酶学分析方法及酶活性测定复习与练习

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1、酶学分析方法及酶活性测定复习与练习一、有关酶的基本理论知识1、酶浓度与酶促反应速度的关系是？2、底物浓度与酶促反应速度的定量关系式是？3、影响酶促反应速度的因素主要有哪些？4、Km 及 Vm 代表的含义及它们在临床酶活性测定中应用及意义。二、酶活性测定的基本知识1、酶活性的概念及酶活性单位如何表示表示2、目前酶活性单位有 、 、 三种表示方式。？3、解释酶活性国际单位、催量（Katal）的概念，并比较两者的关系？4、酶活性单位的计算：几类计算公式要求理解并熟练应用。1）通用公式2）惯用单位的计算公式（测定产物生成类的计算公式；测定底物消耗类的计算公式）3）* 连续监测法根据摩尔吸光系数进行酶活

2、性浓度的计算；*连续监测法因素F值（全自动化生化仪多用K表示）的计算和应用？三、酶活性的测定方法1、酶活性测定的基本原则是什么？2、酶反应时间进程曲线有、三个时期酶活性测定是在期测定，此时期反应速度不受 的影响也称 期3、根据反应时间，酶活性测定分为两类方法是 和 两种从概念、结果计算、优缺点叙述并比较两类方法？其中连续监测法4、按检测对象的酶活性测定方法分为 和 法；其直接法的方法类型有哪些？5、何谓酶偶联反应？写出酶偶联反应的基本模式？什么是待测酶、辅助酶、指示酶？6、何谓工具酶？酶作为工具应用于临床生化检验可进行酶活性测定或进行代谢物浓度 （底 物）的测定时一般有哪两大指示系统？何谓-T

3、rinder反应？ Trinder反应的主要缺点或影响因 素有哪些？7、何谓同工酶？同工酶分析的常用原理有哪些？检测同工酶有何临床意义？并举例说 明？8、酶活性测定条件及影响因素有哪些？9、从几个酶类测定（如AMY、ALT、LD、ALP|等）的实验操作中，讨论酶活性测定应 注意 的问题？10、试述影响血清酶的生理变异有哪些？11、酶活性测定，标本的采集、处理、贮存及样品试剂比有何要求？四、体液酶测定：1、常用于临床协助诊断的血浆酶有哪些？用于协助诊断心肌损伤、肝脏疾病、胰腺疾病、 骨 骼骨骼肌、前列腺疾病等的常用的血清酶有哪些？常用的临床诊断酶谱有哪些？2、将各血清酶活性测定的方法学原理进行分

4、析归纳，请总结出有哪几大反应基础。3、书写出 AMS、 ALP 两种（化学比色法、（连续监测法）方法及 ALT、 AST、 GGT、 LDH、CK酶测定（连续监测法）反应原理、主要试剂成分和作用？影响结果准确性因素有 哪些？评价 LD-L 反应和LD-P 反应试剂盒的优缺点？4、血清 ALT、 AST、 ALP、 GGT、 AMS、 CK、 LD 等酶测定的临床意义？五、选择题：A 1 、 K m 是指反应速度为最大反应速度一半时的A 底物浓度B 酶浓度C 激活剂浓度D 温度E 抑制剂浓度D 2、根据 1976 年国际生化学会生化委员会规定，酶的一个国际单位是指A 最适条件下，每小时催化生成

5、1mmol/l 产物的酶量B 最适条件下，每分钟催化生成 1mmol/l 产物的酶量C 最适条件下，每小时催化生成 1umol/l 产物的酶量D 特定条件下，每分钟催化 1umol 底物产生变化所需的酶量E 25C及其它最适条件下，每分钟催化lumol底物产生变化所需的酶量E 3 、 IFCC 推荐法测定 AST 的辅助酶是A G6PD B HK C POD D LDH E MDHB 4、以NAD ( P)或NAD ( P) H为指示系统的酶活性测定主波长应设置为：A 293nm B 340nm C 405nm D 380nm E 500nmD5、以NAD还原为NADH反应为基础的生化分析，采

6、用波长及吸光度变化为：A、340nm A 下降B 405nm A 上升C、 500nm A 下降D、 340nm A 上升E、405nm A 下降A 6、淀粉酶测定显著升高主要见于：A、溃疡病穿孔B、急性胰腺炎C、甲亢D、糖尿病E、肾病综合症C 7、正常成人血清 LD 同工酶电泳区带的结果应符合：A LD1LD2LD3LD4LD5B LD1LD2LD3LD4LD1LD3LD4LD5D LD3LD1LD2LD4LD5E LD4LD1LD2LD3LD5B 8、 IFCC 推荐法测定 ALP 选择用哪种缓冲液A 乙二胺 B AMP C Tris D 甘氨酸 E 二乙醇胺C 9、单底物酶促反应的最适底

7、物浓度的确定原则：A 1Km B 2Km C 1020Km D 100Km E 越大越好B 10、前列腺疾病最敏感的指标是：A ALP B ACP D CHE D AMY E ASTC 11自动化生化分析仪测定酶活性常用计算 K 值的主要原因是A 方便 B 准确 C 无标准品和校正品 D 酶校正品不准确D 12、GPT测定时，底物液中的a酮戊二酸的量比丙氨酸的量小近百倍的原因是A 防止酶促反应时，丙酮酸生成过量 B 保证酶有足够的底物C防止基质中PH小于7.4 D减少a酮戊二酸与2. 4二硝基苯肼的呈色反应E a 酮戊二酸过多可激活酶的活性D 13、 AST 测定(速率法)的试剂中，不含有A天

8、冬氨酸B NADHCa 酮戊二酸D 丙氨酸 E Tris缓冲液C 14、酶联反应中最后一个外加酶称为：A 偶联酶B 辅酶C 指示酶D 工具酶E 同工酶D 15、 ALP 测定( King 法)其底物是A 铁氰化钾 B 酚C 4 AAPD 磷酸苯二钠 E 丙氨酸B 16 、血清 ALT 测定中，标准曲线为抛物线的干扰物为A丙酮酸B 2.4-二硝基苯肼C谷氨酸D a酮戊二酸E 2.4-二硝基苯腙B 17ALT测定(R F)终止酶促反应是用A 0.4 mol/LN aOH B 2.4 二硝基苯肼C a -酮戊二酸 2.4 二硝基苯腙 D 磷酸盐缓冲液E 碳酸盐缓冲液A 18、血清ALT测定(R F法

9、)，下列哪些情况会导致结果偏低：A 制作标准曲线所用的丙酮酸钠变质B 标本严重溶血C 对照管混浊未被发现D 水浴温度偏高 (升至 5 0C)E 血清与基质混合匀后未及时放入 37C 水浴保温A 19、 100 n Kat 单位酶量等于A6 IUD 2 7 8 IUB 2 7.8IUE 1 6 6 7 IUC 16 6.7IUE 20、根据米氏方程，不符合S与Km的关系的是A当S Km时，反应速度与底物浓度无关，成零级反应B当S vv Km时，反应速度与底物浓度成正比，成一级反应C 当S = Km 时，V 二 Vm / 2D 度量两者的单位是相同的E 当S = Km / 3 时，V 二 67%

10、VmA 丙氨酸+ a 酮戊二酸 丙氨酸+谷氨酸 B 谷氨酸 天冬氨酸 +a 酮戊二酸 草酸乙酸 +C肌酸+ATP 磷酸肌酸+ ADP DE 草酸乙酸 +NADH 苹果酸 + NAD丙酮酸 +NADH 乳酸 + NADB 21 、 AST 催化的反应D 22、 LDH 催化的反应C 23、 CK 催化的反应A磷酸苯二钠B 铁氰化钾C 4-AAPD酚E 碱性试剂B ALP (K ing )测定氧化剂C4、显色剂D2、标准物、27底物A ALT B ALP C GGTD E CK-MBA 28、肝细胞急性损伤最好的指旨标B POD 指示系统肌酐等）A 平衡法C 两者均有B 速率法D 两者均无A 47

11、 、 GOD-POD 测葡萄糖B 48 、碱性苦味酸法测肌酐 C 49 、 GLDH 测尿素C 50 、C 51 、A 酶试剂法测定 C 两 者血均清有钠、钾测定 血清氯、钙的测定B 离子选择电极法测定D 两者均无A 52 、血清磷的测定D 53 、血清总蛋白、清蛋白测定A 54 、血清 ALT 、 AST 测ABCD 55、酶偶联方法测定酶活性的有：A ALT B AST C CK D AMY E LDHABCD 56 、下列哪些因素影响酶活性的测定A 缓冲液的种类和离子强度 B PH C 反应温度D 激活剂浓度 E 比色皿光径BC 57、酶促反应指示物的检测波长为 405nm 的有A NA

12、DH B 4- 硝基酚 C 5-氨基 -2-硝基苯甲酸ABCD 58 ALT测定时，U A- B A的意义有D 磷钼酸E NADPHA 消除 2.4- 二硝基苯肼溶液的 A 值B消除a-酮戊二酸一2.4二硝基苯腙的A值C 消除血清色素的干扰D 消除血可能存在的酮酸的干扰BC 59、属于 Trinder 反应的色原物是 :A H2O2 B 酚 C 4-AAP D POD E CODACDE 60.以下说法正确的是A 当S Km时，反应速度与底物浓度成正比，成一级反应B. 当SKm时，反应速度与酶浓度成正比，酶促反应呈一级反应C. 零级反应时 V=Vman=KEC 29 、肝占位性病变D 30 、

13、急性胰腺炎E 40 、心肌梗死B 41 、骨骼疾病A NAD （ P ） H 指示系统C 两者均有 D 两者均无C 42 、葡萄糖测定C 43 、 TG 测定B 44 、胆固醇测定B 45 、尿酸测定D 46 、尿 TP 测定（ALT AST 胆汁酸 胆红素、D 一级反应是用工具酶测定各种代谢物浓度的方法学基础E. 零级反应是用于测定酶活性或浓度的方法学基础ABCD 61溶血时对测定结果有影响的血清酶是A、CK B、LDC、ALTD、AST E、GGTABE 62、ALP 活性升高可见于A、多发性骨肿瘤B、骨折C贫血D、甲低E、阻塞性黄疸AE 63、 G6PD 可用于测定A、葡萄糖B、淀粉酶C

14、、乳酸脱氢酶D、碱性磷酸酶E、肌酸激酶ACDE 64、下列代谢物与其酶法测定所用试剂的组合，正确的是A、尿酸一尿酸酶一过氧化氢酶B、葡萄糖一葡萄糖氧化酶一葡萄糖-6-磷酸脱氢酶C、尿素-尿素酶-谷氨酸脱氢酶D、三酰甘油一脂蛋白脂肪酶一甘油激酶E、胆固醇一胆固醇氧化酶一过氧化物酶ABDE 65、下列酶活性测定描述正确的是A、可测定产物的生成量B、可测定底物的消耗量C、与底物浓度无关D、需最适温度E需最适的酸碱度补充选择题：、A 1当底物浓度大于Km时,此时的反应速度为A .零级反应B.级反应C 二级反应D .混合级反应E.无法确定反应级D 2、为保证酶动力学分析，底物浓度最好是：A0.5KmB2

15、KmC25KmD1020Km E100Km3、连续监测法测定 ALT 所用的底物通常是： 对硝基苯酚磷酸钠C 4、测定下列哪种血清酶有助于鉴别 ALP 的来源AACP BAMSCGGTDLD ECKB 5、疾病时血清及尿液淀粉酶升高，应除外：A急性胰腺炎 B肝炎C.肠梗阻D急性腮腺炎E溃疡病穿孔 其它练习：1以NAD+还原为NADH反应为基础的生化分析，采用波长是nm,吸光度变化为当测定时其S:R=1:20时（酶速率法）结果计算是IU/L= A/minx factor, factor 为（附NADH在340nm毫克分子吸光系数为6. 22）2、SGPT测定中底物成分要求DL丙氨酸的浓度为2 0 0 mmol/L a 酮戊二酸浓度为2 mmol/L，现欲配制5 0 0 ml底物，各应取 多少mO（DL 丙氨酸 M W=89,a 酮戊二酸 M W=146）3、 CK测定实验原理中酶联的催化顺序。4、 SGPT测定（R F）的底物是,显色剂是，酶作用时间 分。5、AST催化+生成,。在指示酶的催化下，使 + 生成+,在波长nm下，连续监测吸光度变化， 从而测定AST的活力6、 01ml血清，在3 7C水浴中，使底物水解产生02mg酚，该标本的AKP活力是 多少金氏单位？（列出计算式，算出结果）