抗原抗体检测技术ppt课件

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1、抗原抗体检测技术抗原抗体检测技术毕建虹毕建虹抗原抗体检测技术毕建虹1采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物主要内容主要内容n n抗原抗体反应的原理抗原抗体反应的原理n n抗原抗体的反应特点抗原抗体的反应特点n n影响抗原抗体反应的因素影响抗原抗体反应的因素n n抗原抗体反应的类型抗原抗体反应的类型主要内容抗原抗体反应的原理2采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n抗原抗体反应(抗原抗体反应(抗原抗体反

2、应(抗原抗体反应(antigen-antibody reactionantigen-antibody reaction)是抗)是抗)是抗)是抗原与相应抗体的特异性结合反应。原与相应抗体的特异性结合反应。原与相应抗体的特异性结合反应。原与相应抗体的特异性结合反应。n n既可在体内作为体液免疫应答的效应机制自然发既可在体内作为体液免疫应答的效应机制自然发既可在体内作为体液免疫应答的效应机制自然发既可在体内作为体液免疫应答的效应机制自然发生,也可在体外作为免疫学实验的结果出现。生,也可在体外作为免疫学实验的结果出现。生,也可在体外作为免疫学实验的结果出现。生,也可在体外作为免疫学实验的结果出现。n

3、n由于抗体主要存在于血清中,且临床上多用血清由于抗体主要存在于血清中,且临床上多用血清由于抗体主要存在于血清中,且临床上多用血清由于抗体主要存在于血清中,且临床上多用血清标本进行实验,所以体外实验中的抗原抗体反应标本进行实验,所以体外实验中的抗原抗体反应标本进行实验,所以体外实验中的抗原抗体反应标本进行实验,所以体外实验中的抗原抗体反应曾被称作血清学反应(曾被称作血清学反应(曾被称作血清学反应(曾被称作血清学反应(serological reactionserological reaction)。)。)。)。抗原抗体反应(antigen-antibody reacti3第一节第一节 抗原抗体反

4、应的原理抗原抗体反应的原理第一节 抗原抗体反应的原理4采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n抗原抗体反应可分为两个阶段抗原抗体反应可分为两个阶段n n第一为抗原与抗体发生特异性结合的阶段,仅第一为抗原与抗体发生特异性结合的阶段,仅第一为抗原与抗体发生特异性结合的阶段,仅第一为抗原与抗体发生特异性结合的阶段,仅需几秒至几分钟,但不出现可见反应。需几秒至几分钟,但不出现可见反应。需几秒至几分钟,但不出现可见反应。需几秒至几分钟,但不出现可见反应。n n第二为可见反应阶段,抗原抗体复合物在环境第二为

5、可见反应阶段,抗原抗体复合物在环境第二为可见反应阶段,抗原抗体复合物在环境第二为可见反应阶段,抗原抗体复合物在环境因素(如电解质、因素(如电解质、因素(如电解质、因素(如电解质、pHpH、温度、补体)影响下,、温度、补体)影响下,、温度、补体)影响下,、温度、补体)影响下,进一步交联和聚集,表现为凝集、沉淀、溶解、进一步交联和聚集,表现为凝集、沉淀、溶解、进一步交联和聚集,表现为凝集、沉淀、溶解、进一步交联和聚集,表现为凝集、沉淀、溶解、补体结合介导的溶解现象等肉眼可见的反应;补体结合介导的溶解现象等肉眼可见的反应;补体结合介导的溶解现象等肉眼可见的反应;补体结合介导的溶解现象等肉眼可见的反应

6、;此阶段往往需要数分钟至数小时。此阶段往往需要数分钟至数小时。此阶段往往需要数分钟至数小时。此阶段往往需要数分钟至数小时。抗原抗体反应可分为两个阶段5采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n亲水胶体转化为疏水胶体亲水胶体转化为疏水胶体n n抗原抗体的结合使电荷减少或消失,电子云也抗原抗体的结合使电荷减少或消失,电子云也抗原抗体的结合使电荷减少或消失,电子云也抗原抗体的结合使电荷减少或消失,电子云也消失,蛋白质内亲水胶体转化为疏水胶体。消失,蛋白质内亲水胶体转化为疏水胶体。消失,蛋白质内亲水胶体转

7、化为疏水胶体。消失,蛋白质内亲水胶体转化为疏水胶体。n n加上电解质(如加上电解质(如加上电解质(如加上电解质(如NaClNaCl),则进一步使疏水胶体),则进一步使疏水胶体),则进一步使疏水胶体),则进一步使疏水胶体物相互靠拢,形成可见的抗原抗体复合物。物相互靠拢,形成可见的抗原抗体复合物。物相互靠拢,形成可见的抗原抗体复合物。物相互靠拢,形成可见的抗原抗体复合物。亲水胶体转化为疏水胶体6采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n抗原抗体结合力抗原抗体结合力n n抗原和抗体通过非共价键结合,虽是

8、互补性的抗原和抗体通过非共价键结合,虽是互补性的抗原和抗体通过非共价键结合,虽是互补性的抗原和抗体通过非共价键结合,虽是互补性的特异性结合,但并不形成牢固的共价键。特异性结合,但并不形成牢固的共价键。特异性结合,但并不形成牢固的共价键。特异性结合,但并不形成牢固的共价键。n n抗原与抗体这种弱的结合力与静电引力、范德抗原与抗体这种弱的结合力与静电引力、范德抗原与抗体这种弱的结合力与静电引力、范德抗原与抗体这种弱的结合力与静电引力、范德华引力、氢键结合力、疏水作用力相关。华引力、氢键结合力、疏水作用力相关。华引力、氢键结合力、疏水作用力相关。华引力、氢键结合力、疏水作用力相关。n n抗原与抗体之

9、间高度的互补结构恰好为这些结抗原与抗体之间高度的互补结构恰好为这些结抗原与抗体之间高度的互补结构恰好为这些结抗原与抗体之间高度的互补结构恰好为这些结合力的发挥提供了条件。合力的发挥提供了条件。合力的发挥提供了条件。合力的发挥提供了条件。抗原抗体结合力7第二节第二节 抗原抗体的反应特点抗原抗体的反应特点第二节 抗原抗体的反应特点8采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n特异性特异性n n抗原抗体的结合实质上是抗原表位与抗体超变抗原抗体的结合实质上是抗原表位与抗体超变抗原抗体的结合实质上是抗原表位与

10、抗体超变抗原抗体的结合实质上是抗原表位与抗体超变区中抗原结合点之间的结合。区中抗原结合点之间的结合。区中抗原结合点之间的结合。区中抗原结合点之间的结合。n n如果两种不同的抗原物质具有部分相同或类似如果两种不同的抗原物质具有部分相同或类似如果两种不同的抗原物质具有部分相同或类似如果两种不同的抗原物质具有部分相同或类似结构的抗原决定表位或者抗原抗体构型部分相结构的抗原决定表位或者抗原抗体构型部分相结构的抗原决定表位或者抗原抗体构型部分相结构的抗原决定表位或者抗原抗体构型部分相同,则会出现交叉反应(同,则会出现交叉反应(同,则会出现交叉反应(同,则会出现交叉反应(cross reactioncro

11、ss reaction)。)。)。)。特异性9采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n比例性比例性(proportionality)n n比例性指抗原与抗体发生可见反应需要合适的比例性指抗原与抗体发生可见反应需要合适的比例性指抗原与抗体发生可见反应需要合适的比例性指抗原与抗体发生可见反应需要合适的量比关系,只有当二者浓度比例适当,才能形量比关系,只有当二者浓度比例适当,才能形量比关系,只有当二者浓度比例适当,才能形量比关系,只有当二者浓度比例适当,才能形成较大的抗原抗体结合物。成较大的抗原抗体结

12、合物。成较大的抗原抗体结合物。成较大的抗原抗体结合物。n n把最迅速出现可见反应时的抗原抗体浓度比或把最迅速出现可见反应时的抗原抗体浓度比或把最迅速出现可见反应时的抗原抗体浓度比或把最迅速出现可见反应时的抗原抗体浓度比或量比称为抗原抗体反应的最适比(量比称为抗原抗体反应的最适比(量比称为抗原抗体反应的最适比(量比称为抗原抗体反应的最适比(optimal optimal ratioratio)或称等价比()或称等价比()或称等价比()或称等价比(equivalence pointequivalence point)。)。)。)。比例性(proportionality)10采用PP管及配件:根据给

13、水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n因抗原抗体比例不合适而不出现可见反应,称因抗原抗体比例不合适而不出现可见反应,称因抗原抗体比例不合适而不出现可见反应,称因抗原抗体比例不合适而不出现可见反应,称带现象带现象带现象带现象(zone phenomenonzone phenomenon)。)。)。)。n n抗体过量时称为前带(抗体过量时称为前带(抗体过量时称为前带(抗体过量时称为前带(prozoneprozone)。)。)。)。n n抗原过量时称为后带(抗原过量时称为后带(抗原过量时称为后带(抗原过量时称为后带(pos

14、tzonepostzone)。)。)。)。n n当抗原或抗体为单价,不管抗原与抗体当抗原或抗体为单价,不管抗原与抗体当抗原或抗体为单价,不管抗原与抗体当抗原或抗体为单价,不管抗原与抗体的量比的量比的量比的量比关系是否合适,均不能出现可见反应现象。关系是否合适,均不能出现可见反应现象。关系是否合适,均不能出现可见反应现象。关系是否合适,均不能出现可见反应现象。因抗原抗体比例不合适而不出现可见反应,称带现象(zone p11采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物 抗原抗体结合的比例性(带现象)抗原抗体结

15、合的比例性(带现象)抗原抗体结合的比例性(带现象)12采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n可逆性可逆性n n抗原抗体复合物解离取决于抗体对相应抗原的抗原抗体复合物解离取决于抗体对相应抗原的抗原抗体复合物解离取决于抗体对相应抗原的抗原抗体复合物解离取决于抗体对相应抗原的亲和力和环境因素对复合物的影响。亲和力和环境因素对复合物的影响。亲和力和环境因素对复合物的影响。亲和力和环境因素对复合物的影响。n n亲和性亲和性亲和性亲和性(affinityaffinity)是抗体分子上一个抗原结合)是抗体分

16、子上一个抗原结合)是抗体分子上一个抗原结合)是抗体分子上一个抗原结合部分与对应抗原决定簇之间的相适性而存在的部分与对应抗原决定簇之间的相适性而存在的部分与对应抗原决定簇之间的相适性而存在的部分与对应抗原决定簇之间的相适性而存在的引力,是抗原与抗体间固有的结合力。引力,是抗原与抗体间固有的结合力。引力,是抗原与抗体间固有的结合力。引力,是抗原与抗体间固有的结合力。n n亲和力(亲和力(亲和力(亲和力(avidityavidity)指反应系统中复杂抗原与相)指反应系统中复杂抗原与相)指反应系统中复杂抗原与相)指反应系统中复杂抗原与相应抗体之间的结合能力应抗体之间的结合能力应抗体之间的结合能力应抗体

17、之间的结合能力。可逆性13采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n亲和力与亲和性有关,也与抗体的结合价和抗亲和力与亲和性有关,也与抗体的结合价和抗亲和力与亲和性有关,也与抗体的结合价和抗亲和力与亲和性有关,也与抗体的结合价和抗原有效决定簇数目有关。原有效决定簇数目有关。原有效决定簇数目有关。原有效决定簇数目有关。n nIgGIgG为为为为2 2价,其亲和力为单价的价,其亲和力为单价的价,其亲和力为单价的价,其亲和力为单价的10102 2倍;而倍;而倍;而倍;而IgMIgM为为为为1010价,价,

18、价,价,其亲和力为单价的其亲和力为单价的其亲和力为单价的其亲和力为单价的10106 6倍。倍。倍。倍。n n亲和力越大,抗原抗体结合越牢固。亲和力越大,抗原抗体结合越牢固。亲和力越大,抗原抗体结合越牢固。亲和力越大,抗原抗体结合越牢固。亲和力与亲和性有关,也与抗体的结合价和抗原有效决定簇数目有关14采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n抗体与抗原结合是可逆反应,高亲和性抗抗体与抗原结合是可逆反应,高亲和性抗体的抗原结合点与抗原表位在空间构型上体的抗原结合点与抗原表位在空间构型上非常合适,两者结

19、合牢固;低亲和性抗体非常合适,两者结合牢固;低亲和性抗体与抗原形成的复合物较易解离,解离后的与抗原形成的复合物较易解离,解离后的抗原或抗体均能保持未结合前的结构、活抗原或抗体均能保持未结合前的结构、活性及特异性。性及特异性。抗体与抗原结合是可逆反应,高亲和性抗体的抗原结合点与抗原表位15第三节第三节 影响抗原抗体反应的影响抗原抗体反应的因素因素第三节 影响抗原抗体反应的因素16采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n反应物自身因素反应物自身因素n n抗原抗原抗原抗原n n抗原的理化性质、抗原决定

20、簇数目和种类均可影响抗原的理化性质、抗原决定簇数目和种类均可影响抗原的理化性质、抗原决定簇数目和种类均可影响抗原的理化性质、抗原决定簇数目和种类均可影响抗原抗体反应的结果。抗原抗体反应的结果。抗原抗体反应的结果。抗原抗体反应的结果。n n抗体抗体抗体抗体n n不同动物免疫血清反应性有差异不同动物免疫血清反应性有差异不同动物免疫血清反应性有差异不同动物免疫血清反应性有差异n n特异性和亲和力共同影响实验结果的准确程度特异性和亲和力共同影响实验结果的准确程度特异性和亲和力共同影响实验结果的准确程度特异性和亲和力共同影响实验结果的准确程度n n抗体的浓度抗体的浓度抗体的浓度抗体的浓度反应物自身因素1

21、7采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n环境条件环境条件n n电解质电解质电解质电解质n n抗原抗体结合后由亲水胶体变为疏水胶体,易受电抗原抗体结合后由亲水胶体变为疏水胶体,易受电抗原抗体结合后由亲水胶体变为疏水胶体,易受电抗原抗体结合后由亲水胶体变为疏水胶体,易受电解质影响。解质影响。解质影响。解质影响。n n若无电解质存在,则不出现可见反应。若无电解质存在,则不出现可见反应。若无电解质存在,则不出现可见反应。若无电解质存在,则不出现可见反应。n n但如果电解质浓度过高,则会出现非特异性蛋白

22、质但如果电解质浓度过高,则会出现非特异性蛋白质但如果电解质浓度过高,则会出现非特异性蛋白质但如果电解质浓度过高,则会出现非特异性蛋白质沉淀,即盐析。沉淀,即盐析。沉淀,即盐析。沉淀,即盐析。环境条件18采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n酸碱度酸碱度酸碱度酸碱度n npHpH过高或过低都可影响抗原和抗体的理化性质。过高或过低都可影响抗原和抗体的理化性质。过高或过低都可影响抗原和抗体的理化性质。过高或过低都可影响抗原和抗体的理化性质。n n抗原抗体反应一般以抗原抗体反应一般以抗原抗体反应一般以

23、抗原抗体反应一般以pH69pH69为宜。为宜。为宜。为宜。n n温度温度温度温度n n抗原抗体反应最适温度为抗原抗体反应最适温度为抗原抗体反应最适温度为抗原抗体反应最适温度为3737n n有些特殊抗原抗体反应需要特定温度,如冷凝集在有些特殊抗原抗体反应需要特定温度,如冷凝集在有些特殊抗原抗体反应需要特定温度,如冷凝集在有些特殊抗原抗体反应需要特定温度,如冷凝集在4444时与红细胞结合,时与红细胞结合,时与红细胞结合,时与红细胞结合,20202020以上反而解离。以上反而解离。以上反而解离。以上反而解离。n n此外适当振荡与搅拌,可促进抗原抗体分子的此外适当振荡与搅拌,可促进抗原抗体分子的此外适

24、当振荡与搅拌,可促进抗原抗体分子的此外适当振荡与搅拌,可促进抗原抗体分子的结出,加速反应。结出,加速反应。结出,加速反应。结出,加速反应。酸碱度19第四节第四节 抗原抗体反应的类型抗原抗体反应的类型第四节 抗原抗体反应的类型20采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物凝集反应(凝集反应(agglutination reaction)n n凝集反应是指细菌、红细胞等颗粒性抗原凝集反应是指细菌、红细胞等颗粒性抗原或表面覆盖抗原(或抗体)的颗粒状物质或表面覆盖抗原(或抗体)的颗粒状物质(如红细胞、聚苯乙烯乳

25、胶等)与相应抗(如红细胞、聚苯乙烯乳胶等)与相应抗体(或抗原)结合,在一定条件下形成肉体(或抗原)结合,在一定条件下形成肉眼可见的凝集团块现象。眼可见的凝集团块现象。凝集反应(agglutination reaction)凝集21采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n凝集实验是一个定性检测方法,即根据凝凝集实验是一个定性检测方法,即根据凝集现象的出现与否判定结果阳性与阴性。集现象的出现与否判定结果阳性与阴性。n n也可以进行半定量检测,即将标本作一系也可以进行半定量检测,即将标本作一系列对倍稀

26、释后进行反应,以出现阳性反应列对倍稀释后进行反应,以出现阳性反应的最高稀释度作为滴度。的最高稀释度作为滴度。凝集实验是一个定性检测方法,即根据凝集现象的出现与否判定结果22采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物凝集反应的类型凝集反应的类型n n直接凝集反应直接凝集反应n n颗粒性抗原在适当电解质参与下,直接与相应颗粒性抗原在适当电解质参与下,直接与相应颗粒性抗原在适当电解质参与下,直接与相应颗粒性抗原在适当电解质参与下,直接与相应抗体结合出现肉眼可见的凝集现象,成为直接抗体结合出现肉眼可见的凝集现象

27、,成为直接抗体结合出现肉眼可见的凝集现象,成为直接抗体结合出现肉眼可见的凝集现象,成为直接凝集实验凝集实验凝集实验凝集实验(direct agglutination testdirect agglutination test)。)。)。)。n n反应中的抗原称为凝集原(反应中的抗原称为凝集原(反应中的抗原称为凝集原(反应中的抗原称为凝集原(agglutinogenagglutinogen)。)。)。)。n n参与反应的抗体称为凝集素(参与反应的抗体称为凝集素(参与反应的抗体称为凝集素(参与反应的抗体称为凝集素(agglutininagglutinin)。)。)。)。凝集反应的类型直接凝集反应2

28、3采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n玻片凝集实验玻片凝集实验玻片凝集实验玻片凝集实验n n为定性实验方法为定性实验方法为定性实验方法为定性实验方法n n主要用于菌种鉴定和血清型分型,也用于人类红细主要用于菌种鉴定和血清型分型,也用于人类红细主要用于菌种鉴定和血清型分型,也用于人类红细主要用于菌种鉴定和血清型分型,也用于人类红细胞胞胞胞ABOABO血型鉴定。血型鉴定。血型鉴定。血型鉴定。n n试管凝集实验试管凝集实验试管凝集实验试管凝集实验n n为半定量实验方法为半定量实验方法为半定量实验方

29、法为半定量实验方法n n通常以产生明显凝集现象的最高稀释度管作为血清通常以产生明显凝集现象的最高稀释度管作为血清通常以产生明显凝集现象的最高稀释度管作为血清通常以产生明显凝集现象的最高稀释度管作为血清抗体的效价,亦称为滴度。抗体的效价,亦称为滴度。抗体的效价,亦称为滴度。抗体的效价,亦称为滴度。玻片凝集实验24采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n间接凝集反应间接凝集反应n n用人工方法将可溶性抗原(或抗体)先吸附或用人工方法将可溶性抗原(或抗体)先吸附或用人工方法将可溶性抗原(或抗体)先吸附

30、或用人工方法将可溶性抗原(或抗体)先吸附或偶联于与免疫无关的颗粒性载体表面,再与相偶联于与免疫无关的颗粒性载体表面,再与相偶联于与免疫无关的颗粒性载体表面,再与相偶联于与免疫无关的颗粒性载体表面,再与相应抗体(或抗原)作用,在有适宜电解质存在应抗体(或抗原)作用,在有适宜电解质存在应抗体(或抗原)作用,在有适宜电解质存在应抗体(或抗原)作用,在有适宜电解质存在时即可发生凝集,称为间接凝集反应。时即可发生凝集,称为间接凝集反应。时即可发生凝集,称为间接凝集反应。时即可发生凝集,称为间接凝集反应。间接凝集反应25采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边

31、旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n间接凝集反应中所用与免疫无关的颗粒称为载间接凝集反应中所用与免疫无关的颗粒称为载间接凝集反应中所用与免疫无关的颗粒称为载间接凝集反应中所用与免疫无关的颗粒称为载体体体体(carriercarrier)。)。)。)。n n将抗原(或抗体)吸附或偶联于颗粒表面的过将抗原(或抗体)吸附或偶联于颗粒表面的过将抗原(或抗体)吸附或偶联于颗粒表面的过将抗原(或抗体)吸附或偶联于颗粒表面的过程称为致敏(程称为致敏(程称为致敏(程称为致敏(sensitizationsensitization)。)。)。)。n n吸附有已知抗原(或抗体)的颗粒称为致敏颗吸附

32、有已知抗原(或抗体)的颗粒称为致敏颗吸附有已知抗原(或抗体)的颗粒称为致敏颗吸附有已知抗原(或抗体)的颗粒称为致敏颗粒(粒(粒(粒(sensitized particlesensitized particle)。)。)。)。n n敏感度比直接凝集反应高敏感度比直接凝集反应高敏感度比直接凝集反应高敏感度比直接凝集反应高2828倍,适用于各种可倍,适用于各种可倍,适用于各种可倍,适用于各种可溶性抗原(或抗体)的检测,敏感度也高于沉溶性抗原(或抗体)的检测,敏感度也高于沉溶性抗原(或抗体)的检测,敏感度也高于沉溶性抗原(或抗体)的检测,敏感度也高于沉淀反应。淀反应。淀反应。淀反应。间接凝集反应中所用

33、与免疫无关的颗粒称为载体(carrier)26采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n间接凝集反应类型间接凝集反应类型间接凝集反应类型间接凝集反应类型n n正向间接凝集反应:用抗原致敏载体以检测标本中正向间接凝集反应:用抗原致敏载体以检测标本中正向间接凝集反应:用抗原致敏载体以检测标本中正向间接凝集反应:用抗原致敏载体以检测标本中的相应抗体。的相应抗体。的相应抗体。的相应抗体。n n反向间接凝集反应:用特异性抗体致敏载体以检测反向间接凝集反应:用特异性抗体致敏载体以检测反向间接凝集反应:用特异性

34、抗体致敏载体以检测反向间接凝集反应:用特异性抗体致敏载体以检测标本中的相应抗原。标本中的相应抗原。标本中的相应抗原。标本中的相应抗原。n n间接凝集抑制反应:通过抗原致敏的颗粒载体及相间接凝集抑制反应:通过抗原致敏的颗粒载体及相间接凝集抑制反应:通过抗原致敏的颗粒载体及相间接凝集抑制反应:通过抗原致敏的颗粒载体及相应抗体的反应来判断检测标本中是否存在与致敏抗应抗体的反应来判断检测标本中是否存在与致敏抗应抗体的反应来判断检测标本中是否存在与致敏抗应抗体的反应来判断检测标本中是否存在与致敏抗原相同的抗原。原相同的抗原。原相同的抗原。原相同的抗原。间接凝集反应类型27采用PP管及配件:根据给水设计图

35、配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n协同凝集反应协同凝集反应协同凝集反应协同凝集反应(coagglutinationcoagglutination):协同凝集反应):协同凝集反应):协同凝集反应):协同凝集反应与间接凝集反应的原理类似,但所用载体为金黄色与间接凝集反应的原理类似,但所用载体为金黄色与间接凝集反应的原理类似,但所用载体为金黄色与间接凝集反应的原理类似,但所用载体为金黄色葡萄球菌。葡萄球菌。葡萄球菌。葡萄球菌。n n多数金黄色葡萄球菌的细胞壁内有一种特殊的蛋白质,葡多数金黄色葡萄球菌的细胞壁内有一种特殊的蛋白质

36、,葡多数金黄色葡萄球菌的细胞壁内有一种特殊的蛋白质,葡多数金黄色葡萄球菌的细胞壁内有一种特殊的蛋白质,葡萄球菌萄球菌萄球菌萄球菌A A蛋白质(蛋白质(蛋白质(蛋白质(staphylococcal protein Astaphylococcal protein A)。)。)。)。SPASPA能与能与能与能与人及多种哺乳动物血清中人及多种哺乳动物血清中人及多种哺乳动物血清中人及多种哺乳动物血清中IgGIgG类抗体的类抗体的类抗体的类抗体的FcFc段非特异性段非特异性段非特异性段非特异性结合。结合。结合。结合。n n可用于微生物的快速诊断、定种及定型,以协助传染病的可用于微生物的快速诊断、定种及定型

37、,以协助传染病的可用于微生物的快速诊断、定种及定型,以协助传染病的可用于微生物的快速诊断、定种及定型,以协助传染病的早期诊断。早期诊断。早期诊断。早期诊断。协同凝集反应(coagglutination):协同凝集反应28采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n间接凝集反应的载体间接凝集反应的载体间接凝集反应的载体间接凝集反应的载体n n如聚苯乙烯乳胶、白陶土、活性炭、人和多种动物如聚苯乙烯乳胶、白陶土、活性炭、人和多种动物如聚苯乙烯乳胶、白陶土、活性炭、人和多种动物如聚苯乙烯乳胶、白陶土、活性炭

38、、人和多种动物的红细胞、某种细菌等。的红细胞、某种细菌等。的红细胞、某种细菌等。的红细胞、某种细菌等。n n良好的载体应符合以下基本条件良好的载体应符合以下基本条件良好的载体应符合以下基本条件良好的载体应符合以下基本条件n n在生理盐水或缓冲液无自凝倾向在生理盐水或缓冲液无自凝倾向在生理盐水或缓冲液无自凝倾向在生理盐水或缓冲液无自凝倾向n n大小均匀大小均匀大小均匀大小均匀n n比重与介质相似,短时间内不能沉淀比重与介质相似,短时间内不能沉淀比重与介质相似,短时间内不能沉淀比重与介质相似,短时间内不能沉淀n n无化学或血清学活性无化学或血清学活性无化学或血清学活性无化学或血清学活性n n吸附抗

39、原(或抗体)后,不影响其活性吸附抗原(或抗体)后,不影响其活性吸附抗原(或抗体)后,不影响其活性吸附抗原(或抗体)后,不影响其活性间接凝集反应的载体29采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n目前应用最广的是人目前应用最广的是人目前应用最广的是人目前应用最广的是人OO型红细胞和绵羊红细胞。后型红细胞和绵羊红细胞。后型红细胞和绵羊红细胞。后型红细胞和绵羊红细胞。后者应用更广,因为其来源方便,另外,绵羊红细胞者应用更广,因为其来源方便,另外,绵羊红细胞者应用更广,因为其来源方便,另外,绵羊红细胞者应

40、用更广,因为其来源方便,另外,绵羊红细胞的表面有大量糖蛋白受体,极易吸附某种抗原物质,的表面有大量糖蛋白受体,极易吸附某种抗原物质,的表面有大量糖蛋白受体,极易吸附某种抗原物质,的表面有大量糖蛋白受体,极易吸附某种抗原物质,吸附性能好,且大小均匀一致吸附性能好,且大小均匀一致吸附性能好,且大小均匀一致吸附性能好,且大小均匀一致 。目前应用最广的是人O型红细胞和绵羊红细胞。后者应用更广,因为30采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n间接凝集反应的应用间接凝集反应的应用间接凝集反应的应用间接凝集反

41、应的应用n n检测抗原:反向间接凝集实验可用于检测病原体的检测抗原:反向间接凝集实验可用于检测病原体的检测抗原:反向间接凝集实验可用于检测病原体的检测抗原:反向间接凝集实验可用于检测病原体的可溶性抗原,也可用于检测各种蛋白质成分。可溶性抗原,也可用于检测各种蛋白质成分。可溶性抗原,也可用于检测各种蛋白质成分。可溶性抗原,也可用于检测各种蛋白质成分。n n检测抗体:可用于检测细菌、病毒、寄生虫等感染检测抗体:可用于检测细菌、病毒、寄生虫等感染检测抗体:可用于检测细菌、病毒、寄生虫等感染检测抗体:可用于检测细菌、病毒、寄生虫等感染后产生的抗体,也可用于检测自身免疫性疾病的抗后产生的抗体,也可用于检

42、测自身免疫性疾病的抗后产生的抗体,也可用于检测自身免疫性疾病的抗后产生的抗体,也可用于检测自身免疫性疾病的抗体。体。体。体。间接凝集反应的应用31采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n自身红细胞凝集实验自身红细胞凝集实验n n自身红细胞凝集实验自身红细胞凝集实验自身红细胞凝集实验自身红细胞凝集实验(autologous red cell autologous red cell agglutinationagglutination)与一般间接凝集实验不同之处)与一般间接凝集实验不同之处)与一般间

43、接凝集实验不同之处)与一般间接凝集实验不同之处为,反应中的红细胞是未经致敏的受检者新鲜为,反应中的红细胞是未经致敏的受检者新鲜为,反应中的红细胞是未经致敏的受检者新鲜为,反应中的红细胞是未经致敏的受检者新鲜红细胞。红细胞。红细胞。红细胞。n n主要试剂为抗人主要试剂为抗人主要试剂为抗人主要试剂为抗人OO型红细胞型红细胞型红细胞型红细胞的单克隆抗体,这的单克隆抗体,这的单克隆抗体,这的单克隆抗体,这种抗体能与任何血型的红细胞结合,但不引起种抗体能与任何血型的红细胞结合,但不引起种抗体能与任何血型的红细胞结合,但不引起种抗体能与任何血型的红细胞结合,但不引起凝集反应。凝集反应。凝集反应。凝集反应。

44、自身红细胞凝集实验32采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n这种抗体与另一特异性抗体连接成的双功能抗这种抗体与另一特异性抗体连接成的双功能抗这种抗体与另一特异性抗体连接成的双功能抗这种抗体与另一特异性抗体连接成的双功能抗体可用于检测标本中的抗原;如与特异性抗原体可用于检测标本中的抗原;如与特异性抗原体可用于检测标本中的抗原;如与特异性抗原体可用于检测标本中的抗原;如与特异性抗原连接,则可用于检测标本中的抗体。连接,则可用于检测标本中的抗体。连接,则可用于检测标本中的抗体。连接,则可用于检测标本

45、中的抗体。n n反应中的标本为检测者的全血。反应中的标本为检测者的全血。反应中的标本为检测者的全血。反应中的标本为检测者的全血。这种抗体与另一特异性抗体连接成的双功能抗体可用于检测标本中的33采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n自身红细胞凝集实验的特点自身红细胞凝集实验的特点自身红细胞凝集实验的特点自身红细胞凝集实验的特点n n受检标本为全血。不需要分离血清,采指血或耳垂受检标本为全血。不需要分离血清,采指血或耳垂受检标本为全血。不需要分离血清,采指血或耳垂受检标本为全血。不需要分离血清,采

46、指血或耳垂血进行实验血进行实验血进行实验血进行实验n n受检者即刻可知检测结果受检者即刻可知检测结果受检者即刻可知检测结果受检者即刻可知检测结果自身红细胞凝集实验的特点34采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物沉淀反应(沉淀反应(precipitation reaction)n n沉淀反应是指可溶性抗原与相应抗体在适沉淀反应是指可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生结合而出现沉淀的现象。当条件下发生结合而出现沉淀的现象。n n根据介质和检测方法不同,沉淀反应可分根据介质和检测方法不同,沉淀反应可分为液

47、相沉淀实验、凝胶沉淀实验和凝胶免为液相沉淀实验、凝胶沉淀实验和凝胶免疫电泳技术等三大基本类型。疫电泳技术等三大基本类型。沉淀反应(precipitation reaction)沉淀35采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n液相内沉淀反应液相内沉淀反应n n指以含盐缓冲液为反应介质的抗原抗体特异性指以含盐缓冲液为反应介质的抗原抗体特异性指以含盐缓冲液为反应介质的抗原抗体特异性指以含盐缓冲液为反应介质的抗原抗体特异性结合的沉淀反应。结合的沉淀反应。结合的沉淀反应。结合的沉淀反应。n n絮状沉淀实验

48、絮状沉淀实验絮状沉淀实验絮状沉淀实验(flocculationflocculation)n n环状沉淀实验(环状沉淀实验(环状沉淀实验(环状沉淀实验(ring precipitationring precipitation)n n将抗原溶液叠加在细小玻管中抗体溶液上面,因抗将抗原溶液叠加在细小玻管中抗体溶液上面,因抗将抗原溶液叠加在细小玻管中抗体溶液上面,因抗将抗原溶液叠加在细小玻管中抗体溶液上面,因抗血清蛋白浓度高,比重大,在两液交界的清晰界面血清蛋白浓度高,比重大,在两液交界的清晰界面血清蛋白浓度高,比重大,在两液交界的清晰界面血清蛋白浓度高,比重大,在两液交界的清晰界面上形成白色沉淀环为

49、阳性反应。上形成白色沉淀环为阳性反应。上形成白色沉淀环为阳性反应。上形成白色沉淀环为阳性反应。液相内沉淀反应36采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n免疫浊度实验免疫浊度实验免疫浊度实验免疫浊度实验(immunoturbidimetryimmunoturbidimetry),),),),2020世纪世纪世纪世纪7070年代出现的微量免疫沉淀测定法年代出现的微量免疫沉淀测定法年代出现的微量免疫沉淀测定法年代出现的微量免疫沉淀测定法n n透射比浊法透射比浊法透射比浊法透射比浊法n n散射比浊法散射

50、比浊法散射比浊法散射比浊法n n免疫乳胶比浊法免疫乳胶比浊法免疫乳胶比浊法免疫乳胶比浊法免疫浊度实验(immunoturbidimetry),20世37采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n凝胶内沉淀实验凝胶内沉淀实验(gel phase precipitation)n n主要是指琼脂糖扩散或称凝胶扩散。常用的凝主要是指琼脂糖扩散或称凝胶扩散。常用的凝主要是指琼脂糖扩散或称凝胶扩散。常用的凝主要是指琼脂糖扩散或称凝胶扩散。常用的凝胶有琼脂、琼脂糖、葡聚糖或聚丙烯酰胺凝胶。胶有琼脂、琼脂糖、葡聚

51、糖或聚丙烯酰胺凝胶。胶有琼脂、琼脂糖、葡聚糖或聚丙烯酰胺凝胶。胶有琼脂、琼脂糖、葡聚糖或聚丙烯酰胺凝胶。n n根据抗原与抗体反应的方式和特性,可将凝胶根据抗原与抗体反应的方式和特性,可将凝胶根据抗原与抗体反应的方式和特性,可将凝胶根据抗原与抗体反应的方式和特性,可将凝胶内沉淀实验分为单向琼脂扩散实验和双向琼脂内沉淀实验分为单向琼脂扩散实验和双向琼脂内沉淀实验分为单向琼脂扩散实验和双向琼脂内沉淀实验分为单向琼脂扩散实验和双向琼脂扩散实验。扩散实验。扩散实验。扩散实验。凝胶内沉淀实验(gel phase precipitatio38采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂

52、直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n单向琼脂扩散实验单向琼脂扩散实验单向琼脂扩散实验单向琼脂扩散实验n n将定量抗体混匀在琼脂凝胶中,加待测抗原溶液使将定量抗体混匀在琼脂凝胶中,加待测抗原溶液使将定量抗体混匀在琼脂凝胶中,加待测抗原溶液使将定量抗体混匀在琼脂凝胶中,加待测抗原溶液使其单独在凝胶中扩散,在抗原抗体相遇比例合适的其单独在凝胶中扩散,在抗原抗体相遇比例合适的其单独在凝胶中扩散,在抗原抗体相遇比例合适的其单独在凝胶中扩散,在抗原抗体相遇比例合适的部位,两者结合形成沉淀环,沉淀环的大小与抗原部位,两者结合形成沉淀环,沉淀环的大小与抗原部位,两者结合形

53、成沉淀环,沉淀环的大小与抗原部位,两者结合形成沉淀环,沉淀环的大小与抗原浓度成正相关。浓度成正相关。浓度成正相关。浓度成正相关。n n该方法简便,易观察结果,常用于测定人或动物血该方法简便,易观察结果,常用于测定人或动物血该方法简便,易观察结果,常用于测定人或动物血该方法简便,易观察结果,常用于测定人或动物血清。清。清。清。n n缺点是需缺点是需缺点是需缺点是需1212天才能看结果。天才能看结果。天才能看结果。天才能看结果。单向琼脂扩散实验39采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物单向琼脂扩散实验单

54、向琼脂扩散实验单向琼脂扩散实验40采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n双向琼脂扩散实验双向琼脂扩散实验双向琼脂扩散实验双向琼脂扩散实验n n将抗原和抗体溶液分别放在凝胶不同的对应孔中,将抗原和抗体溶液分别放在凝胶不同的对应孔中,将抗原和抗体溶液分别放在凝胶不同的对应孔中,将抗原和抗体溶液分别放在凝胶不同的对应孔中,让两者均在凝胶中自由扩散,当抗原与抗体相遇,让两者均在凝胶中自由扩散,当抗原与抗体相遇,让两者均在凝胶中自由扩散,当抗原与抗体相遇,让两者均在凝胶中自由扩散,当抗原与抗体相遇,在比

55、例合适时形成可见的白色沉淀线。在比例合适时形成可见的白色沉淀线。在比例合适时形成可见的白色沉淀线。在比例合适时形成可见的白色沉淀线。n n常用于抗原或抗体的定性或定量测量,还可用于两常用于抗原或抗体的定性或定量测量,还可用于两常用于抗原或抗体的定性或定量测量,还可用于两常用于抗原或抗体的定性或定量测量,还可用于两种抗原材料的抗原相关性分析。种抗原材料的抗原相关性分析。种抗原材料的抗原相关性分析。种抗原材料的抗原相关性分析。双向琼脂扩散实验41采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物抗原抗体检测技术pp

56、t课件42采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n免疫电泳技术免疫电泳技术n n免疫电泳技术是电泳分析与沉淀反应的结合产免疫电泳技术是电泳分析与沉淀反应的结合产免疫电泳技术是电泳分析与沉淀反应的结合产免疫电泳技术是电泳分析与沉淀反应的结合产物。物。物。物。n n两大优点两大优点两大优点两大优点n n加快了沉淀反应的速度加快了沉淀反应的速度加快了沉淀反应的速度加快了沉淀反应的速度n n将某些蛋白组分根据其所带电荷不同而分开后,再将某些蛋白组分根据其所带电荷不同而分开后,再将某些蛋白组分根据其所带电

57、荷不同而分开后,再将某些蛋白组分根据其所带电荷不同而分开后,再与抗体起反应,使本法更微量化和多样化。与抗体起反应,使本法更微量化和多样化。与抗体起反应,使本法更微量化和多样化。与抗体起反应,使本法更微量化和多样化。免疫电泳技术43采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n免疫电泳免疫电泳免疫电泳免疫电泳(immuno electrophoresisimmuno electrophoresis,IEPIEP)n n免疫电泳时先用区带电泳技术将蛋白质抗原按其所免疫电泳时先用区带电泳技术将蛋白质抗原按其

58、所免疫电泳时先用区带电泳技术将蛋白质抗原按其所免疫电泳时先用区带电泳技术将蛋白质抗原按其所带电荷、分子量和构型的不同,在凝胶电泳中分成带电荷、分子量和构型的不同,在凝胶电泳中分成带电荷、分子量和构型的不同,在凝胶电泳中分成带电荷、分子量和构型的不同,在凝胶电泳中分成不同区带;再与电泳方向平行,挖一条型槽,加入不同区带;再与电泳方向平行,挖一条型槽,加入不同区带;再与电泳方向平行,挖一条型槽,加入不同区带;再与电泳方向平行,挖一条型槽,加入相应抗血清,置室温或相应抗血清,置室温或相应抗血清,置室温或相应抗血清,置室温或3737,使抗原和抗体呈双相扩,使抗原和抗体呈双相扩,使抗原和抗体呈双相扩,使

59、抗原和抗体呈双相扩散而在相应位置上形成肉眼可见的弧形沉淀线。散而在相应位置上形成肉眼可见的弧形沉淀线。散而在相应位置上形成肉眼可见的弧形沉淀线。散而在相应位置上形成肉眼可见的弧形沉淀线。n n根据沉淀弧的数量、位置和形态,可分析样品中所根据沉淀弧的数量、位置和形态,可分析样品中所根据沉淀弧的数量、位置和形态,可分析样品中所根据沉淀弧的数量、位置和形态,可分析样品中所含抗原的成分及性质。含抗原的成分及性质。含抗原的成分及性质。含抗原的成分及性质。n n用于分析血清蛋白种类,对免疫球蛋白缺损或增多用于分析血清蛋白种类,对免疫球蛋白缺损或增多用于分析血清蛋白种类,对免疫球蛋白缺损或增多用于分析血清蛋

60、白种类,对免疫球蛋白缺损或增多的疾病的诊断或鉴别诊断有重要意义。的疾病的诊断或鉴别诊断有重要意义。的疾病的诊断或鉴别诊断有重要意义。的疾病的诊断或鉴别诊断有重要意义。免疫电泳(immuno electrophoresis,IE44采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物免疫电泳(图免疫电泳(图1)免疫电泳(图1)45采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物免疫电泳(图免疫电泳(图2)免疫电泳(图2)46采用P

61、P管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物免疫电泳(图免疫电泳(图3)免疫电泳(图3)47采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物免疫电泳(图免疫电泳(图4)免疫电泳(图4)48采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物免疫电泳(图免疫电泳(图5)免疫电泳(图5)49采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在

62、管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物免疫电泳免疫电泳免疫电泳50采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n火箭免疫电泳(火箭免疫电泳(火箭免疫电泳(火箭免疫电泳(rocket immuno electrophoresisrocket immuno electrophoresis,RIERIE)n n火箭免疫电泳技术是把抗原置于含有抗体的凝胶内火箭免疫电泳技术是把抗原置于含有抗体的凝胶内火箭免疫电泳技术是把抗原置于含有抗体的凝胶内火箭免疫电泳技术是把抗原置于含有

63、抗体的凝胶内电泳。在电场作用下,抗原与凝胶中的抗体移动,电泳。在电场作用下,抗原与凝胶中的抗体移动,电泳。在电场作用下,抗原与凝胶中的抗体移动,电泳。在电场作用下,抗原与凝胶中的抗体移动,逐渐形成梯度浓度,在抗原抗体比例适当时形成不逐渐形成梯度浓度,在抗原抗体比例适当时形成不逐渐形成梯度浓度,在抗原抗体比例适当时形成不逐渐形成梯度浓度,在抗原抗体比例适当时形成不溶性免疫复合物而沉淀。溶性免疫复合物而沉淀。溶性免疫复合物而沉淀。溶性免疫复合物而沉淀。n n随着抗原量减少,沉淀带越来越窄,形成火箭峰样随着抗原量减少,沉淀带越来越窄,形成火箭峰样随着抗原量减少,沉淀带越来越窄,形成火箭峰样随着抗原量

64、减少,沉淀带越来越窄,形成火箭峰样沉淀带,峰形高低与抗原量成正比。沉淀带,峰形高低与抗原量成正比。沉淀带,峰形高低与抗原量成正比。沉淀带,峰形高低与抗原量成正比。n n主要用于抗原或抗体的定量分析,比单向琼脂扩散主要用于抗原或抗体的定量分析,比单向琼脂扩散主要用于抗原或抗体的定量分析,比单向琼脂扩散主要用于抗原或抗体的定量分析,比单向琼脂扩散实验节约了反应时间。实验节约了反应时间。实验节约了反应时间。实验节约了反应时间。火箭免疫电泳(rocket immuno electroph51采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,

65、保持熔接部位干净无污物火箭免疫电泳火箭免疫电泳火箭免疫电泳火箭免疫电泳火箭免疫电泳52采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n对流免疫电泳(对流免疫电泳(对流免疫电泳(对流免疫电泳(counter immuno counter immuno electrophoresiselectrophoresis,CIEPCIEP)n n对流免疫电泳是定向加速的电泳技术与免疫双向扩对流免疫电泳是定向加速的电泳技术与免疫双向扩对流免疫电泳是定向加速的电泳技术与免疫双向扩对流免疫电泳是定向加速的电泳技术与免疫双

66、向扩散技术结合。在散技术结合。在散技术结合。在散技术结合。在pH8.6pH8.6的琼脂凝胶中,抗体球蛋白因的琼脂凝胶中,抗体球蛋白因的琼脂凝胶中,抗体球蛋白因的琼脂凝胶中,抗体球蛋白因等电点高、带微弱负电荷且分子量较大,电泳力会等电点高、带微弱负电荷且分子量较大,电泳力会等电点高、带微弱负电荷且分子量较大,电泳力会等电点高、带微弱负电荷且分子量较大,电泳力会小于电渗力,泳向负极;而一般的抗原蛋白常带较小于电渗力,泳向负极;而一般的抗原蛋白常带较小于电渗力,泳向负极;而一般的抗原蛋白常带较小于电渗力,泳向负极;而一般的抗原蛋白常带较强负电荷且分子较小,造成电泳力大,泳向正极。强负电荷且分子较小,造成电泳力大,泳向正极。强负电荷且分子较小,造成电泳力大,泳向正极。强负电荷且分子较小,造成电泳力大,泳向正极。对流免疫电泳(counter immuno electrop53采用PP管及配件:根据给水设计图配置好PP管及配件,用管件在管材垂直角切断管材,边剪边旋转,以保证切口面的圆度,保持熔接部位干净无污物n n电泳时,抗原放负极侧孔,抗体放正极侧孔,抗原电泳时,抗原放负极侧孔,抗体放正极侧孔,

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