促胃肠动力药物筛选

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1、促 胃 肠 动 力 药 物 筛 选离 体 组 织 、 器 官 水 平 药 物 筛 选 1 了 解 离 体 器 官 试 验 特 点 及 注 意 事 项 ， 掌 握 离 体器 官 试 验 的 基 本 技 术 。2 学 习 利 用 离 体 器 官 进 行 药 物 筛 选 的 方 法 ， 观 察受 试 物 对 离 体 胃 、 肠 平 滑 肌 的 影 响 。3 了 解 科 研 课 题 设 计 原 则 ， 科 研 课 题 立 项 需 阐 述的 相 关 内 容 。4 了 解 科 研 论 文 写 作 规 范 （ 包 括 图 表 制 作 技 巧等 ） 。5 掌 握 试 验 数 据 统 计 、 处 理 方 法 。

2、 目 的 离 体 器 官 试 验 常用 的 离 体 器 官 有心 脏 、 血 管 、 肠段 、 子 宫 及 神 经肌 肉 标 本 ， 用 离体 标 本 可 比 较 直观 地 观 测 药 物 的作 用 。 不 同 的 动物 标 本 用 于 测 定不 同 类 的 药 物 作用 。 背 景 知 识 在离体器官法中，不同动物的不同器官都要求最适宜的营养环境，因此各种动物的人工生理溶液成份和配制都有区别。在离体器官研究中应特别引起重视。背 景 知 识渗 透 压 ： 要 等 渗 ， 但 不 同 动 物 对 同 一 物 质 的 等 渗 浓 度 要 求 不 同 。 如 生 理 盐 水 溶 液 ， 冷 血动 物

3、 用 0.6 0.75%； 温 血 动 物 用 0.8% 0.9%。 各 种 离 子 ： 一 定 比 例 的 不 同 电 解 质 离 子 Na+、 K+、 Ca2+、 Mg2+、 H+、 OH-等 是 维 持组 织 器 官 功 能 所 必 须 。 组 织 器 官 不 同 ， 对 生 理 溶 液 中 离 子 的 成 份 和 浓 度 要 求 亦 不 同 。pH影 响 ： 人 工 生 理 盐 水 中 pH一 般 要 求 为 中 性 ， 对 于 哺 乳 动 物 心 脏 冠 状 动 脉 ， 酸 性 生理 深 夜 可 使 平 滑 肌 松 驰 ； 碱 性 则 可 使 节 律 加 快 ， 振 幅 缩 小 。

4、其 它 条 件 ： 葡 萄 糖 提 供 组 织 活 动 所 需 能 量 ， 临 用 时 再 加 入 ， 以 防 变 质 ； 有 的 离 体 器 官 需 要 氧 气 ， 如 离 体 子 宫 、 离 体 兔 心 、 乳 头 肌 等 。 而 离 体 肠 管 通 以 空 气 就 可 以 了 。 世 界 卫 生 组 织 调 查 表 明 ， 我 国 有 80%的 人 患 有 不 同 程 度 胃 肠 病 居 世界 首 位 。 近 年 来 ， 功 能 性 胃 肠 病 已 受 到 广 泛 的 关 注 ， 如 功 能 性 消 化不 良 、 肠 胃 激 综 合 征 、 功 能 性 便 秘 等 ， ， 西 方 国 家

5、 人 群 患 病 率 为5% 24%， 每 年 花 费 高 额 的 医 疗 费 用 ， 患 者 的 生 存 质 量 亦 受 到 不 同 程度 的 影 响 。 在 最 常 见 造 成 工 作 、 学 习 缺 勤 的 疾 病 中 ， 肠 易 激 综 合 征的 发 病 率 仅 次 于 普 通 感 冒 .目 前 主 要 采 用 解 痉 剂 治 疗 ， 但 只 能 缓 解 腹痛 ， 不 能 治 疗 便 秘 。 而 缓 泻 剂 能 缓 解 便 秘 ， 但 不 能 缓 解 腹 痛 、 腹 胀 ，而 且 不 能 长 期 服 用 。 因 此 ， 研 究 开 发 新 的 调 节 胃 肠 动 力 的 药 物 有 重

6、要 的 社 会 效 益 和 广 阔 的 市 场 前 景 。背 景 知 识 背 景 知 识甲 氧 氯 普 胺 第 一 代 第 二 代多 潘 立 酮 它 可 作 用 于 胃 肠 道和 中 枢 神 经 系 统 ，兼 有 促 动 力 和 止 吐的 功 效 。 可 增 加 食 管 下 端 括 约 肌 的 张力 ， 使 其 压 力 增 加 加 强 胃 内 固 体 和 液体 的 排 空 ， 还 可 协调 胃 窦 和 十 二 指 肠运 动 ， 对 肠 道 无 明显 作 用 第 三 代西 沙 比 利 它 对 整 个 胃 肠 道 包 括从 食 管 到 肛 门 括 约 肌均 有 促 动 力 作 用 ， 能增 强 生

7、 理 反 应 ， 恢 复正 常 的 动 力 模 式 。 临 床 常 用 促 动 力 药 中 药百 合 、 乌 药 、帜 实 、 虎 杖 最 突 出 的 特 点 在 于 标本 兼 治 ， 但 作 用 机 制不 明 确 ， 组 方 尚 缺 少现 代 药 理 学 研 究 的 支持 。 通 过 离 体 胃 肠 平滑 肌 试 验 ， 探 讨 药 物作 用 机 制 、 组 方 依 据， 为 新 药 提 供 线 索 。 教 学 试 验 安 排 （ 一 ） 教 学 分 组在 一 个 教 学 单 元 内 ， 根 据 学 生 人 数 ， 将 学 生 分 为 8组 ， 每 组 2 5人 ， 并 分 成 上 下两 班

8、 ， 4组 /班 。 （ 二 ） 试 验 方 案 1 上 半 班 采 用 胃 平 滑 肌 作 为 试 验 材 料 ， 建 议 受 试 物 ： 百 合 、 或 乌 药 、 或 帜 实 、 或 虎杖 、 或 四 药 合 并 的 水 提 取 物 ， 也 可 采 用 各 教 学 单 位 自 行 提 取 的 物 质 ， 用 于 筛 选 。 西 药对 照 ： 胃 复 安 、 西 沙 必 利 。2 下 半 班 采 用 肠 平 滑 肌 作 为 试 验 材 料 ， 建 议 受 试 物 ： 百 合 、 或 乌 药 、 或 帜 实 、 或 虎杖 、 或 四 药 合 并 的 水 提 取 物 ， 也 可 采 用 各 教

9、 学 单 位 自 行 提 取 的 物 质 ， 用 于 筛 选 。 西 药 对 照 ： 胃 复 安 、 西 沙 必 利 。 试 验 方 法 及 步 骤 （ 一 ） 试 验 材 料1 动 物 ： 大 鼠 （ 220 280g/只 ） ， 雄 性 。2 器 材 ： 恒 温 平 滑 肌 槽 1台 、 通 气 泵 1个 、 铁 支 架 1个 、 止 水 夹 2个 ， 生 物 信 号 采集 处 理 系 统 ， 张 力 换 能 器 ， 1ml注 射 器 4个 ， 培 养 皿 1个 ， 50ml烧 杯 1个 ， 组 织 剪 、眼 科 剪 各 1把 ， 止 血 钳 两 个 ， 镊 子 两 个 ， 丝 线 若 干

10、 ， 移 液 器 一 个 ， 砝 码 一 个 。3 试 剂 ： 台 氏 液 。4 受 试 药 ： 0.5%胃 复 安 溶 液 ； 0.1%西 沙 必 利 溶 液 ； 20%百 合 水 提 取 物 ； 10%乌 药 水 提 取 物 ； 15%帜 实 水 提 取 物 ； 15%虎 杖 水 提 取 物 ； 15%四 药 合 并 的 水 提 取物 。 试 验 方 法 及 步 骤 （ 二 ） 试 验 步 骤1 对 大 鼠 离 体 胃 平 滑 肌 正 常 张 力 的 影 响 试 验 。 （ 1） 制 备 胃 肌 条 标 本 ： 断 头 处 死 ， 立 即 剖 取 胃 底 部 浸 泡 于 台 氏 液 液 中

11、 ，制 备 成 “ Z”型 ， 长 约 2.5cm、 宽 约 0.4cm的 胃 肌 条 标 本 。 （ 2） 冲 洗 浴 槽 ， 并 在 其 中 加 入 台 氏 液 30ml（ 标 线 处 ） ， 加 热 ， 维 持 水 温 在 37 38 。 调 节 通 气 泵 ， 缓 慢 通 入 气 泡 ， 并 调 节 1 2个 气 泡 /秒 。 （ 3） 取 标 本 ， 两 端 对 角 处 用 丝 线 结 扎 。 一 端 挂 在 通 气 钩 上 ， 放 入 浴 槽 ， 另 一 端 从 张 力换 能 器 的 弹 簧 片 小 孔 中 穿 出 并 挂 上 1g砝 码 （ 给 予 负 荷 ） ， 打 开 计 算

12、 机 ， 进 入 生 物 信 号采 集 系 统 ， 选 择 “ 张 力 通 道 ” ， 观 察 活 动 曲 线 。 待 其 平 衡 后 ， 用 丝 线 将 挂 砝 码 的 丝 线 牢 牢 固 定 于 弹 簧 片 上 ， 除 去 砝 码 。 （ 4） 待 标 本 在 浴 槽 内 稳 定 10min左 右 ， 记 录 一 段 正 常 活 动 曲 线 ， 然 后 用 注 射 器 依 次 向 浴槽 中 滴 加 药 液 0.2ml。 每 加 一 组 药 时 立 即 标 记 ， 并 观 察 、 记 录 2min频 率 及 收 缩 幅 度 。 每次 药 物 作 用 后 ， 用 温 暖 的 台 氏 液 冲 洗

13、 2 3次 ， 待 张 力 恢 复 基 线 （ 约 5min） 后 再 试 验 其 他药 物 。（ 5） 停 止 记 录 曲 线 ， 保 存 数 据 。 断 电 断 气 ， 取 出 回 肠 ， 冲 洗 浴 槽 。 试 验 方 法 及 步 骤 2 对 大 鼠 离 体 胃 平 滑 肌 正 常 张 力 的 影 响 试 验 。 打 开 腹 腔 ， 找 到 回 盲 部 ， 在 离 其 2 3cm的 回 肠 处 剪 断 ， 取 出 回 肠 ， 置 于 盛 有 台 氏 液 的 培 养 皿 中 ， 沿 肠 壁 分 离 并 剪 去 肠 系 膜 ， 将肠 管 剪 成 数 段 ， 轻 轻 冲 出 肠 内 容 物 ，

14、 最 后 将 肠 管 剪 成 2 3cm的 小 段 备 用 。 加 样 顺 序 与 操作 同 上 。 试 验 结 果 的 原 始 记 录 给 药 前1min内的 平 均 值 给 药 后第 1min内的 平 均 值 给 药 后第 2min内的 平 均 值频 率 振 幅 频 率 振 幅 频 率 振 幅0.5%胃 复 安 溶 液0.1%西 沙 必 利 溶 液 20%百 合 水 提 物10%乌 药 水 提 物 15%帜 实 水 提 物15%虎 杖 水 提 物15%四 药 合 并 水 提 物 表 1 药 物 对 大 鼠 胃 或 肠 平 滑 肌 作 用 测 定 原 始 数 据 结 果 处 理 上 下 班

15、分 别 收 集 4组 试 验 结 果 ， 计 算 平 均 值 及 标 准 差 ， 根 据 拟 研 究 题 目 ，设 计 表 格 ， 并 与 给 药 前 相 比 ， 进 行 统 计 学 差 异 检 验 。 示 范 表 格 如 下 。促 进 率 （ %） =（ 给 药 后 值 -给 药 前 值 ） /给 药 前 值 100% 收 缩 频 率 促 进 率 （ %）1min 2min 1min 2min0.5%胃 复安 溶 液0.1%西 沙 必利 溶 液 20%百 合 水提 物10%乌 药 水提 物15%帜 实 水提 物15%虎 杖 水提 物15%四 药 水提 物 表 2 受 试 物 对 大 鼠 胃

16、或 肠 平 滑 肌 收 缩 频 率 的 影 响 （ SD， n=4） 试 验 报 告 内 容 及 格 式 要 求 （ 一 ） 题 目根 据 你 的 理 解 或 兴 趣 ， 可 将 报 告 题 目 拟 定 为 ：1 “ 胃 复 安 、 西 沙 必 利 对 胃 肠 平 滑 肌 作 用 特 征 比 较 ” 或2 “ 中 药 促 胃 肠 动 力 药 筛 选 及 组 方 依 据 研 究 ” 或3 “ 中 、 西 药 促 胃 肠 动 力 作 用 特 征 研 究 ” 或4 自 定 。（ 二 ） 研 究 背 景 及 意 义根 据 选 择 的 题 目 ， 说 明 研 究 背 景 、 立 题 依 据 、 研 究

17、意 义 。 （ 三 ） 试 验 方 法根 据 选 择 的 题 目 ， 描 述 试 验 方 法 （ 剔 除 不 必 要 的 试 验 方 法 ） 。（ 四 ） 试 验 结 果根 据 选 择 的 题 目 ， 选 择 所 需 的 试 验 数 据 ， 并 进 行 统 计 处 理 ， 以 图 或 表 的 形 式 描 述 结 果 。（ 五 ） 讨 论分 析 结 果 ， 引 用 相 关 文 献 ， 并 进 行 充 分 讨 论 。 注 意 事 项 1 冲 洗 和 分 离 肠 管 时 动 作 应 轻 柔 ， 尽 量 避 免 牵 拉 肠 管 。2 标 本 制 备 好 后 ， 放 在 盛 有 温 暖 台 氏 液 的

18、培 养 皿 中 保 存 ， 以 免 影 响 标 本 的 反 应 性 。 在 整个 操 作 过 程 中 ， 尽 量 使 肠 段 在 温 暖 的 台 氏 液 而 不 是 在 空 气 中 。3 肠 管 两 端 穿 线 时 ， 切 勿 将 肠 管 缝 死 ， 只 需 穿 过 一 层 肠 壁 ， 靠 端 的 位 置 恰 到 好 处 。4 通 气 时 使 气 泡 呈 小 米 粒 大 小 均 匀 上 升 ， 水 泡 不 宜 过 多 或 过 少 。5 将 肠 管 放 入 裕 管 时 ， 注 意 肠 管 和 连 线 都 不 要 触 及 管 壁 ； 在 用 砝 码 标 定 后 ， 调 节 连 线 松紧 度 ， 用

19、 线 系 牢 ， 并 且 线 应 垂 直 桌 面 ， 加 入 的 台 氏 液 要 超 出 肠 管 。6 加 药 时 不 要 把 药 液 直 接 加 到 回 肠 上 ， 以 免 影 响 结 果 ， 最 好 直 接 加 到 台 氏 液 中 。7 换 台 氏 液 时 ， 切 勿 使 用 冰 冷 台 氏 液 。 8 换 液 时 应 按 “ 暂 停 ” ， 以 减 少 对 张 力 换 能 器 的 影 响 。9 在 整 个 过 程 中 不 要 按 “ 停 止 ” ， 以 免 数 据 的 丢 失 。10 原 始 记 录 数 据 表 多 采 用 “ 主 题 表 格 ” ， 报 告 正 文 中 的 表 格 应 采 用 “ 三 线 表 ” 。