临床微生物学检验:11-棒状杆菌属
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1、 棒状杆菌属棒状杆菌属 CoryebacteriumCoryebacterium 是一群革兰阳性杆菌,属放线菌科,主要致病菌为白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌 C.diohtheriaeC.diohtheriae一、临床意义一、临床意义1 1、致病物质:外毒素致病,引起局部炎症、致病物质:外毒素致病,引起局部炎症、全身中毒症状。全身中毒症状。2 2、临床表现:白喉是急性呼吸道传染病,、临床表现:白喉是急性呼吸道传染病,患者的喉部出现灰白色假膜及全身中毒症患者的喉部出现灰白色假膜及全身中毒症状。状。二、生物学特性二、生物学特性1 1、形态结构:为、形态结构:为G G+细长弯曲杆菌,一端细长弯
2、曲杆菌,一端或两端膨大成棒状,无特殊构造,排列或两端膨大成棒状,无特殊构造,排列不规则,呈栅栏状或不规则,呈栅栏状或X X、Y Y、WW等形,有等形,有明显明显异染颗粒异染颗粒(metachromatic granules)metachromatic granules),可用可用AlbertAlbert、NeisserNeisser等染色法清楚可见。等染色法清楚可见。阿伯特(阿伯特(Albert)Albert)染色法:染色法:I I液(甲液)染色液(甲液)染色5min5min,水洗,甩干;,水洗,甩干;II II液(乙液)染色液(乙液)染色1min1min,水洗,甩干;,水洗,甩干;干后镜检:
3、菌体呈草绿色,异染颗粒呈干后镜检:菌体呈草绿色,异染颗粒呈紫褐色。紫褐色。2 2、培养特性:、培养特性:(1 1)血平板:菌落呈灰白色,不透明,)血平板:菌落呈灰白色,不透明,S S型,轻型菌落周围有狭窄的型,轻型菌落周围有狭窄的 溶血环。溶血环。(2 2)吕氏血清斜面或鸡蛋清斜面吕氏血清斜面或鸡蛋清斜面:生长迅:生长迅速,速,812h812h形成灰白细小有光泽的菌落,形成灰白细小有光泽的菌落,且异染颗粒明显。且异染颗粒明显。(3 3)亚蹄酸钾血平板:为本菌)亚蹄酸钾血平板:为本菌选择鉴选择鉴别培养基别培养基,因本菌能吸收碲盐而还原金,因本菌能吸收碲盐而还原金属碲沉积于菌体内,使菌落呈黑色,又
4、属碲沉积于菌体内,使菌落呈黑色,又因不同菌株还原金属碲的能力不同,而因不同菌株还原金属碲的能力不同,而据菌落形态把该菌分为重型、轻型和中据菌落形态把该菌分为重型、轻型和中间型。间型。3 3、生化反应:触酶阳性,分解、生化反应:触酶阳性,分解GSGS、麦芽、麦芽糖、半乳糖、糊精,还原硝酸盐。糖、半乳糖、糊精,还原硝酸盐。4 4、抵抗力:对干燥、寒冷、日光等较其它、抵抗力:对干燥、寒冷、日光等较其它无芽胞菌强,但对湿热和常用消毒剂敏无芽胞菌强,但对湿热和常用消毒剂敏感。感。三、微生物学检验三、微生物学检验1 1、检验程序、检验程序:2 2、标本采集:双份鼻咽拭子或扁桃体分泌、标本采集:双份鼻咽拭子
5、或扁桃体分泌物、假膜边缘。物、假膜边缘。3 3、检验方法与鉴定:、检验方法与鉴定:(1 1)直接检查:直接涂片,分别作革兰染)直接检查:直接涂片,分别作革兰染色和异染颗粒染色。色和异染颗粒染色。(2 2)分离培养:标本接种于)分离培养:标本接种于吕氏血清斜面、吕氏血清斜面、亚蹄酸钾血平板和血平板。亚蹄酸钾血平板和血平板。痰标本,鼻咽分泌物等痰标本,鼻咽分泌物等血琼脂平板呈灰白色菌落,血琼脂平板呈灰白色菌落,亚碲酸钾平板呈黑色亚碲酸钾平板呈黑色革兰染色:革兰染色:G-G-,呈棒状,呈,呈棒状,呈XYXY或栅栏状或栅栏状异染颗粒染色:可见异染颗粒染色:可见毒力试验毒力试验+生化反应生化反应白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌(3 3)鉴定:根据镜下形态,菌落特征即可诊断。)鉴定:根据镜下形态,菌落特征即可诊断。但还需进行毒力试验,以确定细菌的毒性。常但还需进行毒力试验,以确定细菌的毒性。常用的有用的有ELeKELeK平板法,豚鼠毒力试验。注意与类平板法,豚鼠毒力试验。注意与类白喉棒状杆菌相区别。白喉棒状杆菌相区别。思考题思考题 某幼儿园疑有白喉病流行,你应如某幼儿园疑有白喉病流行,你应如何进行微生物学诊断?并采取哪些防何进行微生物学诊断?并采取哪些防治措施?治措施?
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