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1、 干 片 技 术 VITROS MicroSlide (干 片 )技 术 介 绍 三 种 干 片 定 义 干 片 分 层 , 功 能 , 和 测 量 技 术 叙 述 VITRO S 干 片 在 操 作 中 与 常 规 方 法 相比 的 优 势 1970 年 ： 化 学 干 片 技 术 起 源 于 1970年 的 伊 斯 特 曼 -柯 达 公 司 1971年 ： 借 鉴 普 通 临 床 生 化 反 应 序 列 生 产 出 葡 萄糖 分 析 干 片 1976年 ： 干 片 获 得 专 利 1978年 ： 推 出 专 利 的 干 片 生 化 技 术 1980年 ： FDA批 准 五 个 分 析 产
2、品 可 以 进 入 市 场 1995年 ： 推 出 一 些 免 疫 产 品干 片 的 历 史 干 片 分 类比 色 /速 率 法 干 片 电 极 法 干 片 免 疫 -速 率 法 干 片 比 色 /速 率 法 干 片 通 过 测 定 干 片 颜 色 变 化 来 确 定 化 合 物 浓 度 终 点 法 、 双 波 长 测 定 法 ， 固 定 时 间 法 、 速 率 法 终 点 法应 用 终 点 法 进 行 测 试 的 项 目白 蛋 白 干 片 （ ALB） 血 氨 干 片 （ AMON)钙 离 子 干 片 （ Ca) 胆 固 醇 干 片 （ CHOL)葡 萄 糖 干 片 （ GLU) 高 密 度
3、 脂 蛋 白 胆 固 醇 干 （ HDLC)镁 离 子 干 片 （ Mg) 磷 离 子 干 片 （ PHOS)总 蛋 白 干 片 （ TP) 甘 油 三 酯 干 片 （ TRIG)尿 素 氮 干 片 （ BUN/UREA) 尿 酸 干 片 （ URIC) 双 波 长 测 定 法应 用 双 波 长 测 定 法 进 行 测 试 的 项 目总 胆 红 素 （ TBIL)消 除 可 形 成 的 光 谱 干 扰非 结 合 胆 红 素 和 结 合 胆 红 素 （ BUBC)摩 尔 吸 收 值 相 近 两 不 同 波 长 处 的 读 数 可 以 用来 确 定 BU和 BC的 浓 度 固 定 时 间 法 （
4、两 点 法 ）应 用 固 定 时 间 法 进 行 测 试 的 项 目淀 粉 酶 干 片 （ AMYL) 脂 肪 酶 干 片 （ LIPA)肌 酐 干 片 （ CREA)铁 离 子 干 片 （ FE)茶 碱 干 片 （ THEO) 速 率 法 （ 多 点 法 ）应 用 速 率 法 进 行 测 试 的 项 目谷 丙 转 氨 酶 干 片 （ ALT) 碱 性 磷 酸 酶 干 片 （ ALKP)谷 草 转 氨 酶 干 片 （ AST) 肌 酸 激 酶 干 片 （ CK)肌 酸 激 酶 同 工 酶 干 片 （ CK-MB) 谷 氨 酰 转 肽 酶 干 片 （ GGT)乳 酸 脱 氢 酶 干 片 （ LD
5、H) 胆 碱 酯 酶 干 片 （ CHE) 均 匀 分 布 标 本 过 滤 大 分 子 标 本 预 处 理 提 供 反 射 测 定 的 背 景 试 剂 层试 剂 层 包 含 干 性 试 剂 多 层 试 剂 ， 控 制 反 应 顺 序 指 示 剂 层指 示 剂 层包 含 染 料 以 产 生 显 色 复 合 物驱 使 反 应 完 成 支 持 层 提 供 反 应 支 持 基 垫 允 许 光 路 自 由 通 过 均 匀 分 布 标 本均 匀 分 布 标 本 均 匀 分 布 标 本标 本 进 入 扩 散 层 均 匀 分 布 标 本均 匀 分 布 标 本标 本 迅 速 向 四 周 扩 散 均 匀 分 布
6、标 本均 匀 分 布 标 本标 本 均 匀 向 下 层 渗 透 均 匀 分 布 标 本均 匀 分 布 标 本标 本 与 试 剂 反 应 均 匀 分 布 标 本均 匀 分 布 标 本反 应 物 在 指 示 剂 层 被 固 定 反 射 光 的 测 定反 射 光 的 测 定 干 扰 物 质反 光 背 景指 示 剂 层生 成 纯 净 的 反 射 光光 源 滤 光 片接 收 器 低 浓 度 高 浓 度 湿 化 学 ：n 采 用 透 射 光 度 法n 遵 循 朗 勃 比 尔 定 律干 化 学 ：n 采 用 反 射 光 度 法n 遵 循 Williams Clapper定 律 吸 光 度 浓 度反 射 光
7、浓 度 透 射 与 反 射透 射 与 反 射 检 测 检 测光 线 经 过 干 扰 物 质受 影 响 光 线 不 经 过 干 扰 物 质不 受 影 响 湿 化 学 ：n 仪 器 相 对 开 放 ， 试 剂 选 购 方 便 , 但 是 质 量 控 制 是 隐 患n 由 使 用 者 监 控 仪 器 状 态 和 结 果 的 可 信 度n 频 繁 的 日 常 仪 器 校 验 ， 繁 琐 且 工 作 量 大干 化 学 ：n 仪 器 相 对 封 闭 ， 采 用 固 定 的 试 剂 及 耗 材 来 保 证 结 果n 长 期 稳 定 的 定 标 曲 线 ， 大 大 减 少 了 日 常 工 作 量 电 极 法
8、干 片离 子 选 择 电 极 技 术 直 接 法 测 定 两 电 极 间 电 势 不 同 K、 Na、 Cl I SEI 干 片 结 构干 片 结 构 Electrometer 干 片 在 接 触 点 被 穿 透测 量 电 压 读 数通 过 电 压 读 数 计 算 出 分 析物 的 浓 度 测 量 技 术 盐 桥S2 S1 S3 S4aI ar离 子 载 体 膜M+ ClAgCl Ag 离 子 载 体 膜M+ ClAgClAgaI arVV干 片常 规 已 知 浓 度 液 体 (参 比 液 ) 待 测 液 体 (标 本 )离 子 选 择 电 极 (I SE)盐 桥 r VI TROS干 化 学
9、 检 测 电 解 质 与 常 规 方 法 比 较常 规 法 （ 间 接 法 ） 干 片 法 （ 直 接 法 ）电 极 与 电 极 膜 重 复 使 用 稳 定 性 差 独 立 电 极 / 测 试单 一 采 样 针 、 进 样 通 道 交 叉 污 染 一 次 性 Ti p头大 量 蠕 动 泵 、 电 磁 阀 维 修 保 养 复 杂 无 众 多 管 道 、 多 种 液 体 易 腐 蚀 、 老 化 无 管 道 频 繁 定 标 与 冲 洗 保 养 耗 时 、 不 环 保 定 标 周 期 长 、 环 保电 解 质 排 斥 效 应 有 没 有 I SE间 接 法 电 解 质 排 斥 效 应 标 本 10微
10、升 ， 非 水 相 5 ， 水 相 9. 5微 升 稀 释 100倍 ， 加 入 稀 释 液 990微 升 ， 水 相 999. 5微 升 实 际 稀 释 倍 数 999. 5 9. 5 105. 211 如 果 标 本 中 含 K 3. 50 mmol/ L; Na 140 mmol/ L 间 接 法 实 测 值 为 ： 3. 50 105. 211 100 3. 33 mmol/ L 140 105. 211 100 133. 0 mmol/ L 直 接 法 没 有 电 解 质 排 斥 效 应 一 次 性 电 极 没 有 基 质 效 应 没 有 电 解 质 排 斥 效 应 没 有 繁 琐
11、的 日 长 保 养性 能 优 势 免 疫 速 率 法 干 片竞 争 性 与 非 竞 争 性 免 疫 速 率 反 应 模 式 需 要 液 体 反 应 底 物 地 高 辛 、 苯 妥 因 、 苯 巴 比 妥 、 CRP、 卡 马 西 平 免 疫 速 率 法 干 片酶 抗 体 酶 标 抗 原胶 乳 试 剂扩 散 层受 体 层胶 乳 层聚 酯 支 持 层 酶 标 抗 原抗 体胶 乳 试 剂 病 人 标 本免 疫 速 率 法 干 片 胶 乳 试 剂免 疫 速 率 法 干 片 酶 标 抗 原 标 本 中 抗 原抗 体 免 疫 速 率 法 干 片竞 争 法 结 合 结 合 抗 原 + 游 离 抗 原 免 疫
12、 速 率 法 干 片加 入 液 体 反 应 底 物 洗 去 未 结 合 物 质 免 疫 速 率 法 干 片竞 争 法 结 果 高 浓 度 低 浓 度 VITROS 干 化 学 技 术 在抗 干 扰 方 面具 有 突 出 优 势 去 除 干 扰 的 干 片 原 理 I 缓 冲 液 蜡 染 料 衍 生 物 u 清 道 夫 层使 用 氧 化 酶 或 特 异 性 结 合 物 去 除 干 扰 物以 镁 离 子 干 片 为 例 Mg+2+ Ca +2 Mg +2 + Ca +2 螯 合 剂 复 合 物Mg +2 + 甲 蜡 染 料 衍 生 物 Mg +2 染 料 复 合 物 去 除 干 扰 的 干 片 原 理 IIu 选 择 性 半 透 膜增 强 结 果 特 异 性 ； 去 除 干 扰 物 以 尿 素 氮 干 片 为 例 NH 3 + 氨 指 示 剂 呈 色 氨 指 示 剂 尿 素 酶 缓 冲 液 pH7.8 H2 NCONH2 + H2O 2NH3 + CO2 多 层 涂 膜 干 片 技 术 优 异 的 抗 干 扰 能 力 稳 定 的 定 标 曲 线 所 有 元 素 尽 在 其 中VITROS 干 化 学 技 术 特 点
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