教学课件：第6章-一般毒性作用及其试验与评价方法

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1、第六章第六章 一般毒性作用及其一般毒性作用及其试验与评价方法试验与评价方法 毒性作用毒性作用一般毒性作用一般毒性作用（急性毒性、亚慢性毒性、慢性毒性）（急性毒性、亚慢性毒性、慢性毒性）特殊毒性作用特殊毒性作用（致突变作用、致癌作用、致突变作用、致癌作用、致畸作用、遗传毒性）致畸作用、遗传毒性）一般毒性作用一般毒性作用(general toxicity)(general toxicity)，也称，也称基础基础毒性毒性(basic toxicity)(basic toxicity)：是人和动物单次或：是人和动物单次或反复接触食品毒物或有害因素后在躯体及靶部反复接触食品毒物或有害因素后在躯体及靶部位

2、所发生或表现出的急性或长期的一般性中毒位所发生或表现出的急性或长期的一般性中毒症状、生理生化变化、组织病变及死亡现象。症状、生理生化变化、组织病变及死亡现象。即毒物对动物机体产生的综合毒效应。即毒物对动物机体产生的综合毒效应。根据毒物接触次数和效应发生时间长短，一般根据毒物接触次数和效应发生时间长短，一般毒性作用可划分为急性毒性、（蓄积毒性）、毒性作用可划分为急性毒性、（蓄积毒性）、亚慢性毒性和慢性毒性。亚慢性毒性和慢性毒性。第一节第一节 急性毒性作用及其评价急性毒性作用及其评价一、基本概念一、基本概念。（。（P122）急性毒性（急性毒性（acute toxicity）是指机体）是指机体(人或

3、实验人或实验动物动物)一次接触一次接触(或或2424小时内多次接触小时内多次接触)受试物后，受试物后，在短期内所产生的效应及反应，包括一般行为、在短期内所产生的效应及反应，包括一般行为、外观改变及形态改变，甚至死亡效应。外观改变及形态改变，甚至死亡效应。观察时间：一般为观察时间：一般为7 7天，也可连续观察天，也可连续观察14142828天。天。一次接触一次接触 (P122)(P122)q 经经口口接接触触和和各各种种方方式式的的注注射射接接触触，“一一次次接接触触”，是是指指在瞬间将受试化合物输入实验动物的体内；在瞬间将受试化合物输入实验动物的体内；q 而而经经呼呼吸吸道道吸吸入入与与经经皮

4、皮肤肤接接触触，“一一次次接接触触”是是指指在在一一个特定的期间内实验动物持续地接触受试化合物的过程个特定的期间内实验动物持续地接触受试化合物的过程;q 此此外外，当当化化学学物物毒毒性性较较低低时时，需需要要给给予予动动物物较较大大剂剂量量时时，可可在在2424小小时时内内分分多多次次给给予予，这这时时的的急急性性接接触触即即为为“多多次次”。二、急性毒性试验目的二、急性毒性试验目的1 1、测定和计算出急性毒性评价参数、测定和计算出急性毒性评价参数1927年年Trevan引引入入了了半半数数致致死死量量的的概概念念来来评评价价急急性性毒毒性性，此此后后，该该指指标标得得到到广广泛泛应应用用，

5、并并成成为为急急性性毒毒性的主要指标。性的主要指标。2 2、找出受试物的剂量、找出受试物的剂量-效应和剂量效应和剂量-反应关系反应关系 3 3、为毒作用机制研究提供线索。、为毒作用机制研究提供线索。急性毒性试验可以得到的毒性参数：急性毒性试验可以得到的毒性参数：绝对致死剂量或浓度绝对致死剂量或浓度(LD100或或LCl00)半数致死剂量或浓度半数致死剂量或浓度(LD50或或LC50)最小致死剂量或浓度最小致死剂量或浓度(MLD，LD01或或MLC，LC01)最大耐受剂量或浓度最大耐受剂量或浓度(MTD，LD0或或MTC，LC0)或称为最大非致死剂量或称为最大非致死剂量(MNLD)急性毒性急性毒

6、性LOAEL(观察到有害作用的最低剂量观察到有害作用的最低剂量)急性毒性急性毒性NOAEL(未观察到有害作用的剂量未观察到有害作用的剂量)急急性性毒毒性性的的下下限限参参数数，非非致致死死性性急急性性毒毒性性作作用用为为终终点点急急性性毒毒性性的的上上限限参参数数以以死死亡亡为为终终点点通过病理组织学和中毒症状观察等手段测定通过病理组织学和中毒症状观察等手段测定 三、急性毒性试验设计要点三、急性毒性试验设计要点 1 1、实验动物的选择和要求、实验动物的选择和要求品种、品系的选择品种、品系的选择健康状况：健康成年动物健康状况：健康成年动物 小鼠、大鼠测半数致死量，狗观察毒性反应。小鼠、大鼠测半数

7、致死量，狗观察毒性反应。年年龄龄：大大鼠鼠180-240g180-240g，小小鼠鼠18-25g18-25g（35-5035-50日日龄），龄），家兔家兔2-2.5kg2-2.5kg，豚鼠，豚鼠200-250g200-250g，狗，狗10-15kg10-15kg。性性别别：雌雌、雄雄各各半半，雌雌性性实实验验动动物物要要求求是是未未经交配和受孕的。经交配和受孕的。各剂量组动物数：各剂量组动物数：小动物数量为每组小动物数量为每组1010只，大动物也应每组只，大动物也应每组6 6只。只。2 2、剂量设计与分组、剂量设计与分组根据受试物或其近似物的物理、化学性质选择与本实根据受试物或其近似物的物理、

8、化学性质选择与本实验相同动物物种或品系，相同染毒途径的验相同动物物种或品系，相同染毒途径的LDLD5050值作为参值作为参考值，选择剂量系列。考值，选择剂量系列。一般分四组：高中低三个剂量组及一个阴性对照组一般分四组：高中低三个剂量组及一个阴性对照组3 3、确定实验动物染毒方法：、确定实验动物染毒方法：灌胃灌胃4 4、观察周期及观察内容、观察周期及观察内容 观察周期：一般为观察周期：一般为1414天或天或24h24h，但计算出，但计算出LDLD5050时应注明时应注明急性毒性试验的观察内容（急性毒性试验的观察内容（P132P132）中毒出现的时间和症状死亡时间及死亡数计算LD50剖检、生化及病

9、理学检查毒代动力学分析啮齿类动物急性毒性试验主要的观察项目啮齿类动物急性毒性试验主要的观察项目器官系统器官系统观察项目或中毒后的一般表现观察项目或中毒后的一般表现中枢神经系统中枢神经系统和躯体系统和躯体系统行为：姿态改变、叫声异常。不安、活动增多或少动行为：姿态改变、叫声异常。不安、活动增多或少动动作：痉挛、震颤、运动失调、麻痹、惊厥、强制性动作动作：痉挛、震颤、运动失调、麻痹、惊厥、强制性动作刺激反应：易兴奋，对外界刺激反应过敏或迟钝刺激反应：易兴奋，对外界刺激反应过敏或迟钝肌肉张力：强直，迟缓肌肉张力：强直，迟缓血液循环系统血液循环系统心动过速或过缓、心律不齐、血管收缩或舒张心动过速或过缓

10、、心律不齐、血管收缩或舒张呼吸系统呼吸系统呼吸深缓、呼吸过速、喘息、张口和腹式呼吸呼吸深缓、呼吸过速、喘息、张口和腹式呼吸胃肠系统胃肠系统恶恶心心、呕呕吐吐、腹腹泻泻；便便血血、尿尿血血、大大小小便便失失禁禁，便便秘秘；粪粪便便不成型，呈黑色或灰色不成型，呈黑色或灰色生殖泌尿系统生殖泌尿系统阴阴户户、乳乳腺腺膨膨胀胀、分分泌泌物物增增多多；阴阴茎茎突突出出、遗遗精精；会会阴阴部部污污秽有分泌物秽有分泌物眼眼 瞳孔放大或缩小，瞳孔对光反射；流泪，上眼脸下垂；眼球瞳孔放大或缩小，瞳孔对光反射；流泪，上眼脸下垂；眼球突出、充血，眼球震颤；角膜浑浊突出、充血，眼球震颤；角膜浑浊 皮肤和被毛皮肤和被毛

11、出现红斑、皮疹、水肿、坏死、脱毛、竖毛、松驰出现红斑、皮疹、水肿、坏死、脱毛、竖毛、松驰粘膜粘膜 结膜或口腔中分泌物增多，充血、苍白、黄疸结膜或口腔中分泌物增多，充血、苍白、黄疸其它其它 直肠或脚爪部皮肤温度降低或升高；姿势异常，消瘦等直肠或脚爪部皮肤温度降低或升高；姿势异常，消瘦等 5 5、LD50的计算方法：的计算方法：（1 1）改进寇氏法）改进寇氏法 P127改进寇氏法：计算简便，结果可靠。改进寇氏法：计算简便，结果可靠。试试验验设设计计要要求求：组组内内动动物物数数相相等等、组组间间剂剂量量等等比比例例设设计计、死死亡亡率率正正态态分分布布、最最低低剂剂量量组组死死亡亡率率80%计算公

12、式：计算公式：logLD50=X-i(p-0.5)X-最高剂量组对数值最高剂量组对数值 i -组距（相邻两组剂量对数值之差）组距（相邻两组剂量对数值之差）p-死亡率总和死亡率总和（2 2）霍恩法）霍恩法优点：简单易行，使用动物少优点：简单易行，使用动物少缺点：可信范围大，不够精确缺点：可信范围大，不够精确特点：特点：每组动物数是固定的，每组每组动物数是固定的，每组4 4只或只或5 5只只 剂量是固定的，有两种系列：剂量是固定的，有两种系列：10 10，21.521.5，46.4 46.4，100100，215215，464464，1000 1000 10 10，31.631.6，100100，

13、316316，10001000，31603160，即每个剂量组之间的剂量差距只能是即每个剂量组之间的剂量差距只能是2.152.15倍或倍或3.163.16倍倍应用程序：应用程序：确定每组动物数确定每组动物数，一般大小鼠，一般大小鼠5 5只，家兔只，家兔4 4只只 确定剂量系列确定剂量系列，常用的系列为：，常用的系列为：1.0010 1.0010t t(t=0(t=0、11、2)2)2.1510 2.1510t t 4.6410 4.6410t t 10.010 10.010t t 预试验预试验：如采用：如采用1010，100100，10001000mg/kgmg/kg的剂量的剂量 LDLD50

14、50可能在可能在100-1000mg/kg 100-1000mg/kg 不见死亡不见死亡 全部死亡全部死亡 正式试验正式试验：选择选择100100，215215，464464，1000mg/kg1000mg/kg（t=2t=2）四个剂量组）四个剂量组 观察并记录死亡数、死亡时间及中毒症状等。观察并记录死亡数、死亡时间及中毒症状等。如如 死亡数为死亡数为1 1，1 1，3 3，4 4 查表查表：根据动物死亡数查表（根据动物死亡数查表（P366P366）求得）求得LDLD5050 LDLD50502.78102.78102 2278278（125-619125-619）mg/kgmg/kg 四、急

15、性毒性的分级与评价（四、急性毒性的分级与评价（P134）急性毒性评价的最主要的依据就是急性毒性评价的最主要的依据就是LDLD5050 急性毒性评价急性毒性评价剂量达剂量达10g/kg10g/kg体重以上，仍不引起死亡体重以上，仍不引起死亡认为认为该受试物的急性毒性试验是安全的该受试物的急性毒性试验是安全的急性毒性急性毒性LDLD5050或或7 7天在喂养试验的最小有作用剂天在喂养试验的最小有作用剂量小于人的可能摄入量的量小于人的可能摄入量的1010倍倍表面该受试物表面该受试物急性毒性较大，应予以放弃，不再继续试验急性毒性较大，应予以放弃，不再继续试验急性毒性急性毒性LDLD5050大于人可能摄

16、入量的大于人可能摄入量的1010倍倍该受该受试物可进入下一阶段的试验试物可进入下一阶段的试验急性毒性急性毒性LDLD5050在在人可能摄入量的人可能摄入量的1010倍倍左右左右重重复试验复试验 LD50虽然是评价急性毒性的最重要指标，但虽然是评价急性毒性的最重要指标，但仅凭仅凭LD50进行急性毒性评价是不完善的。进行急性毒性评价是不完善的。因为仅仅因为仅仅LD50一个指一个指标只能反映急性毒性的大小，并不能反映毒性的其他标只能反映急性毒性的大小，并不能反映毒性的其他特征。因此，特征。因此，在评价和报告化学物急性毒性时，除在评价和报告化学物急性毒性时，除LD50外，还应报告外，还应报告LD509

17、5%可信限范围、急性毒作用带可信限范围、急性毒作用带等指标，并尽可能详尽描述中毒特征、症状表现、出等指标，并尽可能详尽描述中毒特征、症状表现、出现时间、死亡前兆、毒性作用的发生、发展、恢复经现时间、死亡前兆、毒性作用的发生、发展、恢复经过，以及体重、剖检和病理学变化等。过，以及体重、剖检和病理学变化等。从而较全面地从而较全面地对急性毒性做出评价。对急性毒性做出评价。免费茶水的重金属严重超标免费茶水的重金属严重超标 一份外国学者的研究指出，一份外国学者的研究指出，中国中国1313个品牌的香烟重金属含量超标个品牌的香烟重金属含量超标第二节第二节 蓄积毒性蓄积毒性 一、基本概念一、基本概念 P138

18、 当化学毒物连续、反复进入机体，而且进当化学毒物连续、反复进入机体，而且进入的速度（或总量）超过代谢转化与排出的速度入的速度（或总量）超过代谢转化与排出的速度（或总量）时，物质就有可能在体内逐渐增加并（或总量）时，物质就有可能在体内逐渐增加并贮留的现象贮留的现象-蓄积作用（蓄积作用（accumulationaccumulation）化学毒物容易蓄积的组织和器官化学毒物容易蓄积的组织和器官贮存库贮存库 蓄积蓄积作用作用物质蓄积物质蓄积（material accumulationmaterial accumulation）：）：指机体少量反复多次接触毒物后，该毒物在指机体少量反复多次接触毒物后，该

19、毒物在机体内逐渐积累。机体内逐渐积累。功能蓄积功能蓄积（functional accumulationfunctional accumulation）：）：指机体少量反复多次接触毒物后，每次引起指机体少量反复多次接触毒物后，每次引起的轻微功能损害逐渐积累，当积累到一定程度时的轻微功能损害逐渐积累，当积累到一定程度时出现毒性效应。出现毒性效应。蓄积作用的毒理学意义：蓄积作用的毒理学意义：发生慢性中毒的物质基础发生慢性中毒的物质基础评价该毒物能否引起慢性中毒的依据之一评价该毒物能否引起慢性中毒的依据之一制订卫生标准时选择安全系数的主要依据制订卫生标准时选择安全系数的主要依据 如：有机氯农药如：有机

20、氯农药DDTDDT和六六六、重金属铅的危和六六六、重金属铅的危害主要是它们的蓄积作用所造成的慢性毒性。害主要是它们的蓄积作用所造成的慢性毒性。二、蓄积毒性试验方法二、蓄积毒性试验方法 蓄积系数法蓄积系数法生物半减期法生物半减期法蓄积系数法蓄积系数法 蓄蓄积积系系数数是是指指多多次次染染毒毒使使半半数数动动物物出出现现效效应应（或或死死亡亡）的的蓄蓄积积剂剂量量EDED50(50(n n)与与一一次次染染毒毒使使半半数数动动物物出出现现相相同同效效应应（或或死死亡亡）的的剂剂量量EDED50 50(l)(l)的比值。的比值。K=ED50(n)/ED50(1)（以出现生物效应或特异性损伤为指标）（

21、以出现生物效应或特异性损伤为指标）或或K=LD50(n)/LD50(1)（以死亡为指标）（以死亡为指标）n多次接触受试物时产生预期效应的蓄积剂量的总和多次接触受试物时产生预期效应的蓄积剂量的总和 1一次接触该物质产生相同效应的一次剂量一次接触该物质产生相同效应的一次剂量蓄积系数蓄积系数K K蓄积毒性分级蓄积毒性分级K K1 1高度蓄积高度蓄积1K1K3 3明显蓄积明显蓄积3K3K5 5中等蓄积中等蓄积K5K5轻度蓄积轻度蓄积蓄积系数分级标准：蓄积系数分级标准：K=ED50(n)/ED50(1)或或K=LD50(n)/LD50(1)蓄积系数法常用的实验方案：蓄积系数法常用的实验方案：固定剂量法固

22、定剂量法剂量递增法剂量递增法剂量固定的剂量固定的2020天蓄积法天蓄积法 试试 验验方方 法法 分分 组组染毒时间染毒时间 剂剂 量量（LDLD5050）染毒染毒 终终 止止观察期观察期 固固 定定剂量法剂量法2-4组组（含对照组）（含对照组）雌雄各半雌雄各半 每日一次每日一次同一时间同一时间1/201/20 1/51/5染毒剂量累计达到染毒剂量累计达到5个个LD50剂量剂量 25 100天天 剂剂 量量递增法递增法实验组实验组对照组对照组 同上同上4天为一期天为一期见表见表实验组累积半数死实验组累积半数死亡或亡或2121天结束天结束 21天天 20 天天蓄积法蓄积法随机分随机分5 5组组（含

23、对照组）（含对照组）雌雄各半雌雄各半 每日一次每日一次同一时间同一时间连续连续2020天天 对照对照1/20 1/10 1/5 1/220天天20 2727天天剂量递增法使用剂量表：剂量递增法使用剂量表：接触天数（天）接触天数（天）14589121316172021242528每日接触剂量每日接触剂量（LD50）0.100.150.220.340.500.751.124日接触总剂量日接触总剂量（LD50）0.400.600.901.362.003.004.48累积接触总剂累积接触总剂量（量（LD50）0.40 1.00 1.90 3.26 5.26 8.26 12.74蓄积毒性试验的目的：蓄积

24、毒性试验的目的：求出外源化学物的蓄积系数，了解蓄积毒性大小求出外源化学物的蓄积系数，了解蓄积毒性大小为慢性毒性试验和其它有关毒性试验的剂量选择提为慢性毒性试验和其它有关毒性试验的剂量选择提供参考依据供参考依据 为制定有毒物质在食品中的卫生限量标准时，为安为制定有毒物质在食品中的卫生限量标准时，为安全系数的选择提供参考全系数的选择提供参考确定该受试物可否用于食品供人类长期食用确定该受试物可否用于食品供人类长期食用三、机体的耐受性三、机体的耐受性 机体对化学物的耐受性：一些化学物在体内蓄积到机体对化学物的耐受性：一些化学物在体内蓄积到应该产生中毒反映的剂量时却没有出现中毒反应，必须应该产生中毒反映

25、的剂量时却没有出现中毒反应，必须再再加大剂量加大剂量才能出现预期的中毒反应的现象。才能出现预期的中毒反应的现象。机体对化学物的蓄积和耐受往往是同时存在的！机体对化学物的蓄积和耐受往往是同时存在的！农药、兽药残留！农药、兽药残留！第三节第三节 亚慢性毒性作用亚慢性毒性作用 一、基一、基本概念本概念 定定义义：亚亚慢慢性性毒毒性性是是指指实实验验动动物物连连续续多多日日接接触触较大剂量较大剂量的外源化学物所出现的中毒效应。的外源化学物所出现的中毒效应。较大剂量较大剂量 -没有明确的剂量范围下限没有明确的剂量范围下限 但剂量上限但剂量上限 急性急性LDLD5050。较长时间较长时间 -通常为通常为3

26、 36 6个月，由试验的目的而定。个月，由试验的目的而定。亚慢性毒性试验目的：亚慢性毒性试验目的：主要是为慢性毒性试验做准备！主要是为慢性毒性试验做准备！1 1、确确定定其其观观察察到到有有害害作作用用的的最最低低剂剂量量（LOAELLOAEL）和和未未观观察察到到有有害害作作用的剂量（用的剂量（NOAELNOAEL），），初步提出这种受试物的安全限量参考数值。初步提出这种受试物的安全限量参考数值。2 2、确定受试物亚慢性毒性的效应谱，毒作用特点和靶器官。、确定受试物亚慢性毒性的效应谱，毒作用特点和靶器官。3 3、研究受试物亚慢性毒性损害的可逆性。、研究受试物亚慢性毒性损害的可逆性。4 4、为

27、慢性毒性试验的剂量设计及观察指标选择提供依据。、为慢性毒性试验的剂量设计及观察指标选择提供依据。5 5、为为在在其其它它试试验验中中发发现现的的或或未未发发现现的的毒毒作作用用提提供供新新的的信信息息，比比较较不不同同动动物物物物种种毒毒效效应应的的差差异异，为为受受试试物物毒毒作作用用机机制制研研究究和和将将研研究结果外推到人提供依据。究结果外推到人提供依据。二、亚慢性毒性试验设计的要点二、亚慢性毒性试验设计的要点（一）试验动物的选择（一）试验动物的选择1 1、物种品系：、物种品系：啮齿类、非啮齿类啮齿类、非啮齿类2 2、性别：、性别：雌雄各半雌雄各半3 3、年龄、年龄/体重：体重：断乳不久

28、的动物断乳不久的动物 如大鼠如大鼠8080100g100g（21-2321-23日龄），小鼠日龄），小鼠15g15g左右（左右（18-2118-21日龄）日龄）4 4、动物数：、动物数：大小鼠每组大小鼠每组2020只，犬猴每组只，犬猴每组66只；只；5 5、环环境境要要求求：应应使使用用SPFSPF及及以以上上等等级级动动物物；符符合合国国家家实验动物标准的实验环境。实验动物标准的实验环境。（二）染毒方式（二）染毒方式一般采用经口、经呼吸道、经皮肤染毒一般采用经口、经呼吸道、经皮肤染毒经口染毒多采用经口染毒多采用掺入饲料法掺入饲料法两个基本原则：两个基本原则：尽尽量量模模拟拟人人类类在在环环境

29、境中中接接触触该该化化学学物物的的途径或方式；途径或方式；应应与与预预期期进进行行慢慢性性毒毒性性试试验验的的接接触触途途径径相一致。相一致。（三）剂量分组（三）剂量分组 至少设四组：至少设四组：3 3个剂量组和个剂量组和1 1个阴性对照组个阴性对照组高剂量组高剂量组以急性毒性试验的阈剂量或以以急性毒性试验的阈剂量或以LDLD5050为参考为参考应能引起明显的毒性或少量动物死亡（应能引起明显的毒性或少量动物死亡（10%10%）中剂量组中剂量组相当于观察到有害作用的最低剂量（相当于观察到有害作用的最低剂量（LOAELLOAEL）低剂量组低剂量组应应无无中中毒毒反反应应，相相当当于于未未观观察察到

30、到有有害害作作用用剂剂量量（NOAELNOAEL），可可依依据据急急性性毒毒性性的的阈阈剂剂量量或或急急性性LDLD5050的的1/201/201/51/5确定确定（四）观察指标（四）观察指标1 1一般性指标：一般性指标：（1 1）外观体征、行为活动：）外观体征、行为活动：每日观察、记录每日观察、记录（2 2）体重：）体重：一般每周称重一次一般每周称重一次（3 3）饲料消耗量：）饲料消耗量：每周记录，计算每周记录，计算食物利用率食物利用率 食物利用率是指动物每食入食物利用率是指动物每食入100g100g饲料所增长的体重克数。饲料所增长的体重克数。（4 4）异常表现、中毒症状）异常表现、中毒症状

31、2 2实验室检查：实验室检查：血象检查、尿液；肝、肾功能的检测血象检查、尿液；肝、肾功能的检测3 3病理解剖学和组织学检查病理解剖学和组织学检查4 4其他指标其他指标观察指标三、亚慢性毒性作用的评价三、亚慢性毒性作用的评价亚亚慢慢性性毒毒性性无无作作用用剂剂量量（NOAELNOAEL）人人的的可可能能摄摄入入量的量的100100倍倍，表示，表示毒性很强毒性很强，放弃该化学物的使用；，放弃该化学物的使用；在在100100300300倍之间的，可进行慢性毒性试验倍之间的，可进行慢性毒性试验如如300300倍倍的的不不必必进进行行慢慢性性毒毒性性试试验验，可可直直接接进进行行毒毒性性评评价价第四节第

32、四节 慢性毒性作用及其试验慢性毒性作用及其试验 一、基本概念一、基本概念 慢慢性性毒毒性性是是指指实实验验动动物物长长期期小小剂剂量量反反复复接接触受试物所引起的毒性效应。触受试物所引起的毒性效应。长长期期：小小鼠鼠一一般般为为1818个个月月（寿寿命命1-21-2年年），大大鼠鼠为为2424个月个月（寿命（寿命2-32-3年）年），其他动物，其他动物2 2年，甚至终身。年，甚至终身。二、慢性毒性试验设计二、慢性毒性试验设计（一）实验动物的选择（一）实验动物的选择 1 1、物种品系：、物种品系：啮齿类、非啮齿类啮齿类、非啮齿类2 2、性别：、性别：雌雄各半雌雄各半3 3、年龄、年龄/体重：体重

33、：初断乳动物初断乳动物 如大鼠如大鼠505070g70g，小鼠，小鼠101015g15g左右左右4 4、动物数：、动物数：大小鼠每组大小鼠每组40406060只，犬猴每组只，犬猴每组8 81212只只繁殖特性：小鼠成熟早，繁殖力强，寿命1-3年。新生仔鼠周身无毛，通体肉红，两眼不睁，两耳粘贴在皮肤上。一周开始爬行，12天睁眼，雌鼠35-50日龄性成熟，配种一般适宜在65-90日龄，妊娠期19-21天，每胎产仔8-12只。（二）染毒途径：（二）染毒途径：经口染毒，多用饲喂法经口染毒，多用饲喂法 染毒期限：染毒期限：小鼠小鼠1818个月、大鼠个月、大鼠2 2年年（三）剂量设计与分组（三）剂量设计与

34、分组 3 3个剂量组和个剂量组和1 1个对照组，个对照组，剂量参考亚慢性毒性剂量参考亚慢性毒性作用阈剂量或作用阈剂量或LDLD5050（四）观察指标（四）观察指标 基本同于亚慢性试验基本同于亚慢性试验 重点观察亚慢性试验中的阳性指标。重点观察亚慢性试验中的阳性指标。三、慢性毒性作用的评价三、慢性毒性作用的评价最大无作用剂量最大无作用剂量人群可能摄入量的人群可能摄入量的5050倍倍 表示毒性较强，应予以放弃表示毒性较强，应予以放弃在在5050100100倍之间，需相关专家共同评议倍之间，需相关专家共同评议100100倍的则可以考虑在食品中使用，并制定卫生标准倍的则可以考虑在食品中使用，并制定卫生标准第五节、局部毒作用第五节、局部毒作用皮肤原发性刺激试验皮肤原发性刺激试验皮肤致敏反应试验皮肤致敏反应试验光致敏反应光致敏反应光刺激试验光刺激试验眼刺激试验眼刺激试验其他粘膜刺激试验其他粘膜刺激试验替代（体外）试验替代（体外）试验思考题思考题1 1、什么是急性毒性、亚慢性毒性、慢性毒性？、什么是急性毒性、亚慢性毒性、慢性毒性？2 2、亚慢性毒性试验和慢性毒性试验在选择实验动、亚慢性毒性试验和慢性毒性试验在选择实验动物的原则上以及评价指标与急性毒性试验有何异物的原则上以及评价指标与急性毒性试验有何异同点？同点？