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1、前言抗利尿激素也即血管升压素，是由 9 个氨基酸残基组成的小肽， 它是下丘脑的视上核和室旁核的神经元分泌的一种激素。在相关的领 域也有了很多的研究：（1）心跳呼吸骤停是临床上最危急的情况，必 须争分夺秒进行复苏。经过近50 年的探讨，心肺复苏已基本形成一 套比较完整的体系，但作为复苏一线药物的肾上腺素，其作用效果越 来越受到质疑，国内外学者将血管加压素，尤其是血管加压素联合肾 上腺素应用于心肺复苏，取得了一定的效果；（2）传统治疗等容性或 高容量性低钠血症的方法包括限水、应用高渗盐水及去甲金霉素等, 但均有明显的副作用,导致其临床应用受限。血管加压素受体拮抗剂 （VRAs）主要通过阻断过度产生
2、的（精氨酸加压素）AVP使净水（非溶质 水）排出增加,达到升高血浆渗透压的作用已被美国食品药品管理局采 用；（3）热性惊厥（febrile convulsion, FC是由发热性疾病导致惊厥发 作的一种临床综合征,是儿童时期最常见的一种惊厥性疾病之一,近年 来的研究表明精氨酸加压素在热性惊厥的发生机制中起着重要作用, 可降低热性惊厥的阈值,提高惊厥的易感性,其作用通过 V2 型 AVP 受 体介导,为临床使用 V2 型 AVP 受体拮抗剂防治热性惊厥开辟了新的 领域。所以研究抗利尿激素对机体的生理作用具有重要意义，本实验 主要研究抗利尿激素对家兔排尿量的影响 研究的理论依据是：抗利 尿激素可以
3、提高远曲小管和集合管上皮细胞对水的通透性，从而增加 水的重吸收，使尿液浓缩，尿量减少。实验原理 抗利尿激素能提高远曲小管和集合管对水的通透性，促进水的吸收， 是尿液浓缩和稀释的关键性调节激素。正常动物体内抗利尿激素对尿 量的作用，主要受血浆渗透压的影响，当血浆渗透压升高时，抗利尿 激素分泌增加，使尿量减少。当血浆渗透压升降低时，抗利尿激素分 泌减少，尿量增加。本实验探究抗利尿激素对家兔尿量的影响，采用 膀胱插管法，先将兔固定麻醉，进行器官插管以保证兔的正常呼吸， 再进行膀胱插管将尿液引出，插管的另一端与受滴器连接，并将受滴 器通过输入线与BL-410生物机能实验系统连接，采用BL-410生物机
4、 能实验系统所提供的“影响尿生成的因素”实验模块进行数据的记录 和处理。生成尿量的多少，可用单位时间（lmin）内的尿滴数或数 mol 表示。研究内容用耳缘静脉注射法给家兔注射不同量的抗利尿激素，然后对其排尿量 进行观察和记录。每项实验进行之前，都应等电脑信号窗口中波形稳 定后，再给予药物，连续记录并观察结果，看抗利尿激素量的多少对 尿量的变化的影响，主要探究以下几个问题；抗利尿激素对排尿是促 进还是抑制；对比各项数据，看什么样的注射量具有最佳的抑制排尿 作用；是否随着注射量的增大，兔排尿减慢的速度一直增大。1.记录lmin正常尿量2耳缘静脉注射0.1I.U/mol的抗利尿激素lml,观察尿量
5、的变化3 耳缘静脉注射0.1I.U/m ol的抗利尿激素2ml观察尿量的变化4耳缘静脉注射O.lI.U/mol的抗利尿激素3ml,观察尿量的变化5. 耳缘静脉注射O.lI.U/mol的抗利尿激素5ml,观察尿量的变化预期结果根据已有的抗利尿激素对机体排尿的作用理论，正常兔注射抗利 尿激素后排尿量减少。当给兔注射不同量的抗利尿激素时，可能在一 定范围内，当注射量多时较注射量少时兔的排尿速度减慢更快。据此， 本实验可能有如下结果：1, 家兔正常状态下的排尿速度（单位：滴min）2, 静脉注射0.1I.U/mo的抗利尿激素1ml后，兔排尿较1减慢3, 静脉注射0.1I.U/mo的抗利尿激素2ml后，
6、兔排尿较2减慢，由于给药量的增加减慢的速度较2可能更快,信号波下降较2可能更陡。4静脉注射0.1I.U/mo的抗利尿激素3ml后，兔排尿较3减慢，由于给药量的增加减慢的速度较3可能更快,信号波下降较3更陡。5,静脉注射0.1I.U/mo的抗利尿激素5ml后，兔排尿较4减慢，由于给药量的增加减慢的速度较4可能更快,信号波下降较4更陡。1、家兔称重：将家兔放在秤上,待家兔安静的时候观察体重并记录。2、麻醉 麻醉药用量：取事先配制好浓度的戊巴比妥钠按1ml/kg进行麻醉。 麻醉方法:注射药物时先将家兔固定 拔去注射部位的毛，用酒精棉球涂擦耳缘静脉, 并用手指弹动或轻轻揉擦兔耳, 使静脉充血,用左手食
7、指和中指压住耳根端、拇指和小指夹住耳边缘部、以无名指 放在耳下, 右手持针从静脉末端刺入血管，进针时，针尖坡面朝上、 与耳缘静脉走向保持平行，不可刺穿过深。 注射速度：一定要慢！前2/3剂量可以快些，后1/3剂量要 慢，以保障麻醉的效果和防止兔死亡。 麻醉效果的观察：注射全过程，要密切观察家兔的呼吸等生 命体征，以免注射过快造成家兔死亡。麻醉结束，可见家兔呼吸、心 跳平稳，四肢肌张力松弛，角膜反射消失等症状。3. 器官插管 颈部剪毛：清水洗湿兔毛后，用粗剪刀放平贴近皮肤剪，防 止损伤皮肤。剪毛范围为上至下颌骨、下到锁骨，两侧剪至胸锁乳突 肌。 颈部手术：用止血钳提起颈部正中线皮肤，用粗剪刀剪一
8、道 4-6 厘米的手术切口。止血钳夹住手术切口两侧皮肤，将皮肤向外侧 牵拉，用止血钳钝性分离筋膜、肌层，气管位于颈腹正中位。 插管：用玻璃分针或止血钳游离器官并在其下穿一根结扎线， 提起结扎线，在气管软骨环下方2-3厘米处，做一个倒“T型切口， 把 Y 型管缓慢插入器官，用结扎线将气管插管结扎牢，结扎时打死 结，以防气管脱落。4. 膀胱插管 剪毛：将耻骨联合以上腹部的被毛用清水洗湿后剪去。 手术：在耻骨联合上缘处向上切开皮肤45cm,用止血钳分离 皮肤与腹壁，用手术剪或手术刀沿腹白线切一0.5cm小口，用止血钳 夹住切口边缘并提起。然后向上、向下切开腹壁层组织45cm，寻找 膀胱，用止血钳提起
9、膀胱移至腹外。 插管：分离并结扎输尿管，在膀胱血管较少处做一个荷包缝 合，在缝合中心做一个小缺口，把一根已充满生理盐水的膀胱插管从 小缺口插入，收紧缝合线固定膀胱插管，并接入受滴器的玻管内。手 术完毕后，用生理盐水纱布覆盖腹部创口。5.仪器连接及参数调节 仪器连接：安装好受滴器后，把连接受滴器的输入线插到电 脑BL410生物机能实验系统前面板的记滴输入插口。 参数调节：使用BL-410生物机能实验系统，选择“实验项 目”菜单中的“泌尿实验”菜单项，以弹出“泌尿实验”子菜单。在“泌尿实验” 子菜单中选择“影响尿生成的因素”实验模块。启动 信号采集，观察记录尿滴信号。根据信号窗口中显示的波形，再适
10、当 调节实验参数以获得最佳的实验效果。（供参考参数: 灵敏度: 50;滤波：3或30HZ;直流输入。）6. 注射抗利尿激素并记录数据 采用多次耳缘静脉进针注射给药法：每次需要注射的药品的 量不同，按注射量由低到高的顺序注射，每次用药都要从耳缘静脉进 针注射给药。在实验过程中,尽量从耳缘静脉远心端开始, 逐步向近心 端移行。 需要记录的数据：A正常情况下兔的排尿量B不同剂量的抗利尿激素对排尿量所产生的影响的数据7. 数据的处理和分析根据实际情况和实验效果，必要时按以上实验步骤进行多次重 复实验，以增强实验数据的准确性和可靠性。收集处理实验所得的数 据，分析得出结论，看所得结果是否与理论和预期结果
11、相符，若不相 符，应综合分析问题的原因，提出解决方案。完成该研究已具备条件的条件和工作基础本次实验是在学习完人体解剖生理学及其实验的基础上完成的，在理 论课堂上，我们已经掌握了扎实的专业知识，对尿量的调节已有一定 的了解；在实验课堂上，我们已经熟练掌握了基本仪器的使用原理和 操作方法。因此，在这些基础上，我们设计了此次实验。本次实验主要运用下列仪器和药品；实验对象：家兔（体重1.52.5kg数量3只） 实验场所：人体解剖实验室实验仪器： BL-410 生物技能实验系统，受滴器，兔手术台，哺乳动 物手术器械，活动双凹夹，铁支柱，膀胱插管，气管插管，注射器 纱布实验药品：3%戊巴比妥钠，0.1I.U/mol抗利尿激素，生理盐水，酒精棉球参考文献：1，李学军利尿药和脱水药见：杨宝峰.药理学M.第7版 北京人民卫生出版社, 2008. 235.2,朱大年.生理学M.第7版.北京：人民卫生出版社,2008. 247.3， 陈浩，聂神有，张蔚泌尿系统药药效学研究. 见：丁虹实验药理学M.北京：科学出版社,2008. 232.
不同量的抗利尿激素对家兔尿量的影响
