《微生物基础知识》PPT课件

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1、 微 生 物 的 概 述微 生 物 的 概 念 ： 是 指 广 泛 存 在 于 自 然 界 、 体 形 极 小 、 具 有 一 定 形 态 结 构 ， 且 能 在适 宜 的 环 境 中 生 长 繁 殖 的 一 大 类 微 小 生物 微 生 物 的 特 点 体 形 极 小 ， 需 借 助 于 显 微 镜 或 电 子 显 微 镜 放 大几 百 或 几 千 倍 才 能 看 到 分 布 广 泛 ， 存 在 于 土 壤 、 空 气 、 动 植 物 体 表 ，以 及 与 外 界 相 通 的 腔 道 肌 内 或 机 体 内 结 构 简 单 ， 多 以 单 细 胞 、 简 单 的 多 细 胞 或 细 胞群 体

2、 的 形 式 存 在 种 类 繁 多 ， 有 病 毒 、 细 菌 、 立 克 次 体 、 支 原 体 、衣 原 体 、 螺 旋 体 、 放 射 菌 、 真 菌 变 异 性 快 ， 受 外 界 环 境 剧 烈 变 化 时 ， 一 部 分 菌体 会 死 亡 ， 一 部 分 菌 体 因 变 异 会 生 存 下 来 繁 殖 快 ， 简 单 的 二 分 裂 进 行 无 性 繁 殖 ， 一 般20 30分 钟 分 裂 一 次 微 生 物 的 分 类病 毒最 简 单 的 分 类 群 。病 毒 含 有 所 有 生 命 物 质 最 基 本 的 组 成部 分 核 酸 微 生 物 的 分 类物 征 ： 它 们 以

3、一 种 或 多 种 形 式 到 处 存 在 ,细 菌能 以 极 快 的 速 度 繁 殖 “ 二 分 裂 法 ” 具 有 产 生 休 眠 状 态 的 能 力 “ 假 死 状 态 ” 孢子细菌 形 态 ： 球 状 （ 球 菌 ） 棒 状 （ 杆 菌 ） 螺 旋 状 （ 弧 菌 ） 阳 性 菌 ： 细 菌 经 染 色 可 以 保 留 结 晶 紫 ， 最 大 来 源 是 人 。阴 性 菌 ： 细 菌 染 色 后 ， 当 用 脱 色 剂 处 理 时 紫 色 就 会 褪 去 ， 不能 与 结 晶 紫 牢 固 的 结 合 ； 阴 性 菌 的 最 大 来 源 是 水 。微 生 物 的 分 类 革 兰 氏 染

4、色 反 应 两 种 形 态 单 细 胞 形 态 ： 酵 母 菌 以 长 的 支 链 形 态 存 在 ： 丝 状 体 真 菌（ 能 产 生 抗 生 产 素 的 真 菌 ）真 菌 产 生 的 孢 子 比 细 菌 的 芽 孢 差 。真 菌微 生 物 的 分 类 按 环 境 条 件 分 类温 度 嗜 冷 菌 ： 无 色 杆 菌 属 ， 黄 色 杆 菌 属 ， 产 硷 杆 菌 属 嗜 温 菌 ： 埃 希 氏 杆 菌 属 ， 沙 门 氏 菌 属 ， 链 球 菌 属 ，金 黄 色 葡 萄 球 菌 属 嗜 热 菌 ： 芽 孢 杆 菌 属 ， 梭 状 芽 孢 杆 菌 属 ， 乳 酸 杆 菌属 注 意 ：允 许

5、微 生 物 生 长 的 温 度 有 很 明 显 的 重 叠 部 分 。 细 菌 在 一 特 定 温 度 下 不 可 能 不 生 长 ， 但 不 是 说 它 们 不 可能 存 活 。 PH 嗜 酸 菌 ： 链 球 菌 属 ， 乳 酸 杆 菌 属 嗜 中 性 菌 ： 埃 希 氏 杆 菌 属 ， 芽 孢 杆 菌 属 嗜 硷 菌 ： 弧 菌按 环 境 条 件 分 类 食 物 来 源 自 养 型 ： 具 有 能 从 简 单 的 无 机 化 合 物 合 成 所有 生 长 和 繁 殖 所 需 营 养 物 的 能 力 。 异 养 型 ： 利 用 在 其 它 生 物 代 谢 中 形 成 的 有 机物 。按 环

6、境 条 件 分 类药 品 制 造 操 作 中 分 离 所 得 的 微 生 物 ， 绝 大 多 数 是 异 养 型 。 按 对 氧 气 的 需 求 分 类 需 氧 菌 厌 氧 菌 细 菌 生 长 繁 殖 的 特 殊 产 物毒 素 ： 内 毒 素 ， 细 菌 菌 体 分 解 后 释 放 的 物 质 外 毒 素 ， 细 菌 生 长 繁 殖 过 程 中 释 放 的 物 质热 源 一 种 内 毒 素 （ 0.22 m 滤 膜 可 除 去 ） 药 品 生 产 中 微 生 物 污 染 的 途 径粒 子 带 入 ： 人 员 说 话 、 体 表 脱 落 物 、 设备 厂 房 散 落 、 物 料 本 身 散 发

7、、 物 料 包 装物 的 脱 落水 源 带 入 ： 作 为 原 料 或 介 质 ， 直 接 或 间接 导 入 污 染 源 （ 工 艺 用 水 ）原 辅 料 、 包 装 材 料 、 容 器 、 垃 圾 、 废 物等 。 药 物 污 染 和 变 质药 物 被 污 染 后 的 结 果 有 致 病 菌 有 微 生 物 的 代 谢 物 ， 如 热 源 微 生 物 的 部 数 超 过 质 量 标 准 要 求 在 无 菌 制 剂 中 有 活 的 微 生 物 存 在 药 物 受 污 染 后 质 量 变 化 的 表 现 物 理 变 化 ： 外 观 、 颜 色 、 气 味 、 硬 度 、粘 度 、 澄 明 度 等

8、 物 理 性 状 的 改 变 ， 发 展下 去 可 发 生 化 学 变 化 化 学 变 化 ： 药 物 中 的 某 些 成 份 （ 糖 、蛋 白 质 、 有 机 聚 合 物 等 ） 被 微 生 物 降 解 ，而 致 酸 败 或 失 效药 物 污 染 和 变 质 外 用 药 受 污 染 ， 可 引 起 局 部 感 染 ， 严 重者 可 引 起 全 身 感 染 ， 如 败 血 症 。口 服 药 受 污 染 可 引 起 消 化 道 感 染 ， 严 重者 可 引 起 其 它 器 官 的 感 染 ， 如 胆 囊 炎 、腹 膜 炎 。注 射 剂 受 污 染 可 引 起 局 部 感 染 ， 大 输 液可 引

9、 起 热 源 反 应 ， 严 重 可 危 及 生 命 。受 污 染 药 物 对 人 体 的 危 害 防 止 微 生 物 污 染 的 措 施加 强 药 品 生 产 过 程 的 卫 生 管 理 环 境 卫 生 工 艺 卫 生 个 人 卫 生 微 生 物 的 应 用 发 酵 利 用 微 生 物 菌 体 细 胞 中 产 生 的 酶 ， 将 有机 物 转 化 成 细 胞 （ 菌 体 ） 或 其 它 有 机 物 ， 从 而得 到 人 们 所 需 要 的 药 物 ， 如 ： 抗 生 素 、 维 生 素 、氨 基 酸 、 甾 体 激 素 、 酶 及 酶 制 剂 微 生 物 的 菌 体 制 剂 及 酶 制 剂

10、中 药 菌 体 有 灵 芝 、 冬 虫 夏 草 、 茯 苓 、 银 耳 等 药 用 酵 母 、 酵 母 片 活 菌 制 剂 ： 乳 酸 菌 、 双 歧 杆 菌 等 消 化 酶 、 胃 蛋 白 酶 等 消 毒 与 灭 菌 消 毒 指 对 微 生 物 繁 殖 体 的 致 死 作 用 ， 但 不 能杀 灭 芽 孢 等 全 部 微 生 物 选 择 消 毒 剂 的 原 则 ： 高 效 、 无 腐 蚀 、 无 特 殊 嗅 味 和 颜 色 ， 不 对 设备 、 物 料 产 生 污 染 ; 在 有 效 浓 度 时 易 溶 或 混 溶 于 水 中 ， 与 其 它 消毒 剂 无 配 伍 禁 忌 ； 贮 存 过 程

11、 中 稳 定 价 格 便 宜 名 称 浓 度 用 途0.1%新洁尔灭溶液手部消毒（48小时用完）乙醇戊二醛甲醛0.2%75%2%40%墙壁、地面、地漏、门窗、台面、桌、椅等消毒直接接触药物的容器、用具、设备表面、天花、墙面及人手部的消毒（48小时用完）直接接触药物的容器、用具、设备表面、天花、墙面及人手部的消毒（24小时用完） 喷洒适用于空间的消毒煤酚皂溶液手部消毒（72小时用完）1%5%适用于洁净区地面及地漏的消毒适用于洁净区设备表面、回风口、墙面、台面及微生物检查有霉菌生长部位的消毒 （ 24小 时 内 用 完 ）麝香草酚乙醇溶液 5%常 用 的 消 毒 剂 影 响 消 毒 剂 活 性 的

12、 因 素 温 度 ： 消 毒 速 度 随 温 度 升 高 而 加 快 浓 度 ： 适 宜 的 浓 度 能 提 高 和 保 证 消 毒 的 效 果 酸 碱 度 ： 酸 碱 度 影 响 不 同 离 子 型 消 毒 剂 微 生 物 种 类 和 数 量 ： 差 异 性 消 毒 环 境 ： 如 存 在 有 机 物 可 影 响 消 毒 的 效 果 其 它 物 理 化 学 因 素 ： 影 响 消 毒 剂 分 配 系 统 与 活 性 微 生 物 的 培 养基 本 生 长 需 求 两 种 最 主 要 的 元 素 ： 碳 ： 所 有 生 命 系 统 中 合 成 各 种 复 杂 有 机 物 的主 要 元 素 。 氮

13、 ： 合 成 蛋 白 质 骨 架 材 料 氨 基 酸 所 必 须的 。培 养 基 无 菌 试 验 无 菌 没 有 活 体 的 存 在 ， 它 是 用 生 长 繁 殖 来 证明 的 。 因 此 ， 证 明 无 菌 最 通 常 的 方 法 是 促 进 生长 的 试 验 。 无 菌 试 验 方 法 是 能 够 促 进 这 类 细 菌 的 生 长 。 硫 乙 醇 酸 盐 液 体 培 养 基 （ FTM） 成 份 功 能L-脱 氧 酸 还 原 剂 ， 维 持 厌 氧 环 境氧 化 钠 离 子 来 源 和 维 持 渗 透 压 葡 萄 糖 碳 源琼 脂 促 进 生 长 ， 特 别 对 厌 氧 菌酵 母 浸

14、液 碳 源 ， 氮 源 ， 必 需 的 氨 基 酸 来 源 （ 弱 缓 冲 液 ） 硫 乙 醇 酸 钠 维 持 厌 氧 环 境 的 还 原 剂汞 防 腐 剂 的 水 溶 化 剂刃 天 青 氧 化 还 原 指 示 剂 （ 粉 红 色 表 示 有 氧 ） 在 30 35 培 养 时 ， 可 供 嗜 中 温 性 细 菌 、 嗜 中 性 细 菌 、 异 养 型 细 菌 、 兼 性 型 细 菌 或 厌 氧 菌的 生 长 用 。 大 豆 酪 蛋 白 水 解 液 培 养 基无 菌 试 验 成 份 功 用胰 酶 消 化 酪 蛋 白 胨 碳 源 、 氮 源 、 基 本 氨 基 酸 来 源 大 豆 的 木 瓜 酶

15、 水 解 物 碳 源 、 氮 源 、 基 本 氨 基 酸 来 源氧 化 钠 离 子 来 源 和 维 持 渗 透 压 （ 等 渗 ） 磷 酸 钾 离 子 来 源 和 缓 冲 剂葡 萄 糖 碳 源 用 于 支 持 需 氧 菌 的 生 长 。 培 养 培 养 时 间 定 为 7 14天 增 加 培 养 时 间 可 补 偿 条 件 不 佳 时 的 生 长 速 率 快 速 生 长 取 决 于 健 康 的 细 胞 ， 只 要 修 复 了 引 起 衰弱 的 伤 害 部 份 ， 这 个 细 胞 才 能 重 新 繁 殖 接 种 培 养 14天 ， 膜 过 滤 培 养 7天 细 胞 集 中 在 滤 膜 上 ， 用

16、 无 菌 洗 涤 液 洗 涤 ， 产 品 中的 抑 菌 剂 被 除 去 进 入 培 养 基 的 细 胞 在 有 效 利 用 营 养 成 分 之 前 ， 必须 适 应 这 一 培 养 基无 菌 试 验 灭 菌概 念 ： 是 指 杀 灭 或 除 去 物 体 中 所 有 微 生物 的 繁 殖 体 和 芽 孢 的 作 用 称 为 灭 菌 。 常 用 灭 菌 方 法一 、 热 力 灭 菌 ： 利 用 热 能 使 微 生 物 的 蛋 白质 凝 固 变 性 而 导 致 细 菌 死 亡干 热 灭 菌 ： 火 焰 、 烧 灼 、 干 烤 、 红 外 线 等 常 用 烘 箱 ： 用 于 耐 高 温 的 物 料 、

17、 金 属 、玻 璃 制 品 ， 灭 芽 孢 效 果 好 。湿 热 灭 菌 ： 煮 沸 、 流 通 蒸 汽 、 高 压 蒸 汽 等 常 用 高 压 蒸 汽 灭 菌 器 ： 穿 透 力 强 ， 用于 耐 热 及 潮 湿 的 物 品 干 热 灭 菌 火 焰 灭 菌 ： 利 用 火 焰 高 温 ， 使 微 生 物 及 芽 孢 在极 短 的 时 间 内 死 亡 ， 此 法 迅 速 、 可 靠 、 简 便 干 热 空 气 灭 菌 ： 用 热 辐 射 和 灭 菌 器 内 空 气 流 动传 递 热 量 使 微 生 物 及 芽 孢 死 亡 135145 35小 时 160170 24小 时 180200 0.5

18、1小 时 250 0.5小 时 或 200以 上 45mim(热 原 )遭 破 坏 主 要 是 通 过 提 高 了 温 度 使 细 胞 成 分 产 生 非特 异 性 氧 化 而 被 破 坏 的 细 胞 固 有 的 水 分 起 了 重要 的 作 用 湿 热 灭 菌热 压 灭 菌 （ 高 压 灭 菌 ） ： 利 用 超 过 一 个大 气 压 的 饱 和 蒸 汽 的 高 性 能 穿 透 力 以 杀灭 微 生 物 ， 最 可 靠 的 方 法 之 一 需 完 全 排 出 高 压 灭 菌 器 内 的 冷 空 气 注 意 被 灭 菌 物 品 能 否 耐 高 温 高 压 定 期 检 查 灭 菌 箱 内 的 温

19、 度 、 压 力 115 ， 67kPa 30mim 121 ， 97kPa 20mim 126 ， 139kPa 15mim 湿 热 灭 菌流 通 蒸 汽 灭 菌 在 常 压 下 用 100 的 流 通蒸 汽 杀 灭 细 菌 30 60min煮 沸 灭 菌 加 热 至 沸 而 杀 灭 细 菌 3060min 低 温 间 歇 灭 菌 法 ： 适 用 于 必 须 热 压 灭 菌 但 又 不耐 高 温 的 药 品 二 、 辐 射 灭 菌 以 放 射 性 同 位 素 Co60放 射 的 射 线 灭 菌 ，射 线 可 使 有 机 化 合 物 的 分 子 直 接 电 离 ， 破 坏 微生 物 的 正 常

20、 代 谢 ， 导 致 微 生 物 体 内 的 大 分 子 化的 分 解 。常 用 灭 菌 方 法 三 、 紫 外 线 灭 菌 ： 用 波 长 200 300nm（ 253.7nm处 杀 菌 力 最 强 ） 的 紫 外 线 进 行灭 菌 ， 微 生 物 细 胞 中 的 核 酸 能 吸 收 紫 外线 ， 紫 外 线 干 扰 蛋 白 质 的 合 成 ， 导 致 微生 物 死 亡 。 紫 外 灭 菌 灯 平 均 寿 命 为 2000小 时 ，设 计 为 0.4w/m2以 上 ， 被 灭 菌 物 品 离 光 源不 超 过 1.5米 ， 一 般 灭 菌 30min1h常 用 灭 菌 方 法 四 、 环 氧

21、 乙 烷 灭 菌 ， 利 用 其 强 氧 化 性 ，对 微 生 物 繁 殖 体 、 芽 孢 有 强 的 灭 菌 作 用常 用 灭 菌 方 法 五 、 臭 氧 灭 菌 ： 臭 氧 在 常 温 下 不 稳 定 ， 很快 自 行 分 解 成 氧 气 （ O2） 及 氧 原 子 （ O） ，氧 原 子 对 微 生 物 具 有 的 氧 化 作 用 。常 用 灭 菌 方 法 六 、 过 滤 灭 菌 ， 利 用 细 菌 不 能 通 过 滤 膜除 去 活 的 、 死 亡 的 微 生 物 。 常 用 微 孔 滤膜 、 滤 棒 等 ， 一 般 选 用 孔 径 为 0.45、0.22m常 用 加 压 或 减 压 过

22、 滤适 用 于 不 耐 热 药 液 的 除 菌常 用 灭 菌 方 法 灭 菌 的 验 证 生 物 指 示 剂 首 先 是 选 择 具 有 能 抵 抗 灭 菌 工 艺 的 生 物 指 示 剂 其 次 要 考 虑 各 种 变 量 对 灭 菌 生 物 指 示 剂 的 耐 受 力 的影 响 再 次 ， 要 建 立 指 示 剂 在 灭 菌 过 程 中 破 坏 的 定 量 性 质 最 后 ， 对 特 定 工 艺 要 测 定 所 需 灭 菌 物 质 实 现 无 菌 的可 能 性灭 菌 方 法 的 验 证 是 包 括 对 证 明 该 方 法 的可 靠 性 和 可 预 见 性 的 一 系 列 研 究 指 示 剂

23、 的 特 征对 灭 菌 方 法 固 有 的 耐 受 性对 设 定 条 件 下 的 灭 菌 方 法 具 有 稳 定 的 和重 复 的 耐 受 性灭 菌 方 法 处 理 后 的 有 效 回 收 率非 致 病 性通 常 存 在 于 待 灭 菌 产 品 中 的 细 菌 特 征 灭 菌 验 证 相 关 概 念 D值 减 少 细 菌 总 数 90%所 需 的 时 间 F值 在 121 时 ， 杀 灭 悬 浮 液 中 所 有 孢 子 所 需 要 的 时 间 F0值 在 任 何 一 个 给 定 温 度 时 ， 所 需 的 相 当 于 在 121 的灭 菌 效 应 的 时 间 例 如 孢 子 数 是 10 6，

24、 121 的 D值 是 2分 钟 ， 则 F0是 12 Z值 D值 改 变 余 数 10时 所 需 要 的 摄 氏 度 数 灭 菌 方 法 的 选 择与 产 品 本 身 的 性 质 有 关任 何 危 害 产 品 安 全 和 有 效 性 的 灭 菌 方 法不 能 使 用努 力 选 用 对 成 本 有 竞 争 力 的 工 艺 步 骤 或单 元 操 作 消 毒 与 灭 菌 的 比 较共 同 点 ： 消 毒 与 灭 菌 都 用 以 杀 灭 微 生 物以 控 制 其 污 染 或 防 止 污 染 。消 毒 与 灭 菌 的 比 较 不 同 点 ：消 毒 是 不 完 全 杀 灭 微 生 物 ， 而 灭 菌 是

25、 完全 杀 灭 微 生 物消 毒 常 用 化 学 物 质 ， 而 灭 菌 方 法 用 物 理 、化 学 方 法检 查 效 果 ： 消 毒 效 果 以 消 毒 剂 的 性 质 与效 价 来 判 定 ， 而 灭 菌 是 用 无 菌 检 查 方 法来 判 定消 毒 与 灭 菌 的 比 较 中 药 霉 变 与 防 治一 、 霉 菌 生 长 的 外 界 条 件1.营 养 物 中 药 中 含 有 淀 粉 、 糖 等 有 机 物2.温 湿 度 霉 菌 最 适 宜 生 长 的 温 度 20 40度 、 湿 度 为 75 1003.光 线 直 射 阳 光 对 霉 菌 有 杀 伤 作 用 ， 但少 量 可 见 光

26、 和 紫 外 线 对 霉 菌 有 剌 激 其 生长 的 作 用 。4.空 气 氧 气 促 进 霉 菌 生 长 ， 二 氧 化 碳 抑制 霉 菌 生 长 二 、 霉 菌 对 中 药 的 危 害霉 菌 对 中 药 某 些 成 份 进 行 分 解 ， 使 中 药有 效 成 份 降 低 ， 以 致 失 效 三 中 药 霉 变 的 防 治 加 工 时 水 分 的 控 制 、 适 宜 的 、 干 净 卫 生 的 包 装材 料 ， 是 防 止 霉 菌 生 长 繁 殖 的 第 一 关 ， 一 般 水分 控 制 在 12 以 下 。 储 存 期 间 控 制 温 湿 度 ， 一 般 控 制 温 度 在 25度 以下 ， 湿 度 在 45 75 加 强 入 库 的 验 收 和 在 库 的 检 查 根 据 药 材 的 性 质 进 行 必 要 的 养 护 措 施 ， 如 爆 晒 、摊 凉 、 高 温 干 燥 、 木 炭 或 石 灰 干 燥 、 翻 垛 通 风 、密 封 吸 湿 、 冷 藏 防 霉 、 蒸 治 防 霉 等