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1、蛋 白 质 修 饰 与 基 因 表 达 蛋 白 质 泛 素 化 制 作 人 ： 孟 海 涛 丁 锦 君 蛋 白 质 的 修 饰 包 含 甲 基 化 ， 磷酸 化 ， 乙 酰 化 ， 泛 素 化 等 ， 各种 修 饰 在 基 因 表 达 转 录 和 翻 译过 程 中 发 挥 重 要 作 用 ， 本 次 讲 泛 素 化 在 拟 南 芥 脱 落 酸调 控 中 的 作 用 。 首 先 了 解 和 下 面 要 讲 到 的 几 个 名 词 泛 素 化 ； 泛 素 化 是 对 特 异 的 靶 蛋 白 进 行 泛素 修 饰 的 过 程 。 在 蛋 白 质 分 子 一 个 位 点 上结 合 单 个 或 多 个
2、泛 素 残 基 的 现 象 。 自 泛 素 化 ： 指 本 身 含 有 结 合 泛 素 分 子 的 能力 ， 进 行 降 解 。 这 里 特 指 KEG蛋 白 自 降 解过 程 KEG基 因 ： 拟 南 芥 的 一 段 功 能 基 因 ， 翻 译出 KEG蛋 白 ， 此 蛋 白 包 含 泛 素 化 酶 E3连 接酶 和 激 酶 域 。 KEG E3连 接 酶 ： 协 助 泛 素 分 子 中 间 体 结 合到 靶 蛋 白 ， 降 解 靶 蛋 白 作 用 。 ABI5： ABA的 转 录 因 子 ， 在 体 内 高表 达 时 ， 会 抑 制 种 子 的 萌 发 和 集体 的 生 长 。 ABA;脱
3、 落 酸 ， 指 能 引 起 芽 休 眠 、叶 子 脱 落 和 抑 制 生 长 等 生 理 作 用的 植 物 激 素 。 一 ， KEG基 因 ： keg-1(KEG基 因 的 双 隐 性 突 变 体 )， 不 产 生KEG蛋 白 。 keg-1/35S:HA-KEG； 有 HA标 记 基 因 的 单 显杂 合 体 ， 能 产 生 KEG蛋 白 。 keg-1/35S:HA-KEGAA： 有 HA标 记 基 因 的 单显 杂 合 体 ， 但 不 能 产 生 完 整 功 能 的 KEG蛋 白 ，KEG基 因 部 分 区 域 被 改 变 （ 29-cys,31-his, 变 成 了 Ala） 。
4、KEG基 因 与 ABI5关 系ABI5抗 体 杂 交 实 验 ， 检 测 ABI5表 达 量 高 低 ， keg-1(KEG基 因 的 双 隐 性 突 变 体 )， 不 产 生KEG蛋 白 ， ABI5含 量 + keg-1/35S:HA-KEG； 有 HA标 记 基 因 的 单 显杂 合 体 ， 能 产 生 KEG蛋 白 ， ABI5含 量 + keg-1/35S:HA-KEGAA； 产 生 无 活 性 的 KEG蛋 白 ， ABI5含 量 + 通 过 许 多 其 他 实 验 证 实 ：KEG蛋 白 中 E3连 接 酶 具 有 靶 向 连 接 ABI5泛 素 化 作 用 ， 使 之 被 2
5、6S蛋 白 酶 体 降解 。 使 具 有 抑 制 植 物 生 长 发 育 的ABI5含 量 的 降 低 ， 植 物 能 生 长 。即 KEG正 常 表 达 ， 降 解 ABI5含 量 ， 解 除生 长 抑 制 ， 能 生 长 。 KEG基 因 与 ABA 以 及 通 过 其 他 实 验 证 实 ： 1.KEG过 量表 达 ， 对 ABA作 用 就 失 敏 2. KEG基 因 表 达 与 泛 素 化 作 用 蛋 白 酶 体 抑 制 剂 MG132.抑 制 26S蛋 白酶 体 对 KEG蛋 白 降 解 。 STAU激 酶 抑 制剂 ， 抑 制 KEG蛋 白 自 泛 素 化 。 （ 所 用的 类 型 都 为 keg-1/35:HA-KEG） 总 结 KEG与 ABI5,ABA关 系
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