研究生班分子生物学综合

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1、研 究 生 班 ： 分 子 生 物 学 综 合 课 件广 西 医 科 大 学 生 物 化 学 与 分 子 生 物 学 教 研 室 黄 勇 奇 (13877103493 ) 考 试 内 容 ： 1、 蛋 白 质 化 学2、 酶 学3、 细 胞 信 号 转 导4、 糖 蛋 白 和 蛋 白 聚 糖5、 核 酸 化 学6、 DNA生 物 合 成 与 损 伤 修 复7、 RNA的 生 物 合 成 和 加 工8、 蛋 白 质 生 物 合 成9、 基 因 表 达 调 控10、 癌 基 因 与 抑 癌 基 因11、 基 因 工 程 的 基 本 原 理 蛋 白 质 化 学第 一 章 一 、 氨 基 酸 组 成

2、蛋 白 质 的 基 本 单 位R氨 基 酸 的 结 构 通 式C NH2COOHH 存 在 自 然 界 中 的 氨 基 酸 有 300余 种 ， 但 组成 人 体 蛋 白 质 的 氨 基 酸 仅 有 20种 ， 且 均 属 L- 氨 基 酸 （ 甘 氨 酸 除 外 ） 。 1、 非 极 性 脂 肪 族 氨 基 酸 （ 疏 水 性 ）2、 极 性 中 性 氨 基 酸 （ 亲 水 性 ）3、 芳 香 族 氨 基 酸4、 酸 性 氨 基 酸5、 碱 性 氨 基 酸（ 一 ） 氨 基 酸 的 分 类* 20种 氨 基 酸 的 英 文 名 称 、 缩 写 符 号 及 分 类 如 下 : (1) Nonp

3、olar aliphatic amino acids: Glycine Alanine Valine Leucine Isoleucine Proline甘 氨 酸 丙 氨 酸 缬 氨 酸亮 氨 酸 异 亮 氨 酸 脯 氨 酸（ 非 极 性 脂 肪 族 ） (1) Nonpolar aliphatic amino acids: Glycine Alanine Valine Leucine Isoleucine Proline(2) Polar neutral amino acids: Serine Threonine Cysteine Methionine Asparagine Glutami

4、ne（ 极 性 中 性 ）丝 氨 酸 苏 氨 酸 半 胱 氨 酸 蛋 氨 酸 （ 甲 硫 氨 酸 ） 天 冬 酰 胺 谷 胺 酰 胺 (3) Nonpolar aromatic amino acids:Phenylalanine Tyrosine Tryptophan非 极 性 芳 香 族 氨 酸 酸苯 丙 氨 酸 酪 氨 酸 色 氨 酸 (3) Nonpolar aromatic amino acids:Phenylalanine Tyrosine Tryptophan(4) acidic amino acids（ 酸 性 氨 基 酸 ） Aspartic acid （ 天 冬 氨 酸 ）

5、Glutamic aicd （ 谷 氨 酸 ） (3) Nonpolar aromatic amino acids:Phenylalanine Tyrosine Tryptophan(4) acidic amino acids: Aspartic acid Glutamic aicd(5) basic amino acid （ 碱 性 氨 基 酸 ）Lysine Arginine Histidine 赖 氨 酸 精 氨 酸 组 氨 酸 特 殊 氨 基 酸 ： 脯 氨 酸（ 亚 氨 基 酸 ） CH2 CHCOO-NHCH2CH2 （ 二 ） 氨 基 酸 的 主 要 理 化 性 质 1、 氨 基

6、 酸 两 性 解 离 和 等 电 点 ： 1） 两 性 解 离 ：AA NH2COOH AA NH3COOHAA NH 2COO -+ （ 二 ） 氨 基 酸 的 主 要 理 化 性 质 1、 氨 基 酸 两 性 解 离 和 等 电 点 ： 1） 两 性 解 离 ：AA NH2COOH AA NH3COOHAA NH 2COO -+H+OH- pH低 时pH高 时 2） 等 电 点 ： 指 使 氨 基 酸 解 离 成 正 、 负 离 子 数 相 等 ， 净 电 荷 为 零 时 溶 液 的 pH值 。 用 pI表 示AA NH2COOH AA NH3COOH +AA NH2COO - AA CO

7、ONH3+ -H+OH- 如 此 则 有 ：AA NH2COOH AA NH3COOH +AA NH2COO - AA COONH3+ -pH pIpH pI pH= pI 问 题 ： 下 列 哪 个 氨 基 酸 在 中 性 溶 液 中 电 泳 时 向 负 极 移 动 ？ A、 精 氨 酸 B、 异 亮 氨 酸 C、 谷 氨 酸 D、 天 冬 氨 酸 E、 丝 氨 酸 2. 紫 外 吸 收 是 指 含 有 共 轭 双 键 的 色 氨 酸 、 酪 氨 酸 溶液 对 紫 外 光 具 有 吸 收 特 性 ， 其 最 大 吸 收 峰 在 280 nm 附 近 。 3. 茚 三 酮 反 应 氨 基 酸

8、与 茚 三 酮 水 合 物 共 热 ， 可 生 成 蓝 紫 色化 合 物 ， 其 最 大 吸 收 峰 在 570nm处 。 由 于 此 吸 收峰 值 与 氨 基 酸 的 含 量 存 在 正 比 关 系 ， 因 此 也 可 作为 氨 基 酸 定 量 分 析 方 法 。 蛋 白 质 的 分 子 结 构The Molecular Structure of Protein 第 二 节 蛋 白 质 的 分 子 结 构 包 括 ： 1952年 高 级结 构一 级 结 构 (primary structure)二 级 结 构 (secondary structure)三 级 结 构 (tertiary st

9、ructure)四 级 结 构 (quaternary structure) 定 义 ： 蛋 白 质 的 一 级 结 构 指 多 肽 链 中 氨 基 酸 从 N端到 C端 的 排 列 顺 序 。一 、 蛋 白 质 的 一 级 结 构一 级 结 构 的 维 系 键 ：肽 键 ， 有 些 蛋 白 质 还 包 括 二 硫 键 。 二 、 蛋 白 质 的 二 级 结 构蛋 白 质 分 子 中 某 一 段 肽 链 的 局 部 空 间 结构 ， 即 该 段 肽 链 主 链 骨 架 原 子 的 相 对 空 间 位 置 ，并 不 涉 及 氨 基 酸 残 基 侧 链 的 构 象 。定 义 ： 维 系 键 ： 氢

10、 键 蛋 白 质 二 级 结 构 的 主 要 形 式 -螺 旋 ( -helix ) ： 最 常 见 -折 叠 ( -pleated sheet ) -转 角 ( -turn ) 无 规 卷 曲 ( random coil ) （ 五 ） 模 体在 许 多 蛋 白 质 分 子 中 ， 两 个 或 三 个 具 有 二 级结 构 的 肽 段 ， 在 空 间 上 相 互 接 近 ， 形 成 一 个 特 殊的 空 间 构 象 并 具 有 特 殊 功 能 ， 称 为 模 体 (motif)。本 质 上 属 超 级 二 级 结 构 。模 体 总 有 其 特 征 性 的 氨 基 酸 序 列 ,并 发 挥 特

11、 殊的 功 能 。 三 、 蛋 白 质 的 三 级 结 构疏 水 键 、 离 子 键 、 氢 键 和 Van der Waals力 等 。 维 系 键 ：整 条 肽 链 中 全 部 氨 基 酸 残 基 的 相 对 空 间 位 置 。即 肽 链 中 所 有 原 子 在 三 维 空 间 的 排 布 位 置 。（ 一 ） 定 义 （ 二 ） 结 构 域大 分 子 蛋 白 质 的 三 级 结 构 常 可 分 割 成 一 个 或 数 个 具 有较 为 独 立 三 维 结 构 的 球 状 或 纤 维 状 的 区 域 ， 折 叠 得 较 为 紧密 ， 各 行 使 其 功 能 ， 称 为 结 构 域 (dom

12、ain) 。但 有 些 蛋 白 质 各 结 构 域 之 间 接 触 较 多 并 紧 密 ， 从 结 构上 很 难 划 分 ， 因 此 并 非 所 有 蛋 白 质 的 结 构 域 都 明 显 可 分 。 四 、 蛋 白 质 的 四 级 结 构蛋 白 质 分 子 中 各 亚 基 的 空 间 排 布 及 亚 基 接 触部 位 的 布 局 和 相 互 作 用 ， 称 为 蛋 白 质 的 四 级 结 构 。有 些 蛋 白 质 分 子 含 有 二 条 或 多 条 多 肽 链 ， 每一 条 多 肽 链 都 有 完 整 的 三 级 结 构 ， 这 样 的 一 条 多肽 链 就 称 为 蛋 白 质 的 亚 基

13、(subunit)。维 系 键 ： 氢 键 ， 离 子 键 ， 疏 水 键 。 不 能 是 二 硫 键 。 理 解 四 级 结 构 要 注 意 的 几 个 问 题 ： （ 1） 并 非 所 有 的 蛋 白 质 都 有 四 级 结 构 。 条 件 ： 由 两 条 (以 上 )的 多 肽 链 构 成 。 且 每 条 多 肽 链 具 有 独 立 的 三 级 结 构 。 多 肽 链 之 间 不 能 以 共 价 键 相 连 。 （ 2） 亚 基 单 独 存 在 时 不 具 有 生 理 功 能 。 （ 3） 蛋 白 质 分 子 之 间 的 结 合 或 蛋 白 质 与 脂 类 、 核 酸 等 的 结 合 ，

14、 不 属 四 级 结 构 范 畴 。 第 四 节蛋 白 质 的 理 化 性 质The Physical and Chemical Characters of Protein （ 一 ） 蛋 白 质 的 两 性 电 离 蛋 白 质 分 子 除 两 端 的 氨 基 和 羧 基 可 解 离 外 ，氨 基 酸 残 基 侧 链 中 某 些 基 团 ， 在 一 定 的 溶 液 pH条件 下 都 可 解 离 成 带 负 电 荷 或 正 电 荷 的 基 团 。 * 蛋 白 质 的 等 电 点 ( isoelectric point, pI) 当 蛋 白 质 溶 液 处 于 某 一 pH时 ， 蛋 白 质 解

15、离 成正 、 负 离 子 的 趋 势 相 等 ， 即 成 为 兼 性 离 子 ， 净 电荷 为 零 ， 此 时 溶 液 的 pH称 为 蛋 白 质 的 等 电 点 。 （ 二 ） 蛋 白 质 的 胶 体 性 质 蛋 白 质 属 于 生 物 大 分 子 之 一 ， 分 子 量 可 自1万 至 100万 之 巨 ， 其 分 子 的 直 径 可 达 1100nm， 为 胶 粒 范 围 之 内 。 * 蛋 白 质 胶 体 稳 定 的 因 素 （ 蛋 白 质 溶 于 水 的 原 因 ）颗 粒 表 面 电 荷水 化 膜 （ 三 ） 蛋 白 质 的 变 性 、 沉 淀 和 凝 固 在 某 些 物 理 和 化

16、 学 因 素 作 用 下 ， 其 特 定 的空 间 构 象 被 破 坏 ， 也 即 有 序 的 空 间 结 构 变 成 无序 的 空 间 结 构 ， 从 而 导 致 其 理 化 性 质 改 变 和 生物 活 性 的 丧 失 。 称 为 蛋 白 质 变 性 。 蛋 白 质 的 变 性 (denaturation) 造 成 变 性 的 因 素 ：如 加 热 、 乙 醇 等 有 机 溶 剂 、 强 酸 、 强 碱 、重 金 属 离 子 及 生 物 碱 试 剂 等 。 变 性 的 本 质 ： 破 坏 非 共 价 键 和 二 硫 键 ， 不 改 变 蛋 白 质 的 一 级 结 构 。 变 性 的 后 果

17、 ： 溶 解 度 降 低 ， 粘 度 增 加 ， 结 晶 能 力 消 失 ， 生 物 活 性 丧 失 ， 易 被 蛋 白 酶 水 解 。 若 蛋 白 质 变 性 程 度 较 轻 ， 去 除 变 性 因 素 后 ，蛋 白 质 仍 可 恢 复 或 部 分 恢 复 其 原 有 的 构 象 和 功 能 ，称 为 变 性 蛋 白 质 的 复 性 (renaturation) 。但 许 多 蛋 白 质 变 性 后 ， 因 空 间 结 构 破 坏 严 重而 难 以 复 性 ， 称 为 不 可 逆 变 性 。 （ 四 ） 蛋 白 质 的 紫 外 吸 收由 于 蛋 白 质 分 子 中 含 有 共 轭 双 键 的

18、 酪 氨 酸和 色 氨 酸 ， 因 此 在 280nm波 长 处 有 特 征 性 吸 收峰 。 蛋 白 质 的 OD280与 其 浓 度 呈 正 比 关 系 ， 因 此可 作 蛋 白 质 定 量 测 定 。 （ 五 ） 蛋 白 质 的 呈 色 反 应 茚 三 酮 反 应 (ninhydrin reaction) 蛋 白 质 经 水 解 后 产 生 的 氨 基 酸 也 可 发 生 茚 三 酮 反 应 。 双 缩 脲 反 应 (biuret reaction)蛋 白 质 和 多 肽 分 子 中 的 肽 键 在 稀 碱 溶 液 中 与 硫 酸铜 共 热 ， 呈 现 紫 色 或 红 色 ， 此 反 应

19、 称 为 双 缩 脲 反 应 ， 双缩 脲 反 应 可 用 来 检 测 蛋 白 质 水 解 程 度 。 OH 2N-C-NH2= OH2N-C-NH2=+ O OH2N-C-NH-C-NH2= = 第 五 节蛋 白 质 的 分 离 纯 化The Separation and Purification of Protein 1、 根 据 分 子 大 小 的 纯 化 方 法 ： （ 1） 透 析 和 超 滤 （ 2） 离 心 （ 3） 凝 胶 过 滤2、 利 用 溶 解 度 差 别 的 纯 化 方 法 （ 1） 等 电 点 沉 淀 （ 2） 盐 析3、 根 据 电 荷 不 同 的 纯 化 方 法

20、（ 1） 电 泳 （ 2） 离 子 交 换 层 析 Enzyme第 二 章 酶 学 一 、 酶 的 分 子 组 成结 合 酶 (conjugated enzyme)n单 纯 酶 (simple enzyme) 一 、 酶 的 分 子 组 成蛋 白 质 部 分 ： 酶 蛋 白 (apoenzyme)辅 助 因 子(cofactor) 金 属 离 子小 分 子 有 机 化 合 物全 酶(holoenzyme)结 合 酶 (conjugated enzyme)n单 纯 酶 (simple enzyme)只 有 全 酶 才 具 有 催 化 作 用 。 *各 部 分 在 催 化 反 应 中 的 作 用1

21、、 酶 蛋 白 决 定 反 应 的 特 异 性 （ 即 决 定 催 化 什么 底 物 ）2、 辅 助 因 子 决 定 反 应 的 种 类 与 性 质 （ 即 决 定使 底 物 发 生 什 么 样 的 反 应 ） 二 、 酶 的 活 性 中 心 酶 分 子 中 执 行 其 催 化 功 能 的 部 位 。 即 与 底 物 结 合 并 把 底 物 转 化 成 产 物 的 部 位 。 结 构 上 是 由 一 些 一 级 结 构 可 能 相 距 甚 远 ，但 在 空 间 结 构 上 彼 此 靠 近 的 必 需 基 团 组 成的 区 域 。 三 、 酶 的 转 换 数 和 米 氏 常 数 酶 的 转 换

22、数 是 指 在 一 定 条 件 下 ， 每 秒 钟 每 个 酶分 子 转 换 底 物 的 分 子 数 。米 氏 常 数 （ Km） 在 数 值 上 等 于 酶 促 反 应 的 速度 达 到 最 大 速 度 一 半 时 的 底 物 浓 度 。 VmaxS Km + S 四 、 酶 的 活 力 酶 活 力 是 指 其 催 化 某 一 化 学 反 应 的 能 力 。 通常 利 用 在 一 定 条 件 下 所 催 化 的 化 学 反 应 的 反应 速 率 表 示 酶 活 力 的 大 小 。 酶 的 比 活 力 表 示 酶 的 纯 度 。 比 活 力 用 单 位 数量 酶 样 品 中 所 含 酶 活 力

23、 单 位 数 表 示 （ U/mg） 五 、 核 酶u 具 有 催 化 功 能 的 RNA分 子 (ribozyme)： 作 为序 列 特 异 性 的 核 酸 内 切 酶 降 解 mRNA。 （ 一 ） 酶 -底 物 复 合 物 的 形 成 与 诱 导 契 合 假 说*诱 导 契 合 假 说 (induced-fit hypothesis)酶 -底 物 复 合 物 （ 过 渡 态 ） E + S E + P ES 酶 与 底 物 相 互 接 近 时 ， 其 结 构 相 互 诱 导 、 相 互 变形 和 相 互 适 应 ， 进 而 相 互 结 合 。 这 一 过 程 称 为 酶 -底 物结 合

24、的 诱 导 契 合 活 化 能 ： 使 底 物 分 子 从 初 态 转 变 到 活 化 态 所 需 的 能 量 。 或 者 说 使 反 应 体 系 当 中 的 非 活 化 分 子 转 变 成 活化 分 子 所 需 的 能 量 。 结 合 能 ： 是 酶 -底 物 相 互 作 用 所 产 生 的 能 量 ， 是 降 低 酶 促 反 应活 化 能 和 稳 定 过 渡 态 的 主 要 能 量 来 源 。 2. 邻 近 效 应 (proximity effect)与 定 向 排 列 (orientation arrange ) 3、 多 元 催 化 （ 酸 碱 催 化 ， 共 价 催 化 ， 亲 核

25、催 化 ）同 一 种 酶 常 常 同 时 具 有 酸 、 碱 催 化 作 用 。 酶 的 活 性 中 心 多 为 疏 水 性 “ 口 袋 ” 状 。 可 防 止 底 物 与 酶 之 间 形 成 水 化 膜 ， 有 利 于 酶 与 底 物 之 间 的 密 切 接 触 。酶 可 与 底 物 形 成 瞬 间 共 价 键 而 将 之 激 活 。酶 的 亲 核 基 团 可 提 供 电 子 给 带 有 正 电 荷 的 过 渡 态 中 间 物 。 第 四 节 酶 的 调 节The Regulation of Enzyme 酶 活 性 的 调 节 （ 快 速 调 节 ）酶 含 量 的 调 节 （ 缓 慢 调

26、节 ）关 键 酶关 键 酶 是 指 整 条 代 谢 途 径 中 活 性 最 低 的 ， 催化 反 应 速 度 最 慢 的 那 一 个 酶 。 又 叫 限 速 酶 。 变 构 效 应 剂 (allosteric effector)变 构 激 活 剂 ： 正 协 同 效 应变 构 抑 制 剂 ： 负 协 同 效 应 变 构 酶 (allosteric enzyme)一 些 代 谢 物 可 与 某 些 酶 分 子 活 性 中 心 外 的某 部 分 可 逆 地 结 合 ， 使 酶 构 象 改 变 ， 从 而 改 变酶 的 催 化 活 性 ， 此 种 调 节 方 式 称 变 构 调 节 。 （ 三 ）

27、酶 的 共 价 修 饰 调 节共 价 修 饰 (covalent modification)： 化 学 修 饰在 其 他 酶 的 催 化 作 用 下 ， 某 些 酶 蛋 白 肽 链 上 的 一 些基 团 可 与 某 种 化 学 基 团 发 生 可 逆 的 共 价 结 合 ， 从 而 改 变酶 的 活 性 ， 此 过 程 称 为 共 价 修 饰 。 （ 三 ） 酶 的 共 价 修 饰 调 节共 价 修 饰 (covalent modification)在 其 他 酶 的 催 化 作 用 下 ， 某 些 酶 蛋 白 肽 链 上 的 一 些基 团 可 与 某 种 化 学 基 团 发 生 可 逆 的

28、共 价 结 合 ， 从 而 改 变酶 的 活 性 ， 此 过 程 称 为 共 价 修 饰 。 常 见 类 型 ：磷 酸 化 与 脱 磷 酸 化 （ 最 常 见 ）乙 酰 化 和 脱 乙 酰 化甲 基 化 和 脱 甲 基 化腺 苷 化 和 脱 腺 苷 化 SH与 S S互 变 酶 的 磷 酸 化 与 脱 磷 酸 化 -OHThrSerTyr酶 蛋 白 H2OPi 磷 蛋 白 磷 酸 酶 ATP ADP蛋 白 激 酶 ThrSerTyr -O-PO32-酶 蛋 白 （ 三 ） 酶 原 与 酶 原 的 激 活酶 原 (zymogen)：有 些 酶 在 细 胞 内 合 成 或 初 分 泌 时 只 是酶

29、 的 无 活 性 前 体 ， 此 前 体 物 质 称 为 酶 原 。 酶 原 的 激 活 ：在 一 定 条 件 下 ， 酶 原 向 有 活 性 酶 转 化的 过 程 。 酶 原 激 活 的 机 理 ： 蛋 白 酶 解 激 活酶 原分 子 构 象 发 生 改 变形 成 或 暴 露 出 酶 的 活 性 中 心 一 个 或 几 个 特 定 的 肽 键 断 裂 ， 水 解掉 一 个 或 几 个 短 肽在 特 定 条 件 下 酶 原 激 活 的 生 理 意 义 ：避 免 细 胞 产 生 的 酶 对 细 胞 进 行 自 身 消 化 ，并 使 酶 在 特 定 的 部 位 和 环 境 中 发 挥 作 用 ，

30、保 证体 内 代 谢 正 常 进 行 。有 的 酶 原 可 以 视 为 酶 的 储 存 形 式 。 在 需 要时 ， 酶 原 适 时 地 转 变 成 有 活 性 的 酶 ， 发 挥 其 催化 作 用 （ 对 机 体 的 保 护 作 用 ） 。通 过 蛋 白 酶 解 激 活 方 式 调 节 活 性 的 酶 主 要 有 蛋 白 消 化酶 、 凝 血 酶 ， 蛋 白 激 素 等 。 细 胞 信 号 转 导第 三 章Cell Communication and Signal Transduction 跨 膜 信 号 转 导 的 一 般 步 骤 ：特 定 的 细 胞 释 放 信 息 物 质信 息 物 质

31、 经 扩 散 或 血 循 环 到 达 靶 细 胞与 靶 细 胞 的 受 体 特 异 性 结 合受 体 对 信 号 进 行 转 换 并 启 动 细 胞 内 信 使 系 统靶 细 胞 产 生 生 物 学 效 应 第 一 节Signal Molecules信 息 物 质 一 、 细 胞 间 信 息 物 质定 义 ：是 由 细 胞 分 泌 的 调 节 靶 细 胞 生 命 活动 的 化 学 物 质 的 统 称 ， 又 称 作 第 一 信 使 。 化 学 本 质 ：* 蛋 白 质 和 肽 类 （ 如 生 长 因 子 、 细 胞 因 子 、 胰岛 素 等 ）* 氨 基 酸 及 其 衍 生 物 （ 如 甘 氨

32、 酸 、 甲 状 腺 素 、肾 上 腺 素 等 ）* 类 固 醇 激 素 （ 如 糖 皮 质 激 素 、 性 激 素 等 ）* 脂 酸 衍 生 物 （ 如 前 列 腺 素 ）* 气 体 （ 如 一 氧 化 氮 、 一 氧 化 碳 ） 等 二 、 细 胞 内 信 息 物 质定 义 ：第 一 信 号 物 质 经 转 导 刺 激 细 胞 内 产 生 的 传 递细 胞 调 控 信 号 的 化 学 物 质 。 常 称 为 第 二 信 使 。 化 学 性 质无 机 离 子 ： 如 Ca2+ 脂 类 衍 生 物 ： 如 DAG、 Cer糖 类 衍 生 物 ： 如 IP3核 苷 酸 ： 如 cAMP、 cGM

33、P信 号 分 子 ： NO 第 二 节受 体Receptor 能 与 受 体 呈 特 异 性 结 合 的 生 物 活 性 分 子称 为 配 体 (ligand)。受 体 ：是 细 胞 膜 上 或 细 胞 内 能 特 别 识 别 生 物 活性 分 子 并 与 之 结 合 的 成 分 ， 它 能 把 识 别 和 接受 的 信 号 正 确 无 误 地 放 大 并 传 递 到 细 胞 内 部 ，进 而 引 起 生 物 学 效 应 的 特 殊 蛋 白 质 ， 个 别 是糖 脂 。 根 据 细 胞 定 位一 、 受 体 的 分 类 、 一 般 结 构 与 功 能膜 受 体 (membrane recept

34、or)胞 内 受 体 (intracellular receptor)镶 嵌 糖 蛋 白DNA结 合 蛋 白 2. G 蛋 白 偶 联 受 体 研 究 最 广 最 透 彻 。又 称 七 个 跨 膜 螺 旋 受 体 /蛇 型 受 体(serpentine receptor)， 种 类 繁 多 。可 对 多 种 激 素 和 神 经 递 质 作 出 应 答 。 (1) 受 体 结 构 的 特 点* 受 体 的 N端 可 有 不 同 的 糖 基 化 。 * 受 体 内 有 一 些 高 度 保 守 的 半 胱 氨 酸 残 基 ，对 维 持 受 体 的 结 构 起 到 关 键 作 用 。 * 胞 内 的

35、第 二 和 第 三 个 环 能 与 G-蛋 白 相 偶 联 。 G蛋 白 偶 联 受 体 的 结 构矩 型 代 表 -螺 旋 ， N端 被 糖 基 化 ， C端 的 半 胱 氨 酸 被 棕 榈 酰 化 。20-25AA G蛋 白 * C-末 端 的 高 度 保 守 的 Cys残 基 在 肾 上 腺 素能 受 体 、 肾 上 腺 素 能 受 体 和 视 紫 质 受 体 中可 被 棕 榈 酰 化 ， 可 稳 定 受 体 胞 内 部 分 的 三 级结 构 。 * 受 体 的 C-末 端 和 胞 内 第 三 环 含 有 多 个 Thr和Ser残 基 可 被 磷 酸 化 ， 与 抑 制 蛋 白 -视 紫

36、红 质 抑 制 蛋 白 （ arrestin） 结 合 ， 使 受 体 不能 再 活 化 G蛋 白 而 失 活 。 此 类 受 体 的 信 息 传 递 可 归 纳 为 ： 以 肾 上 腺 素 为 代 表 。 激 素 受 体 蛋 白 腺 苷 酸环 化 酶 第 二 信 使 cAMP蛋 白 激 酶 A(PKA)酶 或 其 他 功 能 蛋 白 生 物 学 效 应 G蛋 白 (guanylate binding protein)是 一 类 能 和 GTP或 GDP相 结 合 、 位 于 细 胞 膜胞 浆 面 的 外 周 蛋 白 ， 由 、 、 三 个 亚 基 组 成 。分 激 动 型 （ Rs)与 抑

37、制 型 (Ri)两 种 。每 种 又 有 两 种 构 象 ： 活 化 型 ； 非 活 化 型活 化 型 ： 亚 基 与 GTP结 合 并 导 致 亚 基 脱 落 。非 活 化 型 ： 以 三 聚 体 形 式 存 在 并 与 GDP结 合 。 激 动 型 G蛋 白 和 抑 制 型 G蛋 白 的 活 性 型和 非 活 性 型 的 互 变不 同 的 G蛋 白 能 特 异 地 将 配 体 -受 体 和 与 之 相 适 应的 效 应 酶 偶 联 起 来 。 （ 二 ） Ca2+ 信 号 转 导 途 径一 般 过 程 ：胞 外 信 息 分 子 受 体 激 活 G蛋 白 蛋 白 激 酶 C( PKC)被 激

38、 活 。G蛋 白 激 活 磷 脂 酶 C( PLC) 磷 脂 酶 C水 解 PIP2产 生 两 种 第 二 信 使 ( DAG和 IP3 DAG， IP3的 功 能DAG： 在 磷 脂 酰 丝 氨 酸 和 Ca2+协 同 下 激活 PKCIP3 ： 与 内 质 网 和 肌 浆 网 上 的 受 体 结 合 ， 促使 细 胞 内 Ca2+释 放 调 节 基 因 表 达PKC 对 基 因 的 活 化 分 为 早 期 反 应 和 晚 期 反 应 。 * PKC的 生 理 功 能 调 节 代 谢活 化 的 PKC引 起 一 系 列 靶 蛋 白 的 丝 、 苏 氨 酸残 基 磷 酸 化 。靶 蛋 白 包

39、括 ： 质 膜 受 体 、 膜 蛋 白 和 多 种 酶 。 （ 四 ） 酶 偶 联 受 体 介 导 的 信 号 转 导 途 径1、 受 本 酪 氨 酸 激 酶 RTK分 类受 体 型 TPK（ 位 于 细 胞 质 膜 上 ）如 胰 岛 素 受 体 、 生 长 因 子 受 体 及 原 癌基 因 （ erb-B、 kit、 fins等 ） 编 码 的 受 体非 受 体 型 TPK（ 位 于 胞 浆 ）如 底 物 酶 JAK和 原 癌 基 因 （ src、 yes、ber-abl等 ） 编 码 的 TPK 1. 受 体 酪 氨 酸 激 酶 RTK-Ras-MAPK途 径GRB2 (growth fa

40、ctor receptor bound protein 2）SH2 域 (src homology 2 domain) 细 胞 内 某 些 连 接 物 蛋 白 共 有 的 氨 基 酸 序 列 ，与 原 癌 基 因 src编 码 的 酪 氨 酸 蛋 白 激 酶 区 同 源 ，该 区 域 能 识 别 磷 酸 化 的 酪 氨 酸 残 基 并 与 之 结 合 。 组 成 ： 催 化 性 受 体 ， GRB2, SOS, Ras蛋 白 , Raf蛋 白 ， MAPK系 统SH2 SH3 SOS (son of sevenless)富 含 脯 氨 酸 ， 可 与 SH3结 合 ， 促 使 Ras的 GDP

41、换 成 GTP。Ras蛋 白 ： 类 似 与 G蛋 白 的 G亚 基 ， 单 一 肽 链 。Raf蛋 白 ： 具 有 丝 苏 氨 酸 蛋 白 激 酶 活 性MAPK系 统 (mitogen-activated protein kinase)包 括 MAPK、 MAPK激 酶 （ MAPKK） 、MAPKK激 酶 （ MAPKKK） ， 是 一 组 酶 兼 底 物的 蛋 白 分 子 。 一 般 过 程 为 ：EGF（ 生 长 信 号 ） EGFR（ 受 体 酪 氨 酸 激 酶 RTK）GRB2（ 接 头 蛋 白 ） Sos蛋 白 （ GEF）Ras蛋 白 Ser/Thr激 酶 级 联 反 应细

42、胞 增 生 。 糖 蛋 白 和 蛋 白 聚 糖Glycoprotein and Proteoglycan 第 四 章 一 种 或 多 种 糖 以 共 价 键 连 接 到 肽 链 上 的 蛋白 质 。 糖 链 的 长 度 一 般 不 超 过 15个 单 糖 。蛋 白 质 含 量 较 多 ， 糖 所 占 比 例 变 动 大 ， 表现 为 蛋 白 质 的 特 性 。细 胞 膜 、 溶 酶 体 、 细 胞 外 液一 、 糖 蛋 白 概 述 连 接 方 式 N-连 接 ：O-连 接 ： （ 一 ） N-连 接 糖 蛋 白1. 定 义 ：糖 蛋 白 的 糖 链 与 蛋 白 部 分 的 Asn-X-Ser序

43、 列的 天 氡 酰 胺 氮 以 共 价 键 连 接 称 N-连 接 糖 蛋 白 。2. 糖 基 化 位 点 ：N-连 接 糖 蛋 白 中 Asn-X-Ser/Thr三 个 氨 基 酸残 基 的 序 列 子 称 为 糖 基 化 位 点 。 （ 二 ） O-连 接 糖 蛋 白1. 定 义 ：糖 蛋 白 糖 链 与 蛋 白 部 分 的 丝 /苏 氨 酸 残 基的 羟 基 相 连 ， 称 为 O-连 接 糖 蛋 白 。 2. O-连 接 寡 糖 结 构 ：O-连 接 寡 糖 有 N-乙 酰 半 乳 糖 与 半 乳 糖 构 成核 心 二 糖 ， 核 心 二 糖 可 重 复 延 长 及 分 支 ， 再 接

44、上 岩 藻 糖 、 N-乙 酰 葡 萄 糖 胺 等 单 糖 。 二 、 糖 蛋 白 寡 糖 链 的 功 能1. 参 与 糖 蛋 白 新 生 肽 链 的 折 叠2. 影 响 寡 聚 蛋 白 质 亚 基 的 构 象3、 参 与 糖 蛋 白 的 转 运 。4、 参 与 糖 蛋 白 的 分 泌5、 增 强 糖 蛋 白 的 稳 定 性6、 参 与 分 子 的 识 别 作 用 定 义 ： 一 条 或 多 条 糖 胺 聚 糖 以 共 价 键 与 核 心 蛋 白 形成 的 化 合 物 。 每 条 糖 链 长 度 平 均 含 80个 单 糖 。糖 占 比 例 大 ， 约 一 半 以 上 ， 具 有 多 糖 性

45、质 。分 布 于 软 骨 、 结 缔 组 织 、 角 膜 基 质 、 关 节滑 液 、 粘 液 、 眼 玻 璃 体 等 组 织 。二 、 蛋 白 聚 糖 概 述 蛋 白 聚 糖 的 结 构 ：组 成 核 心 蛋 白糖 胺 聚 糖 糖 胺糖 醛 酸 葡 萄 糖 胺半 乳 糖 胺葡 萄 糖 醛 酸艾 杜 糖 醛 酸 二 、 核 心 蛋 白1.定 义 与 糖 胺 聚 糖 链 共 价 结 合 的 蛋 白 质 。核 心 蛋 白 均 含 有 相 应 的 糖 胺 聚 糖 取 代 结 构域 ， 一 些 蛋 白 聚 糖 通 过 这 一 结 构 锚 定 在 细胞 表 面 或 细 胞 外 基 质 的 大 分 子 中

46、 。 三 、 蛋 白 聚 糖 的 生 物 合 成在 内 质 网 上 合 成 核 心 蛋 白 多 肽 链 ， 同 时 在 高尔 基 体 内 进 行 糖 链 延 长 或 加 工 。多 糖 链 的 形 成 是 由 单 糖 逐 个 加 上 去 的 ， 糖 醛酸 由 UDPGA提 供 ； 单 糖 要 由 UDP活 化 ； 硫酸 由 PAPS提 供 ； 糖 胺 氨 基 来 自 于 Gln。 四 、 蛋 白 聚 糖 的 功 能1. 构 成 细 胞 间 基 质在 基 质 中 蛋 白 聚 糖 和 弹 性 蛋 白 、 胶 原 蛋 白 以特 殊 方 式 连 接 ， 构 成 基 质 的 特 殊 结 构 。 这 与 细

47、 胞的 粘 附 、 迁 移 、 增 殖 和 分 化 等 有 关 。2. 其 它 功 能抗 凝 血 （ 肝 素 ）参 与 细 胞 识 别 与 分 化 （ 细 胞 表 面 的 硫 酸 素 ）维 持 软 骨 机 械 性 能 （ 硫 酸 软 骨 素 ） 等 第 五 章核 酸 化 学 核 酸 (nucleic acid) ： 是 以 核 苷 酸 为 基 本 组 成 单 位 的 生 物大 分 子 ， 携 带 和 传 递 遗 传 信 息 。 核 酸 的 分 类 及 分 布 ： 90%以 上 分 布 于 细 胞 核 ， 其 余 分 布 于 核 外 如 线 粒 体 ， 叶 绿 体 ， 质 粒 等 。 分 布 于

48、 胞 液 、 胞 核 。(deoxyribonucleic acid, DNA)(ribonucleic acid, RNA)脱 氧 核 糖 核 酸 核 糖 核 酸 携 带 遗 传 信 息 ， 决 定 细 胞 和 个体 的 基 因 型 (genotype)。参 与 细 胞 内 DNA遗 传 信 息 的 表达 。 某 些 病 毒 RNA也 可 作 为 遗传 信 息 的 载 体 。 核酸的化学组成 1. 元 素 组 成C、 H、 O、 N、 P（ 910%）2. 分 子 组 成 碱 基 (base)： 嘌 呤 碱 ， 嘧 啶 碱 戊 糖 (ribose)： 核 糖 ， 脱 氧 核 糖 磷 酸 (p

49、hosphate) 嘌 呤 (purine) N N NH N 1 2345 6789 碱 基 ： 2NH NNN N1腺 嘌 呤 （ A）鸟 嘌 呤 ( G ) NNHN NOH N2 N NH1 32456 嘧 啶 (pyrimidine)胞 嘧 啶 (cytosine, C) N NH NH2 O 尿 嘧 啶 (uracil, U)NH NHO O胸 腺 嘧 啶 (thymine, T) NH NH O O CH3 两 类 核 酸 分 子 组 成 比 较 ：DNA A、 G、 C、 T 脱 氧 核 糖 （ dR） 磷 酸RNA A、 G、 C、 U 核 糖 （ R） 磷 酸碱 基 核 糖

50、 磷 酸 3. 核 苷 酸 的 连 接 核 苷 酸 之 间 以 磷 酸 二 酯 键 连 接 形 成 多 核苷 酸 链 ， 即 核 酸 。 即 不 管 是 DNA或 是 RNA， 其 本 质 都 是 单核 苷 酸 通 过 磷 酸 二 酯 键 连 接 形 成 的 多 核 苷 酸链 。 3 , 5 磷 酸 二 酯 键 ： 概 念 ： 一 个 核 苷 酸 戊 糖 C3 的 游 离 羟 基 与 另 一 个 核 苷 酸 戊 糖 C5 上 的 磷 酸 脱 水 缩 合 生 成 的 化 学 键 。 O NN NH2OOCH2POOHHO H O NN NH2OOCH2POOH OH HO 3， 5 - 磷 酸

51、二 酯 键3 5 5端 3端3. 核 苷 酸 的 连 接 核 苷 酸 之 间 以磷 酸 二 酯 键 连 接 形成 多 核 苷 酸 链 ， 即核 酸 。 CGA 一 、 DNA的 二 级 结 构双 螺 旋 结 构 （ 1953年 ） （ 二 ） DNA双 螺 旋 结 构 模 型 要 点 （ Watson, Crick, 1953）uDNA分 子 由 两 条 相 互 平行 但 走 向 相 反 的 脱 氧 多 核苷 酸 链 组 成 ， 两 链 以 -脱氧 核 糖 -磷 酸 -为 骨 架 ， 以右 手 螺 旋 方 式 绕 同 一 公 共轴 盘 。 螺 旋 直 径 为 2nm，形 成 大 沟 及 小 沟

52、 相 间 。 35 3 5 u碱 基 垂 直 螺 旋 轴 居 双螺 旋 内 側 ， 与 对 側 碱基 形 成 氢 键 配 对 （ 互补 配 对 形 式 ： A=T; GC） 。u相 邻 碱 基 平 面 距 离0.34nm， 螺 旋 一 圈 螺距 3.4nm， 一 圈 10对碱 基 。 35 3 5 （ 二 ） DNA双 螺 旋 结 构 模 型 要 点 （ Watson, Crick, 1953） u氢 键 维 持 双 链 横向 稳 定 性 ， 碱 基堆 积 力 维 持 双 链纵 向 稳 定 性 。（ 二 ） DNA双 螺 旋 结 构 模 型 要 点 （ Watson, Crick, 1953）

53、 DNA双 螺 旋 结 构 要 点 总 结 ：1、 右 双 螺 旋 ， 反 向 平 行2、 碱 基 在 内 ， 主 链 在 外3、 碱 基 互 补 ， A T， GC4、 螺 旋 一 圈 ， 十 对 碱 基5、 结 构 稳 定 ， 副 键 维 系6、 大 沟 小 沟 ， 调 节 关 键 （ 三 ） DNA双 螺 旋 结 构 的 多 样 性DNA的 结 构 会 随 着 溶 液 的 离 子 强 度 或 相 对 湿 度 的 改 变 而 改变 ， 从 而 产 生 多 样 性 。 旋 向 螺 距(nm) 碱 基 数（ 每 圈 ） 螺 旋 直 径（ nm） 骨 架走 行 存 在 条 件A型 右 手 2.3

54、 11 2.5 平 滑 体 外 脱 水B型 右 手 3.4 10 2.3 平 滑 生 理 条 件Z型 左 手 4.5 12 1.8 锯 齿 型 CG序 列 多n 三 种 DNA构 型 的 比 较 ： 二 、 DNA的 高 级 结 构 是 超 螺 旋 结 构超 螺 旋 结 构 (superhelix 或 supercoil)DNA双 螺 旋 链 再 盘 绕 即 形 成 超 螺 旋 结 构 。 正 超 螺 旋 (positive supercoil)盘 绕 方 向 与 DNA双 螺 旋 方 同 相 同 。 变 紧 密 。 负 超 螺 旋 (negative supercoil)盘 绕 方 向 与

55、DNA双 螺 旋 方 向 相 反 。 变 疏 松 。 （ 一 ） 原 核 生 物 DNA的 环 状 超 螺 旋 结 构更 致 密 （ 三 ） DNA在 真 核 生 物 细 胞 核 内 的 组 装存 在 形 式 ：细 胞 周 期 ： 染 色 质细 胞 分 裂 期 ： 染 色 体 基 本 单 位 是 核小 体 （ 串 珠 样 ） （ 三 ） DNA在 真 核 生 物 细 胞 核 内 的 组 装核 小 体 的 组 成 ：DNA： 约 150bp 组 蛋 白 ： H1： 和 60bp的 DNA组 成 连 接 区组 成 核 心 蛋 白H2AH2BH3H4 核 小 体 串 珠 示 意 图 ： 第 三 节

56、RNA的 结 构 与 功 能Structure and Function of RNA RNA和 DNA的 差 别 ：1、 RNA的 碱 基 组 成 主 要 是 A、 G、 C、 U； 而 DNA的 碱 基 组 成 则 是 A、 G、 C、 T。2、 RNA分 子 中 的 戊 糖 是 核 糖 ， 而 DNA的 是 脱 氧 核 糖 。3、 RNA是 单 链 分 子 ， 其 分 子 内 部 只 有 碱 基 互 补 的 地 方 可 以 形 成 局 部 双 链 。 而 DNA一 般 以 双 链 形 式 存 在 。4、 RNA分 子 比 DNA小 得 多 ， 但 种 类 多 。 按 其 在 基 因 表

57、达 中 的 作 用 不 同 ， 可 主 要 分 为 三 大 类 。 RNA的 种 类 、 分 布 、 功 能核 蛋 白 体 RNA信 使 RNA转 运 RNA核 内 不 均 一 RNA核 内 小 RNA胞 浆 小 RNA 细 胞 核 和 胞 液 线 粒 体 功 能rRNAmRNA mtrRNAtRNA mtmRNAmttRNAHnRNASnRNASnoRNAscRNA/7SL-RNA 核 蛋 白 体 组 分蛋 白 质 合 成 模 板转 运 氨 基 酸成 熟 mRNA的 前 体参 与 hnRNA的 剪 接 、 转 运rRNA的 加 工 、 修 饰蛋 白 质 内 质 网 定 位 合 成的 信 号

58、识 别 体 的 组 分核 仁 小 RNA核 蛋 白 体信 使转 运核 内 不 均 一核 内 小胞 浆 小 细 胞 核 和 胞 液 线 粒 体 功 能核 蛋 白 体 组 分蛋 白 质 合 成 模 板转 运 氨 基 酸成 熟 的 前 体参 与 的 剪 接 、 转 运的 加 工 、 修 饰蛋 白 质 内 质 网 定 位 合 成的 信 号 识 别 体 的 组 分核 仁 小 一 、 信 使 RNA的 结 构 与 功 能mRNA是 蛋 白 质 合 成 的 直 接 模 板 。细 胞 内 刚 合 成 的 mRNA初 级 产 物 叫 不 均 一核 RNA（ hnRNA)， 其 在 细 胞 核 内 经 过 剪接

59、成 为 成 熟 的 mRNA。 * mRNA结 构 特 点1. 大 多 数 真 核 mRNA的 5末 端 均 在 转 录 后 加 上 一 个 7-甲基 鸟 苷 ， 同 时 第 一 个 核 苷 酸 的 C2也 是 甲 基 化 ， 形 成帽 子 结 构 ： m7GpppNm-。2. 大 多 数 真 核 mRNA的 3末 端 有 一 个 多 聚 腺 苷 酸 (polyA)结 构 ， 称 为 多 聚 A尾 。5 帽 子 结 构 3 多 聚 A尾 5 非 编 译 区 3 非 编 译 区编 译 区 1、 可 介 导 mRNA由 核 内 向 胞 质 的 转 运2、 维 系 mRNA的 稳 定 性3、 调 控

60、 翻 译 的 起 始 过 程帽 子 结 构 和 多 聚 A尾 的 功 能 ： mRNA的 特 征 归 纳 ： 1、 含 量 最 少 ， 寿 命 最 短 ， 但 种 类 最 多 。 2、 需 由 hnRNA剪 接 才 变 成 熟 。 3、 有 帽 子 和 尾 巴 结 构 。 4、 是 蛋 白 质 合 成 的 直 接 模 板 。 * tRNA的 一 级 结 构 特 点 分 子 量 最 小 的 RNA。含 1020% 稀 有 碱 基 ， 如 DHU 3末 端 为 CCA-OH 具 有 TC 二 、 转 运 RNA的 结 构 与 功 能 I DHU mG几 种 常 见 的 稀 有 碱 基次 黄 嘌 呤

61、 二 氢 尿 嘧 啶 7-甲 基 鸟 嘌 呤假 尿 嘧 啶（ 核 苷 ） * tRNA的 二 级 结 构三 叶 草 形 氨 基 酸 臂 DHU环 反 密 码 环 额 外 环 TC环 氨 基 酸臂额 外 环 * tRNA的 三 级 结 构 倒 L形* tRNA的 功 能活 化 、 搬 运 氨 基酸 到 核 糖 体 ， 参 与 蛋白 质 的 翻 译 。氨 基 酸 臂反 密 码 子 * tRNA的 功 能 特 点 ： tRNA 利 用 其 反 密 码 环 中 的 反 密 码 子 通 过碱 基 互 补 的 方 式 识 别 mRNA上 的 密 码 子 ，进 而 在 3末 端 的 CCA-OH上 连 接

62、上 相应 的 氨 基 酸 并 转 运 到 核 蛋 白 体 进 行 蛋 白 质合 成 。二 、 转 运 RNA的 结 构 与 功 能 * rRNA的 结 构 ：三 、 核 蛋 白 体 RNA的 结 构 与 功 能* rRNA的 功 能参 与 组 成 核 蛋 白体 ， 作 为 蛋 白 质 生 物合 成 的 场 所 。* rRNA含 量 最 多 。 * rRNA的 种 类 （ 根 据 沉 降 系 数 ）真 核 生 物5S rRNA28S rRNA5.8S rRNA18S rRNA 原 核 生 物5S rRNA23S rRNA16S rRNA 核 蛋 白 体 的 组 成 ：原 核 生 物 （ 以 大

63、肠 杆 菌 为 例 ） 真 核 生 物 （ 以 小 鼠 肝 为 例 ）小 亚 基 30S 40SrRNA 16S 1542个 核 苷 酸 18S 1874个 核 苷 酸蛋 白 质 21种 占 总 重 量 的 40% 33种 占 总 重 量 的 50%大 亚 基 50S 60SrRNA 23S5S 2940个 核 苷 酸120个 核 苷 酸 28S5.85S5S 4718个 核 苷 酸160个 核 苷 酸120个 核 苷 酸 蛋 白 质 31种 占 总 重 量 的 30% 49种 占 总 重 量 的 35% 核 酸 的 理 化 性 质The Physical and Chemical Chara

64、cters of Nucleic Acid第 四 节 一 、 紫 外 吸 收结 构 中 共 轭 双 键 的 存 在 ， 使 得 核 酸 对 260nm的 紫 外 光 有 较 强 的 吸 收 。 可 依 此 特 性 对 核 酸进 行 定 量 分 析 。 1. DNA或 RNA的 定 量A260=1.0相 当 于50g/ml双 链 DNA40g/ml单 链 DNA（ 或 RNA）20g/ml寡 核 苷 酸2.判 断 核 酸 样 品 的 纯 度DNA纯 品 : A260/A280 = 1.8RNA纯 品 : A 260/A280 = 2.0 A260的 应 用 ： 二 、 DNA的 变 性 (den

65、aturation)定 义 ： 在 某 些 理 化 因 素 作 用 下 ， DNA双 链 解 开成 两 条 单 链 的 过 程 。方 法 ： 过 量 酸 ， 碱 ， 加 热 ， 变 性 试 剂 如 尿 素 、 酰 胺 以 及 某 些 有 机 溶 剂 如 乙 醇 、 丙 酮 等 。变 性 后 其 它 理 化 性 质 变 化 ：A 260增 高 ， 粘 度 下 降 DNA变 性 的 本 质 是 双 链 间 氢 键 的 断 裂 Tm： DNA变 性 是 在 一 个 相 当 窄 的 温 度 范 围 内 完 成 ， 在 这 一范 围 内 ， 紫 外 光 吸 收 值 达 到 最 大 值 的 50%时 的

66、温 度 称 为DNA的 解 链 温 度 ， 又 称 融 解 温 度 (melting temperature, Tm)。 Tm时，50%的DNA双链被打开。 其 大 小 与 G+C含 量 成 正 比 。 三 、 DNA的 复 性 与 分 子 杂 交 DNA复 性 (renaturation)的 定 义在 去 除 变 性 条 件 后 ， 变 性 DNA的 两 条 互 补链 可 恢 复 天 然 的 双 螺 旋 构 象 ， 这 一 现 象 称 为 复性 。减 色 效 应 ：DNA复 性 时 ， 其 溶 液 A 260降 低 。热 变 性 的 DNA经 缓 慢 冷 却 后 即 可 复 性 ，这 一 过 程 称 为 退 火 (annealing) 。 在 DNA变 性 后 的 复 性 过 程 中 ， 如 果 将 不 同 种 类 的DNA单 链 分 子 或 RNA分 子 放 在 同 一 溶 液 中 ， 只 要 两 种 单链 分 子 之 间 存 在 着 一 定 程 度 的 碱 基 配 对 关 系 ， 在 适 宜 的条 件 （ 温 度 及 离 子 强 度 ） 下 ， 就 可 以 在 不 同 的 分 子