柠檬中总酸度及Vc含量的测定

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1、柠檬中总酸度及Vc含量的测定(1)一、实验目的1. 学习定量维生素C的原理和方法2. 掌握微量滴定技术3. 学会直接法配制标准溶液的方法。4. 学会使用分析天平称取试样。5. 练习容量瓶、移液管、滴定管的操作方法。二、实验原理 1. 用硼砂标定酸溶液的反应： 化学计量点时的pH=5.27, 可选甲基红作批示剂。 2. 硼砂标准溶液浓度计算：硼砂标准液浓度：0.38 /（382*0.25）= 0.00398（0.00399） M 3.维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺乏时会产生坏血病，因此，又称为抗坏血酸。它对物质代谢的调节具有重要的作用，近年来发现它还能增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有对

2、化学致癌物的阻断作用。4维生素C是具有L-系糖构型的不饱和多羟基化合物，属于水溶性维生素。它分布很广，植物的绿色部分及许多水果（桔类、草莓、山楂、辣椒等）的含量都很丰富。5.维生素C具有很强的还原性，在碱性溶液中加热并有氧化剂存在时，维生素C易被氧化而破坏。在中性和微酸性环境中，维生素C能将染料2，6二氯酚靛酚还原成无色的还原型的2，6二氯酚靛酚，同时将维生素C氧化成脱氢维生素C。氧化型的2，6二氯酚靛酚在酸性溶液中呈现红色，在中性或碱性溶液中呈兰色。当用2，6二氯酚靛酚滴定含有维生素C的酸性溶液时，在维生素C尚未全被氧化时，滴下的2，6二氯酚靛酚立即被还原成无色。但当溶液中的维生素C刚好全部

3、被氧化时，滴下的2，6二氯酚靛酚立即时溶液呈红色。所以，当溶液由无色变为微红色时即表示溶液中的维生素C刚好全部被氧化，此时即为滴定终点，从滴定时2，6二氯酚靛酚溶液的消耗量，可以计算出被检物质中还原型维生素C的含量。其化学反应式如下：三、仪器、试剂 （一）仪器：万分之一分析天平，25ml酸碱滴定管各1支，20ml移液管1支，10ml量筒1支，表面皿1个，250ml锥形瓶2只，250ml容量瓶2只，250ml烧杯，洗耳球1只，玻璃棒1根，移液管架1个，药匙1个，滴定台。天平、容量瓶（100ml）、量筒、移液管、锥形瓶（50ml）、酸式滴定管、漏斗（二）材料、试剂1、柠檬2、1%草酸溶液1g草酸溶

4、于100ml蒸馏水中3、2%草酸溶液2g草酸溶于100ml蒸馏水中4、标准维生素C溶液准确称取20mg纯维生素C 粉状结晶于1%草酸溶液中，稀释至100ml，再取其中10ml稀释至100ml，即得0.02mg/ml的维生素C溶液。在使用前临时配制。5、0.02%2，6二氯酚靛酚溶液溶解50mg2，6二氯酚靛酚于约200ml含有52mg的NaHCO3的热水中，冷后稀释至250ml，过滤，装于棕色瓶中。 6.硼砂（分析纯，摩尔质量381.37或382），甲基红指示剂（0.1%：0.1g 甲基红 20ml 乙醇 80ml蒸馏水 混合100ml 不够补乙醇至100ml）四、实验步骤（一）试样处理： 取

5、柠檬，需去皮、去柄、去核，切成块状，置于搅拌机中捣碎混匀并过滤。准确移取25ml柠檬汁，加100mL无CO2的蒸馏水，稀释定容为250ml溶液。然后倒入烧杯中在7580水浴上加热30分钟。冷却后倒入容量瓶中备用。（二） 硼砂标准溶液的配制取一个洁净且干燥的表面皿，在分析天平上用直接称量法称取硼砂(Na2B4O710H2O : 十水合四硼酸钠)基准物0.3800g (1.9000g，称准至0.1mg)，转移至洁净的250ml烧杯中，从洗瓶中挤出少量蒸馏水冲洗表面皿3次，洗液一并转入烧杯，加入蒸馏水至约100ml，搅拌溶解（浓度大的要加热）。将溶液全部转入洁净的250mL容量瓶中定容。计算硼砂标准

6、溶液的浓度（0.00398或0.0199M）。（三）酸度的标定取洁净的25mL碱式滴定管一支，用少量硼砂标准溶液淌洗3次。准确移取待测溶液20.00mL于250mL洁净的锥形瓶中，加入甲基红指示剂2滴，用硼酸溶液滴定，至溶液颜色由黄色转变为橙色，即为滴定终点。记录所消耗硼砂的体积，平行滴定3-4次。计算柠檬溶液的总酸度。（四）2，6二氯酚靛酚溶液的标定：取5ml维生素C标准液及5ml1%草酸溶液于50ml的锥形瓶中，用配制好的2，6二氯酚靛酚溶液于微量滴定管中滴定至粉红色出现，并保持15s不褪色，即滴定终点。此时所用染料的体积相当于0.1mg维生素C，由此求出每ml2，6-二氯靛酚溶液相当于维

7、生素C的mg数（五）取柠檬，需去皮、去柄、去核，切成块状，置于搅拌机中捣碎并混均，过滤，准确移取25ml柠檬汁于250ml容量瓶，用1草酸稀释至刻度，充分摇匀。（六）用移液管吸取滤液5或10ml于50ml的锥形瓶中，立即用标定过的2，6二氯酚靛酚溶液滴定，直至溶液呈浅粉红色15s不褪色为止。记录所用染料的ml数。为了避免其它物质的干扰，滴定过程不得超过2min。（此步骤平行作23次）（一） 计算维生素C含量（mg/100g样品）=（VT/W）100式中：V为滴定样品所耗用的染料的平均ml数 T为1ml染料相当于维生素C的mg数W为滴定时所用样品稀释液中含样品的g数五、数据记录与处理1、总酸度的

8、测定硼砂的质量M/g1.9154硼砂浓度C/(mol/l)0.02009V初读数/ml V终读数/mlV/ml0.0117.8817.870.1018.0017.900.0917.9717.88CH+（mol/L）0.035900.035960.03592平均CH+（mol/L）0.03593绝对偏差di0.000030.000030.00001相对平均偏差Rd(%)0.12、柠檬中Vc含量的测定测点次数V初读数/ml V终读数/mlV/ml0131171041.212.241.032.243.271.03V初读数/ml V终读数/mlV/ml3.333.710.383.714.090.384

9、.094.460.37平均体积/ml0.38维生素C含量（mg/100ml）=（VT/W）10036.6436.8936.89平均维生素C含量（mg/100ml）36.81绝对偏差di0.170.080.08相对平均偏差Rd(%)0.3六、注意事项1.整个滴定过程要迅速，防止还原型的维生素C被氧化。滴定过程一般不超过2min。滴定所用的染料不应少于1ml或多于4ml，若滴定结果不在此范围，则必须增减样品量或将提取液稀释；2.本实验必须在酸性条件下进行，在此条件下，干扰物反应进行很慢； 3.提取液中尚含有其它还原性的物质，均可与2，6二氯酚靛酚反应，但反应速度均较维生素C慢，因而，滴定开始时，染

10、料要迅速加入，而后尽可能一滴一滴地加入，并要不断地摇动锥形瓶直至呈粉红色15s不褪色为终点；4.若提取液中色素很多时，滴定不易看出颜色变化，需脱色，可用白陶土、30%Zn（AC）2和15%K4Fe（CN）6溶液等，本实验用30%Zn（AC）2和15%K4Fe（CN）6溶液脱色，若色素不多，可不脱色，直接滴定。5.在生物组织和组织提取液中，维生素C还能以脱氢维生素C及结合维生素C的形式存在，它们同样具有维生素C的生理作用，但不能将2，6二氯酚靛酚还原脱色.6. 2%草酸有抑制抗坏血酸酶的作用，而1%的草酸无此作用七、数据分析与总结此次有7同学参与该实验研究，我们将7同学分成2组，一组4人，一组3

11、人，第1组是做硼砂准溶液的配制和柠檬总酸度的标定和维素C的定量测定2，6-二氯酚靛酚滴定法，第2组是做NaOH标准溶液的标定柠檬中总酸度的测定和碘量法。结果如下： 第1组的结果：总酸度的平均值为0.03593mol/L ，相对平均偏差为0.1%；Vc的平均含量为36.81mg/100mol，相对平均偏差为0.3%。第2组的结果：总酸度的平均值为0.02580mol/L ，相对平均偏差为0.004%；Vc的平均含量为26.63mg/100mol，相对平均偏差为0.2%。比较两个实验的误差大小来说明哪个更实验方法更适合测定。由于第2 组的相对平均偏差较小，所以该方法适合于柠檬中总酸度及Vc含量的测定。八、心得体会在经历了三个星期的实验，我会了很多东西，虽然以前也做了很多同类实验，但都是照课本上实验并未像此次以小组形式自行设计实验方案。刚开始时有点慌张，不过到后面我们就静下心来认真完成实验。实验过程中有些出错，如维生素C含量额测定时柠檬汁不需加热，小组为准备充足将其加热，在滴定时导致浓度偏低，经过老师的指导我们改进了实验，同时在实验过程中学会思考遇到的问题的解决的方法，最后在其他成员的协同帮助下我们成功的完成了实验。