《杂交与倍性育种》PPT课件教学教材

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1、杂交与倍性育种杂交与倍性育种PPTPPT课件课件提要提要n杂交育种是杂交育种是创造新的遗传型创造新的遗传型的育种方式,在林木育种的育种方式,在林木育种中应用较普遍。中应用较普遍。n杂种优势的遗传学理论以杂种优势的遗传学理论以“显性学说显性学说”和和“超显性学超显性学说说”较为认可。较为认可。n杂交方式取决于于育种目标和亲本特性,杂交组合和杂交方式取决于于育种目标和亲本特性,杂交组合和亲本植株的选择影响杂交育种效果。亲本植株的选择影响杂交育种效果。n获得杂交种子仅是杂交育种的开始,还要经过培育、获得杂交种子仅是杂交育种的开始,还要经过培育、鉴定和选择,最后才能选育出优良新品种。鉴定和选择,最后才

2、能选育出优良新品种。n林木林木多倍体多倍体育种在杨树、刺槐、桑树等树种上已取得育种在杨树、刺槐、桑树等树种上已取得成效。成效。n多倍体诱导有体细胞染色体加倍、不同倍性体间杂交、多倍体诱导有体细胞染色体加倍、不同倍性体间杂交、利用天然或人工未减数配子杂交、胚乳培养与细胞融利用天然或人工未减数配子杂交、胚乳培养与细胞融合等途径。合等途径。5.1 5.1 杂种优势杂种优势5.1.1杂交育种的有关概念杂交育种的有关概念n杂交杂交(Hybridization):):不同基因型个体间的交配。(不同树种或同一树种不同种源、家系、不同树种或同一树种不同种源、家系、无性系间的交配无性系间的交配.)n 通过生殖细

3、胞相互融合的过程称为有性杂交有性杂交;体细胞相互融合的过程称为体细胞杂交体细胞杂交n杂种杂种(Hybrid):):杂交产生的后代。n远缘杂交远缘杂交:不同种属间的交配称为远缘远缘杂交杂交,所得个体称远缘杂种远缘杂种。属间、种间、亚种间各体的交配。n近缘杂交近缘杂交:种内小种间、类型间、品种间的杂交。n近交(近交(Inbreeding):):亲缘关系极近的个体间杂交称为近亲交配或近交。例如自交,全同胞个体之间,半同胞个体之间杂交,孤立种群成员之间的杂交。n自交(自交(Selfing):):同一个体或同一无性系的不同个体间交配称为自交。n异交(异交(Outbreeding):):除自交之外的一切交

4、配,不论亲体双方的基因型有无差异都属于异交。n杂交育种(杂交育种(Hybridization breeding):):以基因型不同的个体(种间、品种间、类型间等)进行交配或结合形成杂种,通过培育选择,获得新品种的过程。n杂种优势杂种优势:指两个遗传型不同的亲本杂交所产指两个遗传型不同的亲本杂交所产生的杂种一代在生长势、生活力、繁殖力、生的杂种一代在生长势、生活力、繁殖力、抗逆性、产量和品质等方面比双亲优异的现抗逆性、产量和品质等方面比双亲优异的现象象 5.1.2 杂种优势的遗传学解释1.1.显性假说(显性假说(dominance theorydominance theory)显性假说显性假说认

5、为显性基因(dominant gene)对生长有利或效应较大,隐性基因(recessive gene)对生长有害或效应较弱。杂交使亲本一方的某些有利的显性基因掩盖了另一方不利的隐性基因,从而使杂种获得多于双亲任何一方的显性基因,因而表现出杂种优势。杂种优势来源于等位基因间的显性效应和非等位基因间互作效应的累加作用累加作用。假假如如,两两个个亲亲本本控控制制某某一一数数量量性性状状的的基基因因型型分分别别为为AABBccddAABBccdd和和aabbCCDDaabbCCDD,F F1 1的基因型及表现型图示如下:的基因型及表现型图示如下:P AA BB cc dd aa bb CC DDP A

6、A BB cc dd aa bb CC DD 12 10 4 3 6 5 8 6 12 10 4 3 6 5 8 6 等位基因显性效应值等位基因显性效应值 29 25 29 25 非等位基因累计效应值非等位基因累计效应值 F F1 1 Aa Bb Cc Dd Aa Bb Cc Dd假设完全显性假设完全显性 12+10+8+6=36 12+10+8+6=36 无显性无显性 (12+6+10+5+4+8+3+6)(12+6+10+5+4+8+3+6)2 2=27=27(双亲平均值)(双亲平均值)不完全显性不完全显性 27 F1 3627 F1 362.2.超显性假说超显性假说n超显性假说超显性假说

7、认为:等位基因之间的关系不仅是显隐性关系,而是互作关系。由于等位基因之间产生互作效应互作效应,杂合体Aa比纯合体AA或aa在生长和适应性都有优势。关于超显性产生的原因,有人认为是由于两个等位基因分别产生不同的产物,或控制不同的反应,杂合体(heterozygote)存在两种基因,能同时产生两种产物,或控制两种反应,具有超过双亲的功能。前提是:前提是:等位基因间没有显隐性关系等位基因间没有显隐性关系杂合等位基因相互作用大于纯合等位基因的作用杂合等位基因相互作用大于纯合等位基因的作用同时存在非等位基因之间互作同时存在非等位基因之间互作Aa Aa AAAA或或aaaa,BbBbBBBB或或bbbb

8、P a P a1 1a a1 1b b1 1b b1 1c c1 1c c1 1D D1 1D D1 1 a a2 2a a2 2b b2 2b b2 2c c2 2c c2 2D D2 2D D2 2 (1 1 1 1=41 1 1 1=4)(1 1 1 1=41 1 1 1=4)F F1 1 a a1 1a a2 2b b1 1b b2 2c c1 1c c2 2D D1 1D D2 2 (2 2 2 2=82 2 2 2=8)等位基因的互作效应因不同基因不同性状而差异等位基因的互作效应因不同基因不同性状而差异5.1.25.1.2杂种优势度量方法杂种优势度量方法评价杂种优势的强弱,比较常用

9、的有超中亲值法和超优亲值法两种。1、超中亲值法、超中亲值法:这是以某个性状双亲平均值为标准的计算方法。n2、超优亲值法:、超优亲值法:这是以双亲中最优亲本表型值为标准计算杂种优势度量值的方法。n基因渐渗基因渐渗(Introgression):是指一个种的遗传是指一个种的遗传物质通过杂交与反复回交穿越种间障碍转入到物质通过杂交与反复回交穿越种间障碍转入到另一个物种内的现象另一个物种内的现象,又称渐渗杂交又称渐渗杂交(Introgressive hybridizationIntrogressive hybridization)。)。n渐渗的三个阶段渐渗的三个阶段:即开始形成杂种;杂种和亲即开始形成

10、杂种;杂种和亲本树种的一方或双方进行回交;通过自然选择,本树种的一方或双方进行回交;通过自然选择,有利重组类型出现。有利重组类型出现。n杂种群:由两个种及其杂种与衍生杂种组成的群体5.2.1 天然杂种天然杂种5.2 5.2 天然杂种与人工杂种天然杂种与人工杂种树种种质渐渗示意图树种种质渐渗示意图 南南京京地地区区的的黄黄松松,是是黑黑松松和和马马尾尾松松的的天天然然杂杂种种;高高山山松松是是油油松松与与云云南南松松的的天天然然杂杂种种;黄山松与马尾松也存在基因渐渗。黄山松与马尾松也存在基因渐渗。n渐渗的证实:群体中察觉渐渗,首先要证实两点渐渗的证实:群体中察觉渐渗,首先要证实两点:一一是杂交和

11、回交确已发生;二是和杂交区以外的亲本树是杂交和回交确已发生;二是和杂交区以外的亲本树相比,变异性增加了,而这种变异性的增加是由于杂相比,变异性增加了,而这种变异性的增加是由于杂交,而不是由于强度选择。交,而不是由于强度选择。n天然杂种常出现在两个种的接壤地带天然杂种常出现在两个种的接壤地带和地理紊乱地区和地理紊乱地区如山地或火山地区,如山地或火山地区,这些地区在短距离内环境变化很大,这些地区在短距离内环境变化很大,因此为种的混杂和杂种的建立提供了因此为种的混杂和杂种的建立提供了机会。机会。n在天然群体中判断两个种是不是发生在天然群体中判断两个种是不是发生杂交杂交,往往会有严重失误,判定时最主往

12、往会有严重失误,判定时最主要的是了解要的是了解亲本种的变异范围亲本种的变异范围.n推推定定天天然然杂杂种种的的方方法法已已有有很很多多报报道道。最最基基本本的的方方法法是是AndersonAnderson的的“杂杂种种指指数数”法法,还还有有SmouseSmouse和和Saylar(1973)Saylar(1973)的的规规范范分分析析方方法法以以及及NamkoongNamkoong(19631963)的的复复杂杂的统计分类方法。的统计分类方法。n林林木木中中大大多多数数杂杂种种的的识识别别是是靠靠形形态态和和解解剖剖特特征征;现现在在更更多多利利用用同同工工酶酶标标记记及及分分子标记子标记等

13、。等。1.1.桉树、柳树、杨树桉树、柳树、杨树能迅速利用无性繁能迅速利用无性繁殖推广自然杂种,如欧美杨;殖推广自然杂种,如欧美杨;2.2.作为育种材料中的变异来源;作为育种材料中的变异来源;3.3.在物种的形成与物种进化过程中起了在物种的形成与物种进化过程中起了很重要的作用。很重要的作用。天然杂种在林木改良中的价值:天然杂种在林木改良中的价值:n2000BC,第一次报道枣椰子(Phoenix dactylifera)人工授粉;n我国,宋代,范成大范村梅谱梅花品种杂交;n18世纪,欧洲,观赏植物杂交育种;n20世纪,杂种优势利用。n林木中,杨,柳,松,落叶松,杉,桉,经济林果等。5.2.2 5.

14、2.2 人工杂种人工杂种1.杨属n我国的林木杂交育我国的林木杂交育种是以杨树为起点种是以杨树为起点的。的。n到了到了70年代,全年代,全国已培育出一批速国已培育出一批速生、优质、抗病的生、优质、抗病的杨树新杂种及其优杨树新杂种及其优良无性系,如以钻良无性系,如以钻天杨为亲本之一的天杨为亲本之一的北京杨、群众杨和北京杨、群众杨和合作杨等杨树杂交合作杨等杨树杂交品种。品种。1982年开年开展了以黑杨派杨树展了以黑杨派杨树为中心的杂交育种为中心的杂交育种工作,选育出中林工作,选育出中林46号杨、中林号杨、中林“三三北北”1号杨、南林号杨、南林80121号杨等无性号杨等无性系。系。辽育辽育1号杨(号杨

15、(P.LiaohenicaP.xiaozuanica Anshan)2.桉属桉属n桉属包括桉属包括700余种余种和变种,遗传基础和变种,遗传基础极为广泛,种间杂极为广泛,种间杂交产生杂种优势的交产生杂种优势的潜力巨大。潜力巨大。n我国桉树杂交育种我国桉树杂交育种始于始于60年代,中国年代,中国林业科学研究院热林业科学研究院热带林业研究所于带林业研究所于1985年开展桉属树年开展桉属树种、种源和家系试种、种源和家系试验,引进了验,引进了63个树个树种的种的258个种源和个种源和572个半同胞家系。个半同胞家系。在此基础上,开展在此基础上,开展杂交育种。杂交育种。尾巨桉尾巨桉 3.松属n上世纪20

16、50年代松属杂交研究较热。n我国于上世纪60年代开展松属杂交育种工作。自1961年起,南京林业大学在油松和南方松各派间做了约30个杂交组合。湿地松湿地松加勒比松加勒比松 4.落叶松我国于我国于70年代初开年代初开展了落叶松杂交展了落叶松杂交工作。东北林业工作。东北林业大学、中国科学大学、中国科学院林业土壤研究院林业土壤研究所、和黑龙江林所、和黑龙江林业科学研究院先业科学研究院先后得到了日本落后得到了日本落叶松和兴安落叶叶松和兴安落叶松正反交、日本松正反交、日本落叶松落叶松长白落长白落叶松等杂种。叶松等杂种。日本落叶松日本落叶松n杂种马褂木杂种马褂木是叶培忠教授是叶培忠教授于于1963年首次以鹅

17、掌楸年首次以鹅掌楸属的中国马褂木和北美鹅属的中国马褂木和北美鹅掌楸为亲本育成的种间杂掌楸为亲本育成的种间杂种。种。东方杉东方杉也是叶教授的也是叶教授的作品作品东方东方杉杉-树树木中木中的的“狮狮虎兽虎兽”此外,我国在泡桐、榆、柳、刺槐、鹅掌楸、银杏等树种中作了不少的杂交育种工作。杂种马褂木:杂种马褂木:中国马褂木中国马褂木北美鹅掌楸北美鹅掌楸5.3.1 5.3.1 杂交方式杂交方式1.单交单交:AB 北京杨:(钻天杨青杨)2.回交回交:(AB)B 或(AB)A 3.(毛白杨新疆杨)毛白杨3。复交:复交:三交三交:(AB)C,南林杨:(河北杨毛白杨)响叶杨 双交双交:(AB)(CD)(毛白杨新疆

18、扬)(银白杨灰杨)多父本混合授粉多父本混合授粉:A(B+C+D+)群众杨:小叶杨(钻天杨+旱柳)5.35.3杂交方式与亲本选择杂交方式与亲本选择5.3.2.1 杂交组合的选配原则杂交组合的选配原则n根据育种目标选择亲本;根据育种目标选择亲本;n选择地理起源、生态类型差异较大的种源或亲缘关选择地理起源、生态类型差异较大的种源或亲缘关系较远的系较远的 n优缺点互补;优缺点互补;n地理相距远,地理相距远,生态习性差异大;生态习性差异大;n性状的遗传力大;性状的遗传力大;n亲本配合力高。亲本配合力高。5.3.25.3.2杂交亲本的选择和选配杂交亲本的选择和选配5.3.2.2 5.3.2.2 杂交亲本植

19、株的选择杂交亲本植株的选择1.选择综合性状优良的个体作母本选择综合性状优良的个体作母本;2.树木通直、圆满,尖削度小,树冠完整较窄,树木通直、圆满,尖削度小,树冠完整较窄,枝叶茂盛,生长快,材质优良;分枝角度小,枝叶茂盛,生长快,材质优良;分枝角度小,自然整枝好自然整枝好;3.抗性好,生长健壮,无病虫危害;抗性好,生长健壮,无病虫危害;4.达到正常开花结实年龄;达到正常开花结实年龄;育种性状典型育种性状典型5.对于扦插繁殖的树种,要求亲本植株的插条对于扦插繁殖的树种,要求亲本植株的插条容易生根。容易生根。5.45.4杂交技术杂交技术1.始花树龄始花树龄2.2.花器构造花器构造3.3.单性花:单

20、性花:雌雄同株异花(松树),雌雄雌雄同株异花(松树),雌雄异株(银杏、杨柳树)异株(银杏、杨柳树)4.4.两性花:两性花:雌雄同花(刺槐、榆树)雌雄同花(刺槐、榆树)5.5.3.3.传粉:传粉:虫媒虫媒/风媒,花粉结构,传播距离,风媒,花粉结构,传播距离,主风方向主风方向4.4.受精:受精:自花自花/异花异花5.4.1.开花与生殖习性开花与生殖习性鹅掌楸鹅掌楸思茅松雄花思茅松雄花思茅松雌花思茅松雌花5.4.25.4.2花粉技术花粉技术1.花期调整:光敏,温敏光敏,温敏2.花粉收集:集:适时采粉,适时采粉,合理收集n树上收集树上收集(量多质轻,松树);采集采集花枝收集花枝收集(杨柳榆等)3.花粉

21、贮藏:低温、干燥、黑暗贮藏花粉;n 4.花粉生命力测定花粉生命力测定 (1)直接授粉法)直接授粉法 (2)染色法)染色法 (3)培养基法)培养基法A.杂交前准备。杂交前准备。(1)制订杂交技术:包括育种目标,)制订杂交技术:包括育种目标,亲本选配,杂交任务,操作规程等亲本选配,杂交任务,操作规程等(2)熟悉花器构造和开花习性;)熟悉花器构造和开花习性;(3)准备杂交用具:镊子,授粉器,)准备杂交用具:镊子,授粉器,隔离袋等隔离袋等5.3.4 5.3.4 杂交技术杂交技术(控制授粉技术控制授粉技术)1.1.去雄去雄:防止自交。防止自交。2.2.套袋隔离套袋隔离:3.3.授粉授粉:掌握可授期掌握可

22、授期。4.4.标记:标记:不能混淆;不能混淆;5.5.摘袋:摘袋:透气透水,光照;透气透水,光照;6.6.管理:管理:水肥,病虫害,动物,人。水肥,病虫害,动物,人。B.树上杂交树上杂交(适用于松、杉、落叶松等开花结实过程长的树种)树树上上杂杂交交Now,Top Grafting is done by leaving much foliage from the old ramet to help the new grafts to grow.Promotion of flowering injection GA4/7 control temperature&soil moisturePromo

23、tion flowering in Denmark C.C.室内切枝杂交室内切枝杂交(适用于杨、柳、榆等开花结实过程短的树种)n花枝采集与修剪 n水培和管理n去雄与隔离n授粉n去袋与果实发育期的管理n种子采摘5.65.6克服远缘杂交不亲和性的方法克服远缘杂交不亲和性的方法5.6.1杂交不亲和性(杂交不亲和性(Incompatibility)(1)杂交不亲和性杂交不亲和性:是指亲缘关系较远的物种,在漫长的进化过程中,形成了各种生殖隔离机制。(2)主要表现:父本花粉不能在母本柱头上萌发;花粉管生长缓慢,或花粉管太短,不能到达胚囊;花粉管虽然到达胚囊,但受精不正常;胚停止发育、落果等。5.6.25.

24、6.2克服远源杂交不亲和性的方法克服远源杂交不亲和性的方法n正确选择亲本和杂交组合n桥梁亲本(中介亲本法)n移植父本柱头或喷父本柱头液n特殊授粉方法:蒙导花粉(没有生活力的亲和性花粉)授粉;混合花粉授粉;重复授粉;提前或延迟授粉n预先无性系渐进法:两个不易杂交的树种嫁接,砧木与接穗营养物质互相同化,生理上逐渐接近,然后进行杂交。(1)概念:是指远缘杂交所得种子不能发芽或幼苗夭折,一些杂种虽能成活,但不能开花结实,或虽能开花结实,但配子败育,不能繁衍后代。(2)杂种不育的克服方法n胚培养n杂种染色体加倍n杂种回交2 杂种不育(杂种不育(Sterility)及其克服)及其克服5.7杂种的测定、选择

25、和推广n通过杂交得到杂种种子,这是杂交育种的通过杂交得到杂种种子,这是杂交育种的开开端端,而不是结束;,而不是结束;n杂种种子必须进行一步培育,杂种苗木还要杂种种子必须进行一步培育,杂种苗木还要经过多次的选择淘汰,最后才能实现杂交育经过多次的选择淘汰,最后才能实现杂交育种的目的;种的目的;n杂种杂种F F1 1在培育过程中必须进行在培育过程中必须进行选择选择5.7.15.7.1杂种苗的培育杂种苗的培育 n杂种种子的育苗同常规育苗。n应特别仔细。由于种子数量少,要尽可能获得最多杂种苗。对小粒种子,如杨、柳、泡桐等可在温室盆播,幼苗移至杂种圃;松类可再用营养钵育苗。n要保证培育条件的一致性,以客观

26、评定和选择。n防止混淆,做好挂牌、观测、登记等工作。5.7.25.7.2杂种的测定和选择杂种的测定和选择n插条繁殖为主的树种:杂种苗初选杂种无性系繁殖和测定杂种无性系初选区域造林测定决选优良杂种无性系。n种子繁殖的树种:杂种家系与亲本种子代的对比试验杂种家系和优良杂交亲本组合初选区域化试验决选优良杂种家系和优良杂交亲本组合。意大利的欧美杨育种程序意大利的欧美杨育种程序 5.7.3 杂交品种的繁殖、推广和命名杂交品种的繁殖、推广和命名5.7.3.1杂交品种的繁殖与推广(1)对主要依靠种子繁殖的树种:n利用具有杂种优势的亲本建立杂种种子园;n利用杂种第一代衍生的各种种子:如F1自交或F1与亲本回交

27、获得的种子。(2)对幼龄能无性繁殖的杂种:建立幼龄杂种采穗圃,生产扦插苗,如松、云杉、落叶松等。应用微体繁殖技术(体细胞胚胎发生)生产微繁苗,如辐射松等(3)对于容易无性繁殖的树种:如杨树、桉树等,目前主要用扦插繁殖5.7.3.2 杂种的命名杂种的命名n对自然杂种,常在属名后加杂交符号“”,如 Populus canadensis(加拿大杨)n写出杂交组合,母本在前,父本在后,如 Pinus rigida P.taeda(刚松火炬松)n用品种名称,如 Populus euramericana cv.I-214(欧美杨 I-214)5.8多倍体育种1 1、多倍体育种的意义、多倍体育种的意义(1(

28、1)多倍体的细胞巨大性使林木纤维长度增大,单位材积)多倍体的细胞巨大性使林木纤维长度增大,单位材积的纤维细胞数以及细胞表面积减小,木质素等含量降低。的纤维细胞数以及细胞表面积减小,木质素等含量降低。(3)(3)多倍体植物一般生活力强,对环境适应性亦强,抗旱、抗多倍体植物一般生活力强,对环境适应性亦强,抗旱、抗寒以及抗病虫害等优势明显。寒以及抗病虫害等优势明显。(2)(2)多倍体的基因剂量倍增,从而使植物的一些生理生化过程多倍体的基因剂量倍增,从而使植物的一些生理生化过程加强,新陈代谢旺盛,其体内的某些生化成分的含量也相应加强,新陈代谢旺盛,其体内的某些生化成分的含量也相应提高。提高。如粗蛋白、

29、橡胶以及黄酮等,从而提高经济林木的利如粗蛋白、橡胶以及黄酮等,从而提高经济林木的利用价值,降低生产成本。用价值,降低生产成本。多倍体(多倍体(polyploid)polyploid)是指细胞核含有是指细胞核含有3 3套以上套以上染色体组的个体。染色体组的个体。2 2、多倍体诱导途径、多倍体诱导途径胚乳培养与细胞融合胚乳培养与细胞融合 在大多数被子植物中,一个精核与两个极核融合完成双受精过程,从在大多数被子植物中,一个精核与两个极核融合完成双受精过程,从而产生三倍性的胚乳,因此通过某一树种的胚乳培养也可以获得三倍体植而产生三倍性的胚乳,因此通过某一树种的胚乳培养也可以获得三倍体植株。株。细胞融合

30、能够获得同源或异源多倍体以及双二倍体,可以说是克服植细胞融合能够获得同源或异源多倍体以及双二倍体,可以说是克服植物远缘杂交障碍、创造多倍体的又一条新途径。物远缘杂交障碍、创造多倍体的又一条新途径。未减数配子杂交未减数配子杂交:利用天然:利用天然2n2n花粉直接培育多倍体;人工诱导配子染花粉直接培育多倍体;人工诱导配子染色体加倍是林木多倍体诱导最快捷的途径。色体加倍是林木多倍体诱导最快捷的途径。不同倍性体间杂交不同倍性体间杂交:当一树种中存在可育的不同倍性体时,利用不同当一树种中存在可育的不同倍性体时,利用不同倍性体杂交是获取新的异源或同源多倍体最为简捷而有效的途径。倍性体杂交是获取新的异源或同

31、源多倍体最为简捷而有效的途径。体细胞染色体加倍体细胞染色体加倍:机械损伤、高温和低温、辐射、化学试剂等理化处理:机械损伤、高温和低温、辐射、化学试剂等理化处理方法均可获得体细胞多倍体。方法均可获得体细胞多倍体。3 3、染色体加倍方法、染色体加倍方法化学诱导化学诱导 化学诱导法是指利用生物激素等某些化学试剂处理分裂化学诱导法是指利用生物激素等某些化学试剂处理分裂中的植物器官、组织甚至细胞,从而诱导细胞染色体加中的植物器官、组织甚至细胞,从而诱导细胞染色体加倍的方法。倍的方法。染色体化学加倍选用秋水仙碱、萘嵌戊烷(染色体化学加倍选用秋水仙碱、萘嵌戊烷(C C1212 H H1010)、有、有机杀菌

32、剂富民隆、氧化亚氮机杀菌剂富民隆、氧化亚氮(N(N2 20)0)等也常被使用。等也常被使用。染色体加倍时应根据育种目标选择适宜的染色体加倍时应根据育种目标选择适宜的处理材料处理材料。如果是为了取得如果是为了取得同源偶数倍性体同源偶数倍性体,可选择萌动的种子、幼,可选择萌动的种子、幼苗、茎尖、幼胚、合子及愈伤组织等,其中以合子、幼胚苗、茎尖、幼胚、合子及愈伤组织等,其中以合子、幼胚和刚萌动的种子最佳。和刚萌动的种子最佳。如果是为了取得如果是为了取得奇数倍性体奇数倍性体,则应处理进入减数分裂中的雌,则应处理进入减数分裂中的雌雄花芽,通过染色体加倍处理获得未减数配子,再与正常减雄花芽,通过染色体加倍

33、处理获得未减数配子,再与正常减数配子杂交选育多倍体。数配子杂交选育多倍体。诱导方式:诱导方式:浸浸渍渍法法:用用一一定定浓浓度度的的秋秋水水仙仙碱碱等等化化学学试试剂剂浸浸渍渍萌萌发发的的种种子、幼苗、茎尖、花芽等。子、幼苗、茎尖、花芽等。注注射射法法:用用注注射射器器将将一一定定浓浓度度的的秋秋水水仙仙碱碱等等化化学学溶溶液液直直接接注射到待处理的部位。注射到待处理的部位。涂涂布布法法:将将配配制制好好的的含含一一定定浓浓度度的的秋秋水水仙仙碱碱等等化化学学溶溶液液的的羊毛脂软膏涂抹在生长点上进行处理。羊毛脂软膏涂抹在生长点上进行处理。喷喷雾雾法法:用用喷喷雾雾器器将将配配制制好好的的秋秋水

34、水仙仙碱碱等等化化学学药药剂剂喷喷到到要要处理的分生部位。处理的分生部位。药药剂剂-培培养养基基法法:即即将将待待处处理理材材料料接接种种到到含含一一定定浓浓度度秋秋水水仙仙碱等培养基上进行处理的方法。碱等培养基上进行处理的方法。处理持续时间处理持续时间。因处理的材料、选择的处理方法以及环境温度。因处理的材料、选择的处理方法以及环境温度等而异,一般在等而异,一般在12-48 h12-48 h之间。之间。处理适宜温度处理适宜温度。温度过高和过低均不利于多倍体诱导。一般处。温度过高和过低均不利于多倍体诱导。一般处理温度以理温度以1515一一2020为宜。另外,处理温度与处理的溶液浓度为宜。另外,处

35、理温度与处理的溶液浓度和持续时间密切相关。和持续时间密切相关。试剂的最适浓度试剂的最适浓度。因处理的材料、选择的处理方法以及处理的。因处理的材料、选择的处理方法以及处理的持续时间和环境温度等而异。持续时间和环境温度等而异。在化学诱导染色体加倍过程中需重视如下几个方面:在化学诱导染色体加倍过程中需重视如下几个方面:处理时期处理时期。由于秋水仙碱等化学药剂只影响正在分裂的细胞,。由于秋水仙碱等化学药剂只影响正在分裂的细胞,所以在处理时要了解被处理植物的细胞分裂周期,从而保证在所以在处理时要了解被处理植物的细胞分裂周期,从而保证在细胞分裂有效作用时期之前进行处理。细胞分裂有效作用时期之前进行处理。(

36、2)(2)物理因素诱导物理因素诱导 物理诱导法是指利用温度、射线、机械损伤等物理因物理诱导法是指利用温度、射线、机械损伤等物理因素处理植物材料,诱导细胞染色体加倍的方法。物理诱导素处理植物材料,诱导细胞染色体加倍的方法。物理诱导法对象包括萌动的种子、幼苗以及雌雄花芽等。法对象包括萌动的种子、幼苗以及雌雄花芽等。(3)(3)林木多倍体的鉴定林木多倍体的鉴定 林木等植物材料在施加染色体加倍处理后,是否获得林木等植物材料在施加染色体加倍处理后,是否获得多倍体需经过倍性鉴定。鉴定方式可分为间接与直接鉴定多倍体需经过倍性鉴定。鉴定方式可分为间接与直接鉴定两种,其中直接鉴定最为可靠,即通过体细胞或花粉母细两种,其中直接鉴定最为可靠,即通过体细胞或花粉母细胞染色体压片,检查材料的染色体数目,如果染色体数目胞染色体压片,检查材料的染色体数目,如果染色体数目呈倍数增加,则可以判定获得了多倍体植株。呈倍数增加,则可以判定获得了多倍体植株。结束结束

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