尿理学及湿化学检验

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1、尿理学及湿化学检验 尿 液 pH测 定l 原 理 PH试 纸 是 多 种 指 示 剂 适 当 配 合 的 试 带 ，显 色 范 围 为 棕 红 至 深 黑l 器 材 洁 净 试 管 或 尿 杯 。l 试 剂 pH广 泛 试 纸 1套 (包 括 试 带 和 标 准 色 板 )。l 标 本 新 鲜 尿 液 。 操 作 l 将 手 洗 净 擦 干 或 配 戴 手 套 ， 取 试 纸 1条 ， 将 其一 端 浸 入 尿 液 约 0.5s取 出 自 然 光 线 下 与 标 准 色板 比 色 读 取 尿 液 pH。 注 意 事 项 l 1 试 带 应 密 封 、 避 光 、 干 燥 保 存 ， 远 离 酸

2、 性和 碱 性 物 质 以 防 失 效 。l 2 在 规 定 时 间 内 比 色 ， 1min内 。 l 3 标 本 应 新 鲜 ， 放 置 过 久 会 因 细 菌 繁 殖 或 丧失 挥 发 性 酸 而 使 pH增 高 。 尿 比 密 测 定 （ 折 射 仪 法 ）目 的 熟 悉 折 射 仪 的 工 作 原 理 、 使 用 及 校 正 方 法 。原 理 折 射 率 与 媒 质 的 密 度 有 关 ， 密 度 越 高 ， 折 射 率越 大 ； 其 次 也 与 光 的 波 长 及 温 度 有 关 。 经 过 大 批 量 尿 标 本 的 研 究 ， 已 经 建 立 了 折 射 率 、 比 密 和 总

3、固 体 量 的 经 验 公 式 ， 并 将 数 字 列 成 线 图 刻 在 目 镜 系 列 的 适 当 位 置中 ， 测 量 时 直 接 读 数 即 可 。 器 材 临 床 折 射 计 ， 尿 杯 、 吸 水 纸 、 滴 管 、 镊 子 。 标 本 新 鲜 尿 液 。 操 作 零 点 校 准 每 次 测 试 前 必 须 用 纯 净 水 进 行 零点 校 准 ： 向 标 本 室 中 加 入 足 够 的 蒸 馏 水 ， 轻 微调 节 旋 转 螺 丝 使 边 界 线 重 合 在 1.000刻 线 上 。 标 本 测 定 程 序 拭 干 标 本 室 和 标 本 盖 上 的 蒸馏 水 ， 在 标 本 室

4、 内 滴 入 足 够 的 尿 液 ， 通 过 接 目镜 读 取 数 值 或 查 表 得 出 结 果 。 注 意 事 项 l 1 用 过 的 滤 纸 、 棉 球 等 应 及 时 焚 毁 ， 以 免 污染 环 境 。l 2 尿 酸 盐 所 致 的 浑 浊 可 影 响 结 果 ， 需 要 加 温溶 解 后 再 测 定 ， 切 不 可 弃 去 。l 3 细 胞 等 有 形 成 分 增 多 时 ， 应 离 心 后 测 定 上清 液 ， 测 试 完 毕 后 用 纯 净 蒸 馏 水 擦 拭 干 净 。 尿 蛋 白 测 定 （ 磺 基 水 杨 酸 法 ）目 的 掌 握 尿 蛋 白 定 性 的 磺 基 水 杨

5、酸 法 原 理 及 操 作原 理 在 酸 性 条 件 下 ， 磺 基 水 杨 酸 的 磺 酸 根 离 子 与 蛋 白 质 氨 基 酸 阳 离 子 结 合 ， 形 成 不 容 性 的 蛋 白 盐 沉 淀 ， 沉 淀 的 程 度 可 反 映 蛋 白 质 含 量 。 l 器 材 小 试 管 、 滴 管 、 吸 管l 试 剂 200g/l磺 基 水 杨 酸 溶 液l 标 本 人 工 蛋 白 尿 操 作1 加 尿 液 取 小 试 管 2支 ， 各 加 清 晰 尿 液 lml。2 加 试 剂 于 第 1支 试 管 内 滴 加 磺 基 水 杨 酸 溶 液 2滴 ， 轻 轻 混 匀 ； 另 1支 试 管 不

6、加 试 剂 作 空 白 对 照 ， 1min内 观 察 结 果 。3 判 断 结 果 按 P70表 2-2判 断 阳 性 程 度 及 蛋 白 质 的 含 量 注 意 事 项1 该 法 灵 敏 ， 极 轻 微 反 应 无 意 义 。 判 断 结 果 应 及时 ， 否 则 会 使 阳 性 增 高 。2 尿 液 偏 碱 时 (pH9)， 磺 基 水 杨 酸 法 可 呈 假 阴 性 ；尿 液 偏 酸 (pH3)也 会 引 起 蛋 白 定 性 假 阴 性 。 应 先将 尿 液 PH值 调 到 5 6。3 含 碘 造 影 剂 、 大 剂 量 青 霉 素 等 也 可 使 反 应 呈 假阳 性 ， 但 其 反

7、 应 与 蛋 白 尿 不 同 ， 应 仔 细 观 察 并 结合 用 药 情 况 综 合 分 析 。4 尽 量 指 导 患 者 采 集 中 段 尿 ， 或 离 心 后 测 定 。 l 原 理 ： 根 据 葡 萄 糖 氧 化 酶 法 反 应 原 理 ， 葡 萄 糖氧 化 酶 特 异 性 氧 化 葡 萄 糖 ， 生 成 葡 萄 糖 醛 酸 和过 氧 化 氢 ， 过 氧 化 氢 在 过 氧 化 物 酶 的 作 用 下 ，使 指 示 剂 氧 化 而 呈 现 颜 色 变 化 。l 标 本 ： 新 鲜 尿l 器 材 ： 一 次 性 尿 杯 、 尿 糖 试 纸尿 葡 萄 糖 定 性 检 查 （ 一 ） 尿 糖

8、 试 纸 法 操 作l 、 将 试 纸 的 试 垫 区 浸 入 样 本 中 约 秒 钟 ， 并将 其 取 出l 、 让 试 纸 的 边 缘 沿 着 样 本 容 器 口 轻 轻 撩 拭 ，以 去 除 残 余 的 尿 液l 、 横 握 试 纸 ， 在 秒 内 与 瓶 签 上 的比 色 图 谱 比 较 ， 记 录 结 果 。 试 纸 与 标 准 色 版 相同 颜 色 即 为 尿 样 的 尿 糖 值 ， 如 反 应 颜 色 在 两 个标 准 色 版 颜 色 之 间 ， 则 该 尿 样 的 尿 糖 值 也 介 于两 者 之 间 。 注 意 事 项l 、 用 清 洁 干 燥 的 容 器 收 集 新 鲜 尿

9、 液 并 尽 快 检测 ， 尿 样 在 室 温 下 的 放 置 时 间 不 可 超 过 小 时 ，否 则 应 将 尿 样 保 存 在 冰 箱 中 并 在 小时 内 检 测 ， 不 要 在 尿 样 中 加 防 腐 剂 ， 尿 样 不 可离 心 ， 测 试 前 要 将 尿 样 混 匀 。 注 意 事 项l 、 温 度 越 低 ， 反 应 所 需 要 的 时 间 要 相 应 延 长l 、 尿 糖 浓 度 时 通 过 试 纸 由 蓝 色 棕 色 的 颜 色 变化 来 指 示 ， 蓝 色 为 无 尿 糖 ， 棕 色 越 深 ， 尿 糖 越高 。 l （ 二 ） 班 氏 法 （ 讲 解 ）l 目 的 掌

10、握 班 氏 法 原 理 方 法l 原 理 葡 萄 糖 或 其 他 还 原 性 的 糖 的 醛 基 在 热 硷性 溶 液 中 ， 能 将 班 氏 试 剂 的 兰 色 硫 酸 铜 还 原 为黄 色 的 氢 氧 化 铜 ， 进 而 形 成 红 色 氧 化 亚 铜 沉 淀l 器 材 试 管 架 、 中 试 管 、 滴 管 、 试 管 夹 、 酒 精灯l 试 剂 班 氏 试 剂 操 作1 鉴 定 班 氏 试 剂 质 量 取 中 号 试 管 1支 ， 加 入班 氏 试 剂 2.0ml， 摇 动 试 管 徐 徐 加 热 至 沸 腾 ，观 察 试 剂 有 无 颜 色 及 性 状 变 化 ， 若 试 剂 仍 为

11、 透明 蓝 色 ， 可 进 行 以 下 实 验 。2 加 尿 液 向 班 氏 试 剂 中 加 离 心 后 的 尿 液0.2ml(约 4滴 )， 混 匀 。3 加 热 煮 沸 继 续 煮 沸 1 2min， 或 置 沸 水 浴5min， 自 然 冷 却 。4 判 断 结 果 注 意 事 项 1 试 剂 与 尿 液 的 比 例 为 10： 1。 2 煮 沸 时 应 不 时 摇 动 试 管 以 防 爆 沸 喷 出 ， 也 可在 沸 水 浴 中 实 验 。 3 检 验 糖 尿 病 患 者 尿 液 中 葡 萄 糖 ， 应 空 腹 或 餐后 2h留 取 尿 标 本 。 目的 掌 握 改 良 Rothera

12、法 尿 酮 体 定 性 的 方 法 。 原理 亚 硝 基 铁 氢 化 钠 Na2Fe(CN)52H2O遇 尿 分 解 为Na4Fe(CN)6、 NaNO2、 Fe(OH)3和 Fe(CN)53- 如 尿 中 存 在 可检 出 量 的 酮 体 (丙 酮 、 乙 酰 乙 酸 )， 在 碱 性 环 境 中 即 与 试 剂作 用 生 成 异 硝 基 (HOON=)或 异 硝 基 胺 (NH2OON=)， 后 者与 Fe(CN)53-生 成 紫 红 色 化 合 物 。 器材 试 管 或 载 玻 片 、 药 匙 、 滴 管 。 试剂 Rothera试 剂 。 标本 新 鲜 尿 液 。尿 酮 体 测 定 （

13、 改 良 Fe(CN)53-法 ） l 操 作 l 1 加 入 酮 体 粉 于 载 玻 片 上 (或 试 管 内 )， 加入 1小 勺 酮 体 粉 。l 2 加 尿 液 滴 加 尿 液 于 酮 体 粉 上 ， 至 完 全 将酮 体 粉 浸 湿 。l 3 观 察 结 果 观 察 酮 体 粉 的 颜 色 变 化 ， 5min内 出 现 紫 色 者 为 阳 性 。l 4 判 断 结 果 判 断 结 果 的 标 准 见 P76表 2-5。尿 酮 体 测 定 （ 改 良 Fe(CN)53-法 ） 作 业l 1.列 表 比 较 湿 化 学 法 与 试 带 法 的 不 同l 2.列 表 说 明 4个 实 验 的 影 响 因 素