革兰阳性需氧或兼性厌氧杆菌

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1、革兰阳性需氧或兼性厌氧杆菌 白喉棒状杆菌属棒状杆菌属是引起白喉的病原体主要以外毒素致病 白喉棒状杆菌形态染色革兰阳性细长、棒状杆菌,无芽孢,无荚膜、无芽孢排列不规则胞浆中有易染颗粒(重要形态学特征)异染颗粒染色法: 阿伯脱然色 奈瑟染色 白喉棒状杆菌培养特性需氧或兼性厌氧营养要求高菌落特征 血平板:灰白、狭窄溶血环 鸡蛋斜面和血清斜面:生长迅速,灰白色有光泽菌落 亚碲酸钾血平板:为选择培养基,菌落 呈黑色。菌落分为重型、轻型或中间型 白喉棒状杆菌生化反应和抗原结构生化反应 分解葡萄糖、麦芽糖、果糖等 不分解乳糖、多数不分解蔗糖 靛基质试验、明胶液化、尿素分解抗原构造 K抗原:型特异性抗原,不耐

2、热 O抗原:与分枝杆菌、奴卡菌有共同抗原 白喉棒状杆菌临床意义致病物质:白喉外毒素由携带-棒状杆菌噬菌体的白喉杆菌产生。抑制蛋白质的合成。经呼吸道飞沫感染,引起白喉。假膜脱落阻塞呼吸道是白喉早期死亡的主要原因中毒性心肌炎是白喉晚期死亡的主要原因抗白喉免疫主要依靠白喉抗毒素的中和作用锡克试验用于检测机体有无白喉抗毒素免疫 白喉棒状杆菌检验程序咽拭标本亚碲酸钾 血平板观察菌落特征 直接涂片 革兰染色异染颗粒染色血平板 吕氏血清斜面 直接涂片 革兰染色异染颗粒染色涂片染色镜检 生化反应 毒力试验 白喉棒状杆菌标本采集和检查方法咽拭标本标本直接涂片 革兰染色:观察形态、染色性 异染颗粒染色:观察异染颗

3、粒 初步报告:检出形似白喉棒状杆菌分离培养 吕氏斜面:生长迅速,涂片镜检异染颗粒明显 亚碲酸钾血平板:黑色菌落 白喉棒状杆菌毒力试验意义:是鉴定白喉杆菌为致病菌株的重要依据方法 艾立克平板毒力试验 对流电泳法 协同凝集试验 动物实验 需氧芽孢杆菌属是一大群下枯杨,能产生芽孢的革兰阳性大杆菌。种类: 炭疽芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌 蜡样芽孢杆菌 多粘杆菌等 炭疽芽孢杆菌形态染色革兰阳性粗大杆菌,两端平截,呈竹节状,链状排列可形成荚膜、芽孢,无鞭毛 炭疽芽孢杆菌培养特性需氧或兼性厌氧营养要求不高,普通培养基上生长良好干燥、边缘不整的粗糙型菌落,低倍镜下边缘呈“卷发状”液体培养基中呈絮状生长明胶培养基中

4、呈倒置的杉树有毒株在NaH CO3培养基中形成荚膜,菌落呈粘液状,有拉丝 炭疽芽孢杆菌抗原结构与抵抗力抗原结构:炭疽毒素:由保护性抗原、致死因子、水肿因子组成,具有毒性作用。三种成分单独存在无致病作用。菌体抗原:耐热、耐腐败,能与相应抗体结合发生沉淀反应,用于Ascoli试验抵抗力:本菌芽孢抵抗力强,芽孢对碘和氧化剂敏感耐药性:本菌对青霉素、氨基糖甙类、四环素类、环丙沙星敏感 炭疽芽孢杆菌临床意义致病物质炭疽毒素、荚膜所致疾病经多途径感染,引起炭疽病临床类型:肺炭疽、肠炭疽、皮肤炭疽、败血症属人畜共患传染病,死亡率高 炭疽芽孢杆菌标本采集和处理标本采集病人血液、痰、粪便、渗出液、脑脊液等死亡病

5、畜标本:死亡牲畜严禁宰杀污染物品:皮革、兽毛、土壤等标本处理:无杂菌污染标本直接接种,有杂菌污染标本先加热杀死繁殖体和杂菌再接种 已处理标本直接涂片增菌培养分离培养Ascoli试验革兰染色荚膜染色初步报告血平板戊烷脒琼脂平板可疑菌落菌落涂片染色镜检鉴定试验肉汤培养动物实验动物死亡分离培养 噬菌体裂解串珠试验青霉素抑制试验 炭疽芽孢杆菌检查方法涂片染色镜检革兰染色:涂片后升汞固定;发现革兰阳性粗大杆菌、有荚膜,竹节样排列可初步报告分离培养:污染的标本先加热处理再接种动物试验:注射部位胶样水肿,肝脾肿大,出血等。 炭疽芽孢杆菌鉴定试验青霉素抑制试验:与其他需氧芽孢杆菌鉴别串珠试验:与其他类炭疽芽孢杆菌鉴别青霉素和串珠联合试验噬菌体裂解试验:与类炭疽芽孢杆菌鉴别重碳酸盐毒力试验植物凝集素试验Ascoli试验结果报告:经检验未发现炭疽芽孢杆菌经检验发现炭疽芽孢杆菌 蜡样芽孢杆菌革兰阳性杆菌,短链状排列,有芽孢和鞭毛菌落粗糙呈蜡状,溶血,液体培养基中呈混浊和菌膜生长液化明胶、卵磷酯酶产生两种类型肠毒素,引起食物中毒微检:细菌培养鉴定、活菌计数定量(1336106)

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