《脱毒苗的培育》PPT课件.ppt

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1、植物组织培养Good Morning第 四 章 脱 毒 苗 的 培 育 一 .病 毒 在 植 物 体 内 的 分 布 及 危 害 ； 二 .植 物 脱 毒 的 意 义三 .植 物 脱 毒 的 原 理 和 方 法 ； 四 .植 物 脱 毒 苗 的 鉴 定 ； 五 .植 物 脱 毒 苗 保 存 、 应 用 与 繁 殖教 学 内 容 目 的 与 要 求 ：l 了 解 ： 1、 病 毒 在 植 物 体 内 的 分 布 及 危 害 。 l 理 解 ： 1、 脱 毒 苗 的 意 义 ； 2、 植 物 脱 毒 苗 的 鉴 定 、 保 存 、 应 用 与 繁 殖 。 l 掌 握 ： 1、 无 病 毒 苗 概

2、念 ； 2、 植 物 脱 毒 的 原 理 和 方 法 。 l 病 毒 对 寄 主 植 物 可 造 成 毁 灭 性 危 害 ， 导 致 大 幅度 减 产 ， 甚 至 全 株 死 亡 。 l 潜 隐 性 病 毒 侵 染 植 物 造 成 症 状 不 明 显 的 慢 性 危害 ， 不 易 被 发 现 ， 尤 其 危 险 。l 国 内 外 解 决 作 物 病 虫 害 的 有 效 途 径 是 培 育 无 病毒 苗 ， 实 施 农 作 物 无 病 毒 化 栽 培 。 无 病 毒 苗 是 指 不 含 该 种 植 物 的主 要 危 害 病 毒 ， 即 经 检 测主 要 病 毒 在 植 物 内 的 存 在表 现

3、阴 性 反 应 的 苗 木 。 脱 毒 后 的 马 铃 薯 苗 一 .病 毒 在 植 物 体 内 的 危 害 及 分 布1.危 害 : 绝 大 多 数 植 物 都 可 以 无 性 繁 殖 的 , 容 易 受 到 多 种 病原 菌 的 侵 染 , 体 内 积 累 浓 度 相 当 高 的 病 毒 。l 组 织 和 细 胞 病 变l 新 陈 代 谢 等 生 理 机 能 受 到 干 扰l 外 观 表 现 不 正 常 状 态 一 .病 毒 在 植 物 体 内 的 危 害 及 分 布l 2.分 布l 在 植 物 体 内 的 分 布 具 有 不 均 匀 性 ， 随 植 株 不 同 部 位和 年 龄 而 异

4、。 老 叶 和 成 熟 组 织 及 器 官 中 病 毒 含 量 较 高 根 尖 、 茎 尖 生 长 点 约 0.11mm区 域 内 ， 几 乎 不 含 病毒 。 （ 原 因 ？ ）(原 因 ： 分 生 组 织 细 胞 分 裂 和 生 长 速 度 快 ， 而 病 毒在 植 物 体 细 胞 内 繁 殖 速 度 相 对 较 慢 ； 另 外 ， 病 毒是 通 过 筛 管 组 织 或 胞 间 联 丝 传 播 至 其 他 组 织 细 胞的 ， 而 茎 尖 分 生 组 织 无 分 化 ， 没 有 维 管 组 织 。 ) 黄 瓜 病 毒 病 辣 椒 病 毒 病黄 瓜 病 毒 病 一 串 红 病 毒 病 菜 豆

5、 细 菌 性 病 害 危 害 一 些 植 物 的 病 毒 数 目物 种 感 染 病 毒种 类 物 种 感 染 病 毒种 类 物 种 感 染 病 毒种 类菊 花 19 矮 牵 牛 5 苹 果 36康 乃 馨 11 百 合 6 柑 橘 23水 仙 4 马 铃 薯 17 葡 萄 26唐 菖 蒲 5 大 蒜 24 草 莓 24风 信 子 3 豌 豆 15 桃 23月 季 10 樱 桃 44 梨 11 病 毒 的 特 性 及 侵 染l 有 性 生 殖 退 化 、 仅 用 无 性 繁 殖 方 法 繁 殖 的 植 物 ，极 易 受 病 毒 病 的 侵 染 。l 大 多 植 物 病 毒 不 经 种 子 传 播

6、 （ 专 化 性 强 的 病 毒除 外 ） 。l 病 毒 在 生 长 旺 盛 的 部 位 繁 殖 速 度 慢 。 二 、 植 物 脱 毒 的 意 义 任 何 一 种 优 良 品 种 均 需 有 一 个 稳定 地 保 存 其 遗 传 性 状 的 繁 殖 方 法 。 离 体 无 性 繁 殖 可 以 很 好 地 保 持 品种 的 优 良 特 性 ， 是 无 性 繁 殖 品 种 繁育 的 理 想 途 径 。1、 能 够 有 效 地 保 持 优 良 品 种 的 特 性 2、 快 速 繁 殖 品 种 ， 使 优 良 品 种 迅 速 应 用 离 体 繁 殖 周 期 短 不 受 季 节 限 制 繁 殖 系 数

7、 高 繁 殖 速 度 是 任 何 其 他 方 法 所 不 能 比 的 ， 又 称 之 为 快 繁 3、 生 产 无 病 毒 种 苗 ， 防 止 品 种 退 化受 病 毒 危 害 严 重 的 作 物 ：大 田 作 物 ： 马 铃 薯 、 甘 薯 、 甘 蔗 、 烟 草蔬 菜 ： 白 菜 、 大 蒜 、 葱 、 番 茄 、 箩 卜果 树 ： 柑 橘 、 苹 果 、 草 莓 、 香 蕉花 卉 ： 香 石 竹 、 各 种 菊 花 、 天 竺 葵 、 紫 罗 兰 4、 节 约 耕 地 ， 提 高 农 产 品 的 商 品 率 块 根 、 块 茎 、 鳞 茎 为 繁 殖 器 官 的 作 物 ，每 年 产 品

8、 用 留 作 种 的 比 例 ： 大 蒜 ： 留 种 量 占 产 量 的 五 到 八 分 之 一 马 铃 薯 ： 留 种 量 占 产 量 的 十 分 之 一 贝 母 ： 留 种 量 占 产 量 的 三 分 之 一(贝 母 ： 多 年 生 草 本 植 物 ,其 鳞 茎 供 药 用 ,有 止 咳 化 痰 、 清 热散 结 之 功 。 产 于 四 川 、 云 南 、 陕 西 秦 巴 山 区 ， 甘 肃 等 地 ) 5、 便 于 运 输 常 规 的 块 根 、 块 茎 等 ， 体 细 胞 大 、含 水 量 高 ， 包 装 、 运 输 十 分 不 便 。 离 体 繁 殖 的 种 苗 体 积 小 ， 易

9、携 带 ，运 输 十 分 方 便 。 以 马 铃 薯 为 例 ： 按 一 亩 地 4000株 计 算 ， 常 规 薯 4000个 重200kg（ 每 个 50g） ， 若 用 试 管 薯 4000个 则 只 有2kg（ 每 个 0.5g） 。 脱毒马铃薯试管苗 三 、 植 物 脱 毒 的 原 理 和 方 法（ 一 ） 植 物 脱 毒 原 理 ：1） 植 物 病 毒 本 身 不 具 有 主 动 转 移的 能 力 。 在 一 个 植 物 体 内 ， 病 毒 易 于 通 过 维 管系 统 而 移 动 ， 但 在 分 生 组 织 中 不 存 在 维管 系 统 。 病 毒 在 细 胞 间 移 动 只 能

10、 通 过 胞间 连 丝 ， 速 度 很 慢 ， 难 赶 上 活 跃 生 长 的茎 尖 ； 2） 在 旺 盛 分 裂 的 分 生 细 胞 中 ， 代 谢 活 性 高 ， 竞 争抑 制 了 病 毒 的 复 制 ；3） 在 植 物 体 内 ， 可 能 存 在 着 病 毒 钝 化 系 统 ， 它 在分 生 组 织 中 比 其 他 任 何 区 域 具 有 更 高 的 活 性 。4） 在 茎 尖 存 在 高 水 平 内 源 生 长 素 ， 也 可 能 抑 制 病毒 的 增 殖 。 （ 二 ） 植 物 脱 病 毒 方 法物 理 方 法 化 学 方 法 生 物 方 法高 温 处 理 茎 尖 培 养 微 体 嫁

11、 接珠 心 培 养 愈 伤 脱 毒热 处 理 脱 毒X射 线 、 紫 外 线 、超 短 波 、 高 温热 处 理 等化 学 抑 制 剂 ，干 扰 病 毒 在植 物 体 内 的复 制 选 用 抗 病 毒 品 种 或采 用 种 子 繁 殖 方 法 1.热 处 理 脱 毒 法热 处 理 脱 毒 原 理 病 毒 DNA分 子 进 入 细 胞 后 随 植 物 细 胞 DNA一 起 复 制 。 热 处 理 并 不 能 杀 死 病 毒 ， 只 能 钝 化 病 毒 活 性 ， 使 病 毒 在植 物 体 内 增 殖 减 缓 或 增 殖 停 止 ， 失 去 传 染 能 力 。 作 为 一 种 物 理 效 应 可

12、以 加 速 植 物 细 胞 的 分 裂 ， 使 植 物 细胞 在 与 病 毒 繁 殖 的 竞 争 中 取 胜 。 热 处 理 方 法（ 1） 愈 伤 组 织 热 处 理 离 体 培 养 愈 伤 组 织 热 处 理 继代 分 化 培 养 。 常 用 温 度 及 时 间 ： 低 温 3738 处 理 2周 、4周 或 8周 ； 高 温 50 处 理 35min。 （ 2） 热 空 气 处 理 脱 毒 法 试 验 母 株 在 高 温 生 长 室 中 生 长 一 段 时间 ， 其 顶 端 分 生 组 织 比 次 生 分 生 组 织 生 长迅 速 ， 后 切 取 其 茎 尖 分 生 组 织 进 行 离

13、体 培养 。 生 长 室 温 度 35-40 光 照 300010000 lx 热 处 理 的 优 缺 点优 点 : 方 法 简 单 ， 效 果 明 显 。缺 点 : 1)具 有 局 限 性 ， 不 能 去 除 所 有 病 毒 。 只 对 圆 形 病 毒 （ 苹 果 花叶 病 毒 ） ， 或 对 线 状 病 毒 （ 马 铃 薯 卷 叶 病 毒 ） 有 效 ； 而 对杆 状 病 毒 （ 千 日 红 病 毒 ） 无 效 。2)热 处 理 后 只 有 小 部 分 植 株 能 够 存 活 。 极 易 使 植 物 材 料 受 热枯 死 ， 造 成 损 失3） 延 长 热 处 理 时 间 ， 病 毒 钝

14、化 效 果 好 ， 同 时 也 可 能 会 钝 化植 物 组 织 中 的 抗 性 因 子 而 降 低 处 理 效 果 。 其 效 果 香 石 竹 （ 康 乃 馨 ） 在 38 40 下 经 两 个月 处 理 可 除 去 全 部 病 毒 。 马 铃 薯 在 37 下 处 理 10 20天 能 除 去 卷 叶病 毒 。 2.组 织 培 养 脱 毒 法 包 括 微 茎 尖 培 养 脱 毒 、 愈 伤 组 织 培 养 脱毒 、 珠 心 组 织 培 养 脱 毒 。（ 1） 微 茎 尖 培 养 脱 毒 法 脱 毒 效 果 好 后 代 遗 传 稳 定 使 用 最 广 泛 的 一 种 方 法 1） 原 理 及

15、 依 据 病 毒 在 植 物 体 内 分 布 不 均 ， 茎 尖 处 含 量 最少 病 毒 DNA分 子 与 细 胞 分 裂 蛋 白 质 合 成 竞 争2） 操 作 程 序 外 植 体 经 表 面 消 毒 灭 菌 后 ， 在 解 剖 镜 下 ，经 无 菌 操 作 切 取 小 茎 尖 ， 接 种 到 备 用 培 养 基 上 ，放 入 培 养 室 内 进 行 培 养 ， 并 及 时 观 察 和 记 录 培养 结 果 。 茎 尖 培 养l 1） 茎 尖 大 小 ： 一 般 以 带 1-2片 叶 原 基 为 好 ， 大 小 为 0.2-0.3毫 米 为 宜 ， 超 过 0.5毫 米 时 ， 脱 毒 效

16、 果 差 。 （ 外 植 体 过小 茎 尖 存 活 率 低 ）l 2） 培 养 基 ： 能 使 茎 尖 快 速 生 长 、 分 化 的 培 养 基 均 适 于 脱毒 。l 3） 前 处 理 ： 切 取 茎 尖 之 前 ， 植 物 材 料 如 经 过 预 处 理 ， 如热 水 或 热 空 气 处 理 、 低 温 处 理 、 药 物 处 理 ， 均 可 大 大 提 高脱 毒 效 率 。 l 4） 培 养 条 件 ： 同 一 般 茎 尖 培 养l 5） 外 植 体 生 理 状 态 ： 由 活 跃 生 长 的 芽 上 切 取 优 缺 点 ： 茎 尖 越 小 ， 去 病 毒机 会 越 大 ， 脱 毒 效

17、 果 就越 好 ， 但 同 时 因 为 其 含营 养 及 水 量 太 低 ， 故 培养 时 对 培 养 基 的 要 求 就越 高 ， 对 剥 离 技 术 要 求也 越 高 。 小 茎 尖 ： 顶 端 分 生 组 织 +叶 原 基 （ 12个 ） ， 大 小为 0.1mm-1mm。 热 处 理 结 合 茎 尖 脱 毒 培 养 用 于 脱 毒 的 适 宜 茎 尖 大 小植 物 病 毒 名 称 剥 离 茎 尖 大小（ mm） 植 物 病 毒 名 称 剥 离 茎 尖 大小（ mm）马 铃 薯 马 铃 薯 卷 叶 病 毒 1.0 3.0 百 合 花 叶 病 0.2 1.0马 铃 薯 Y病 毒 1.0 3

18、.0 鸢 尾 花 叶 病 0.2 0.5马 铃 薯 X病 毒 0.2 0.5 菊 花 各 种 病 毒 0.2 1.0马 铃 薯 G病 毒 0.2 0.3 康 乃 馨 各 种 病 毒 0.2 0.8马 铃 薯 S病 毒 0.2以 下 大 丽 花 花 叶 病 0.6 甘 薯 斑 纹 花 叶 病 毒 1.0 2.0 大 蒜 花 叶 病 毒 0.3 1.0缩 叶 花 叶 病 毒 1.0 2.0 甘 蔗 花 叶 病 0.7 3.0羽 毛 状 花 叶 病 毒 0.3 1.0 草 莓 各 种 病 毒 0.2 1.0 脱 毒 时 ， 最 好 找 出 茎 原基 所 带 叶 原 基 的 数 目 与生 长 点 （

19、茎 尖 ） 大 小 的相 关 性 ， 这 样 在 取 材 时就 方 便 多 了 茎 尖 越 小 对 培 养 基 的 要求 越 高 ， 剥 离 技 术 要 求越 高 ， 成 功 率 越 低 。 2、 愈 伤 组 织 培 养 脱 毒 法（ 1） 原 理 及 依 据 a、 病 毒 在 植 物 体 内 分 布 不 均 匀 b、 病 毒 复 制 的 能 力 衰 退 或 丢 失 c、 继 代 培 养 的 愈 伤 组 织 产 生 抗 性 变 异 （ 2） 技 术 关 键 诱 导 再 生 植 株 的 愈 伤 组 织（ 3） 操 作 程 序 植 物 各 种 器 官 或 组 织 诱 导 产 生 出 愈 伤 组 织

20、 ，愈 伤 组 织 多 次 继 代 ， 然 后 从 愈 伤 组 织 再 诱 导 分化 芽 ， 长 成 植 株 。 愈 伤 组 织 培 养 脱 毒 法 脱 毒 效 果 不 定 ， 常 出现 一 些 变 异 。 （ 3） 珠 心 组 织 培 养 脱 毒 法 病 毒 是 通 过 维 管 组 织 传 播 ， 而 珠 心 组 织 和维 管 束 系 统 无 直 接 联 系 ， 故 可 以 通 过 珠 心 组 织离 体 培 养 获 得 无 病 毒 植 株 。 目 前 已 用 该 方 法 去 除 了 柑 橘 银 屑 病 、 叶 脉突 出 病 、 柑 橘 裂 皮 病 、 速 衰 病 等 病 毒 。缺 点 ： 会

21、 有 20%30%左 右 的 变 异 率 ， 同 时 无 毒 苗苗 期 较 长 。 柑 橘 要 68年 才 能 结 果 。 3.微 体 嫁 接 离 体 培 养 脱 毒 法 应 用 微 体 嫁 接 的 原 因 ：木 本 植 物 茎 尖 培 养 难 以 生 根 形 成 植 株 。具 体 做 法 ： 将 极 小 的 茎 尖 （ 0.14mm1.0mm） 作 为 接 穗 嫁 接 到不 带 病 毒 的 种 子 实 生 苗 砧 木 上 ， 然 后 将 砧 木 、 接 穗 一起 在 培 养 基 上 培 养 。优 点 ： 接 穗 在 砧 木 上 易 成 活 ， 故 可 用 很 小 的 茎 尖 来 培养 ， 去

22、 除 病 毒 几 率 大 ， 获 得 无 病 毒 苗 的 可 能 性 大 。 微 嫁 接 要 求 的 剥 离 技 术 高 ， 嫁 接 成 活 率 与 接 穗 大 小呈 正 相 关 ， 而 脱 毒 率 与 接 穗 大 小 呈 负 相 关 微 体 嫁 接 法 (micrografting)脱 除 病 毒 的 关 键 ： 要 求 剥 离 技 术 很 高 ； 需 要 考 虑 砧 木 和 接 穗 对 营 养组 成 的 不 同 要 求 ； 与 接 穗 的 取 材 季 节 有 密 切 关系 （ 苹 果 46月 取 材 嫁 接 成活 率 较 高 。 ） 四 、 植 物 脱 毒 苗 的 鉴 定1、 视 觉 观

23、察 法 (直 接 检 测 法 ) 看 植 株 的 茎 叶 是 否 有 该 病 毒 所 有 可 见 症 状 。番茄无菌小苗 厚叶莲花掌 植 物 病 毒 的 症 状l 植 物 病 毒 引 起 植 株 的 症 状 是 各 异 的 ， 在 观 赏 植 物上 由 病 毒 引 起 外 部 症 状 主 要 有 以 下 几 种 ：l （ 1） 变 色 ： 褪 绿 、 黄 化 、 花 叶 、 斑 驳 、 红 叶 等 ， 常 见 病 毒 有 ； 香 石竹 斑 驳 病 毒 、 黄 瓜 花 叶 病 毒 、 芋 花 叶 病 毒 等 。l （ 2） 坏 死 ： 常 见 的 坏 死 是 病 斑 或 斑 点 。 有 轮 斑

24、、 环 斑 、 条 斑 条 纹等 。 如 香 石 竹 坏 死 斑 点 病 毒 、 ， 凤 仙 花 坏 死 斑 点 病 毒 草 等 。 l （ 3） 畸 形 ： 植 株 可 出 现 矮 缩 、 矮 化 或 叶 片 皱 缩 、 卷 叶 、 蕨 叶 等 病 状 。l （ 4） 萎 蔫 ： 主 要 是 指 植 物 根 或 茎 的 维 管 束 组 织 受 到 破 坏 而 发 生 供 水不 足 所 出 现 的 凋 萎 现 象 。 2、 生 物 鉴 定 法 (指 示 植 物 indicating Plant法 ) 由 于 采 用 汁 液 接 种 法 比 较 困 难 ， 所 以 通 常 采 用嫁 接 接 种

25、的 方 法 , 利 用 嫁 接 法 接 种 ， 把 待 测 的 植 物接 种 在 敏 感 植 物 上 ， 然 后 视 其 有 无 病 斑 ， 来 判 断 是 否脱 除 了 病 毒 。指示植物 接穗 嫁 接 后的 植 物 指 示 植 物 indicating Plant法l 定 义 :将 一 些 对 病 毒 敏 感 、 症 状 特 征 显 著 的 植物 作 为 指 示 植 物 (又 叫 鉴 别 寄 主 ),利 用 病 毒 在 其他 植 物 上 产 生 的 枯 斑 作 为 鉴 别 病 毒 种 类 的 方 法 .优 点 :方 法 简 单 灵 敏 准 确 擦 方 便 ,仍 为 一 种 经 济 有效 的

26、 方 法缺 点 :枯 斑 法 不 能 测 出 病 毒 总 的 核 蛋 白 浓 度 ,而 只 能测 出 相 对 的 感 染 力 部 分 病 毒 的 木 本 指 示 植 物 及 相 应 症 状病 毒 种 类 木 本 指 示 植 物 表 现 症 状苹 果 褪 绿 叶 斑 病 毒 苏 俄 苹 果 叶 片 出 现 褪 绿 斑 点 ， 叶 小 ， 植 株 矮 化 ，长 势 弱苹 果 茎 痘 病 毒 司 派 227或 光 辉 叶 片 反 卷 ， 植 株 矮 化 ， 皮 层 坏 死苹 果 茎 沟 病 毒 弗 吉 尼 亚 小 苹 果 植 株 矮 小 ， 接 合 部 内 有 深 褐 色 坏 死 环纹 ， 木 质

27、部 产 生 深 褐 色 纵 向 条 沟苹 果 花 叶 病 毒 兰 蓬 王 、 红 玉 和 金冠 叶 片 上 产 生 黄 斑 、 沿 叶 脉 条 斑 苹 果 锈 果 类 病 毒 国 光 叶 和 茎 干 锈 斑 、 坏 死 斑葡 萄 扇 叶 病 毒葡 萄 茎 痘 病 毒 沙 地 葡 萄 圣 乔 治 叶 片 出 现 褪 绿 斑 点 、 线 纹 斑 及 环 斑 、局 部 坏 死 、 畸 形 ； 叶 脉 间 出 现 星 状 透明 斑 3、 电 子 显 微 镜 鉴 定 法 小 于 0.1mm的 病 毒 颗粒 。 用 电 子 显 微 镜 直 接 观察 经 脱 毒 培 养 的 叶 片 ， 检查 是 否 有 的

28、 病 毒 粒 子 存 在 ，还 可 测 量 病 毒 颗 粒 的 大 小 、形 状 和 结 构 。较 为 先 进 的 方 法 ， 但 需 一定 的 设 备 和 技 术 4、 抗 血 清 鉴 定 法 利 用 抗 原 与 抗 体 特 异 反 应 的 特 性 ， 用已 知 病 毒 的 抗 血 清 来 鉴 定 未 知 病 毒 的 种 类 ，其 中 酶 联 免 役 吸 附 反 应（ ELISA） 是 常 用 的 一 种 方 法 。 血 清 鉴 定 法 示 意 图 特 点 :特 异 性 高 测 定 速 度 快l很 常 用l 抗 血 清 的 基 本 原 理 是 通 过 植 物 病 毒 的 抗 原 与 抗体 的

29、 专 化 结 合 , 形 成 可 见 反 应 而 加 以 判 断 。 由于 植 物 病 毒 抗 血 清 具 有 高 度 的 专 化 性 , 受 体 植物 无 论 显 、 隐 症 , 无 论 是 何 种 传 播 介 质 , 均 可通 过 抗 血 清 反 应 法 准 确 判 断 病 毒 的 存 在 与 否 , 进 行 病 毒 的 快 速 诊 断 。 抗 血 清 反 应 鉴 定 电 子 显 微 镜 检 查 法 常 用 脱 毒 植 物 的 4种 鉴 定 方 法指 示 植 物 鉴 定 直 观 鉴 定 五 、 无 病 毒 种 苗 的 保 存 、 应 用 及 繁 殖（ 一 ） 无 病 毒 原 种 的 保 存

30、 获 得 无 毒 原 种 不 易 ， 若 保 存 不 好 会 很 快 重新 感 染 病 毒 。 为 防 止 再 度 感 染 ， 应 在 隔 离 条 件下 保 存 。 若 原 种 保 存 得 好 ， 无 毒 原 种 可 以 利 用 5-10年 ，在 生 产 上 可 以 创 造 更 多 的 经 济 效 益 。 1、 隔 离 种 植 保 存 通 过 无 毒 原 种 要 在 隔 离 区 或 隔 虫 网 室 内 种 植 保 存 。植 物 病 毒 的 传 播 媒 介 主 要 是 昆 虫 如 蚜 虫 、 叶 蝉 。 2、 离 体 保 存 脱 毒 苗 经 鉴 定 后 ， 选 择 无 病 原 种 株 系 ， 回

31、 接 于试 管 内 ， 可 长 期 保 存 ， 是 最 理 想 的 保 存 方 法 。Rooting mediumProliferation medium （ 二 ） 无 毒 原 种 的 应 用 获 得 无 毒 原 种 后 ， 一 方 面 要 积 极 进 行 无毒 苗 的 推 广 ， 另 一 方 面 还 要 做 好 无 病 毒 种 的 繁育 。 无 毒 苗 的 推 广 应 在 发 展 良 种 的 新 区 使 用 才能 取 得 良 好 的 效 果 ； 在 老 病 区 使 用 时 应 实 行 统一 的 防 治 措 施 ， 一 次 性 全 区 换 种 ， 才 能 取 得 应有 的 效 果 。 （ 三

32、 ） 无 病 毒 原 种 的 繁 殖 可 在 无 毒 源 和 其 他 病 虫 害 的 大 田中 进 行 ， 场 地 土 壤 要 进 行 消 毒 ， 防 治蚜 虫 、 线 虫 和 其 他 传 毒 媒 介 ， 并 建 立一 套 严 格 的 原 种 繁 育 制 度 和 栽 培 管 理制 度 ， 防 止 病 毒 的 再 次 感 染 。 （一）无病毒苗的繁殖方法 1、 嫁 接 繁 殖2、 扦 插 繁 殖3、 压 条 繁 殖 4、 匍 匐 茎 繁 殖 5、 微 型 薯 块 繁 殖 （二）无病毒苗繁育生产体系 我国农作物无病毒苗繁育生产体系归结为以下模式： 国家级（或省级）脱毒中心无病毒苗繁育基地无病毒苗栽

33、培示范基地作物无病毒化生产 离 体 繁 殖 的 使 用 范 围1.用 于 加 速 某 些 难 繁 殖 或 繁 殖 速 度 很 低 的 植 物 ，或 某 些 需 要 加 速 繁 殖 的 特 殊 基 因 型 ， 如 名 贵 花卉 、 优 良 资 源 、 果 树 芽 变 分 离 、 工 程 植 株 等 。 用 于 自 然 繁 殖 极 易 感 染 病 毒 的 植 物 ， 如 马 铃 薯 、甘 薯 、 甘 蔗 、 香 蕉 、 石 竹 、 百 合 等 用 于 有 性 繁 殖 变 异 范 围 大 而 自 然 条 件 下 又 不 易无 性 繁 殖 的 植 物 ， 如 非 洲 菊 、 花 竹 、 紫 罗 兰 等

34、 本 章 小 结l (1)去 除 植 物 病 毒 的 方 法 有 热 处 理 法 、 微 茎 尖 培 养 法 、 愈 伤组 织 培 养 法 和 茎 尖 微 体 嫁 接 法 。 前 两 种 是 主 要 方 法 。l (2)热 处 理 法 :为 温 汤 浸 渍 处 理 法 和 热 处 理 法 。 其 中 后 者 因 不损 伤 植 物 材 料 ， 因 而 是 目 前 最 为 常 用 的 方 法 。l (3)病 毒 主 要 分 布 于 植 物 体 成 熟 和 衰 老 的 组 织 及 器 官 中 ， 靠维 管 束 传 播 。 由 于 茎 尖 尚 未 形 成 维 管 束 ， 所 以 茎 尖 一 般 是 无毒 的 ， 可 用 于 组 织 培 养 无 毒 苗 。 l (4)无 毒 苗 的 鉴 定 方 法 主 要 有 ： 指 示 植 物 鉴 定 法 ； 抗 血清 鉴 定 法 ； 电 子 显 微 镜 检 查 法 ； 酶 联 免 疫 鉴 定 法 。 其 中 ，最 后 -种 是 目 前 比 较 精 确 和 常 用 的 鉴 定 方 法 。 思考题：名词解释：植物脱毒技术、微体嫁 接、指示植物。1、植物脱毒方法有哪些?2、植物脱毒效果的检测方法有哪些？ 睡 醒 了 嗎 ？-謝 謝 各 位 !