小鼠的超数排卵

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1、小 鼠 的 超 数 排 卵 研 究 的 理 论 依 据w 造 成 超 排 效 果 （ 获 卵 率 和 可 用 的 胚 胎 数 ） 不稳 定 的 因 素 主 要 有 两 大 类 ： 一 类 是 动 物 因 素 ，包 括 个 体 和 遗 传 的 差 异 、 生 理 和 营 养 状 态 、开 始 超 排 的 日 期 、 季 节 及 其 它 影 响 动 物 的 环境 因 素 ； 另 一 类 是 药 物 因 素 ， 包 括 激 素 的 半衰 期 、 激 素 制 剂 中 的 FSH LH比 例 、 给 药 途径 、 剂 量 和 频 率 等 。 研 究 的 理 论 依 据w 动 物 的 整 个 生 殖 活

2、动 都 是 受 神 经 、 激 素 控 制 的 。 生 殖 系 统 与神 经 系 统 、 内 分 泌 系 统 之 间 形 成 一 条 中 枢 神 经 、 下 丘 脑 、 垂体 、 性 腺 轴 。 由 于 这 条 轴 的 作 用 ， 使 动 物 的 生 命 活 动 按 照 严格 的 规 律 有 条 不 紊 的 进 行 。 中 枢 神 经 系 统 把 外 界 环 境 刺 激 传到 下 丘 脑 ， 使 之 分 泌 促 性 腺 释 放 激 素 ， 促 性 腺 释 放 激 素 作 用于 垂 体 ， 促 使 垂 体 分 泌 促 性 腺 激 素 ， 促 性 腺 激 素 即 作 用 于 性腺 ， 使 性 腺

3、分 泌 性 腺 激 素 。 垂 体 激 素 可 以 通 过 反 馈 作 用 调 节下 丘 脑 释 放 激 素 的 分 泌 。 同 样 ， 性 腺 激 素 也 可 以 通 过 反 馈 作用 调 节 下 丘 脑 和 垂 体 释 放 相 应 的 激 素 。w 生 殖 激 素 是 指 与 动 物 性 器 官 、 性 细 胞 、 性 行 为 等 的 发 生 和 发育 以 及 发 情 、 排 卵 、 妊 娠 、 分 娩 和 泌 乳 等 生 殖 活 动 有 直 接 关系 的 激 素 。 几 种 对 母 鼠 繁 殖 有 作 用 的 激 素 A类 别 名 称 简 称 来 源 化 学 特 征 生 理 功 能下丘脑

4、部激素 促 性 腺 激素 释 放 激素 GnRH 下 丘 脑 十 肽 促 进 腺 垂 体释 放 促 黄 体素 和 促 卵 泡素催 产 素 OXT 下 丘 脑 合 成 ,神 经 垂 体 释放 九 肽 促 进 子 宫 收 缩 、排 乳 ， 并 具 溶解 黄 体 作 用 几 种 对 母 鼠 繁 殖 有 作 用 的 激 素 B促性腺激素 促 卵 泡 素 GnRH 腺 垂 体 糖 蛋 白 促 使 卵 泡 发 育 和 成 熟 ， 促进 精 子 发 生促 黄 体 素 LH 腺 垂 体 糖 蛋 白 刺 激 排 卵 ， 促 进 黄 体 生 成 ，促 进 雄 激 素 和 孕 激 素 的 分泌促 乳 素 PRL 腺

5、 垂 体 糖 蛋 白 促 进 泌 乳 ， 对 某 些 动 物 刺激 黄 体 功 能 和 孕 酮 的 分 泌 ，增 强 母 性 行 为孕 马 血 清促 性 腺 激素 PMSG 马 属 动 物 尿 囊 绒毛 膜 糖 蛋 白 与 促 卵 泡 素 类 似 ， 促 进 马属 动 物 辅 助 黄 体 的 形 成人 类 绒 毛 膜 促 性 腺激 素 hCG 灵 长 类 胎 盘 绒 毛膜 糖 蛋 白 与 促 黄 体 素 类 似其 它 前 列 腺 素 PG 子 宫 及 其 他 脂 肪 酸 溶 解 黄 体 ， 促 进 子 宫 收 缩 目 前 的 研 究 进 展w 在 目 前 ， 关 于 超 数 排 卵 已 有 一

6、 些 研 究 。 如 杨 文 胜 、 倪 和 民 等 发 现 采 用 相 同 品 种 、 月 龄 和 体 重 的 处 女 母 兔 进 行 超 数 排 卵试 验 , 过 低 或 过 高 剂 量 的 PMSG， 显 着 降 低 母 兔 的 超 排 效 果 ，hCG剂 量 的 提 高 ， 有 助 于 提 高 排 卵 率 ， 获 得 较 多 的 胚 胎 。 而徐 平 对 不 同 品 系 及 日 龄 小 鼠 的 超 排 研 究 发 现 ， 用 PMSG和hCG分 别 对 不 同 日 龄 （ 28日 龄 、 56日 龄 及 112日 龄 ） 的 ICR、B6C3F1及 C57BL/6J三 个 品 系 超

7、排 处 理 后 ， 28日 龄 小 鼠 的 排卵 数 高 于 56日 龄 及 112日 龄 的 排 卵 数 （ P 0.01） 。 而 这 与Yokoyama与 朱 士 恩 研 究 结 果 完 全 相 同 。 在 李 秦 等 研 究 中 ，用 PMSG、 APMSG、 hCG、 LHRH等 对 大 鼠 、 小 鼠 、 豚 鼠 、家 兔 、 绵 羊 、 猪 、 牛 等 的 超 排 作 用 系 统 探 索 后 发 现 ， PMSG和 hCG各 5 10IU可 使 小 鼠 产 生 稳 定 的 超 排 ， 取 卵 数 达50 10个 。 目 前 的 研 究 进 展w 参 考 文 献w 杨 文 胜 倪

8、和 民 等 母 兔 超 数 排 卵 方 法 的 研 究 实 验 动 物科 学 与 管 理 1996. 4 w 徐 平 不 同 日 龄 与 品 系 小 鼠 超 排 卵 、 体 外 受 精 及 受 孕 率 的比 较 研 究 中 国 实 验 动 物 学 杂 志 2001. 6 w 李 秦 等 不 同 激 素 对 哺 乳 动 物 超 数 排 卵 作 用 的 研 究 实 验 动物 科 学 与 管 理 1997.3 实 验 方 法 主 要 实 验 内 容 ： 以 小 鼠 为 研 究 对 象 ， 其 腹 腔 注 射 PMSG hCG、 PMSG hCG或 PG F2比 较 几 组 注 射 后 排卵 的 效

9、果 。 主 要 研 究 方 法 ： 实 验 所 需 要 的 材 料 ： a、 实 验 动 物 ： 清 洁 级 小 白 鼠 30只 b、 实 验 药 品 ： 一 定 量 的 孕 马 血 清 促 性 腺 激 素 （ PMSG） 人 类 绒 毛 膜 促 性 腺 激 素 (hCG) 前 列 腺 素 F2a(PG F2)需 要 产 地 明 确 。 生 理 盐 /水 ，75%乙 醇 、 PBS(自 配 ） 。 实 验 方 法w 主 要 研 究 方 法w c.实 验 器 械 一 次 性 塑 料 培 养 皿 、 显 微 镜 、 灭 菌 手 术 器 械 （ 眼 科 剪 、 眼 科 镊 ） 、 ？ ml无 菌 注

10、 射 器 、 吸 管 等 。w d.实 验 步 骤w 将 小 鼠 分 为 A、 B及 对 照 组 三 组 ， A、 B每 组 6只 ， 对 照 组 8只 ， A组 腹 腔 注射 PMSG + hCG ,B组 腹 腔 注 射 PSMG + PG F2 ， 对 照 组 不 作 任 何 处 理 。这 样 的 注 射 一 般 在 每 天 下 午 四 点 左 右 进 行 。 先 注 射 PMSG（ A、 C组 ） 、FSH（ B组 ） ， 在 44小 时 候 后 注 射 hCG (B组 )和 PG F2（ C组 ） ,在 注 射后 第 二 天 上 午 约 八 点 左 右 将 前 一 天 处 理 过 得

11、小 鼠 处 死 ， 打 开 小 鼠 腹 腔 ，取 出 输 卵 管 及 卵 巢 ， 撕 裂 输 卵 管 壶 腹 部 ， 将 胚 胎 冲 出 ， 在 显 微 镜 下 检 查 胚 胎 、 卵 巢 ， 计 数 、 记 录 。 实 验 方 法 实 验 结 果w 观 察 解 剖 小 鼠 的 卵 巢 （ 包 括 大 小 、 黄 体 数 量 ）和 胚 胎 的 质 量 及 数 量w 对 观 察 结 果 统 计 分 析w 比 较 各 组 观 察 结 果 ， 找 出 超 排 效 果 较 好 的 一组 实 验 讨 论 感 谢w刘 云 海 老 师 的 指 导 和 大 力 帮 助w袁 海 滨 同 学 及 其 他 实 验 室 同 学的 合 作 和 帮 助