支衣检测与临床意义.ppt

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1、支 原 体 、 衣 原 体 定 义 支 原 体 :是 一 类 无 细 胞 壁 、 呈 高 度 多 形 态性 ， 能 通 过 滤 菌 器 （ 0.45um） ， 在 人 工培 养 基 上 能 生 长 的 最 小 原 核 微 生 物 。 衣 原 体 ： 是 一 类 能 通 过 滤 菌 器 、 专 性 细胞 内 寄 生 、 有 独 特 生 活 周 期 的 原 核 细 胞型 微 生 物 。 具 有 NDA和 与 革 兰 氏 阴 性 菌类 似 的 细 胞 壁 ， 对 多 种 广 谱 抗 生 素 敏 感 。 支 原 体 、 衣 原 体 分 类 支 原 体 分 类 ： 种 类 繁 多 ， 分 布 广 泛 。

2、 其 对 人 类致 病 的 主 要 有 肺 炎 支 原 体 、 生 殖 道 支 原 体 、 穿透 支 原 体 、 解 脲 脲 原 体 和 人 型 支 原 体 。 1981至 1996年 曾 报 道 发 醇 支 原 体 、 穿 透 支 原体 和 梨 支 原 体 是 HIV的 协 同 因 子 。 衣 原 体 分 类 ： 沙 眼 衣 原 体 、 鹦 鹉 热 衣 原 体 、 肺炎 衣 原 体 和 家 畜 衣 原 体 。 支 原 体 、 衣 原 体 检 测 方 法 学 支 原 体 检 测 方 法 ： 1、 分 离 培 养 法 2、 血 清 学 试 验 （ 抗 体 测 定 ） 3、 PCR（ 只 做 UU

3、） 4、 改 良 肉 汤 稀 释 法 （ 解 脲 脲 原 体 、 人 型支 原 体 ） 优 点 ： 价 格 低 且 可 提 供 药 敏 结果 ， 是 目 前 实 验 室 最 常 用 方 法 。 沙 眼 衣 原 体 检 测 方 法沙 眼 衣 原 体 的 检 测 方 法 ： 分 离 培 养 法 （ 组 织 细 胞 学 是 诊 断 金 标 准 ） 。 聚 合 酶 链 反 应 法 （ PCR） /连 接 酶 链 反 应 法（ LCR） 直 接 免 疫 荧 光 法 （ DFA） 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ ELISA） 血 清 抗 体 检 测 （ 肺 炎 衣 原 体 、 鹦 鹉 热 衣 原 体

4、） 抗 原 快 速 免 疫 层 析 法 （ 快 速 法 ） 目 前 我 实 验 室 沙 眼 衣 原 体检 测 方 法 聚 合 酶 链 反 应 法 （ PCR） 抗 原 快 速 免 疫 层 析 法 （ 快 速 法 ） 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ ELISA： 常 用 方 法 ） 沙 眼 衣 原 体 检 测 方 法 细 胞 培 养 法 优 点 ： 特 异 性 接 近 100%是 沙 眼 衣 原 体 检 测 的 “ 金 标准 ” 。 缺 点 ： 昂 贵 、 费 时 、 要 求 高 ， 用 于 研 究 或 确 认 性 试 验 。 PCR、 LCR法 优 点 ： 敏 感 性 很 高 ， 理 论

5、上 只 要 一 个 原 体 ， 可 通 过 扩增 而 检 测 出 阳 性 ， 也 适 用 于 无 活 性 标 本 。 缺 点 ： 特 异 性 相 对 较 差 ， 尤 其 是 注 意 避 免 外 界 污 染 和殘 留 污 染 ， 实 验 条 件 和 质 量 控 制 有 严 格 要 求 。 沙 眼 衣 原 体 检 测 方 法 直 接 免 疫 荧 光 法 （ DFA） 优 点 ： 快 速 、 价 廉 、 操 作 简 便 。 缺 点 ： 结 果 判 断 受 主 观 因 素 影 响 大 ， 要 求 较 高 ， 在 低感 染 率 人 群 中 敏 感 性 差 。 抗 原 快 速 检 测 法 ： 是 目 前

6、基 层 医 院 最 常 用 沙 眼 衣 原 体检 测 方 法 。 优 点 ： 操 作 简 便 、 快 速 ， 无 需 复 杂 的 仪 器 和 设 备 。 缺 点 ： 标 本 中 需 要 足 够 数 量 的 沙 眼 衣 原 体 抗 原 ， 否 则可 能 出 现 漏 检 ， 敏 感 性 为 3065%， 在 试 验 结 果 阴 性时 ， 不 能 完 全 排 除 感 染 ， 有 可 能 是 沙 眼 衣 原 体 数 量 不足 或 标 本 采 集 不 当 的 缘 故 。 沙 眼 衣 原 体 检 测 方 法 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ ELISA） 优 点 ： 敏 感 性 在 7098%， 特 异

7、 性 97%,可 同 时 检 测 大 批 量 样 本 ， 结 果 判 断 客 观性 强 。 缺 点 ： 不 适 用 于 单 个 样 本 的 测 定 ， 试 验结 果 阴 性 时 ， 有 可 能 是 沙 眼 衣 原 体 数 量不 足 或 标 本 采 集 不 当 的 缘 故 。 支 原 体 、 衣 原 体 检 测 结 果与 临 床 关 系 1、 正 确 采 集 标 本 是 保 证 结 果 准 确 性 的前 提 。 2、 支 原 体 、 衣 原 体 流 行 病 学 与 临 床 症 状 。 3、 支 原 体 、 衣 原 体 的 结 果 解 释 与 临 床 治疗 。 采 集 泌 尿 生 殖 道 标 本

8、正 确 方 法 尿 道 （ 男 性 ） ： 清 洁 尿 道 口 ， 用 男 性 无 菌 棉拭 子 插 入 尿 道 2-4cm， 转 动 3-5秒 轻 轻 旋 转后 取 出 放 置 在 干 燥 试 管 中 送 检 ， 标 本 收 集 前被 检 测 者 至 少 一 小 时 不 排 尿 。 宫 颈 管 （ 女 性 ） ： 清 除 阴 道 及 宫 颈 口 分 泌 物 ，无 菌 拭 子 插 入 宫 颈 管 内 1-2cm， 轻 轻 旋 转 后取 出 ， 不 可 碰 阴 道 壁 。 精 液 、 羊 水 、 前 列 腺 液 ： 由 专 科 医 生 取 样 ，无 菌 洁 净 溶 器 盛 装 送 检 。 采 集

9、 泌 尿 道 生 殖 道 标 本 注意 事 项 因 支 原 体 对 细 胞 表 面 有 很 强 亲 和 力 ， 衣 原 体 又 是一 种 严 格 细 胞 内 寄 生 的 微 生 物 ， 易 感 染 柱 状 上 皮细 胞 ， 应 尽 量 多 采 集 细 胞 ， 所 以 宫 颈 标 本 的 采 集应 在 宫 颈 口 或 移 行 处 进 行 ， 在 患 处 采 用 拭 子 或 刮片 获 取 。 拭 子 进 入 宫 颈 或 尿 道 后 须 停 留 数 秒 并 旋 转 刮 取 上皮 细 胞 后 再 取 出 。 阴 道 及 宫 颈 口 分 泌 物 支 原 体 、 衣 原 体 含 量 低 ， 杂菌 多 ，

10、真 菌 较 多 ， 容 易 污 染 不 可 取 。 脓 性 分 泌 物 由 于 缺 少 感 染 的 上 皮 细 胞 不 适 用 于 此项 检 测 ， 应 该 在 对 患 处 进 行 清 洗 后 采 取 标 本 。 采 集 泌 尿 道 生 殖 道 标 本 注意 事 项 要 与 PCR标 本 区 别 ， 月 经 期 、 先 兆 流 产 妇 女 禁 用 ；阴 道 用 药 或 灌 洗 后 禁 用 。 由 于 抗 原 快 速 检 测 方 法 需 要 抗 原 量 较 大 ， 请 使 用第 一 支 拭 子 采 集 标 本 ， 否 则 可 能 导 致 假 阴 性 结 果 。 尽 量 使 用 绦 棉 或 腈 纶

11、 拭 子 ， 棉 花 中 带 有 抑 制 衣 原体 的 成 分 ， 且 棉 花 吸 水 性 强 ， 使 用 后 标 本 量 往 往达 不 到 试 验 要 求 。 标 本 采 集 后 应 尽 快 送 检 ， 4 放 置 不 宜 超 过 24h， 支 原 体 、 衣 原 体 检 测 结 果与 临 床 关 系 1、 正 确 采 集 标 本 是 保 证 结 果 准 确 性 的 前提 。 2、 支 原 体 、 衣 原 体 的 临 床 症 状 。 3、 支 原 体 、 衣 原 体 的 结 果 解 释 与 临 床 治疗 。 支 原 体 感 染 临 床 症 状 与 传播 方 式 支 原 体 因 种 类 不 同

12、 可 引 起 肺 炎 、 支 气 管炎 、 咽 炎 、 泌 尿 生 殖 道 感 染 、 与 不 孕 不育 、 不 良 妊 娠 等 有 关 。 传 播 方 式 ： 主 要 有 性 接 触 传 播 和 垂 直 传播 ， 性 接 触 是 支 原 体 感 染 和 传 播 的 重 要途 径 。 沙 眼 衣 原 体 感 染 临 床 症 状 男 性 ： 尿 道 炎 、 附 睾 炎 、 直 肠 炎 、 结 膜 炎 。 女 性 ： 宫 颈 炎 、 尿 道 炎 、 子 宫 内 膜 异 位（ 衣 原 体 感 染 女 性 发 生 率 约 为 40%） 、 盆腔 炎 （ 50%由 衣 原 体 引 起 ） 、 宫 外 孕

13、（ 70%以 上 与 衣 原 体 感 染 有 关 ） 、 生 育 能力 下 降 或 不 孕 、 腹 膜 炎 和 结 膜 炎 。 婴 儿 ： 新 生 儿 眼 炎 和 肺 炎 。 沙 眼 衣 原 体 感 染 流 行 病 学 沙 眼 衣 原 体 感 染 是 最 常 见 的 性 传 播 疾 病 在 国 外 ， 沙 眼 衣 原 体 感 染 率 为 10.4% 16.4%。 在 我 国 ， 非 淋 菌 性 尿 道 炎 已 是 感 染 率 最 高 的 性传 播 疾 病 ， 而 沙 眼 衣 原 体 是 非 淋 的 主 要 病 原 体 。 20岁 以 下 的 女 性 是 沙 眼 衣 原 体 感 染 最 高 危

14、的 人群 ， 这 可 能 与 年 轻 女 性 宫 颈 的 解 剖 结 构 有 关 。 口 服 避 孕 药 及 拥 有 多 个 性 伴 也 增 加 感 染 的 风 险 。 沙 眼 衣 原 体 检 测 重 要 性 CT是 我 国 常 见 的 性 传 播 疾 病 ， 其 发 病 率 高 ，流 行 广 泛 ， 已 成 为 较 为 严 重 的 公 共 卫 生 问 题 。 大 部 分 情 况 下 (80%被 感 染 女 性 和 50%被 感 染男 性 ),感 染 衣 原 体 后 都 没 有 明 显 的 临 床 症 状 。 引 发 的 问 题 ： 潜 在 的 感 染 源 不 利 于 及 时 防 治 由其 引

15、 起 的 不 孕 不 育 等 严 重 并 发 症 。 容 易 反 复 感 染 ， 进 而 引 起 严 重 的 宫 外 孕 和 宫 颈癌 ， 可 促 进 HIV和 HPV病 毒 感 染 。 卫 生 部 于 2007年 颁 布 全 国 性 病 监 测 点 监 测方 案 ， 新 增 加 了 生 殖 道 CT感 染 作 为 单 监 测的 病 种 。 支 原 体 、 衣 原 体 检 测 结 果与 临 床 关 系 1、 正 确 采 集 标 本 是 保 证 结 果 准 确 性 的 前提 。 2、 支 原 体 、 衣 原 体 流 行 病 学 与 临 床 症 状 。 3、 支 原 体 、 衣 原 体 的 结 果

16、 解 释 与 临 床治 疗 。 支 原 体 培 养 结 果 的 解 释Uu和 Mh的 检 测 相 对 较 容 易 ， 但 结 果 解 释 应 慎 重 ： 支 原 体 培 养 阳 性 ， 说 明 有 支 原 体 感 染 ， 如 患 者有 临 床 症 状 ， 但 其 他 病 原 体 阴 性 ， 则 应 考 虑 支原 体 引 起 致 病 的 可 能 ， 在 部 份 正 常 人 群 中 可 以存 在 支 原 体 。 正 常 无 菌 部 位 ： 不 成 问 题 ， 血 液 、 输 卵 管 或 子宫 内 膜 来 的 标 本 需 要 治 疗 。 可 能 为 共 生 菌 存 在 的 部 位 ， 定 量 指 标

17、 非 常 有 用 。 支 原 体 定 量 指 标 推 存 值 尿 道 标 本 ： 104ccu/ml Uu 第 1段 尿 、 精 液 ： 103ccu/ml Uu 子 宫 颈 ： 104ccu/ml Mh 衣 原 体 结 果 解 释 生 殖 道 标 本 衣 原 体 结 果 如 为 阳 性 即 可 能感 染 衣 原 体 ， 如 结 果 为 阴 性 ， 不 能 完 全排 除 沙 眼 衣 原 体 感 染 ， 需 结 合 临 床 症 状全 面 考 虑 。 支 原 体 、 衣 原 体 治 疗 支 原 体 生 物 学 特 性 与 用 药 关 系 支 原 体 个 体 微 小 ， 无 细 胞 壁 是 与 细

18、菌 区 别 的 主要 特 点 ， 对 作 用 于 细 胞 壁 的 抗 菌 药 物 不 敏 感 ，天 然 耐 受 所 有 -内 酰 胺 类 、 磺 胺 嘧 啶 、 甲 氧苄 啶 和 利 福 平 。 凡 能 作 用 于 核 蛋 白 体 或 影 响 蛋白 质 合 成 的 物 质 ， 如 大 环 内 酯 类 、 四 环 素 和 氟喹 诺 酮 类 可 破 坏 支 原 体 的 细 胞 膜 ， 使 其 死 亡 。 治 疗 原 则 ： 对 作 用 于 细 胞 壁 的 抗 生 素 不 敏 感 ，对 作 用 膜 蛋 白 、 浆 蛋 白 敏 感 。 2012年 1-2月 支 原 体 药 敏 试 验 耐 药 率抗 生

19、 素 阳 性 株 总 数 耐 药 株 总 数 耐 药 率 （ %） 中 敏 率 （ %） 敏 感 率 （ %）阿 奇 霉 素 355 87 24.51 23.38 52.11红 霉 素 355 148 41.69 23.38 34.93环 丙 沙 星 355 236 66.67 7.63 25.71环 脂 红 霉 素 355 70 19.72 0.56 79.72加 替 沙 星 355 172 48.45 24.51 27.04甲 砜 霉 素 355 84 23.66 33.24 43.10交 沙 霉 素 355 6 1.69 0.00 98.31克 拉 霉 素 355 74 20.90 0.

20、56 78.53 罗 红 霉 素 355 86 24.23 13.24 62.54美 满 霉 素 355 15 4.23 1.97 93.80强 力 霉 素 355 18 5.07 1.69 93.24左 旋 氧 氟 沙 星 355 155 43.66 23.66 32.68 支 原 体 感 染 治 疗 根 据 药 敏 结 果 选 择 敏 感 药 物 进 行 治 疗 ： 首 选 ： 四 环 素 类 如 强 力 霉 素 、 美 满 霉 素 ， 大 环 内 酯 类 如 交 沙 霉 素 。 次 选 ： 克 拉 霉 素 、 阿 奇 霉 素 。 其 他 ： 红 霉 素 类 、 喹 诺 酮 类 。 共 同 敏 感 的 有 四 环 素 、 强 力 霉 素 。 引 起 重 视 ： 免 疫 抑 制 患 者 或 当 -内 酰 胺 药 物 治疗 无 效 时 较 容 易 引 起 支 原 体 感 染 。 衣 原 体 治 疗据 临 床 经 验 及 相 关 报 道 ： 阿 奇 霉 素 是 治 疗 沙 眼 衣 原 体 常 用 方 法 大 环 内 酯 类 药 物 ： 除 阿 奇 霉 素 外 ， 还 有交 沙 霉 素 和 红 霉 素 较 敏 感 。 喹 诺 酮 类 ： 司 帕 沙 星 、 莫 西 沙 星 四 环 素 类 ： 米 诺 环 素