第十三章-转基因动物ppt课件

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1、我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物第十二章第十二章转基因动物转基因动物转基因动物是动物基因工程在医学生物学研究转基因动物是动物基因工程在医学生物学研究中的突出成果。中的突出成果。近十年来，为分子遗传学、发育生物学、医学近十年来，为分子遗传学、发育生物学、医学遗传学、肿瘤研究及优良经济动物的开发研究遗传学、肿瘤研究及优良经济动物的开发研究等多方面做出了很大的贡献。等多方面做出了很大的贡献。第十二章转基因动物转基因动物是动物基因工程在医学生物学1我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放

2、在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物（一）转基因动物的概念（一）转基因动物的概念转基因动物（转基因动物（transgenicanimal）是指以实验方法导入的）是指以实验方法导入的外源基因在其染色体基因组内稳定整合并能遗传给后代的一类外源基因在其染色体基因组内稳定整合并能遗传给后代的一类动物。动物。外源基因随细胞分裂分配到所有子细胞中并遗传给后代，这种外源基因随细胞分裂分配到所有子细胞中并遗传给后代，这种动物叫转基因动物。动物叫转基因动物。严格说，转基因动物有别于嵌合体。严格说，转基因动物有别于嵌合体。嵌合体动物（嵌合体动物（chimerican

3、imal）：）：只有部分组织细胞的基因组只有部分组织细胞的基因组中整合有外源基因。中整合有外源基因。逆转录病毒感染法、胚胎干细胞介导法制逆转录病毒感染法、胚胎干细胞介导法制备的动物第一代均为嵌合体。雄原核显微注射法制备的动物第备的动物第一代均为嵌合体。雄原核显微注射法制备的动物第一代中一代中1-10%为嵌合体（延迟整合）。为嵌合体（延迟整合）。（一）转基因动物的概念2我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物Gordon等人首次成功地将含有等人首次成功地将含有HSV和和SV40DNA片段片段的重组质粒

4、的重组质粒DNA以显微注射法导入小鼠受精卵的雄原以显微注射法导入小鼠受精卵的雄原核内，得到了带有这种外源核内，得到了带有这种外源DNA顺序顺序TGM。1982年年Palmiter等运用此法得到的所谓等运用此法得到的所谓“超级巨鼠超级巨鼠”,曾引起整个生物学界的轰动。曾引起整个生物学界的轰动。到目前为止，人类已获得转基因鱼、鼠、羊、猪、兔、到目前为止，人类已获得转基因鱼、鼠、羊、猪、兔、牛等等大小动物。牛等等大小动物。从转基因动物所获得的资料几乎涉及医学遗传、肿瘤从转基因动物所获得的资料几乎涉及医学遗传、肿瘤学、免疫学等的基因研究，还涉及生物药物的研究，学、免疫学等的基因研究，还涉及生物药物的研

5、究，基因治疗的开发研究等。基因治疗的开发研究等。Gordon等人首次成功地将含有HSV和SV40DNA片段的3我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物AfterDollyAfterDolly4我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物继继“多莉羊多莉羊”之后：之后：13岁成年牛岁成年牛继“多莉羊”之后：13岁成年牛5我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉

6、快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物转基因无毛鼠转基因无毛鼠转基因无毛鸡转基因无毛鸡转基因无毛鼠转基因无毛鸡6我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物异体动物克隆-北山羊异体动物克隆-北山羊7我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物黄禹锡学生克隆成功的阿富汗猎狗黄禹锡学生克隆成功的阿富汗猎狗在韩国首都汉城的汉城在韩国首都汉城的汉城大学，世界上首只克隆大学，世界上首只克隆狗狗-小猎犬斯纳皮小猎犬斯纳

7、皮首次公开亮相。首次公开亮相。黄禹锡学生克隆成功的阿富汗猎狗在韩国首都汉城的汉城大学，世界8我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物克隆兔在广西大学诞生克隆兔在广西大学诞生美国加州的一家公司可为美国加州的一家公司可为顾客克隆其宠物顾客克隆其宠物 克隆兔在广西大学诞生美国加州的一家公司可为顾客克隆其宠物9我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物二、转基因动物技术的主要步骤二、转基因动物技术的主要步骤w获取外

8、源目的基因获取外源目的基因w外源目的基因导入生殖细胞或胚胎干细胞外源目的基因导入生殖细胞或胚胎干细胞w选择携带目的基因的细胞，选择体外培养系统选择携带目的基因的细胞，选择体外培养系统和宿主动物和宿主动物w转基因胚胎的发育及鉴定转基因胚胎的发育及鉴定w筛选所得的转基因动物筛选所得的转基因动物二、转基因动物技术的主要步骤获取外源目的基因10我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物三、三、转基因动物的技术路线转基因动物的技术路线w经典的技术路线经典的技术路线目的基因显微注射显微注射已交配的取出取出移植移植

9、受体动物妊娠妊娠供体动物受精卵输卵管转基因动物缺点：注入目的基因的命中率低，目的基因的整缺点：注入目的基因的命中率低，目的基因的整合率低，受精卵移植的受孕率低。合率低，受精卵移植的受孕率低。三、转基因动物的技术路线经典的技术路线11我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物转基因动物的技术路线转基因动物的技术路线(续续)w整合胚胎移植的技术路线整合胚胎移植的技术路线转基因动物受体动物子宫目的基因非手术非手术胚胎移植胚胎移植体外受精体外受精体外培养体外培养多细胞胚胎检测检测整合外源基因卵子受精卵或囊胚的

10、胚胎精子优点：受精卵的成活率高达优点：受精卵的成活率高达90以上，外源基因整以上，外源基因整合率高，提高受孕率。合率高，提高受孕率。转基因动物的技术路线(续)整合胚胎移植的技术路线12我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物转基因动物的技术路线（续）转基因动物的技术路线（续）w核移植（克隆）的技术路线核移植（克隆）的技术路线目的基因转基因动物导入导入动物胎儿成纤维细胞妊娠妊娠取核取核动物去核去核重组的体外培养体外培养囊胚期胚胎移植胚胎移植卵细胞受精卵胚胎受体动物子宫w特点：体细胞核移植；核移植前导入

11、目的基因。特点：体细胞核移植；核移植前导入目的基因。转基因动物的技术路线（续）核移植（克隆）的技术路线13我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物转基因动物的技术路线（续）转基因动物的技术路线（续）w整合卵受精的技术路线：整合卵受精的技术路线：目的基因转基因动物导入导入逆转录病毒妊娠妊娠精子感染感染体外受精体外受精胚胎移植胚胎移植卵母细胞成熟卵细胞囊胚受体动物子宫特点：卵母细胞导入目的基因后再与精子受精。转基因动物的技术路线（续）整合卵受精的技术路线：14我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什

12、么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物四四转基因动物的制作方法转基因动物的制作方法1、受精卵雄原核显微注射法、受精卵雄原核显微注射法2、胚胎干细胞（、胚胎干细胞（ES细胞）法细胞）法3、逆转录病毒感染法、逆转录病毒感染法4、体细胞核移植法、体细胞核移植法5、精子载体法、精子载体法6、YAC法法四转基因动物的制作方法1、受精卵雄原核显微注射法15我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物1、雄原核显微注射法、雄原核显微注射法以单细胞受精卵为靶细胞，利

13、用显微注射技术以单细胞受精卵为靶细胞，利用显微注射技术将构建好的载体将构建好的载体DNA直接注射入受精卵的原核，直接注射入受精卵的原核，再将接受注射的受精卵移入假孕母体输卵管继再将接受注射的受精卵移入假孕母体输卵管继续发育获得转基因动物个体。续发育获得转基因动物个体。目前应用较广泛，最早最经典的方法。目前应用较广泛，最早最经典的方法。1、雄原核显微注射法以单细胞受精卵为靶细胞，利用显微注射技术16我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物这一方法的实验程序如下：这一方法的实验程序如下：（1）准备假孕母

14、鼠（养母）准备假孕母鼠（养母）（2）受精卵的准备）受精卵的准备（3）基因导入）基因导入（4）胚胎移植）胚胎移植（5）对幼鼠的鉴定）对幼鼠的鉴定这一方法的实验程序如下：17我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物TimingofPre-ImplantationeventsTimingofPre-Implantationeve18我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物OviductTransfersOvid

15、uctTransfers19我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物优点：优点：w外源外源DNA大小基本不受限制（大小基本不受限制（1-50kb）；导入过程）；导入过程直观；直观；w整合率高整合率高缺点：缺点：w设备昂贵、环节较多设备昂贵、环节较多w对操作人员有较高的技术要求对操作人员有较高的技术要求w低效率（尤其是大家畜）低效率（尤其是大家畜）w对卵子伤害大，胚胎存活率低对卵子伤害大，胚胎存活率低w基因整合随机性基因整合随机性w转基因沉默转基因沉默优点：20我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，

16、为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物2、胚胎干细胞（、胚胎干细胞（ES细胞）法细胞）法ES细胞是早期胚胎的内细胞团经过体外培养建立起来的多潜细胞是早期胚胎的内细胞团经过体外培养建立起来的多潜能细胞系。能细胞系。将携带有外源基因的将携带有外源基因的ES细胞注入到动物的早期胚胎内，可产细胞注入到动物的早期胚胎内，可产生嵌合体及转基因动物。生嵌合体及转基因动物。它本身是二倍体，能在体外培养，具有高度的全能性，可以它本身是二倍体，能在体外培养，具有高度的全能性，可以形成包括生殖细胞在内的所有组织，并且在不同的培养条件形成包括生殖细胞在内的所有

17、组织，并且在不同的培养条件下表现出不同的功能状态。下表现出不同的功能状态。在在ES细胞上的基因操作：细胞上的基因操作：可以通过逆转录病毒感染、脂质体介导、电穿孔、磷酸钙可以通过逆转录病毒感染、脂质体介导、电穿孔、磷酸钙共沉淀等方法将外源基因导入共沉淀等方法将外源基因导入ES细胞。细胞。因此，借用因此，借用ES细胞系可将人们企望的某种不完整的、无功能基细胞系可将人们企望的某种不完整的、无功能基因直接引入到因直接引入到ES细胞中，通过细胞增殖、筛选可得到丧失了细胞中，通过细胞增殖、筛选可得到丧失了某种基因功能的动物后代。某种基因功能的动物后代。2、胚胎干细胞（ES细胞）法ES细胞是早期胚胎的内细胞

18、团经过21我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物GeneratingESCellsGeneratingESCells22我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物第十三章-转基因动物ppt课件23我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物RetrievalofBlastocystsRetrievalofBlast

19、ocysts24我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物InjectionofEScellsintoblastocystsInjectionofEScellsintobl25我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物优点：优点：w外源基因整合情况的可控性高。外源基因整合情况的可控性高。w可预先在细胞水平检测外源基因的拷贝数、定位、表可预先在细胞水平检测外源基因的拷贝数、定位、表达的水平及插入的稳定性。达的水

20、平及插入的稳定性。w外源基因导入外源基因导入ES细胞的方法多样，细胞鉴定及筛选方细胞的方法多样，细胞鉴定及筛选方便。便。缺点：缺点：wES细胞系建立及培养困难细胞系建立及培养困难w维持维持ES细胞的未分化及多向分化潜能不易细胞的未分化及多向分化潜能不易w所得个体为嵌合体所得个体为嵌合体目前，胚胎干细胞介导法在小鼠上应用比较成熟，在大目前，胚胎干细胞介导法在小鼠上应用比较成熟，在大动物上应用较晚。动物上应用较晚。优点：26我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物五五转基因动物的特性转基因动物的特性整整

21、合合拷拷贝贝数数1-100左左右右，多多拷拷贝贝常常以以首首尾尾相相连连接接的的形式存在。形式存在。整合是随机的。整合是随机的。整合是稳定的，可以传给子代。整合是稳定的，可以传给子代。外源基因可以在一种组织或多种组织中表达。外源基因可以在一种组织或多种组织中表达。少数外源基因两侧序列有重排现象。少数外源基因两侧序列有重排现象。基因表达强弱与拷贝数无关，与基因表达强弱与拷贝数无关，与“位置效应位置效应”有有关。关。五转基因动物的特性整合拷贝数1-100左右，多拷贝常以首27我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有

22、一个活的生物六六转基因动物的意义转基因动物的意义转基因动物是在单细胞基因转染技术的基础上发展起转基因动物是在单细胞基因转染技术的基础上发展起来的。来的。而许多基因的表达是无法通过转染的方法来研而许多基因的表达是无法通过转染的方法来研究：究：基因表达有时空与组织的特异性；基因表达有时空与组织的特异性；外源基因的表达受特异性有关顺式作用序列的调控；外源基因的表达受特异性有关顺式作用序列的调控；因此，只有通过转基因的动物才有可能研究基因的表因此，只有通过转基因的动物才有可能研究基因的表达、调控及基因之间的相互作用。达、调控及基因之间的相互作用。进进行行功功能能基基因因组组学学的的研研究究，研研究究外

23、外源源基基因因在在动动物物整整体体水平的表现调控规律。水平的表现调控规律。转转基基因因动动物物疾疾病病模模型型可可用用来来进进行行疾疾病病发发病病学学和和治治疗疗性性研究。研究。也可改变动物基因使其表现型更适合人类需要。也可改变动物基因使其表现型更适合人类需要。还可以用转基因动物生产一些人类所需的生物活性物还可以用转基因动物生产一些人类所需的生物活性物质。质。六转基因动物的意义转基因动物是在单细胞基因转染技术的基28我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物免疫缺陷动物免疫缺陷动物（Immunodef

24、icientanimal）（一）定义：（一）定义：是是指指由由于于先先天天性性遗遗传传突突变变或或用用人人工工方方法法,造造成成一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物。一种或多种免疫系统组成成分缺陷的动物。（二）分类：（二）分类：1、先天性免疫缺陷动物：、先天性免疫缺陷动物：a.T淋巴细胞功能缺陷动物：裸小鼠，裸大鼠淋巴细胞功能缺陷动物：裸小鼠，裸大鼠b.B淋巴细胞功能缺陷动物：淋巴细胞功能缺陷动物：CBA/N小鼠小鼠c.NK细胞功能缺陷动物：细胞功能缺陷动物：Beige小鼠小鼠d.联合免疫缺陷动物：联合免疫缺陷动物：SCID小鼠等小鼠等2、获得性免疫缺陷动物：猴、小鼠、猫等、获得性免疫缺陷动物

25、：猴、小鼠、猫等AIDS模型模型免疫缺陷动物（Immunodeficientani29我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物（三）裸小鼠（三）裸小鼠（NudeMice）（三）裸小鼠（NudeMice）30我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物1、发现与发展、发现与发展1962年年英英国国格格拉拉斯斯哥哥医医院院Grist在在非非近近交交系系的的小小鼠鼠中中偶然发现有个别小鼠无毛。偶然发现有个别小鼠无毛

26、。1966年证实是由于第年证实是由于第11对染色体基因突变所致。对染色体基因突变所致。1968年，年，Pantelouris解剖发现裸鼠失去了正常的胸腺。解剖发现裸鼠失去了正常的胸腺。由于裸鼠原种抵抗力差，生育力低，寿命短，不能用由于裸鼠原种抵抗力差，生育力低，寿命短，不能用于实际。和纯系于实际。和纯系BALB/C，C3H，C57BL/6小鼠交配，小鼠交配，不断选育，获得了三种近交系鼠（不断选育，获得了三种近交系鼠（InbredNudeMice）新种。）新种。1969年年Rygaard首先将人结肠腺癌移植裸小鼠获得成首先将人结肠腺癌移植裸小鼠获得成功。功。裸鼠自发现以来，广泛应用于肿瘤学、免疫

27、学和病毒裸鼠自发现以来，广泛应用于肿瘤学、免疫学和病毒学等多个学科的研究。学等多个学科的研究。1、发现与发展1962年英国格拉斯哥医院Grist在非近交系31我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物2、生物学特点、生物学特点（1）一般特点）一般特点w纯纯合合子子突突变变裸裸鼠鼠（nu/nu）主主要要表表现现为为无无毛毛以以及及胸胸腺腺缺陷。杂合子小鼠（缺陷。杂合子小鼠（nu/+）各方面表现正常。）各方面表现正常。w体重小于同龄普通鼠，发育缓慢。体重小于同龄普通鼠，发育缓慢。w必须养育在必须养育在SP

28、F环境中环境中。w繁繁殖殖方方式式：一一般般采采用用隐隐性性纯纯合合子子雄雄性性与与杂杂合合子子雌雌鼠鼠交交配（配（nu/nunu/+）。）。2、生物学特点（1）一般特点32我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物（2）解剖生理特点）解剖生理特点胸胸腺腺残残留留一一些些上上皮皮样样细细胞胞；淋淋巴巴组组织织胸胸腺腺依依赖赖区区的的淋淋巴细胞消失；外周血淋巴细胞减少。巴细胞消失；外周血淋巴细胞减少。虽虽然然有有原原始始的的T细细胞胞，但但缺缺乏乏成成熟熟的的T细细胞胞。T细细胞胞的的辅辅助助，抑抑制制

29、及及杀杀伤伤功功能能不不全全。在在混混合合淋淋巴巴细细胞胞反反应应中中无无有有丝丝分分裂裂反反应应，对对刀刀豆豆素素A或或植植物物凝凝集集素素P无无促促分分裂裂原应答。原应答。无接触敏感性，无移植排斥，无移植物无接触敏感性，无移植排斥，无移植物抗宿主反应。抗宿主反应。B细胞数量正常但功能有缺陷，合成的免疫球蛋白主要细胞数量正常但功能有缺陷，合成的免疫球蛋白主要是是IgM，只有少量，只有少量IgG。粒细胞功能较低，粒细胞功能较低，NK细胞活性高。细胞活性高。（2）解剖生理特点胸腺残留一些上皮样细胞；淋巴组织胸腺依赖区33我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢

30、？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物BALB/c-nu的胸腺的胸腺昆明小鼠的胸腺昆明小鼠的胸腺BALB/c-nu的胸腺昆明小鼠的胸腺34我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物3、裸鼠的应用、裸鼠的应用裸鼠在肿瘤研究上的应用：裸鼠在肿瘤研究上的应用：制作人类肿瘤移植瘤模型制作人类肿瘤移植瘤模型人类肿瘤移植于动物的历史人类肿瘤移植于动物的历史w免疫排斥问题免疫排斥问题w眼前房，脑内，地鼠的颊囊等免疫逃避部位眼前房，脑内，地鼠的颊囊等免疫逃避部位w免疫抑制剂、射线照射的使用免疫抑

31、制剂、射线照射的使用w裸鼠作为人类肿瘤受体裸鼠作为人类肿瘤受体3、裸鼠的应用裸鼠在肿瘤研究上的应用：制作人类肿瘤移植瘤35我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物肿瘤移植瘤模型在肿瘤移植瘤模型在肿瘤基础研究肿瘤基础研究中的意义中的意义w添加人为因子（致突变剂，癌基因，药物等）观察肿瘤添加人为因子（致突变剂，癌基因，药物等）观察肿瘤病因及机理和治疗。病因及机理和治疗。w建立肿瘤细胞株：提供大量肿瘤组织供分析。建立肿瘤细胞株：提供大量肿瘤组织供分析。w诊断和预后：建立平行模型，明确诊断和诊断和预后：建立

32、平行模型，明确诊断和跟踪预后。跟踪预后。w个体化疗有效试验：对于晚期和复发肿瘤有重要意义。个体化疗有效试验：对于晚期和复发肿瘤有重要意义。w药物有效的标准：药物有效的标准：1.肿瘤不生长；肿瘤不生长；2.肿瘤生长缓慢；肿瘤生长缓慢；3.肿肿瘤长出后又消失；瘤长出后又消失；4.肿瘤无转移；肿瘤无转移；5.动物寿命延长。动物寿命延长。肿瘤移植瘤模型在肿瘤基础研究中的意义36我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物肿瘤移植瘤模型制作方法肿瘤移植瘤模型制作方法肿瘤组织块或肿瘤细胞皮下移植肿瘤组织块或肿瘤细胞

33、皮下移植腹腔内或肾包膜下移植腹腔内或肾包膜下移植原位移植原位移植肿瘤移植瘤模型制作方法肿瘤组织块或肿瘤细胞皮下移植37我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物移植瘤模型成功制作的影响因素：移植瘤模型成功制作的影响因素：肿瘤组织：肿瘤组织：恶性程度：恶性和转移复发瘤成功率较高恶性程度：恶性和转移复发瘤成功率较高种类：细胞系成功率种类：细胞系成功率活检标本活检标本来源：淋巴瘤、骨肿瘤等难获成功来源：淋巴瘤、骨肿瘤等难获成功部位：肿瘤块的外周部接种易成活部位：肿瘤块的外周部接种易成活裸鼠：裸鼠：遗传背景：

34、胰腺癌接种遗传背景：胰腺癌接种BALB/c成功，成功，NIH系失败系失败性别：雌激素依赖性肿瘤接种雄鼠生长慢性别：雌激素依赖性肿瘤接种雄鼠生长慢鼠龄：鼠龄：4-6周周动物健康状态动物健康状态移植瘤模型成功制作的影响因素：肿瘤组织：38我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物接接种种部部位位：原原位位移移植植成成功功率率高高，移移植植肿肿瘤瘤与与人人类类原原发发瘤瘤相相似似。有有些些肿肿瘤瘤需需要要接接种种在在特特定定的的部部位位（对对雌雌激激素素依依赖赖的的人人乳乳腺腺癌癌MCF-7细细胞胞系系，接

35、接种种乳乳腺腺脂脂肪肪垫垫才才能能成活）。成活）。其其他他：环环境境：细细菌菌病病毒毒可可以以影影响响NK细细胞胞活活性性；接接种种时时间越早越好，注意无菌操作。间越早越好，注意无菌操作。（2）裸鼠在医学其他领域的应用：）裸鼠在医学其他领域的应用：免免疫疫学学：研研究究体体液液免免疫疫与与细细胞胞免免疫疫的的关关系系，研研究究免免疫疫相关疾病相关疾病寄寄生生虫虫：寄寄生生虫虫感感染染的的动动物物模模型型，美美洲洲锥锥虫虫，卡卡氏氏肺肺囊虫囊虫皮肤：鱼鳞病皮肤：鱼鳞病免疫缺陷模型：麻风，结核免疫缺陷模型：麻风，结核接种部位：原位移植成功率高，移植肿瘤与人类原发瘤相似。有些肿39我吓了一跳，蝎子是

36、多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物严重联合免疫缺陷小鼠严重联合免疫缺陷小鼠 （Sever Combined Immunodeficient Mice,SCID mice）1983年年Bosma首次报告，来源于首次报告，来源于C.B-17小鼠。小鼠。由于第由于第16对染色体隐性基因突变，纯合突变导对染色体隐性基因突变，纯合突变导致淋巴细胞抗原受体基因致淋巴细胞抗原受体基因VDJ区域重排的重组区域重排的重组酶活性异常，基因重排时断裂无法正常连接，酶活性异常，基因重排时断裂无法正常连接，从而影响从而影响B、T细胞的正

37、常功能分化。细胞的正常功能分化。1988年我国医科院动物所从美国年我国医科院动物所从美国Jackson实验室实验室引进；引进；严重联合免疫缺陷小鼠（SeverC40我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物1、生物学特点：、生物学特点：外观体重与普通小鼠相同。外观体重与普通小鼠相同。繁殖特点：纯合子兄妹交配。繁殖特点：纯合子兄妹交配。对鼠肝炎，巴氏杆菌、卡氏肺囊虫极易感染，感染后对鼠肝炎，巴氏杆菌、卡氏肺囊虫极易感染，感染后易发病死亡。必须养育在易发病死亡。必须养育在SPF环境中，平均寿命环境中，平均

38、寿命1年以年以上。上。2、组织解剖学特点：、组织解剖学特点：脾脾脏脏、胸胸腺腺、淋淋巴巴结结体体积积低低于于普普通通小小鼠鼠的的30%，淋淋巴巴组组织织缺缺乏乏淋淋巴巴细细胞胞。（胸胸腺腺残残留留上上皮皮样样细细胞胞和和成成纤纤维维细细胞胞，脾脾脏脏没没有有脾脾小小体体，白白髓髓缺缺限限，红红髓髓正正常常，淋淋巴巴结由网状细胞构成。）结由网状细胞构成。）外外周周血血白白细细胞胞总总数数减减少少，淋淋巴巴细细胞胞占占1020%，非非淋淋巴巴性性造造血血细细胞胞如如粒粒细细胞胞，巨巨噬噬细细胞胞正正常常，NK、LAK细胞正常。细胞正常。1、生物学特点：外观体重与普通小鼠相同。41我吓了一跳，蝎子是

39、多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物3、免疫功能特点：、免疫功能特点：没没有有B、T阳阳性性标标志志细细胞胞，对对外外来来抗抗原原无无细细胞胞和和体体液液免免疫疫。NK、LAK细细胞胞功功能能正正常常或或增增高高；肥肥大大细细胞胞因因缺缺乏乏T细细胞胞因因子子而分化受阻。而分化受阻。约约2-23%的的SCID小小鼠鼠在在青青年年期期B、T细细胞胞功功能能可可以以恢恢复复，称称为为渗渗漏漏（Leaky），此此时时仍仍带带有有SCID基基因因，淋淋巴巴细细胞胞不不受受影影响响而发育成熟，原因不明，可以用血清学和组织学

40、方法诊断。而发育成熟，原因不明，可以用血清学和组织学方法诊断。4、SCID小鼠的应用小鼠的应用用用于于自自然然防防御御细细胞胞如如NK、LAK、巨巨噬噬细细胞胞、粒粒细细胞胞，及及免免疫疫辅辅助助细细胞胞的的分分化化和和功功能能研研究究，也也可可以以研研究究这这些些细细胞胞与与输输入入的的B、T细胞、淋巴因子的相互作用。细胞、淋巴因子的相互作用。能能接接受受人人类类造造血血组组织织的的移移植植，是是淋淋巴巴细细胞胞分分化化功功能能的的活活体体测测试试系统，可以用于评价人各类淋巴细胞的抗肿瘤活性。系统，可以用于评价人各类淋巴细胞的抗肿瘤活性。肿瘤接种成活率比裸鼠高。何杰金氏淋巴瘤，白血病模型肿瘤

41、接种成活率比裸鼠高。何杰金氏淋巴瘤，白血病模型寄生虫：人血丝虫病寄生虫：人血丝虫病3、免疫功能特点：没有B、T阳性标志细胞，对外来抗原无细胞42我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物转基因动物作为食物引起的社会转基因动物作为食物引起的社会反响反响1欧洲和美国的态度截然不同欧洲和美国的态度截然不同知识宣传知识宣传 政府支持政府支持 宗教问题宗教问题2中国和日本中国和日本起步阶段起步阶段 仍需宣传仍需宣传转基因动物作为食物引起的社会反响1欧洲和美国的态度截然不同43我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东

42、西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物关于转基因动物安全性关于转基因动物安全性一一对自然界基因库的影响对自然界基因库的影响二二对人类健康的影响对人类健康的影响输入人生长激素基因的猪的生长速度和出肉量都输入人生长激素基因的猪的生长速度和出肉量都比普通猪高一倍，但却百病缠身，人类食用后是否有比普通猪高一倍，但却百病缠身，人类食用后是否有损于健康迄今全然不知。损于健康迄今全然不知。应特别注意并谨慎对待以下几种情况；应特别注意并谨慎对待以下几种情况；1涉及人类转基因问题涉及人类转基因问题2转基因鱼类的制作与释放转基因鱼类的制作与释放3转基因

43、昆虫的制作与管理转基因昆虫的制作与管理4各类转基因小动物疾病模型的制作和管理各类转基因小动物疾病模型的制作和管理关于转基因动物安全性一对自然界基因库的影响44我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物特殊动物基因资源的保护特殊动物基因资源的保护中国的国宝中国的国宝-大熊猫大熊猫中国长江的河豚中国长江的河豚美国野黄牛美国野黄牛特殊动物基因资源的保护中国的国宝-大熊猫45我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物

44、器官移植器官移植器官移植46我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物w据现有的考古发现，人类开展移植手术的时间可以追溯到史前时期的青铜器时代。考古学家们在一具出土的史前人类的颅骨上，发现了颅骨环切术的痕迹，并且十分清楚地看见，在这个史前人类颅骨的缺损部，一块移植骨恰到好处的填补了这一部位。据现有的考古发现，人类开展移植手术的时间可以追溯到史前时期的47我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物w尽管在该标本

45、上，颅骨的手术切口没有愈合，而且显然导致了该史前人的死亡，然而，大量的文献资料和考古证据都足以说明，远古时代所施行的这些颅骨环切修补术，具有一定程度的治疗作用。尽管在该标本上，颅骨的手术切口没有愈合，而且显然导致了该史前48我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物w现代的器官移植是从肾移植开始的。最早的肾移植是在1936年，一位前苏联医生沃罗诺夫将一个尸体的肾脏移植到一位汞中毒的病人体内。病人是一位年仅26岁的青年人，由于肾衰竭已经病入膏肓，无药可救。于是沃罗诺夫给他做了手术，但是一直没有获得成功，

46、病人在48小时后死去了。现代的器官移植是从肾移植开始的。最早的肾移植是在1936年，49我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物器官发生了排斥，怎样解决呢？w1954年，美国波士顿的莫雷医生，为一位21岁的女病人进行了肾移植，用的是她同卵双同卵双生生姐姐的一只肾。病人患有严重的肾炎，在生命垂危之际接受了这项珍贵的卷，成为异体移植成功并且长期存活的第一位病人。后来，这对双胞姐妹都成了几个孩子的母亲。莫雷因此获得了诺贝尔生理学医学奖。这是器官移植史上的一个重要的里程碑，前百年来人类的幻想终于变成了现实。

47、器官发生了排斥，怎样解决呢？1954年，美国波士顿的莫雷医生50我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物心脏移植心脏移植w1967年12月3日，一位25岁的年轻女子不幸死于车祸，她的心脏却完好无损。这件突发的事件，给45岁的南非医生巴纳德巴纳德带了一次成功的机会。当天，他为一名54岁的商人成功地作了人类首例异体心脏移植手术。这位病人患有晚期动脉硬化性心脏病，心脏移植是挽救他生命唯一可能的方法。巴纳的一生的手术成功了，病人手术后顺利地度过了17天，虽然由于肺炎最终夺取了他的第二次生命，但是，这在人类器

48、官移植史上毕竟是一个里一个里程碑式程碑式的伟大成就。心脏移植1967年12月3日，一位25岁的年轻女子不幸死于车51我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物w不久，巴纳德又为第二名病人移植了心脏。这一次，病人存活了18个月。1971年，他为一位心脏病人做的手术非常成功，病人换心后，居然又活了20多年，一直到1994年七月，才因中风去世。w巴纳德熠熠生辉的创举，不仅为自己竖起了一座丰碑，也标志着在世界医学的领域中，人类又开辟了一块新大陆。不久，巴纳德又为第二名病人移植了心脏。这一次，病人存活了1852

49、我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物w肾移植的成功，标志着器官移植进入了临床应用阶段，也推动了器官移植的发展。于是，医学界上出现了大量使用亲属肾进行移植的手术，病人术前都要接受免疫抑制治疗。这个时期的医学人才辈出，捷报频传。1963年，肝移植和肺移植先后获得成功，1966年胰腺移植也取得了成功。肾移植的成功，标志着器官移植进入了临床应用阶段，也推动了器官53我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物w人

50、数众多人数众多至今全世界不下20万万人接受了肾移植，并以每年2万万例的速度增加着；1963年开始的肝移植到90年代已超过了14000例，最长存活者已超过了20年；心脏移植，根据国际移植中心统计已达12631例，即美国截至2000年大约就有2300人接受了心脏移植手术，并且有70%的患者生存时间至少有4年；肺移植自1967年哈斯利医生首次进行以来，至1995年止，全世界已有3809例。人数众多54我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物w我国的情况我国的情况在中国，器官移植始于20世纪50年代末，研究

51、人员先是在动物身上做了大量的实验，然后在60年代由吴阶平教授在国内率先开展了肾脏移植手术。到70年代末，中国器官移植就开始加快了步伐，至90年代中期已有近2万人接受了器官移植。现在，中国许多大医院都能实行肾脏移植手术，仅2001年中国就做了肾移植手术5500多例次我国的情况55我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物难度更大的肺脏移植发展就比较缓慢。据报道，自1993年以来，在中国大陆共实行单肺移植8例，双肺移植2例。接受肺脏移植存活最长者，当数北京安贞医院做的单肺移植患者，存活了五年11个月，患者

52、最后死于急性肝萎缩和霉菌性肺炎；安贞医院做的另一例双肺移植到2002年初时仍健在，当时已存活了3年9个月，也是国内唯一存活的肺脏移植患者。难度更大的肺脏移植发展就比较缓慢。56我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物关于器官移植关于器官移植的伦理学问题的伦理学问题关于器官移植的伦理学问57我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物案例一w1998年10月北京某医院眼科博士，在准备为两位失去视力的眼疾病人移植

53、角膜时，发现储存的角膜已经坏死。于是他进入停尸房将一女性尸体的角膜摘除，换上异眼，未告知死者家属，未获得家属同意。在火葬前家属发现死者角膜已被摘除，将医生告上法庭，控告他犯盗尸罪。1999年三月初北京市西城区人民检察院做出了对这位医生摘取尸体眼球一案不予起诉的决定。案例一1998年10月北京某医院眼科博士，在准备为两位失去视58我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物案例二w有一个病人甲因多年酗酒，肝脏功能衰竭，急需移植肾。另一青年乙因抓歹徒被歹徒刺伤肝脏，也急需移植。正好有一肾可供移植，而且组织配

54、型与这两位病人也正好相容。甲经济条件好，付得起肝移植费用；而乙是待业青年，无力负担移植费用。案例二有一个病人甲因多年酗酒，肝脏功能衰竭，急需移植肾。另一59我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物克隆动物生产费用克隆动物生产费用多莉多莉78万英镑万英镑成功率成功率0.36%克隆动物生产费用多莉60我吓了一跳，蝎子是多么丑恶和恐怖的东西，为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢？但是我也感到愉快，证实我的猜测没有错：表里边有一个活的生物进行克隆研究的主要单位进行克隆研究的主要单位中国科学院发育生物所中国科学院发育生物所中国科学院动物所中国科学院动物所中国农业科学院畜牧所中国农业科学院畜牧所西北农林科技大学西北农林科技大学东北农业大学东北农业大学广西农业大学广西农业大学扬州大学扬州大学华南师范大学华南师范大学进行克隆研究的主要单位中国科学院发育生物所61