细胞工程的操作水平和目的

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1、一 、 植 物 细 胞 工 程1 细 胞 工 程 的 操 作 水 平 和 目 的(1)操 作 水 平 ： 。(2)目 的 ： 按 照 人 的 意 愿 来 改 变 细 胞 内 的 或获 得 。细 胞 水 平 或 细 胞 器 水 平 遗 传 物 质细 胞 产 品 2 植 物 组 织 培 养 技 术 的 原 理 、 条 件 及 过 程(1)原 理 ： 。(2)全 能 性 表 达 条 件 ： 具 有 ， 处 于 状 态 ， 提 供 一 定 的 和 其 他 适 宜外 界 条 件 。植 物 细 胞 具 有 全 能 性完 整 的 细 胞 结 构离 体 营 养 、 激 素 (3)过 程 ： 3 植 物 体 细

2、 胞 杂 交 的 程 序 4 植 物 细 胞 工 程 的 应 用(1)植 物 繁 殖 新 途 径 ： 。(2)培 养 作 物 新 品 种 ： 和 的 利 用 。(3)细 胞 产 物 的 工 厂 化 生 产 ： 利 用 技 术 生 产蛋 白 质 、 脂 肪 、 糖 类 、 药 物 、 香 料 和 生 物 碱 等 。微 型 繁 殖 、 作 物 脱 毒 、 人 工 种 子 等单 倍 体 育 种 突 变 体植 物 组 织 培 养 二 、 动 物 细 胞 工 程1 动 物 细 胞 工 程 常 用 的 技 术 手 段常 用 手 段 ： 、 、 动 物细 胞 融 合 、 生 产 等 ， 其 中技 术 是 其

3、 他 动 物 细 胞 工 程 技 术 的 基 础 。动 物 细 胞 培 养 动 物 细 胞 核 移 植单 克 隆 抗 体 动 物 细 胞 培 养 2 动 物 细 胞 培 养 的 过 程 返回科 目 三 考 试 http:/ 科 目 3实 际 道 路 考试 技 巧 、 视 频 教 程科 目 四 考 试 http:/ 科 目 四 模 拟 考 试 题 C1科 目 四 仿 真 考 试 3 动 物 体 细 胞 的 克 隆(1)过 程 ： 动 物 体 细 胞 克 隆 包 括 和 两 个 过 程 。(2)核 移 植 的 原 理 是 。(3)核 移 植 分 类 ： 移 植 和 移 植 。胚 胎 移 植 动 物

4、 细 胞 核 具 有 全 能 性动 物 细 胞 核 移 植胚 胎 细 胞 核 体 细 胞 核 (4)核 移 植 过 程 ： (5)选 用 去 核 卵 (母 )细 胞 的 原 因 ： (6)体 细 胞 核 移 植 技 术 存 在 的 问 题 是 什 么 ？ 。卵 (母 )细 胞 比 较 大 ， 容 易操 作 ， 卵 (母 )细 胞 细 胞 质 多 ， 营 养 丰 富 ， 含 有 促 进 核 全能 性 表 达 的 物 质 。克 隆 动 物 存 在 着 健 康 问 题 ， 表 现 出 遗 传 和 生 理 缺 陷 等 4 动 物 细 胞 融 合 及 单 克 隆 抗 体 制 备(1)原 理 ： 。(2)

5、方 法 ： 物 理 法 (离 心 、 振 动 、 电 激 )、 化 学 法 和 。(3)应 用 ： 单 克 隆 抗 体 ， 过 程 如 下 ：细 胞 膜 的 流 动 性 生 物 法(灭 活 病 毒 ) (4)单 克 隆 抗 体 的 特 点 ： 。特 异 性 强 、 灵 敏 度 高 、 并 可 大 量 制 备 考点一植物的组织培养与植物体细胞杂交考 情解 读 植 物 的 组 织 培 养 与 植 物 体 细 胞 杂 交 在 农 业 生 产中 的 应 用 极 为 广 泛 ， 成 为 新 课 标 高 考 的 热 点 ， 近 几年 在 高 考 试 题 中 的 比 重 逐 渐 提 升 。 考 查 形 式

6、以 简 答题 为 主 ， 常 与 植 物 育 种 等 知 识 结 合 以 图 解 的 形 式 呈现 ， 以 考 查 基 本 概 念 和 获 取 信 息 的 能 力 为 主 。 做 一 题 例 1 下 面 为 “番 茄 马 铃 薯 ”的 培 育 过 程 示 意 图 ， 请 据图 回 答 ： (1)若 运 用 传 统 有 性 杂 交 (即 用 番 茄 、 马 铃 薯 杂 交 )能 否 得到 可 育 的 杂 种 植 株 ？ 为 什 么 ？_。(2)在 利 用 杂 种 细 胞 培 育 杂 种 植 株 的 过 程 中 ， 运 用 的 技 术手 段 是 _， 依 据 的 原 理 是 _， 其 中过 程 称

7、 为 _技 术 ， 与 过 程 密 切 相 关 的 具 有单 层 膜 结 构 的 细 胞 器 为 _， 过 程 相 当 于_， 过 程 涉 及 的 分 裂 方 式 为 _。(3)已 知 番 茄 、 马 铃 薯 分 别 为 四 倍 体 、 二 倍 体 、 则 “番 茄马 铃 薯 ”属 于 _倍 体 植 株 。 (4)随 “神 六 ”太 空 旅 行 的 种 苗 中 ， 最 受 关 注 的 是 柴 油 树 试管 苗 。 柴 油 树 种 子 含 有 的 柴 油 是 植 物 细 胞 的 代 谢 产 物 ，可 用 植 物 组 织 培 养 来 实 现 柴 油 的 工 业 化 生 产 。 若 利 用此 技 术

8、 ， 将 柴 油 树 细 胞 培 养 进 行 到 过 程 _(填字 母 编 号 )即 可 。 解 析 (1)番 茄 和 马 铃 薯 属 于 两 种 植 物 ， 存 在 生 殖 隔 离 ，不 能 通 过 有 性 杂 交 产 生 后 代 。 (2)过 程 是 把 a、 b两 个 原生 质 体 融 合 在 一 起 ， 所 以 称 为 原 生 质 体 融 合 。 过 程 是 在融 合 的 原 生 质 体 外 再 生 一 层 细 胞 壁 ， 而 细 胞 壁 的 形 成 与 高尔 基 体 有 关 。 过 程 的 结 果 是 形 成 了 愈 伤 组 织 ， 所 以 为脱 分 化 。 (3)“番 茄 马 铃

9、薯 ”属 于 异 源 多 倍 体 里 面 的 异 源六 倍 体 。 (4)柴 油 是 植 物 细 胞 的 代 谢 产 物 ， 将 柴 油 树 细 胞培 养 进 行 到 愈 伤 组 织 即 可 。 答 案 (1)不 能 。 不 同 种 的 植 物 存 在 生 殖 隔 离 (2)植 物组 织 培 养 细 胞 全 能 性 原 生 质 体 融 合 高 尔 基 体 脱 分化 有 丝 分 裂 (3)六 (4)e 链 一 串 1 植 物 细 胞 工 程 的 基 本 技 术(1)植 物 组 织 培 养 技 术 ： 原 理 ： 植 物 细 胞 的 全 能 性 ， 即 具 有 某 种 生 物 全 部 遗 传信 息

10、 的 任 何 一 个 细 胞 ， 都 具 有 发 育 成 完 整 个 体 的 潜 能 。 过 程 ： (2)植 物 体 细 胞 杂 交 技 术 ： 概 念 ： 将 不 同 植 物 的体 细 胞 ， 在 一 定 条 件 下融 合 成 杂 种 细 胞 ， 培 育成 新 的 植 物 体 的 技 术 。 过 程 如 右 图 所 示 。 人 工 诱 导 的 方 法 ：a 物 理 法 ： 离 心 、 振 动 、电 刺 激 等 。 b 化 学 法 ： 一 般 用 聚 乙 二 醇 (PEG )作 为 诱 导 剂 诱 导 原 生质 体 融 合 。c 融 合 成 功 的 标 志 ： 杂 种 细 胞 再 生 出 细

11、 胞 壁 。 意 义 ： 克 服 不 同 生 物 远 缘 杂 交 不 亲 和 的 障 碍 。2 植 物 细 胞 工 程 的 应 用(1)植 物 繁 殖 的 新 途 径 ： 微 型 繁 殖 ：a 概 念 ： 用 于 快 速 繁 殖 优 良 品 种 的 植 物 组 织 培 养 法 (2)培 育 作 物 新 品 种 ： 用 植 物 的 花 药 进 行 离 体 培 养 形 成 单 倍体 ， 再 经 人 工 诱 导 染 色 体 加 倍 后 筛 选 出 需 要 的 新 品 种 ；利 用 组 织 培 养 过 程 中 出 现 的 突 变 体 ， 培 育 新 的 品 种 。(3)细 胞 产 物 的 工 厂 化

12、生 产 ： 用 人 工 培 养 的 愈 伤 组 织 提 取 细胞 中 的 某 种 成 分 。 关 键 一 点 细 胞 分 裂 素 与 生 长 素 对 细 胞 分 化 的 影 响使用顺序结果生长素/细胞分裂素比值结果先生长素，后细胞分裂素有利于分裂但不分化比值高促根分化，抑芽形成先细胞分裂素，后生长素细胞既分裂也分化比值低促芽分化，抑根形成同时使用分化频率提高比值适中促进愈伤组织生长 通 一 类 1 (2012盐 城 模 拟 )右 图 是 人 工 种 子 的 结 构 简 图 ， 对 其 叙 述 不 正 确 的 是 ( )A 人 工 种 子 的 胚 乳 中 含 有 胚 状 体 发 育 所 需 要

13、的 营 养 物质 ， 还 可 以 添 加 农 药 和 植 物 激 素B 人 工 种 子 可 以 工 业 化 生 产 ， 播 种 人 工 种 子 可 节 省 大量 粮 食 . C 人 工 种 子 克 服 了 有 些 植 物 品 种 繁 殖 能 力 差 、 结 子 困 难或 发 芽 率 低 等 问 题D 人 工 种 子 的 胚 状 体 还 未 分 化 出 胚 芽 、 胚 轴 和 胚 根 等 结构 解 析 ： 所 谓 人 工 种 子 ， 就 是 以 植 物 组 织 培 养 得 到 的 胚 状体 、 不 定 芽 、 顶 芽 和 腋 芽 等 为 材 料 ， 经 人 工 薄 膜 包 装 得到 的 种 子

14、。 人 工 种 子 在 适 宜 的 条 件 下 同 样 能 够 萌 发 长 成幼 苗 ， 可 见 ， 人 工 种 子 的 胚 状 体 已 经 分 化 出 胚 芽 、 胚 轴 、胚 根 等 结 构 。答 案 ： D 2 “白 菜 甘 蓝 ”是 用 细 胞 工 程 的 方 法 培 育 出 来 的 蔬 菜 新 品种 ， 它 具 有 生 长 周 期 短 、 耐 热 性 强 和 易 于 储 存 等 优 点 。下 图 是 “白 菜 甘 蓝 ”的 杂 交 过 程 示 意 图 ， 请 据 图 回 答 ： (1)在 上 述 方 法 中 ， 除 去 细 胞 壁 的 方 法 是 _。(2)图 中 原 生 质 体 A

15、和 原 生 质 体 B能 融 合 形 成 一 个 杂 种 细 胞 ，所 依 据 的 生 物 学 原 理 是 _。(3)通 常 情 况 下 ， 白 菜 和 甘 蓝 杂 交 是 不 能 成 功 的 ， 原 因 是_。(4)通 过 细 胞 工 程 获 得 的 “白 菜 一 甘 蓝 ”是 否 可 育 ？ 为 什 么 ？_。 解 析 ： (1)植 物 体 细 胞 杂 交 时 先 要 除 去 细 胞 壁 得 到 原 生 质体 。 细 胞 壁 的 主 要 成 分 是 纤 维 素 和 果 胶 ， 因 而 用 纤 维 素酶 和 果 胶 酶 除 去 细 胞 壁 较 为 合 适 。 (2)原 生 质 体 融 合 时

16、 首先 是 细 胞 膜 的 融 合 ， 这 说 明 了 细 胞 膜 具 有 流 动 性 。 (3)自然 状 态 下 ， 白 菜 和 甘 蓝 为 不 同 物 种 ， 存 在 着 生 殖 隔 离 ，所 以 不 能 杂 交 。 (4)通 过 体 细 胞 杂 交 获 得 的 “白 菜 甘 蓝 ”是 可 育 的 ， 因 为 它 的 细 胞 中 存 在 同 源 染 色 体 ， 可 以 通 过减 数 分 裂 产 生 有 性 生 殖 细 胞 ， 再 经 受 精 作 用 形 成 种 子 。 答 案 ： (1)酶 解 法 (用 纤 维 素 酶 、 果 胶 酶 除 去 细 胞 壁 )(2)细 胞 膜 的 流 动 性

17、 (3)存 在 生 殖 隔 离(4)可 育 。 经 减 数 分 裂 可 产 生 有 性 生 殖 细 胞 ， 再 经 受 精 作用 可 形 成 受 精 卵 并 发 育 成 种 子 考点二动物细胞培养与核移植技术考 情解 读 对 本 考 点 的 考 查 主 要 以 简 答 题 的 形 式 呈 现 。 常与 一 些 社 会 热 点 和 科 技 前 沿 知 识 相 联 系 ， 以 相 关 的重 要 成 果 为 背 景 进 行 命 题 ， 考 查 应 用 基 本 原 理 分 析解 决 实 际 问 题 的 能 力 。 预 计 2013年 高 考 中 ， 与 基 因工 程 、 胚 胎 工 程 相 结 合 的

18、 试 题 仍 会 出 现 。 做 一 题 例 2 (2012济 南 调 研 )克 隆 羊 的 成 功 轰 动 世 界 ， 它 不 仅 奠定 了 克 隆 性 治 疗 疾 病 的 基 础 ， 又 解 决 了 器 官 移 植 中 供 体 不足 的 问 题 ， 同 时 也 给 人 类 带 来 了 一 些 过 去 尚 未 遇 到 的 问 题 。下 图 为 人 类 对 克 隆 羊 技 术 的 拓 展 和 应 用 ， 请 据 图 回 答 下 列问 题 ： (1)图 中 所 涉 及 的 现 代 生 物 技 术 有 _和 _等 。(2)下 列 有 关 胚 胎 移 植 的 叙 述 正 确 的 有 _(多 选 )。

19、A 冲 卵 指 的 是 从 子 宫 中 冲 出 胚 胎 ， 而 非 冲 出 卵 子B 只 有 供 、 受 体 生 理 环 境 高 度 一 致 ， 移 入 受 体 的 胚 胎 才能 被 接 受C 供 体 和 受 体 要 进 行 免 疫 检 查 ， 防 止 发 生 免 疫 排 斥 反 应D 不 同 动 物 胚 胎 移 植 的 时 间 不 同 ， 人 的 胚 胎 移 植 最 好 在原 肠 胚 时 期 进 行 (3)图 中 两 个 克 隆 动 物 长 大 后 ， 各 方 面 特 征 与 原 型 动 物 相 同 ，这 说 明 _具 有 全 能 性 。(4)使 用 培 养 基 进 行 胚 胎 干 细 胞

20、培 养 时 ， 通 常 要 加 入 _等 天 然 成 分 ， 除 了 保 证 被 培 养 细 胞 处 于 无 菌 、 无 毒 及 充 足氧 气 的 环 境 中 ， 还 需 要 保 证 细 胞 生 活 所 需 的 适 宜 _。(5)图 中 从 内 细 胞 团 到 胚 胎 干 细 胞 的 培 养 过 程 中 ， 一 般 用_处 理 内 细 胞 团 ， 使 之 分 散 成 单 个 细 胞 。 解 析 经 核 移 植 形 成 的 重 组 细 胞 培 育 成 的 新 个 体 其 性 状与 供 核 方 原 型 动 物 相 同 ， 表 明 细 胞 核 具 全 能 性 ； 进 行 动物 细 胞 培 养 时 ，

21、 培 养 基 中 常 需 添 加 动 物 血 清 ， 且 需 保 证细 胞 生 活 所 需 要 的 适 宜 温 度 和 pH 。 欲 使 动 物 细 胞 分 散 成单 个 细 胞 ， 常 用 胰 蛋 白 酶 处 理 。 答 案 (1)核 移 植 胚 胎 移 植 细 胞 培 养 (任 意 两 个 )(2)AB (3)动 物 体 细 胞 核 (4)血 清 温 度 和 pH (5)胰 蛋 白 酶 链 一 串 1 动 物 细 胞 培 养 和 动 物 体 细 胞 核 移 植项 目 动 物 细 胞 培 养 动 物 体 细 胞 核 移 植原 理 细 胞 增 殖 动 物 细 胞 核 的 全 能 性 项 目 动

22、 物 细 胞 培 养 动 物 体 细 胞 核 移 植过 程 项 目 动 物 细 胞 培 养 动 物 体 细 胞 核 移 植结 果 获 得 细 胞 群 获 得 与 供 体 遗 传 物 质 基 本相 同 的 个 体联 系 动 物 细 胞 培 养 是 体 细 胞 克 隆 的 基 础 2 动 物 细 胞 培 养 需 要 满 足 以 下 条 件(1)无 菌 、 无 毒 的 环 境 ： 培 养 液 应 进 行 无 菌 处 理 。 通 常 还 要在 培 养 液 中 添 加 一 定 量 的 抗 生 素 ， 以 防 培 养 过 程 中 的 污染 。 此 外 ， 应 定 期 更 换 培 养 液 ， 防 止 代 谢

23、 产 物 积 累 对 细胞 自 身 造 成 危 害 。 (2)营 养 ： 合 成 培 养 基 成 分 ： 糖 、 氨 基 酸 、 促 生 长 因 子 、 无机 盐 、 微 量 元 素 等 。 通 常 需 加 入 血 清 、 血 浆 等 天 然 成 分 。(3)温 度 ： 适 宜 温 度 ： 哺 乳 动 物 多 是 36.5 0.5 ； pH ：7.2 7.4。(4)气 体 环 境 ： 95%空 气 5%CO2， 其 中 O2是 细 胞 代 谢 所必 需 的 ， CO 2的 主 要 作 用 是 维 持 培 养 液 的 pH 。 关 键 一 点 (1) 动 物 细 胞 培 养 中 两 次 用 到

24、胰 蛋 白 酶 ， 第 一 次 用 胰 蛋 白 酶 处 理 剪 碎 的 组 织 使 之 分 散 成 单 个 细 胞 ， 第 二 次 使 贴 壁 细 胞 从 瓶 壁 上 脱 落 下 来 。(2) 核 移 植 产 生 的 克 隆 动 物 与 提 供 细 胞 核 的 亲 本 不 同 的 原 因 ： 克 隆 动 物 细 胞 质 基 因 来 源 于 另 一 个 亲 本 ， 所 以 与 植 物 组 织 培 养 不 同 (只 来 自 于 一 个 亲 本 )， 即 克 隆 动 物 遗 传 物 质 来 自 两 个 亲 本 。 在 发 育 过 程 中 可 能 发 生 基 因 突 变 、 染 色 体 变 异 导 致

25、 性状 改 变 。 外 界 环 境 条 件 的 影 响 引 起 不 可 遗 传 的 变 异 。 通 一 类 3 动 物 细 胞 培 养 与 植 物 组 织 培 养 的 重 要 区 别 在 于 ( )A 培 养 基 不 同B 动 物 细 胞 培 养 不 需 要 在 无 菌 条 件 下 进 行C 动 物 细 胞 可 以 传 代 培 养 ， 而 植 物 细 胞 不 能D 动 物 细 胞 能 够 大 量 培 养 ， 而 植 物 细 胞 只 能 培 养 成 植 株 解 析 ： 动 物 细 胞 培 养 的 培 养 基 与 植 物 组 织 培 养 的 培 养 基不 同 ， 动 物 细 胞 一 般 用 液 体

26、 培 养 基 培 养 ， 而 植 物 组 织 培养 一 般 用 固 体 培 养 基 ， 与 植 物 组 织 培 养 的 培 养 基 相 比 ，动 物 细 胞 培 养 的 培 养 基 中 还 要 加 动 物 血 清 等 。 它 们 都 是在 无 菌 条 件 下 进 行 的 。答 案 ： A 4 右 图 是 动 物 细 胞 培 养 的 基 本 过 程 示 意 图 。请 据 图 回 答 ：(1)容 器 A中 放 置 的 是 动 物 器 官 或 组 织 ， 它 一 般 取 自 _。(2)容 器 A中 的 动 物 器 官 或 组 织 首 先 要 进 行 的 处 理 是 _， 然 后 用 _酶 处 理 ，

27、 这 是 为 了 使 细 胞 分 散 开 来 ， 这 样 做 的 目 的 是 _。(3)培 养 首 先 在 B瓶 中 进 行 ， 瓶 中 的 培 养 基 成 分 有_等 。 在 此 瓶 中 培 养 一 段 时 间 后 ， 有 许 多 细 胞 衰 老 死 亡 ， 这时 培 养 到 第 _代 ， 到 这 时 的 培 养 称 为 _。(4)为 了 把 B瓶 中 的 细 胞 分 装 到 C瓶 中 ， 用 _处 理 ，然 后 配 制 成 _， 再 分 装 。(5)在 C瓶 中 正 常 培 养 了 一 段 时 间 后 ， 发 现 细 胞 全 部 死 亡 ，原 因 是 _。 解 析 ： 进 行 动 物 细

28、胞 培 养 时 所 取 材 料 一 般 为 胚 胎 或 幼 龄动 物 的 胚 胎 或 组 织 ， 培 养 过 程 中 需 用 胰 蛋 白 酶 处 理 ， 促使 细 胞 分 散 开 来 ； 用 于 动 物 细 胞 培 养 的 培 养 基 成 分 可 包括 葡 萄 糖 、 氨 基 酸 等 有 机 营 养 、 无 机 盐 、 动 物 血 清 等 。正 常 细 胞 在 分 裂 10次 左 右 时 往 往 停 止 分 裂 并 最 终 死 亡 ，发 生 癌 变 的 细 胞 才 能 保 持 永 久 分 裂 能 力 。 答 案 ： (1)胚 胎 或 幼 龄 动 物 的 器 官 或 组 织 (2)剪 碎 胰 蛋

29、白 使 细 胞 与 培 养 液 充 分 接 触 (3)葡 萄 糖 、 氨 基 酸 、 无机 盐 和 动 物 血 清 10 原 代 培 养 (4)胰 蛋 白 酶 细 胞 悬浮 液 (5)细 胞 没 有 发 生 癌 变 考点三动物细胞融合与单克隆抗体的制备考 情解 读 单 克 隆 抗 体 的 制 备 在 近 几 年 新 课 标 高 考 中考 查 较 多 ， 一 般 起 点 较 高 ， 而 落 点 较 低 。 预 计2013年 命 题 角 度 主 要 注 重 于 细 胞 融 合 及 单 克 隆抗 体 在 医 学 实 践 中 的 应 用 。 做 一 题 例 3 人 绒 毛 膜 促 性 腺 激 素 (H

30、 CG )是 女 性 怀 孕 后 胎 盘 滋 养层 细 胞 分 泌 的 一 种 糖 蛋 白 ， 制 备 抗 H CG 单 克 隆 抗 体 可 用 于早 孕 的 诊 断 。 下 图 是 抗 H CG 单 克 隆 抗 体 制 备 流 程 示 意 图 ，请 分 析 回 答 下 列 问 题 ： (1)制 备 单 克 隆 抗 体 过 程 中 要 用 到 _和 _技 术 。(2)制 备 单 克 隆 抗 体 过 程 中 ， 给 小 鼠 注 射 的 H CG 相 当 于_， 使 小 鼠 产 生 能 分 泌 相 应 _的 淋 巴 细 胞 ，此 过 程 属 于 特 异 性 免 疫 中 的 _免 疫 。(3)在 细

31、 胞 内 DNA合 成 一 般 有 两 条 途 径 ， 主 要 途 径 是 在 细 胞内 由 糖 和 氨 基 酸 合 成 核 苷 酸 ， 进 而 合 成 DNA， 而 氨 基 喋呤 可 以 阻 断 此 途 径 。 另 一 辅 助 途 径 是 在 次 黄 嘌 呤 和 胸 腺嘧 啶 核 苷 存 在 的 情 况 下 ， 经 酶 催 化 作 用 合 成 DNA， 而 骨髓 瘤 细 胞 的 DNA合 成 没 有 此 辅 助 途 径 。 利 用 DNA合 成 途 径 不 同 的 特 点 配 制 的 H AT培 养 基 含 有多 种 成 分 ， 其 中 添 加 的 _成 分 具 有 筛 选 杂 交 瘤 细胞

32、 的 作 用 。 最 终 筛 选 获 得 的 杂 交 瘤 细 胞 的 特 点 是_。(4)此 过 程 生 产 的 单 克 隆 抗 体 可 以 与_特 异 性 结 合 ， 从 而 诊 断 早 孕 。 解 析 ： 制 备 单 克 隆 抗 体 要 用 到 动 物 细 胞 培 养 和 动 物 细 胞 融合 技 术 。 给 小 鼠 注 射 的 H CG 相 当 于 抗 原 ， 小 鼠 经 过 体 液 免疫 从 而 产 生 分 泌 相 应 抗 体 的 B淋 巴 细 胞 。 在 培 养 基 中 加 入氨 基 喋 呤 可 阻 断 细 胞 内 由 糖 和 氨 基 酸 合 成 核 苷 酸 进 而 合 成DNA的

33、过 程 ， 从 而 抑 制 DNA通 过 此 途 径 进 行 复 制 ， 因 此用 此 种 培 养 基 进 行 筛 选 时 ， 培 养 基 中 的 骨 髓 瘤 细 胞 的 DNA复 制 过 程 被 阻 断 ， 不 能 生 长 ， 而 受 抗 原 刺 激 后 的 淋 巴 细 胞也 不 能 增 殖 ， 则 筛 选 出 来 的 就 都 是 杂 交 瘤 细 胞 。 答 案 (1)动 物 细 胞 培 养 动 物 细 胞 融 合 (2)抗 原 抗 体 体 液 (3) 氨 基 喋 呤 能 无 限 增 殖 并 分 泌 特 异 性 抗 体(必 须 答 全 ) (4)人 绒 毛 膜 促 性 腺 激 素 (或 H

34、CG ) 链 一 串 1 植 物 体 细 胞 杂 交 和 动 物 细 胞 融 合 的 比 较植 物 体 细 胞 杂 交 动 物 细 胞 融 合细 胞 融合 原 理 细 胞 膜 的 流 动 性 、 植 物细 胞 的 全 能 性 细 胞 膜 的 流 动 性细 胞 融合 方 法 用 纤 维 素 酶 、 果 胶 酶 去除 细 胞 壁 后 诱 导 原 生 质体 融 合 用 胰 蛋 白 酶 或 胶 原 蛋白 酶 使 细 胞 分 散 后 ，诱 导 细 胞 融 合 植 物 体 细 胞 杂 交 动 物 细 胞 融 合诱 导手 段 离 心 、 电 刺 激 、 振 动 、显 微 操 作 、 聚 乙 二 醇 等诱 导

35、 与 植 物 体 细 胞 杂 交 相 比 ，还 可 用 灭 活 的 病 毒 诱 导结 果 获 得 杂 种 植 株 获 得 杂 种 细 胞 ， 以 生 产 细胞 产 品用 途 克 服 远 缘 杂 交 不 亲 和 的障 碍 ， 扩 展 杂 交 亲 本 范围 ， 培 育 新 品 种 制 备 单 克 隆 抗 体 、 病 毒 疫苗 、 干 扰 素 等 植 物 体 细 胞 杂交 动 物 细 胞 融 合相 同 点 两 者 在 融 合 过 程 中 都 会 发 生 多 种 融 合 方 式 ，如 AA， BB， AB， 因 此 要 进 行 筛 选 两 者 都 要 用 到 细 胞 融 合 和 细 胞 培 养 两 种

36、 技 术手 段 2 细 胞 融 合 两 次 筛 选 的 目 的 及 方 法(1)在 特 定 的 选 择 性 培 养 基 上 ， 未 融 合 的 亲 本 细 胞 (B淋 巴 细 胞和 骨 髓 瘤 细 胞 )和 融 合 的 具 有 同 种 核 的 细 胞 (BB融 合 细 胞 、瘤 瘤 融 合 细 胞 )都 会 死 亡 ， 只 有 融 合 的 杂 种 细 胞 (杂 交 瘤 细胞 )才 能 生 长 。 这 种 杂 种 细 胞 的 特 点 是 既 能 迅 速 大 量 繁 殖 ，又 能 产 生 单 一 的 特 异 性 抗 体 。(2)经 选 择 性 培 养 的 杂 交 瘤 细 胞 并 非 都 是 能 分

37、 泌 所 需 抗 体 的 细胞 (很 多 种 杂 交 瘤 细 胞 )， 需 经 克 隆 化 培 养 和 抗 体 检 测 ， 经多 次 筛 选 后 可 获 得 足 够 数 量 的 能 分 泌 所 需 抗 体 的 细 胞 。 关 键 一 点 抗 体 是 由 B淋 巴 细 胞 分 泌 的 ， 每 一 种 B淋巴 细 胞 只 能 分 泌 一 种 特 异 性 抗 体 ， 要 想 得 到 大 量 的 单一 抗 体 ， 必 须 将 同 一 种 B淋 巴 细 胞 大 量 克 隆 ， 但 在 体外 培 养 的 条 件 下 ， 一 个 B淋 巴 细 胞 不 能 无 限 增 殖 ， 而骨 髓 瘤 细 胞 可 以 在

38、 体 外 无 限 增 殖 ， 因 此 ， 通 过 细 胞 融合 可 得 到 既 能 分 泌 特 异 性 抗 体 、 又 能 无 限 增 殖 的 杂 交瘤 细 胞 。 A 表 示 B淋 巴 细 胞 和 骨 髓 瘤 细 胞 均 是 从 小 鼠 的 脾 脏中 提 取 的B 中 的 筛 选 是 通 过 抗 原 、 抗 体 反 应 进 行 的C 促 进 细 胞 融 合 的 过 程 可 以 利 用 聚 乙 二 醇 作 介 导D 可 以 无 限 增 殖 6 (2012广 州 模 拟 )根 据 单 克 隆 抗 体 制 备 流 程 示 意 图 判 断以 下 选 项 中 正 确 的 是 ( ) 解 析 ： A项 不 能 体 现 细 胞 的 全 能 性 ； B项 中 选 择 培 养 基是 按 用 途 划 分 的 ； D项 中 融 合 的 细 胞 的 细 胞 质 中 也 含有 DNA分 子 。答 案 ： C