微生物学第二章纯培养

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1、 1、 微 生 物 培 养 的 常 用 器 具 及 其 灭 菌灭 菌 方 法 ： 高 压 蒸 汽 灭 菌 干 热 灭 菌 1、 微 生 物 培 养 的 常 用 器 具 及 其 灭 菌 生 物 安 全 超 净 柜 小 型 无 菌 箱 平 板 （ plate） 又 称培 养 平 板 （ culture plate） 接 种 针 解 剖 镜 .培 养 武 汉 大 学 中 国 典 型 培 养 物 保 藏 中 心 几 种 常 用 菌 种 保 藏 方 法 的 比 较 矿 油 斜 面 覆 盖 保 藏 武 汉 大 学 中 国 典 型 培 养 物 保 藏 中 心 无 菌 技 术 、 菌 落 、 纯 培 养 、

2、二 元 培 养 物 ；掌 握 固 体 培 养 基 分 离 纯 培 养 的 方 法 、 选 择 培 养 分 离 法 ；了 解 液 体 培 养 基 分 离 纯 培 养 的 方 法 、 单 孢 分 离 法 ；掌 握 获 得 目 的 微 生 物 分 离 纯 化 的 基 本 流 程 ；掌 握 菌 种 保 藏 的 意 义 、 常 用 菌 株 保 藏 方 法 ；了 解 国 内 外 菌 种 保 藏 机 构 。本 章 要 求 第 二 章 纯 培 养1 一 般 说 来 ， 严 格 的 无 菌 操 作 是 一 切 微 生 物 学 工 作 的 基 本 要求 ， 但 在 分 离 与 培 养 极 端 嗜 盐 菌 时 ，

3、常 在 没 有 点 酒 精 灯 的普 通 实 验 台 上 倾 倒 培 养 平 板 、 在 日 常 环 境 中 直 接 打 开 皿 盖观 察 和 挑 取 菌 落 ， 而 其 研 究 结 果 并 没 有 因 此 受 到 影 响 ， 你知 道 这 是 为 什 么 吗 ？答 ： 培 养 极 端 嗜 盐 菌 的 培 养 平 板 需 要 添 加 很 高 浓 度 的 氯 化钠 （ 25%） ， 实 验 室 环 境 中 的 一 般 微 生 物 都 不 能 在 这 种 选 择培 养 基 上 生 长 ， 因 此 在 实 验 过 程 中 ， 即 使 不 采 取 无 菌 操 作技 术 ， 实 验 结 果 仍 不 会

4、受 到 影 响 。 2 如 果 希 望 从 环 境 中 分 离 得 到 厌 氧 固 氮 菌 ， 你 该如 何 设 计 实 验 ？答 ： （ 1） 根 据 选 择 分 离 的 原 理 设 计 不 含 氮 的 培 养 基 ， 在 这种 培 养 基 上 生 长 的 细 菌 ， 其 氮 素 应 来 自 固 氮 作 用 。 （ 2）将 环 境 样 品 （ 例 如 土 样 ） 稀 释 涂 布 到 选 择 平 板 上 ， 放 置 于厌 氧 罐 中 。 对 厌 氧 罐 采 用 物 理 、 化 学 方 法 除 去 氧 气 ， 保 留氮 气 。 培 养 后 在 平 板 上 生 长 出 来 的 细 菌 应 是 厌

5、氧 固 氮 菌 或兼 性 厌 氧 固 氮 菌 。 （ 3） 挑 取 一 定 数 量 的 菌 落 ， 对 应 点 种到 两 块 缺 氮 的 选 择 平 板 上 ， 分 别 放 置 于 厌 氧 罐 内 、 外 保 温培 养 。 在 厌 氧 罐 内 外 均 能 生 长 的 为 兼 性 厌 氧 固 氮 菌 ， 而 在厌 氧 罐 外 的 平 板 上 不 能 生 长 ， 在 厌 氧 罐 内 的 平 板 上 生 长 的即 为 可 能 的 厌 氧 固 氮 菌 。 3、 对 细 菌 的 细 胞 形 态 进 行 观 察 和 描 述 时 应 注 意 哪 些 方 面 ?你是 否 能 很 快 地 在 显 微 镜 下 区

6、 分 同 为 单 细 胞 的 细 菌 、 酵 母 菌 和 原生 动 物 ? 答 ： (1)首 先 应 使 用 稀 释 涂 布 等 方 法 对 待 检 菌 株 的 纯 度 、 群 落形 态 、 生 理 特 性 等 进 行 检 查 、 确 认 。 (2)选 用 正 常 的 新 鲜 培 养基 和 新 鲜 培 养 物 进 行 培 养 和 观 察 ， 避 免 培 养 过 程 中 一 些 物 理 、化 学 条 件 的 改 变 或 培 养 时 间 过 长 等 因 素 对 细 胞 形 态 的 影 响 。 (3)报 告 细 胞 大 小 时 应 选 用 多 个 细 胞 检 测 的 平 均 数 ， 并 记 录 所

7、用 的实 验 方 法 ， 包 括 培 养 条 件 、 培 养 时 间 、 样 品 制 备 方 法 和 染 色 方法 等 。 (4)可 从 大 小 和 形 态 上 对 细 菌 、 酵 母 菌 和 原 生 动 物 进 行区 分 。 酵 母 菌 、 原 生 动 物 个 体 较 大 ， 一 般 可 用 低 倍 镜 观 察 ， 酵母 菌 细 胞 一 般 呈 卵 圆 形 、 圆 形 、 圆 柱 形 或 柠 檬 形 ， 不 具 运 动 性 ，原 生 动 物 细 胞 形 态 多 变 ， 能 够 运 动 。 相 比 较 而 言 ， 细 菌 细 胞 一 般 较 小 ， 需 用 高 倍 镜 或 油 镜 才 能 看 清 。 4、 菌 种 保 藏 的 意 义 、 常 用 菌 株 保 藏 方 法