《遗传学实验-果蝇唾腺染色体》由会员分享，可在线阅读，更多相关《遗传学实验-果蝇唾腺染色体（27页珍藏版）》请在装配图网上搜索。
1、遗传学实验二果蝇唾腺染色体的制备与观察 一、实验目的o1.练 习 剖 取 果 蝇 三 龄 幼 虫 唾 腺 的 方 法 ；o2.掌 握 制 作 果 蝇 唾 腺 染 色 体 标 本 的 技 术 ；o3.观 察 果 蝇 唾 腺 染 色 体 的 形 态 特 征 。 二、实验原理o 双 翅 类 昆 虫 (摇 蚊 、 果 蝇 等 )幼 虫 期 的 唾 腺 细胞 很 大 ， 其 中 的 染 色 体 称 为 唾 腺 染 色 体(salivary chromosome)；o 这 种 染 色 体 比 普 通 染 色 体 大 得 多 ， 宽 约 5m，长 约 400m， 相 当 于 普 通 染 色 体 的 100-
2、150倍 ， 因 而 又 称 为 巨 大 染 色 体 ；o 唾 腺 染 色 体 经 过 多 次 复 制 而 并 不 分 开 ， 大 约有 1000-4000根 染 色 体 丝 的 拷 贝 ， 所 以 又 称多 线 染 色 体 (polytene chromosome)； o 唾 腺 细 胞 中 同 源 染 色 体 互 相 靠 拢 呈 现 联 会状 态 体 联 会 ；o 各 染 色 体 的 异 染 色 质 多 的 着 丝 粒 部 分 互 相靠 拢 形 成 染 色 中 心 (chromocenter)；o 唾 腺 染 色 体 经 染 色 后 ， 出 现 深 浅 不 同 、 密疏 各 别 的 横 纹
3、 (band)， 其 数 目 和 位 置 是 恒 定的 ， 代 表 着 种 的 特 征 ；o 如 果 染 色 体 有 缺 失 、 重 复 、 倒 位 、 易 位 等畸 变 ， 很 容 易 在 唾 腺 染 色 体 上 识 别 出 来 ，因 此 唾 腺 染 色 体 是 研 究 染 色 体 畸 变 的 好 材料 。 三、实验材料o黑 腹 果 蝇 的 三 龄 幼 虫 为 了 得 到 更 好 的 染 色 体 标 本 ， 需 要在 2025 和 营 养 良 好 的 条 件 下 饲 养 幼虫 。 选 择 行 动 迟 缓 、 肥 大 ， 爬 上 管 壁 的三 龄 幼 虫 （ 化 蛹 之 前 ） 做 标 本 最
4、 佳 。 三 龄 幼 虫 照 片 四、实验仪器与试剂 . 器 具 ： 双 筒 体 视 解 剖 镜 、 显 微 镜 、 镊 子 、解 剖 针 、 载 玻 片 、 盖 玻 片 、 培 养 皿 、 吸 水 纸等 。 . 试 剂 ： 改 良 苯 酚 品 红 溶 液 、 生 理 盐 水 、 1N盐 酸 。 五、实验步骤o 实 验 前 知 识 准 备 ： 果 蝇 三 龄 幼 虫 的 唾 腺 位 于 幼 虫 的 头 部 附 近 ，可 以 看 看 显 微 照 片 中 的 位 置（ 点 击 图 片 观 察 放 大 图 ） o 实 验 开 始1.唾 腺 剖 取 把 载 玻 片 置 于 双 筒 镜 下 。 载 玻
5、片 上 滴加 生 理 盐 水 1-2滴 ， 取 三 龄 幼 虫 放 在 其 中 ，操 作 者 两 手 各 握 一 枚 解 剖 针 ， 左 手 的 解 剖针 压 住 幼 虫 后 端 1/3处 ， 固 定 幼 虫 。 右 手 的解 剖 针 按 住 幼 虫 头 部 ， 用 力 向 右 拉 ， 把 头部 从 身 体 拉 开 ， 唾 腺 随 之 而 出 ， 唾 腺 是 一对 透 明 的 棒 状 腺 体 。 用 针 剔 除 脂 肪 组 织 。图 示 2.解 离 ： 在 载 玻 片 上 除 去 幼 虫 其 它 部 分 ， 用 吸水 纸 吸 去 生 理 盐 水 ， 然 后 在 腺 体 上 加 1-2滴1NH
6、Cl溶 液 ， 作 用 5-10 min。3.冲 洗 ： 用 吸 水 纸 吸 去 H Cl ， 滴 加 蒸 馏 水 于 腺 体上 进 行 冲 洗 （ 两 次 ） 。4.染 色 ： 吸 去 蒸 馏 水 ， 加 1-2滴 苯 酚 品 红 溶 液 ，染 色 10min。5. 压 片 观 察 ： 用 镊 子 加 盖 玻 片 ， 压 片 。 镜 检 。 六、实验结果1.先 用 低 倍 物 镜 观 察 ， 找 到 好 的 染 色 体 图 像 后 ，放 到 视 野 中 心 ， 再 用 高 倍 镜 观 察 。 2. 黑 腹 果 蝇 染 色 体 是 2n=2 4=8（ 图 一 ） ， 但由 于 体 细 胞 配
7、对 ， 又 因 短 小 的 第 4染 色 体 和 X染色 体 的 着 丝 粒 在 端 部 ， 所 以 染 色 体 的 一 端 在 染色 中 心 上 ， 看 上 去 ， 各 自 只 形 成 一 条 线 状 和 点状 染 色 体 。 只 有 第 2和 第 3染 色 体 的 着 丝 粒 在 中央 ， 它 们 从 染 色 中 心 以 V字 形 向 外 伸 出 （ 2L，2R， 3L， 3R） ， 因 此 共 有 6条 （ 图 二 ） 。 在 显 微 镜 下 ， 短 小 的 第 4染 色 体 有 时 不 易 观察 到 ， 所 以 最 容 易 识 别 的 是 5条 （ 图 三 ） 。 雄 果 蝇 的 Y染
8、 色 体 几 乎 包 含 在 染 色 中 心 里 ， 因为 是 异 染 色 质 ， 看 起 来 染 色 可 能 深 些 。 有 经 验的 人 可 以 发 现 雄 果 蝇 的 X染 色 体 比 雌 果 蝇 X染 色体 要 细 些 ， 因 为 雄 性 只 有 一 条 X染 色 体 。 3.唾 腺 染 色 体 上 的 横 纹 宽 窄 、 深 浅 是 一 定 的 ，但 在 果 蝇 的 特 定 发 育 时 期 ， 它 们 会 出 现 不连 续 的 膨 胀 ， 这 称 为 疏 松 区 （ puff） ， 目 前人 们 认 为 这 是 这 部 分 基 因 被 激 活 的 标 志 。 七、绘图 绘制你所观察到
9、的清晰的果蝇唾腺染色体的图像。 八、实验分析与讨论1、根据实验的观察可以确定果蝇的染色体数目吗？2、制备果蝇唾腺染色体需注意哪几个关键步骤？3、利用果蝇唾腺染色体可以进行哪些遗传学研究？ 九、参考文献o张贵友，普通遗传学实验指导， 北京：清华大学出版社，2003o卢龙斗、常重杰，遗传学实验技术， 合肥：中国科学技术大学出版社，1996o刘祖洞、江绍慧，遗传学实验， 北京：高等教育出版社，1987 果蝇三龄幼虫 下一张 果蝇三龄幼虫 下一张 果蝇三龄幼虫 返 回 果 蝇 唾 腺 位 于 头 部 附 近返 回 果 蝇 唾 腺 位 于 头 部 附 近 （ 放 大 图 ）返 回 1、两手各握一枚解剖针，左手解剖针压住幼虫后端1/3处，固定幼虫；右手的解剖针按住幼虫的头部用力向右拉，把头部从身体拉开，唾腺随之而出。2、已剥离出的唾腺染色体一对透明的棒状腺体。 下一张 返 回得 到 完 整 的 果 蝇 唾 腺 果 蝇 唾 腺 染 色 体 显 微 照 片 （ 一 ）下一张 果 蝇 唾 腺 染 色 体 显 微 照 片 （ 二 ）返 回 黑 腹 果 蝇 染 色 体 核 型返 回 2L 4 3L2R X 3R黑 腹 果 蝇 唾 腺 染 色 体 模 式 核 型 返 回
遗传学实验-果蝇唾腺染色体
