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1、实 验 六细 菌 芽 孢 、 荚 膜 的 染 色 及 观 察 一 、 目 的1、 学 习 并 掌 握 芽 孢 染 色 法 ；2、 初 步 了 解 芽 孢 杆 菌 的 形 态 特 征 ；3、 学 习 并 掌 握 荚 膜 染 色 法 。 二 、 基 本 原 理 芽 孢 染 色 法 的 基 本 原 理 是 ： 用 着 色 力 强 的 染色 剂 在 加 热 条 件 下 染 色 ， 使 染 料 不 仅 进 入 菌 体 也可 进 入 芽 孢 内 ， 进 入 菌 体 的 染 料 经 水 洗 后 被 脱 色 ，而 芽 孢 一 经 着 色 难 以 被 水 洗 脱 ， 当 用 对 比 度 大 的复 染 剂 染 色
2、 后 ， 芽 孢 仍 然 保 留 初 染 剂 的 颜 色 ， 而菌 体 和 芽 孢 囊 被 染 成 复 染 剂 的 颜 色 ， 使 芽 孢 和 菌体 更 易 于 区 分 。 荚 膜 是 包 围 在 细 菌 细 胞 外 的 一 层 粘 液 状 或 胶质 状 物 质 ， 其 成 分 为 多 糖 、 糖 蛋 白 或 多 肽 。 由 于荚 膜 与 染 料 的 亲 和 力 弱 、 不 易 着 色 ； 通 常 用 衬 托染 色 法 染 色 。 使 菌 体 和 背 景 着 色 ， 而 荚 膜 不 着 色 ，在 菌 体 周 围 形 成 一 透 明 圈 。 由 于 荚 膜 含 水 量 高 ，制 片 时 通 常
3、不 用 热 固 定 ， 以 免 变 形 影 响 观 察 。 三 、 器 材1、 菌 种 枯 草 芽 孢 杆 菌 约 2d营 养 琼 脂 斜面 培 养 物 ； 固 氮 菌 约 2d无 氮 培 养 基 琼 脂 斜面 培 养 物 ；2、 染 色 剂 5 孔 雀 绿 水 溶 液 ， 0.5 番红 水 溶 液 ， 绘 图 墨 水 、 95%乙 醇 、 石 炭 酸复 红 染 液 等 ； 3、 仪 器 或 其 他 用 具 木 夹 子 、 显 微 镜 、 酒 精 灯 、 载 玻 片 、 盖 玻 片 、 香 柏 油 、 二 甲 苯 、 擦 镜 纸 等 四 、 操 作 步 骤1、 细 菌 的 芽 孢 染 色 涂
4、片 、 干 燥 、 固 定 孔 雀 绿 水 溶 液染 色 5 7min 水 洗 番 红 水 溶 液染 2min、 水 洗 、 干 燥 、 镜 检 。2、 细 菌 的 荚 膜 染 色 涂 片 自 然 干 燥 1 2滴 95%乙醇 固 定 石 炭 酸 复 红 染 液 染 色 1 2min，水 洗 ， 自 然 干 燥 加 墨 水 ， 涂 层 ， 自 然干 燥 ， 镜 检 。 荚 膜 染 色 的 涂 片 方 法 细 菌 的 芽 孢 五 、 实 验 报 告1、 绘 图 表 示 芽 孢 杆 菌 的 形 态 特 征 （ 注 意 芽 孢 的 形 状 、 着 生 位 置 及 芽 孢 囊 的 形 状 特 征 ） ；2、 绘 图 说 明 你 所 观 察 到 的 细 菌 的 菌 体 和 荚 膜 的 形 态 ；3、 通 过 荚 膜 染 色 法 染 色 后 ， 为 什 么 被 包 在 荚 膜 里 面 的 菌 体 着 色 而 荚 膜 不 着 色 ？ 放 线 菌 的 形 态 观 察 。 霉 菌 的 形 态 观 察 。六 、 预 习
实验细菌的芽孢、荚膜染色
