玉米胚芽油食用安全性评估

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1、玉米胚芽油食用安全性评估玉米胚芽油食用安全性评估 2014/09/05 食品与药品杂志2014年第三期1方法1.1小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验体重2530g小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组：阴性对照组（给予花生油，15mL/kg体重），阳性对照组（给予环磷酰胺，40mg/kg体重），3个试验组的染毒剂量分别为2.5，5.0，10.0g/kg体重。各组灌胃量均为15mL/kg体重，灌胃2次，间隔24h。末次给予受试物6h后处死小鼠，常规制片。每只小鼠镜检1000个嗜多染红细胞（PCE），记录微核细胞数，计算微核率（即微核细胞数/嗜多染红细胞，以千分率表示）。同时观察200个PCE，计算观察到的

2、正染红细胞（NCE）数，并计算PCE/NCE比值。1.2小鼠精子畸形试验体重2731g雄性小鼠25只，随机分为5组：阴性对照组（给予花生油，15mL/kg体重），阳性对照组（给予环磷酰胺，40mg/kg体重），3个试验组的染毒剂量分别为2.5，5.0，10.0g/kg体重。各组灌胃量均为15mL/kg体重，每天灌胃1次，连续5d。第35天处死小鼠，常规制片。每只小鼠计数1000个结构完整的精子，记录畸变类型和数量，计算精子畸形率（以百分率表示）。1.3大鼠30d喂养试验体重7090g断乳大鼠80只，雌雄各半，随机分为花生油阴性对照组（给予花生油，20mL/kg体重）及玉米胚芽油高、中、低剂量组

3、（剂量分别为20，10，5mL/kg体重），各组灌胃量均为20mL/kg体重，每天灌胃1次，连续30d。观察动物一般状况。第30天尾静脉取血，测血常规；此后禁食16h，腹动脉取血，进行血生化测定。同时对脏器进行病理性检查。试验期间观察大鼠的一般表现、行为、中毒体征等；每周称重1次，称量2次食物剩余量和撒食量以计算每周食物摄入量、每周及总的食物利用率；试验结束时所有大鼠均行大体检查，计算肝、脾、肾、睾丸等脏器的绝对重量和脏器系数，肝、脾、肾、胃、肠、睾丸、卵巢等脏器行组织病理学检查。1.4统计学分析使用Excel和SPSS16.0软件进行均数、标准差的计算和方差分析或秩和检验，以xs表示。2结果

4、2.1急性毒性试验14d内小鼠未见明显中毒症状、无死亡。最大耐受量（MTD）试验结果显示，该受试物对两种性别小鼠的MTD均大于20.0g/kg体重。根据急性毒性分级标准，该样品实际属无毒级物质。2.2遗传毒性试验2.2.1Ames试验两次试验受试物各剂量组回变菌落数均未超过自发回变菌落数的2倍，亦无剂量-反应关系，说明在加与不加S-9时该样品对鼠伤寒沙门菌TA97、TA98、TA100、TA102试验菌株均未呈现遗传毒性。2.2.2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验见表1。由表1可见，受试物各剂量组微核率与阴性对照组比较差异无统计学意义（P0.05），而环磷酰胺阳性对照组与阴性对照组相比差异有统计学

5、意义（P2.2.3小鼠精子畸形试验见表2。由表2可见，与阴性对照组比较，受试物各剂量组小鼠精子畸形率均无统计学差异（P0.05）；环磷酰胺阳性对照组有统计学差异（P2.3大鼠30d喂养试验大鼠喂养30d试验周期内各试验动物总体生长状况良好，体重逐周增长，未见中毒体征及死亡。各试验组动物每周体重、进食量、食物利用率和体重增重、总进食量、总食物利用率与阴性对照组比较均无统计学差异（P0.05）。血液学测定结果显示，与阴性对照组比较，雄性中剂量组红细胞计数、中性细胞数、淋巴细胞数及低剂量组白细胞计数有统计学差异（P0.05）。血液生化学测定结果显示，与阴性对照组比较，雄性低剂量组尿素氮差异有统计学意

6、义（P0.05）。试验结束时所有动物均行大体检查，肝脏大小正常、颜色新鲜、表面光滑、质地柔软、边缘锐利、无结节包块等。取出两侧肾和肾上腺，对准肾门将肾以最大剖面剖开，暴露肾盂，皮质和髓质厚度、颜色正常，界限清晰。未见胃肠黏膜出血、溃疡、增厚、淋巴滤泡增生等病变。脾切面马氏小体清晰可见。睾丸/卵巢形态、大小正常。各试验组动物的肝、肾、胃、肠、脾及卵巢/睾丸组织未见明显异常。与阴性对照组比较，肝、脾、肾、睾丸等器官的重量和脏器系数差异均无统计学意义（P0.05）。取高剂量组和阴性对照组雌、雄动物的肝、脾、肾、胃、肠、睾丸、卵巢等脏器进行组织病理学检查：对照组和高剂量组动物均未观察到胃、小肠、脾脏、

7、睾丸、卵巢等有病理改变。少数动物可观察到肝脏、肾脏有轻微病理学改变，但这些病理改变程度较轻且无组间特异性分布，考虑与动物质量有关，不认为试验组出现有意义的病理学改变。3讨论根据我国保健食品检验与评价规范推荐的遗传毒性检测试验组合，本研究选取了急性毒性试验、Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、大鼠30d喂养试验。急性毒性试验是经口1次给予或24h内多次给予受试物，观察动物短时间内产生的毒性反应，包括致死和非致死的参数指标。Ames试验是目前检测基因突变最常用的方法之一，其原理是检测受试物诱发鼠伤寒沙门菌组氨酸缺陷型菌株回复突变成野生型的能力，许多致癌剂的生物转化是依赖细

8、胞内微粒体混合功能氧化酶系完成的。大鼠肝S-9是常用的体外活化系统，其主要有效成分为混合功能氧化酶系统，不加S-9混合液得到阳性结果，说明受试物是直接诱变剂，加S-9混合液得到阳性结果，说明受试物是经S-9活化后产生致突变性。微核是常用的遗传毒理学指标之一，代表染色体或纺锤体的损伤。这种损伤会因细胞受到外界诱变因子的作用而加剧，微核产生的数量又与诱变因子剂量的强弱成正比，因此，可用微核出现的频率评价环境诱变因子对生物遗传物质的损伤。小鼠精子形态受基因控制，精子畸形是决定精子形成的基因发生突变的结果。因此，形态改变提示有关基因及其蛋白质产物的改变。大鼠30d喂养试验主要观察较长期饲喂不同剂量的受

9、试物引起有害效应的剂量、毒作用性质和靶器官，估计亚慢性摄入的危害。当未观察到有害作用的最大剂量达到人可能摄入量的一定倍数时，则可以此为依据外推到人，为确定人食用的安全剂量提供依据。本研究结果显示，接受急性毒性试验的14d内小鼠未见明显中毒症状、无死亡，且两种性别小鼠对玉米胚芽油的最大耐受量均大于20.0g/kg体重。根据急性毒性分级标准，该样品属无毒级物质。Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验结果显示，玉米胚芽油对小鼠没有致畸、致突等遗传毒性作用。大鼠30d喂养试验结果显示，试验期内各试验组动物生长发育良好，体重增重、食物利用率、脏器重量和脏器系数等各项指标均在本试验正常值范围。试验组血常规及血生化各指标均在本试验正常值范围。病理组织学检查试验组被检脏器未见有意义的病理学改变。毒理学评价结果认为该玉米胚芽油是安全的。作者：冯文娟许美艳石劢李峰卢连华单位：山东省五莲县疾病预防控制中心航天中心医院中日友好医院山东西王食品有限公司山东省疾病预防控制中心 上一个文章： 羧甲基纤维素钠黏度测试下一个文章： 山药皮中重要功能性成分的研究