2022届高三生物二轮复习生物实验知识梳理汇总

《2022届高三生物二轮复习生物实验知识梳理汇总》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2022届高三生物二轮复习生物实验知识梳理汇总（59页珍藏版）》请在装配图网上搜索。

1、高考生物实验知识梳理(-)一、课本实验考点知识归纳【表一】提取鉴定类实验实验名称鉴定对象主要试剂颜色水浴加热生物材料生物组织中糖类的鉴定淀粉碘液蓝色尢脱色的叶片还原糖需 色 试 剂(班 氏 试破红色需要蚩臼放的鉴定蚤门质双缩麻试剂紫色尢脂肪的鉴定脂肪苏丹III鳖无苏丹VI红色叶绿体中色素的提取和分离四种色素提取内酮或尢水乙醇尢分离层析液胡萝卜素：橙黄色叶黄素：黄色叶 绿 素a：蓝绿色前 绿 素b：黄绿色D N A粗提取与鉴定D N A7E二基股试剂监色布妥提取0.1 4 m o l/L氯化钠溶液无鸡血细胞119 5%冷酒精【表二】观察类实验实验名称观察方式观察对象显微镜染色剂玻片标本生物材料观

2、察叶绿体原色观察叶绿体高倍无临时装片苔葬的叶片或菠菜叶的小表皮稍带点叶肉细胞观察细胞质流动细胞质，以叶绿体作参/昭、高倍无临时装片黑藻的叶片观察质壁分离与复原紫色大液泡高倍无撕片法制作临时装紫色洋葱的外表皮-1 -片观察有丝分裂染色观察染色体高倍龙胆紫或醋酸洋红压片法制作临,装洋葱根尖脂肪的鉴定脂肪高倍苏丹m或苏丹W切片法得 戛片花生种子【表三】实习、研究性课题实习、研究性课题调查对象统计方法计算手段个体总数（N）再次捕获个体数一重播的杆士个体粒种群密度的取样调查动物（活动范围较大）标志重捕法所有样方内个体总个样方的总面积植物（不活动或活动范围较小）样方法发病率-患 忌 遨-1 0 0%被调查

3、人数4 -亦知由 污染区域r节 水 程 度-沪 调 杏 区 怙 X 1 0 0%调查人群中的遗传病人类某种遗传病汇总法调查环境污染对生物的影响环境污染程度汇总法-2-【表四】实验原理归纳实验目的实验原理植物必需矿质元素的确定缺乏该元素时，植物表现出相应病症；补充后，缺乏症消失鉴定还原性糖斐林试剂与还原糖在沸水浴下反应生成枝红色沉淀鉴定蛋白质双缩胭试剂与蛋白质反应生成紫色物质鉴定淀粉淀粉遇碘后形成紫蓝色的复合物鉴定脂肪苏丹w可将脂肪染成红色、苏丹i n 可将脂肪染成橘黄色鉴 定 D N A二苯胺在加热情况下可将D N A 染成蓝色检测血糖或尿糖班氏试剂可与葡萄糖在加热情况下反应生成砖红色沉淀提取

4、叶绿体中的色素色素可溶于丙酮等有机溶剂分离叶绿体中的色素不同色素在层析液中的溶解度不同观察植物细胞的质壁分离与复原细胞壁的伸缩性比原生质层的伸缩性小、渗透作用糖渍盐渍食品不易变质高浓度的糖或盐溶液使细菌等发生渗透作用严重失水而死亡检测人类的遗传病和传染病D N A 分子杂交（D N A 探针或基因探针与被测D N A 或基因的单链碱基互补配对）动物细胞培养细胞分裂用培养的动物细胞鉴定物质的毒性有毒物质可使培养的动物细胞发生染色体结构和数目的变异转基因抗虫棉的培育过程遗传学原理是基因重组、细胞学原理是细胞的全能性植物体细胞杂交细胞膜的流动性、细胞的全能性单倍体育种遗传学原理是基因重组和染色体变异

5、、细胞学原理是细胞的全能性多倍体育种秋水仙素可抑制有丝分裂过程中纺锤体的形成，导致染色体不分离，使细胞不能分裂，从而形成染色体加倍的细胞，该细胞以后正常分裂发育成多倍体组织或个体人工诱变育种基因突变通过杂交培育高产杂种作物利用杂种优势合理密植生态学原理是根据种内斗争的原理确定株距，增加植株周围的C 02浓度，植物生理学原理是增加光合作用面积，提高光能利用率中耕松土增 加 土 壤 中 的 含 量，促进根细胞的有氧呼吸，有利于矿质元素的吸收；增强硝化细菌的活动，使土壤中的NO那加；促进需氧型分解者的分解作用；抑制反硝化细菌的活动减少土壤中N的流失轮作（在同一块土地上不同年份种植不一样的作物）充分利

6、用土壤中的矿质元素，防止土壤肥力枯竭，改变原有食物链，降低害虫的危害程度。间作套种（即不同作物同年份在同一块土地上间行种植或高矮套种）通过增加光合作用面积，控制光照强度，提高植株间C 0 2 浓度等提高光能利用率一年一耕改为一年两耕延长光合作用时间，提高光能利用率阴雨天适当降低温度并保持昼夜温差在弱光下降温不会降低光合作用但可降低呼吸作用对有机物的消耗，保证有机物的积累合理施肥的原理不同植物对各种必需的矿质元素的需要量不同。同一植物在不同的生长发育阶段，对 K、P等各种必需的矿质元素的需要量也不同合理施肥就是指根据植物的需肥规律，适时地、适量地施肥，以便使植物体茁壮成长，并且获得少肥高效的结果

7、。细胞分化的原理基因的选择性表达-3-【表五】实验材料的选择和处理实验材料优点备注鉴定植物组织中可溶性还原糖梨富含还原糖，颜色近于白色不用胡萝卜：避免材料的颜色对实验结果的影响观察细胞质流动新鲜的黑藻嫩叶新鲜、含水量多、含叶绿体多、叶片薄、取材方便观察植物细胞的质壁分离紫色洋葱鳞片叶细胞液呈紫色，便于观察若用无色透明的材料，则需使用平面反光镜，缩小先阖鉴定植物组织中的脂肪花生富含脂肪，便于切片获取较纯净的细胞膜哺乳动物的红细胞不含细胞核、细胞器等膜结构验证遗传规律豌豆自花传粉、闭花授粉，自然状态下是纯种、有许多稳定的、易区分的相对性状果蝇种类多、繁殖快、容易饲养；有许多稗定的、易区分的柏对性状

8、恩格尔曼的实验水绵有细而长的带状叶绿体，而且螺旋状的分布在细胞中，便于观察和分析研究研究植物的呼吸商种子不进行光合作用，排除光合作用对结果的影响测定绿色器官的呼吸速率：黑暗条件下进行研究甲状腺激素促进幼示动物发育蝌蚪胚后发育为变态发育容易出现实验结果DNA的粗提取与鉴定鸡血细胞液含有细胞核有性杂交实验玉米雌雄同株异花，便于去雄，利于杂交；培育周期短，后代数量多便于数学统计、分析；有许-4-多稳定的、易区分的相对性状【表六】几种重要的培养基/液成分培养基用途成分无土栽培的完全营养液 含1 4种必需矿质元素、水动物细胞培养液水、无机盐、动物血清、葡萄糖、氨基酸、维生素植物组织培养基水、矿质元素、植

9、物激素、有机小分子(维生素、琼脂、蔗糖、某些氨基酸)微生物培养基根据微生物种类、培养目的选择材料(碳源、氮源、水、生长因子、无机盐)选择培养基(分离微生物)不加碳源、不加氮源、添加青霉素、添加高浓度食盐等二、实验设计总结1.常用仪器、试剂或药品的用途(1)NaOH：用于吸收CO2或改变溶液的pH(2)Ca(OH)2：鉴定CO2(3)CaC12：提高细菌细胞壁的通透性(4)HC1：解 离(1 5%)或改变溶液的 pH(5)NaHCO3：提供 CO2、作为酸碱缓冲剂(6)酸碱缓冲剂(Na2cO3/NaHCO3，Na2HPO4/NaH2PO4)：用于调节溶液 pH-5-(7)NaCl：配制生理盐水(

10、0.9%)维持红细胞、口腔上皮细胞形态或用于提取DNA(0.14M或 2M)琼脂：激素或其他物质的载体或培养基，用于激素的转移或培养基酒精：用于消毒(75%)、提 纯 DNA(95%)、叶片脱色、配 制 解 离 液(95%的冷酒精)及洗去浮色(50%)(1 0)蔗糖：配制蔗糖溶液，测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原。10%KNO3溶液：植物细胞质壁分离和自动复原(1 1)二苯胺：用 于 DNA的鉴定(沸水浴，蓝色)(甲基绿：检 测 D N A,呈绿色(1 3)毗罗红：检 测 R N A,呈红色(1 5)斐林试剂(甲液O.lg/mLNaOH、乙液0.05g/mLCuS04)/班氏试剂：鉴定可

11、溶性还原性糖(沸水浴，砖红色沉淀)(1 6)双缩版试剂：用于蛋白质的鉴定(紫色)(1 7)苏丹HI染液(橘黄色)和苏丹W染液(红色)：用于脂肪鉴定(碘液：用于鉴定淀粉(变蓝色)(龙胆紫溶液或醋酸洋红：碱性染料，用于染色体染色时，前者呈深蓝色，后者呈红色(2 0)改良苯酚品红染液：检测染色体，红色)健那绿：检测线粒体，专一性让线粒体染色呈蓝绿色(2 2)重铝酸钾溶液：检测酒精，呈灰绿色(2 3)澳麝香酚蓝水溶液：检 测 C O 2,由蓝变绿再变黄(2 4)呼|跺酚试剂：用于维生素C 的鉴定(2 5)伊红美蓝：鉴定有无大肠杆菌的存在(2 6)亚甲基蓝：用于活体染色或检测污水中的耗氧性细菌(细菌的氧

12、化可使之褪色)(2 7)p H试纸：检验物质的酸碱性，如乳酸(2 8)卡诺氏固定液：用于细胞有丝分裂根尖的固定(2 9)解 离 液(5%盐酸和95%酒精按1:1 的比例配成)：有丝分裂中根尖的分离与固定(3 0)层析液：用于叶绿素的分离，主要类型：由 2 0 份 石 油 酸(在 60 90 C下分储出来的)、2 份丙酮和1 份苯混合而成；95%的酒精；9 3 号汽油；9 份体积分数为95%的酒精和1 份苯混合；汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。(3 1)20%新鲜肝脏研磨液：含 有 H2O2酶，可促进H2O2分解产生02(3 2)无土营养液：用于植物无土栽培(3 3)柠檬酸钠：血液抗凝剂(3 4

13、)2,4-D生长素类似物：有双重性，低浓度促进生长；高浓度抑制生长；培育无籽果实(35)秋 水 仙 素(C22H25O6N)：用于单倍体育种，作用机理是可抑制植物细-6-胞有丝分裂中纺锤体的形成，可导致细胞内染色体数目加倍，因此用于多倍体育种以及单倍体育种时培育纯种；还可以诱发基因突变。是 1937年发现的，是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶，有剧毒，使用时应特别注意。(36)滤纸：过滤或纸层(37)纱布、尼龙布：过滤，遮光(38)云母片：阻止生长素传递(39)微电流计：测量神经元受刺激时，神经元细胞内或细胞间的兴奋传递情况(4。)紫外线：

14、一定剂量作为能量、保温，高剂量导致细胞基因突变2.实验设计的技术手段(1)光学显微镜的使用：包括显微镜的取送、放置、旋转、对光(反光镜及光圈的使用)、低倍观察、高倍观察、镜头的擦拭；显微镜的放大倍数(是物体的长和宽，不是面积，也不是体积)、焦距问题、物镜离装片的远近、准焦螺旋的使用、显微镜使用时物象移动方向、显-7-微镜使用时异物的判断(通常通过移动玻片、转动转换器或旋转目镜来判断)。(2)临时装片、切片和涂片的制作：适用于显微镜观察，凡需在显微镜下观察的生物材料，必须先制成临时装片、切片和涂片，如“观察植物细胞的质壁分离和复原”中要制作洋葱表皮细胞的临时装片，在“生物组织中脂肪的鉴定”中要制

15、作花生种子的切片，在“观察动物如人体血液中的细胞”中要制作血液的涂片等等。(3)研磨，过滤：适用于从生物组织中提取物质如酶、色素等，要求学生熟练掌握研磨、过滤的方法，如研磨时要先将生物材料切碎，然后加入摩擦剂(常用二氧化硅)、提取液和其它必要物质，充分研磨之后，往往要进行过滤，以除去渣滓，所用过滤器具则根据需要或根据试题中提供的器材加以选用，如可用滤纸、纱布、脱脂棉、尼龙布等。(4)解离技术：适用于破坏细胞壁，分散植物细胞，制作临时装片。(5)恒温技术：适用于有酶参加的生化反应，一般用水浴或恒温箱，根据题目要求选用。(6)纸层析技术：适用于溶液中物质的分离。主要步骤包括制备滤纸条、划滤液细线、

16、层析分离等。(7)植物叶片中淀粉的鉴定：适用于光合作用的有关实验，主要步骤包括饥饿处理、光照、酒精脱色、加碘等。(8)根尖培养技术：有丝分裂实验的材料(9)小动物饲养技术：饲养小白鼠等实验动物(1 0)无土栽培技术：用于植物必需元素与非必需元素的鉴定(1 1)微电流测量技术：用于刺激神经元细胞时，兴奋的传递情况。刺激神经元的某一点时，相对于该神经元的刺激点而言，其两侧均有电位变化(用两表则可在两侧任意位置，用一表测定则相对于受刺激点不等距位置有两次偏转)可证明在同一神经元内具有双向传递性；刺激突触前神经元时，突触后神经元可测得电位变化，刺激突触后神经元时，突触前神经元测不到电位变化，可证明突触

17、传递具有单向传递性。(12)pH 控制技术：利用缓冲液调节p H,确保实验环境的pH 相对稳定。(1 3)同位素示踪技术：如噬菌体浸染细菌的实验，用1 80 2 和 14co2 追踪光合作用中氧原子和碳原子转移途径的实验等。3.常用实验方法(1)显微观察法：如“观察细胞有丝分裂”“观察叶绿体和细胞质流动”“用显微镜观察多种多样的细胞”等。(2)观色法：如“生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定”“观察动物毛色和植物花色的遗传”“DNA和 RNA的分布”等。(3)同位素标记法(元素示踪法)：如“噬菌体浸染细菌的实验”“恩格尔曼实验”等。(4)补充法(加法创意)：如用饲喂法研究甲状腺激素，用注射法研

18、究动物胰岛素和生长激素，用移植法研究性激素等。(5)摘除法(减法创意)：如 用“阉割法、摘除法研究性激素、甲状腺激素-8-或生长激素的作用”“雌蕊受粉后除去正在发育着的种子”等。(6)杂交法：如植物的杂交、测交实验等。如孟德尔发现遗传规律的植物杂交、测交的实验，小麦的杂交实验等。雌雄同花：花蕾期去雄+套袋+开花期人工授粉+套袋雌雄异花：花蕾期雌花套袋+开花期人工授粉+套袋(7)化学分析法：如“番 茄 对 C a和 S i的选择吸收”“叶绿体中色素的提取和分离”等。(8)理论分析法：如“大、小两种草履虫的竞争实验”“植物向性动物的研究”等。(9)预实验法：在科学研究中，有时需要在正式实验前先做一

19、个预实验。这样可以为进一步的实验摸索或创造条件，可以检验和保障实验设计的科学性和可行性。例 如“探索生长素类似物促进插条生根的最适浓度”的实验中，确定应设计什么样的浓度梯度？如果对要研究的植物有关情况所知不多，可以先设计一组梯度比较大的预实验进行摸索，再在预实验的基-9-础上设计细致的实验；再如预热处理，研究某温度对酶活性影响：将酶溶液和反应物分别放入2个试管，然后在同一水浴环境中持续一定时间，再将酶溶液和反应物倒入同一试管中混合反应。(10)初测法：如初始长度、初始刻度、初始温度、初始重量等(1 1)重复法：如测量上重复，取其平均值，这在统计学上才是更可靠的。例如“不同浓度香烟浸出液对水蚤的

20、影响”的课题研究：不同浓度烟草浸出液每分钟心跳次数第一次测量第二次测量第m次测量浓 度1.浓 度n蒸储水(对照)(1 2)确定某一显性个体基因型方法：测交；该显性个体自交；单倍体培育法(1 3)确定某一个体是否具有抗性基因的方法：确定小麦是否具有抗锈病基因，用锈菌去侵染，一段时间后，观察有无锈斑出现(1 4)育种的方法：杂交育种；人工诱变育种；多倍体育种；单倍体育种；基因工程育种；细胞工程育种(1 5)测定种群密度的方法：样方法；标志重捕法(16)水培法(完全培养液与缺素完全培养液对照)：确定某种元素为植物必需的元素方法(17)获得无籽果实的方法：用适宜浓度的生长素处理花蕾期已去雄的子房,如无

21、籽蕃茄；诱导染色体变异，如无籽西瓜(三倍体)(1 8)确定传入、传出神经的功能：刺激+观察效应器的反应或测定神经上的电位变化(19)模拟实验法：如模拟探究细胞表面积与体积的关系、通过模拟实验探究膜的透性、渗透作用的实验装置等4.常用的实验条件控制方法增加水中02：泵入空气或吹气或放入绿色植物；减少水中02：容器密封或油膜覆盖或用凉开水；除去容器中CO2：NaOH溶液、Na2co3溶液；除去叶中原有淀粉：置于黑暗环境(饥饿)；除去叶中叶绿素：酒精水浴加热(酒精脱色)；除去植物光合作用对呼吸作用的干扰：给植株遮光；单色光的获得：棱镜色散或透明薄膜滤光；血液抗疑：加入柠檬酸钠(去掉血液中的Ca2+)

22、；|7!/|7!/JZXJZ!/1234567/|z(x/|z(zlz(z(8-10-(9)线粒体提取：细胞匀浆离心；(1 0)骨无机盐的除去：HC1溶液；(1 1)消除叶片中脱落酸的影响：去除成熟的叶片；(1 2)消除植株本身的生长素：去掉生长旺盛的器官或组织(芽、生长点)；(1 3)补充植物激素的方法：涂抹、喷洒、用含植物激素的羊毛脂膏或琼脂作载体；(1 4)补充动物激素的方法：口服(饲喂)、注射；(15)阻断植物激素传递：插云母片法。5.实验结果的显示方法一一实验现象的观测指标(1)光合作用：0 2释放量或CO 2吸收量或有机物(淀粉)生成量。例：水生植物可依气泡的产生量或产生速率；离体

23、叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目；植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅。(2)呼吸作用：0 2吸收量或CO2释放量或有机物(淀粉)消耗量(3)原子或分子转移途径：同位素标记法或元素示踪法-11-（4）细胞液浓度大小或植物细胞活性：质壁分离与复原（5）溶液浓度的大小：U型管+半透膜（6）甲状腺激素作用：动物耗氧量、发育速度等（7）生长激素作用：生长速度（体重、体长变化）（8）胰岛素作用：动物活动状态（是否出现低血糖症状昏迷）（9）胰高血糖素作用：尿糖的检测（在尿液中加班氏试剂进行沸水浴，看是否出现砖红色沉淀）（1 0）菌量的多少：菌落数、亚甲基蓝褪色程度（1 1）生

24、长素作用及浓度高低的显示：可通过去除胚芽鞘后补充生长素后的胚芽生长情况来判断（弯曲、高度）（1 2）淀粉：碘 液（变蓝色）（1 3）还原性糖：斐林试剂/班氏试剂（沸水浴后生成砖红色沉淀）（1 4）C O 2：C a（O H）2 溶 液（澄清石灰水变浑浊）（1 5）乳酸：pH试纸（1 6）0 2：余烬复燃（1 7）蛋白质：双缩版试剂（紫色）（脂肪：苏丹H I 染液（橘黄色）；苏丹I V染液（红色）（1 9）DNA：二 苯 胺（沸水浴，蓝色）、甲 基 绿（染色后，呈绿色）（2 0）R N A：毗 罗 红（呈红色）、苔黑酚乙醇溶液6.实验设计的原则（1）对照原则科学、合理的设置对照可以使实验方案简洁

25、、明了，且使实验结论更有说服力。实验中的无关变量很多，必须严格控制，要平衡和消除无关变量对实验结果的影响，对照实验的设计是消除无关变量影响的有效方法。所谓对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全相等的实验。对照实验设置的正确与否，关键就在于如何尽量去保证“其它条件的完全相等”。具体来说有如下四个方面：所有用生物材料要相同即所用生物材料的数量、质量、长度、体积、来源和生理状况等方面特点要尽量相同或至少大致相同。所用实验器具要相同即试管、烧杯、水槽、广口瓶等器具大小型号要完全一样。所用实验试剂要相同即试剂的成分、浓度、体积要相同。尤其要注意体积上等量的问题。所用处理方法要相同如：保温或冷却

26、：光照或黑暗；搅拌或振荡都要一致。有时尽管某种处理对对照实验来说，看起来似乎是毫无意义的，但最好还是要作同样的处理。阳性对照：给对照组施以已经被证明是一种有效的处理因素。阳性对照目的是证明试验具有检验灵敏度，也就是该试验具有证明有效阳性药物的有效性的能力。空白对照：指不做任何实验的对照组或不给对照组以任何处理因素。值得-12-注意的是，不给对照组任何处理因素是相对实验组而言的，实际上对照组还是要做一定的处理，只是不加实验组的处理因素，或者说相对于实验组而言，除实验变量外，别的处理与实验组完全相同。空白对照能明白地对比和衬托实验组的变化和结果，增加说服力。通常未经实验因素处理的对象组为对照组，经

27、实验因素处理的对象组为实验组；或处于正常情况下的对象组为对照组，未处于正常情况下的对象组为实验组。例如，在“唾液淀粉酶催化淀粉”的实验中，实验组滴加了唾液淀粉酶液，而对照组只加了等量的蒸储水，起空白对照；在还原糖鉴定实验中留一部分样液不加入斐林试剂，以作对照。自身对照：指对照组和实验组都在同一研究对象上进行，不另设对照。自身对照方法简便，关键是看清实验处理前后现象变化的差异。实验处理前的对象状况为对照组，实验处理后的对象变化则为实验组。例如，“质壁分离与复原”实验，自身对照简便，但关键要看清楚实验处理前后的现象及变化差异。-13-相互对照：不另设对照组，而是几个实验组相互对比对照，其中每一组既

28、是实验组也是其他级别的对照组。在等组实验法中，若不设空白对照，则大都是运用相互对照。相互对照较好地平衡和抵消了无关变量的影响，使实验结果具有说服力。例如：“植物向光性”实验中，利用若干组燕麦胚芽的不同条件处理的实验组之间的对照，说明了生长素与植物生长弯曲的关系。证明玉米根的生长方向与地心引力的关系实验中不同方向放置的玉米种子之间则属于相互对照。再如：在探究温度（或p H）对酶催化活性影响实验中温度（或p H）（O、5 0 1 0 0）互为相互对照。在实验中要找出一个最佳效果点，就要采取相互对照进行实验。条件对照：指虽然给对象施以某种实验处理，但是这种处理是作为对照意义的，给定的处理因素正是为了

29、保证实验中对照组与实验组相比只是少了实验变量的影响，或者说这种处理不是实验假设所给定的实验变量意义的。通常施以条件因素的对象组为对照组，施以实验因素的对象组为实验组。例如，在“动物激素饲喂小动物”的实验中，采用等组实验法，甲组为实验组（饲喂甲状激素），乙组为条件对照（饲喂甲状抑制剂）；不饲喂药剂的是空白对照组。显然，通过条件对照.实验说服力大大提高。标准对照：生物生理、生化的某些项目也都有相应的标准，将观察测定的实验数值与规定的标准值相比较，以确定其正常与否的对照方法。【“实验组”与“对照组”确认】一个实验通常分为实验组和对照组（控制组）。实验组是施加实验变量处理的被试组；对照组是不施加实验变

30、量处理的对象组，两者对无关变量的影响是相等的，两组之间的差别，被认为是来自实验变量的结果，如为研究光对幼苗生长的影响时实验变量应为撤掉光照，因而暗处生长的小麦幼苗应为实验组,而自然状态（即未接受实验变量处理）的小麦幼苗应为对照组，通过对照组能增强实验的信度。（2）单一变量原则理解该原则，应弄清几组变量：即自变量与因变量，无关变量与额外变量。自变量与因变量：a.自变量是研究者主动操纵的条件和因子，是作用于实验对象的刺激变量（也称实验变量），自变量须以实验目的和假设为依据，应具有可变性和可操作性。b.因变量（又称反应变量或应变量），是随自变量变化而产生反应或发生变化的变量，因变量是研究是否成功的证

31、据，应具可测性和客观性。c.二者关系：自变量是原因，因变量是结果，即具因果关系。无关变量与额外变量：无关变量又称干扰变量、控制变量，是指与研究目标无关，但却影响研究结果的变量。额外变量，指实验中由于无关变量所引起的变化和结果。无关变量是原因，额外变量是结果，二者也具有因果关系。为确保实验结果的准确，实验者应严格控制无关变量，防止额外变量的出现，否则实验结果的真实性无法得到认定，如我们常在实验过程中强调“选取生长状况相同的幼苗”“数量大小相同的种子”“置于相同并适宜条件下培养”“加入等量的清水”等均是为了控制无关变量对实验结果的干扰。所谓单一变量原则（单因子变量原则），就是要尽可能控制无关变量的

32、作用,-14-以确保实验变量的唯一性。强调的是实验组和对照组相比只能有一个变量，只有这样当实验组和对照组出现不同结果时，才能确定造成这种不同结果的原因肯定是这个变量造成的，从而证明实验组所给实验因素的作用，因此在设计对照组实验时首先要确定变量并加以正确设置，至于将谁作为变量则很容易确定,即要验证谁则把谁作为变量，也就是要把所要验证的中心条件作为变量。【案例剖析】例如，生物课本内温度对酶活性影响的实验中：实验变量是低温（冰），适 温（6 0 论 高 温（沸水）；酶的活性变化即反应变量；试管的洁净度，淀粉酶的稀释度，可溶性淀粉的浓度，碘液的量和浓度，温度处理时间，操作程序等是无关变量。实验中不论有

33、几个实验变量，都应做到每个自变量对应一个因变量，此外还要做到操作规范。在实验设计、实施的全过程中，应严格操纵实验变量，严格控制无关变量，尽可能消除误差，获取较为精确的反应变量。-15-(3)等量原则实验中要做到“单一变量”(即自变量)外，其它变量需注意等量原则，即：生物材料要相同：即所用生物材料的数量、质量、长度、体积、来源和生理状况等方面要尽量相同或至少大致相同。实验器具要相同：即试管、烧杯、水槽、广口瓶等器具的大小、型号、洁净度等相同。实验试剂要相同：即试剂的成分、浓度、体积要相同。即使使用不同试剂也要注意体积相同。处理方法要相同：保温或冷却、光照或黑暗、搅拌或振荡都要一致。有时尽管某种处

34、理对对照实验来说，看起来似乎是毫无意义的，但还是要作同样的处理。(4)科学性原则：包括实验原理的科学性、实验材料选择的科学性、实验方法、实验结果处理的科学性。(5)安全原则：尽量避免危险性操作(如确需使用，应注明，防止环境污染和人身伤害)。如：在“叶绿体色素的提取和分离”实验中，使用丙酮时指 出“用滤纸打孔盖住研钵进行研磨”以减少挥发，或者干脆使用酒精，以减少危害。(6)可行性原则：实验设计应注意取材方便、药品便宜、装置简单、经济实用、步骤简洁、操作性强、花时经济，在现有实验条件下能够完成。(7)平行复重原则：即控制某种因素的变化幅度，在同样条件下重复实验，观察其对实验结果影响的程度。任何实验

35、都必须能够重复，这是具有科学性的标志。(8)随机性原则：随机性原则是指被研究的样本是从总体中任意抽取的。这样做的意义在于：一是可以消除或减少系统误差，使显著性测验有意义；二是平衡各种条件，避免实验结果中的偏差。(9)简便性原则：实验设计时，要考虑到实验材料要容易获得，实验装置简单，实验药品较便宜，实验操作较简便，实验步骤较少，实验时间较短。7.操作 设计注意事项1、应注意实验选材的合理性如：所选材料应有利于实验现象的观察：如可溶性还原糖的鉴定中应选择“白色或近白色”的材料；所选材料应容易获得：尽可能选择无明显季节性、地域性的材料；所选材料应价格便宜2、应注意操作细节的合理性如：溶液或培养基灭菌

36、后是否要冷却后使用？冷却后向淀粉糊中加了唾液后是否要振荡试管呢？要酶促反应的试管如何加热？是直接加热，还是水浴加温？水浴加热用酒精溶解叶中叶绿素时，酒精直接或隔水加热？隔水加热使甲状腺激素、胰岛素、生长激素进入动物体内的方法应如何操作？是饲喂，还是注射？甲状腺激素饲喂，胰岛素、生长激素注射-16-不同的情况下要合理地选用不同的水。如：清水、池水、凉开水、蒸储水、生理盐水。3、应注意操作顺序的合理性例：为“验 证 pH对唾液淀粉酶活性的影响”。在如下实验步骤中，最佳顺序应该是 在 1 5 号试管中分别加入0.5%的淀粉液2mL；加完淀粉液后，向各试管中加入相应的缓冲液3m L,使各试管中反应液的

37、 pH 依次稳定在 5.00、6.20、6.80、7.40、8.00；分别向1 5 号试管中加入0.5%唾 液 1m L,然后进行37恒温水浴；反应过程中，每 隔 Im in从第3 号试管中取出一滴反应液，滴在比色板上，加一滴碘液显色，待呈橙黄色时，立即取出5 支试管，加碘液显色并比色，记录结果；A.B.C.D.-17-答案：c4、应注意实验方案的可操作性例：为“验证镁是植物生活的必需元素”。请写出你的设计思路。方 案1：将幼苗中运载M g 2+的载体去掉方 案2：用去掉镁的砂性土壤培养幼苗方案3：将植物体内的M g 2+分离出来方 案4：取生长状况一致的大豆幼苗，用符合实验要求的容器，对照组

38、盛有含植物必需的各种矿质元素的完全培养液，实验组盛有不含镁离子的完全培养液,两组置于相同的适宜条件下培养；观察比较两组植物的生长发育情况。方 案1、2、3均缺乏可操作性，正确思路应该是方案4 o8.实验设计的题型【观察类实验】高倍镜的使用和观察叶绿体原理：叶绿体存在于细胞质基质中，一般是绿色的、扁平的椭球形或球形。步骤：取 材（碎类叶）一制片一观察观察植物细胞的有丝分裂原理：高等植物体的分生区细胞能进行有丝分裂，用高倍显微镜观察有丝分裂各个时期细胞内的染色体变化情况，从而识别该细胞处于有丝分裂的哪个时期。步骤：洋葱根尖的培养f 装 片 制 作（解离、漂洗、染色、制片）一观察观察植物细胞的质壁分

39、离与复原原理：内因为原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性，外因为细胞液的浓度与外界溶液的浓度差。步骤：装片一观察说明：（1；在此类实验中常综合运用显微观察技术、染色技术、玻片标本制作技术等。（2）观察类实验应注意的问题注意取材.：根据观察对象采用合适的材料，如观察有丝分裂应选取根尖分生区细胞；观察质壁分离与复原应选取成熟的植物细胞等。注意材料处理：根据不同材料，不同的观察对象，做不同的材料处理，如浸泡、染色、解离、保持生活状态等。注意制片方法：显微观察实验要用装片，不同材料用不同的制片方法。装片法（把整个实验材料制成装片，如用葫芦群观察叶绿体），切 片 法（把材料切成薄片，以便观察，如脂肪鉴定）

40、，压 片 法（把材料压碎成一薄层，以便观察，如观察根尖有丝分裂）。注意光学显微镜的使用方法。【鉴定物质成分的生化实验】（1）生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定（2）D N A的粗提取与鉴定说明：（1）在此类实验中，常利用某种试剂对生物体或细胞中成分进行鉴别，针对不同的鉴别对象，采用不同的试剂。-18-(2)鉴别类实验应注意的问题实验结论常根据特定的颜色反应来确定。有些可不设立对照实验，若需设立，应增设一组，加入已知的待检测物质,如验证唾液淀粉酶是蛋白质，对照组可加入稀释的鸡蛋清。注意选择合适的试剂，并注意试剂使用的特殊要求，如加热煮沸等。【调查实验题】-19-（1）种群密度的取样调查原

41、理：在一般情况下，逐一计数某个种群的个体总数是困难的。常常用取样调查法来估计整个种的种群密度。植物种群密度的取样调查常用样方法。动物种群密度的取样调查常用标志重捕法。（2）调查人群中的遗传病流程图：确定调查的目的要求，制定调查的计划（A.以组为单位，确定组内人员；B.确定调查病例；C.制定调查记录表；D.明确调查方式；E.讨论调查时应注意的问题），实施调查活动，整理、分析资料，得出结论、撰写调查报告。（3）初步学会社会科学研究的一般方法步骤：社会科学研究的一般步骤是：确定研究课题一制定研究计划一收集信息资料一加工分析收集的信息资料一提出论点或假说一撰写研究报告一自我评价。说明：此类实验常通过调

42、查法，调查法中常使用统计技术和测量技术。注意事项：调查时，最好选取群体中发病率较高的单基因遗传病，如红绿色盲、白化病、高度近视（6 0 0 以上）等为保证调查的群体足够大，小组调查的数据，应在班级和年级中进行汇总。某遗传病的发病率=某种遗传病的患病人数+某种遗传病的被调查人数又1 0 0%调查结果往往与实际水平有一定的差距，要想缩小与实际水平的差距，在调查时应采取哪些措施？随机性调查，调查的群体足够大【探究性实验与验证性实验】探究性实验:指实验者在不知晓实验结果的前提下，通过自己实验、探索、分析 研究得出结论，从而形成科学概念的一种认知活动。验证性实验:指实验者针对已知的实验结果而进行的以验证

43、实验结果、巩固和加强有关知识内容、培养实验操作能力为目的的重复性实验。探究性实验验证性实验实验目的探索研究对象的未知属性、特征以及与其他因素的关系验证研究对象的已知属性、特征以及与其他因素的关系实验假设假设一般采用“如 果A,则B”的形式表述，是根据现有的科学理论、事实.对所要研究的对象设想出一种或几种可能性的答案、解释因结论是己知的，因此不存在假设问题（或已有实验过程、结果，在提出假设时，通过验证，得出假设是正确的）实验原理因探究内容而异因验证内容而异应有的实验步骤实际上并未完成，因探究内容而异应有的实验步骤，可以是曾经做过或尚未做过的，因验证内容而异-20-相同：实验原理、所用材料、方法步

44、骤相同。区别：现象:验证性实验每个装置只出现一种现象，探索性实验分情况说;实验过程实验的分组：有实验组和对照组。如果实验中是一个自变量，则分成 2 组（有时也分成3组），即自变量改变与否；如果是二个自变量，则分成3 组，即1、2 组的设立是改变其中的一个自变量，第 3 组是两个自变量改变与否；实验组和对照组的设计是对自变量的处理，对无关变量的应设置在相同的条件下，以免影响自变量对实验的效果。故从实验材料中分析出自变量是实验的关键。实验现象天知，可以不描述已知，应准确描述实验结果预测对应假设，分类讨论。一般需讨论“如果出现结果会怎样，如果出现结果或又会怎样”，一般有多种可能的结果。但有时也会出现

45、“预测最可能的结果”的问题.此种情况应根据已有知识推测最合理的结果。与实验假设一致（不可与探究性的结果预测相混）实验结论根据可能的实验结果，进行分析。对应实验目的做出肯定结论-21-结论:验证性实验只有一种结论，探索性实验对每种现象分别作以说明，例如必修本上“探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的水解作用”。一般的来说，凡是探究性的实验的预测，往往有三种可能性，而作为鉴定性的实验则只有一种可能性，要么就是结论是成立的，要么就是结论不成立的，切记！当然，涉及到具体的实验题时，一般不会面面俱到，也就是以上各项实验要求不会在试题中全部出现，即在题中仅出现其中的部分要求，因此解题时需具体情况具体分析。详见如下分类。

46、(1)验证性生物学实验的几类题型分析A、解释原理与方法型；B、独立设计实验型；C、评价、纠正型；D、续写步骤型应对策略：看有无对照实验，如果有看对照设计是否合理。看实验是否遵循了单一变量原则。看实验步骤的顺序是否合理，步骤是否完整。看实验仪器、药剂的使用的是否合理。药剂的配备、使用及用量的大小。看实验结果的验证是否合理。(2)探究性生物学实验的几类题型分析高考生物探究实验的基本题型大致有5种：分析一一结论、设计一一预测、问题一一假设、评价一一修正和模仿一一创新。这5种基本题型的命题立意，遵循科学探究思想，重视考查同学们参与科学探究活动的能力，充分贯彻高中生物学新课程改革的精神，有助于推动新一轮

47、课程改革和高考命题改革的进程。近年来主要以分析一一结论、设计一一预测的题型为主，有的考题每个题目又 包 含1 2种组题类型，其中以实验设计或分析结论为主干，而问题一一假设、评价一一修正等其他编制试题的形式则较少。分析一一结论型 该题型的特点是试题给出实验的目的、方法和过程，侧重于考查同学们对实验过程的观察与理解、对实验现象的解释和分析以及对实验结论的归纳与总结能力。设计一一点测型 该题型的特点是试题列出生物科学的结论、事实，要求考生选用适当的实验材料，依据科学的实验原则，设计合理实验步骤，验证生物科学的结论、事实，对实验可能的结果作出预测，并对预测的结果进行解释和分析，推理出实验的结论，侧重于

48、对考生推理能力的考查。问 题 一 假 设 型 该题型的特点是试题陈述生产和生活中的一些生物学问题，要求考生提出合理的假设，选用恰当的方法验证或解释提出的假设，并根据提出的假设作出合理的预测。此类题型重在考查同学们提出问题、解决问题的探究能力，是近年来实验考查的主力题型，从命题技术上看，这类题型是开放性的好题。评价修正型 该题型的特点是试题给出实验的目的，列出一些实验设计的基本思路，考生通过对试题给出的实验思路进行分析，评价能否达到实验的目的，考查了同学们的科学思维的能力和判断推理能力；同时要求考生结合自己的评价，对错误的实验设计加以修正，提出恰当合理的实验思路，是一-22-类较为简单的题型。模

49、 仿 一 创 新 型 该题型的特点是试题先进行原型示范和具体指导，考生从考试的过程中获得能力的提升，考查考生尝试、模仿已有实验的操作，作进一步创新设计，这类题型增强了实验技能性目标的考查，体现终生学习的理念。基于课文实验的创新为备考的重点。9.实验设计解题方法实验设计的解题方法第一步，明确实验目的；第二步，明确实验原理；第三步，选择实验方法；第四步，选择实验材料（实验材料要根据原理来选择）；第五步，设计实验步骤；第六步，记录分析，预测实验结果并得出结论。（一定要列出所有可能的结果和结论，而且在很多情况下“结论=单一性+结果”）-23-注：关 于“假设”“预期”“结果”与“结论”的辨析 假设：假

50、设也称假说或猜测，是指用来说明某种现象但未经证实的论题，也是对所提出的问题作出的参考答案，即依据发现的事实材料或科学原理，通过创造性思维，提出初步假定。如“孟德尔分离现象解释验证”的测交实验中，提出的假说是：“F l （D d）产生配子时，因等位基因分离，使 得F 1产生含基因D和基因d的两种配子，且其数目相等。”再 如“观察植物细胞质壁分离和复原”实验中，提出的假说应为：当细胞外溶液浓度细胞液浓度一细胞失水；当细胞外溶液浓度细胞液浓度一细胞吸水 预 期：预期是在实验设计方案确定以后，实验正式实施之前，根据假说和原理，对实验可能出现的结果的判断，是依据提出的假说进行推理，得出假定性结果或推论，

51、即“假如假设成立，则应有何种结果”，如“孟德尔分离现象验证实验，假如假说成立则有测交的后代应出现Dd与d d为1：1的结果，即高茎与矮茎数量比应为1：1”，而“观察植物细胞质壁分离与复原实验”中，假若假设成立，则应有处于高浓度（3 0%）蔗糖溶液中的洋葱表皮细胞因不断失水一质壁分离，而处于清水中的已分离细胞因细胞吸水一质壁分离复原 结 果：结果应为实验实际出现的情况，如“孟德尔分离现象解释实验”中出现的结果为“得 到 的6 4株后代中，3 0株高茎，3 4株矮茎，两种性状分离比为1：1”而“质壁分离复原实验”中处于3 0%蔗糖溶液中的洋葱表皮细胞果真发生了质壁分离，而处于清水中的已分离细胞果真

52、发生了复原现象。（4）结论：结论的得出须依据实验结果，即若出现的结果与预期结果一致则得出与先前的假说一致的结论或“假说成立”，若实验出现的结果与预期结果不符，则得出的结论应为“假说不成立”。由此可知，“假设”应对应“结论”，“预期”应对应“结果”，在实验讨论时应注意描述的科学性即“如果出现何种结果，则应有何种结论”，例如用检测呼吸装置的红色液滴检测酵母菌呼吸类型时，应为若液滴向左移动则推出什么结论，若液滴向右移动则推出什么结论，而不能描述为“若为有氧呼吸，则液滴向哪移动”，再如在验证淀粉，碘液能否通过半透膜时应描述为“若袋内外液体均变蓝（结果或现象），则淀粉、碘液均能通过半透膜。”而不能描述为

53、“若淀粉、碘液均能通过，则袋内外液体均变蓝”。运用举例：探究土壤中是否具有微生物第一步明确目的：探究土壤中是否含有微生物第二步明确实验原理：先提出假设有微生物，则 微 生 物（病毒除外）都具有新陈代谢的特征，生物进行新陈代谢很容易引起PH值的变化，可以根据培养时P H值的变化来检测是否含有微生物第三步选择实验方法：条件对照第四步选择实验材料（略）：锥形瓶，牛奶，酒精灯，土壤等第五步 设计实验步骤：-24-。取两个锥形瓶，分别编号为1、2号，并灭菌处理（为对照作基础）。2 取等量的鲜牛奶进行灭菌处理在无菌条件下加入到1、2号锥形瓶中（等量性原则、科学性原则）3 取二份等量的土壤，一份加热灭菌处理

54、后，加入到1号锥形瓶中，另一份不处理加入2号瓶，并分别测定PH值并记录（对照性原则、单一性原则、等量性原则）4 在适宜的温度（3 5摄氏度）培养两天，再测定PH值并记录。（科学性原则）第六步：记录分析、预测实验结果并得出结论。第一种情况：1号瓶前后PH值相同、2号瓶前后也相同，则说明土壤中没有微生物第二种情况：1号瓶前后PH值相同、2号瓶不相同，则说明土壤中含有微生物1 0.实验中常见问题有关酶的实验设计，应注意各步骤的顺序，必须先调节相关条件（温度、p H等）才能-25-让反应物与酶相遇，还应 注 意 空 白 对 照 中 加 入“等量清水”。（2）生长素设计中，应注意对胚芽鞘的生长状况的描述

55、，如“向哪方弯曲生长”、“直立生长”、“不弯曲不生长”。无子番茄培育要注意“去雄”、“套袋”、“使用一定浓度生长素类似物”。（3）动物激素调节实验中，有 些 激 素 只 能 用“注射”（如胰岛素），有些可以“饲 喂”（如甲状腺激素）。（4）无土栽培时应注意“培养液中通空气”、“适时适量补充稀释培养液”。微 生 物 培 养 中 注 意“无菌”、“接种到培养基”及氧气、p H、温度的控制，培养基配制注意碳源、氮源、生长因子、水、无机盐，并 在 调 节 pH后灭菌。（6）遗传学实验 复 制、转录、翻译时条件的控制；D N A 粗提取应选用非哺乳动物的红细胞，注意蒸储水的使用和过滤的目的，鉴定时注意水

56、浴加热的条件控制及现象。植 物 杂 交 实 验：如 果 为 两 性 花（花中既有雄蕊又有雌蕊）的植物杂交，如:应 注 意“去雄”、“人工授粉”、“授粉后套袋”；如果为单性花（即有雄无雌或有雌 无 雄），则 无 需“去雄”，但 要“套袋”。（8）动物杂交实验：千 万 不 能 有“自交”，应 为“与相同基因型的异性交配”。（9）基因工程实验：注 意“限制性内切酶”、“运载体”、“D N A 麻 酶”、“目的基因”、“受体细胞”等科学语言的使用。1 1.实验语言组织（1）应注意实验组别的编号如：凡实验中涉及到两组或两组以上，所 用 器 材 需 用 1、2、3 或 A、B、C或甲、乙、丙等加以编号便于

57、区分。（2）对在量上难以准确描述的，应 尽 可 能 用“定性”的语言表达如：“一段时间”“适宜温度”“适量的”“一定量的”“用相同型号的”“选取生长状况相同的”“大小数量相同的”等体积的”“置于相同且适宜条件下”“加入等量的”等。（3）叙说中注意语言规范、表达准确，不用含糊的口语如：“盖玻片”不 说 成“薄的玻璃片”；“等量的”不 说 成“一样多的”；“振荡”不 说 成“晃动”“摇动”；加碘后，“不变蓝”不 说 成“无色”或“没有颜色变化”；“不变”不说成“无现象”等。（4）注 意 避 免“词不达意”如：如图二，有 些 学 生 描 述 为“分别在甲、乙 两 试 管 中 加 入 A、B 物质”，

58、如此表达则成了图三的含义，显然与图二不符。准确的描述应为“在甲乙两支试管图二 图三中 分别加入A、B 物质”或“在 甲 试 管 中 加 入 A 物质，乙试管中加入B物质。”-2 6-(5)选用表格、曲线等形式进行具体、准确表达若需使用表格、曲线时，应注意表格设计合理、曲线描绘准确，做到具体、实用、直观，易理解-27-高考生物实验知识梳理（二）实验一：使用高倍显微镜观察几种细胞一、实验目的：1.学会如何使用显微镜观察细胞；2.了解细胞的结构；3.学会制作临时装片。二、实验材料：实验材料可换）松针、动物血液、动物神经细胞永久装片三、实验用具：载玻片、盖玻片、蒸储水、滴管、镜子、土豆、刀片、显微镜（

59、物镜 5 X、1 0X、4 0 X）四、方法步骤：1.制作松针的临时切片：取干净的载玻片一个平置于试验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴蒸帽水。将土豆切成条状（截面约：0.5 X 0.5 c m）取两条，将一根松针夹在两个土豆条之间，用刀片削成尽量薄的薄片，削时，手腕不动，靠大臂带动小臂移动刀片。切片数次。从中选取较薄的切片，置于载玻片的水滴上。从一侧轻轻盖上盖玻片，不要产生气泡。用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的水滴，即完成临时切片的制作。2.观察切片：（1）取出显微镜，置于试验台上靠左的位置，打开光源。（2）将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上，调整载物台位置，使盖玻片对准光源。使 用5 X物镜观

60、察切片，使松针切片在视野中心，换 成1 0 X物镜，观察松针叶面横切结构。（4）换 成4 0 X物镜观察，注意细胞及细胞内物质结构，画图。3.动物血液临时装片的制作及观察（除了不用切片，其他类似）4.动物神经细胞永久装片的观察。五、考点提示：1 .松针的叶面结构是什么样的？2 .动物细胞的结构是什么样的？与植物细胞又什么不同？3 .显微镜的物镜倍数愈大，视野的亮度如何？物体的大小如何？4 .如何调节焦距？5 .如何才能使切片尽量的薄？切片的厚薄对显微镜下观察的效果有什么影响。实验二：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质一、实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理一颜

61、色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌 握N a O H溶液和C uS 0 4溶液的使用方法。-28-二、实验原理：某些化学试剂3 使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。1.生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶性非还原糖。可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu20沉

62、淀。如：葡 萄 糖+2CU2+4 0 H_ _加热 葡 萄 糖 酸+Cu 2 0 I （砖红回）+即 Cu2+被还原成Cu2 0,葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为：浅蓝色一棕色f砖红色沉淀淀粉遇碘变蓝色（直链）或 紫（红）色（支链）。2.脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醛、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。-29-在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴

63、别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹I I I,苏丹I V,苏丹黑及 油 红 0 等。脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理，适当提高温度（37 60）对组织切片染色效果是有好处的。脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。脂肪可以被苏丹m 染液染成橘黄色或橙红色（或被苏丹W染液染成红色），胆脂素呈淡红色，脂肪酸不着色，细胞核呈蓝色。3.蛋白质与双缩版试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽N H2c=oN H2NH.I 2C=OIN

64、H2i 8（r c加 热NHIC=OH-b C=：OINH+NHJ双 缩 服O=CX C=0戚：NHR-CH 、!、CH-RI 、I ,0=C,C=OR-CH；2H-RH2O I紫色络合物键，在 碱 性 NaOH溶液中能与双缩版试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。)三、实验材料：1.做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高,颜 色 为 白色的植物组织,如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察。）经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。2.做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要 浸 泡 34 小 时（也可用薨麻种子）。3.做蛋白质的鉴定实验，

65、可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。4.淀粉的鉴定：马铃薯匀浆。四、实验用具：双面刀片、试 管（最好用刻度试管）、试管夹、试管架、大小烧杯、小量筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜五、实验试剂：斐 林 试 剂（包括甲液：质量浓度为0.Ig/mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/mL CuS04 溶液）；苏丹III或苏丹W染液；双缩胭试剂（包 括 A 液：质量浓度为0.Ig/mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.Olg/mL-3 0-C u S 0 4 溶液）；体积分数为5 0%的酒精溶液；碘液；蒸储水六、方法步骤：（一）可溶性糖的鉴定操 作 方 法

66、注 意 问 题解释1.制备组织样液。（去皮、切块、研磨、过滤）苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。2.取 1支试管，向试管内注入2 mL 组织样液。褊 梗 内 注 入 血林试剂，振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂；切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。斐林试利退不碍鼻 甲、乙液混合葆存时，生成的C u （O H）2在 7 0 9 0 下分解成黑色C u O 和水；甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无 C u O H生成。-31-（二）脂肪的鉴定4.试管放在盛有5 0-6 5 温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色一 棕 色 f 砖红色（沉淀）最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。也可用酒精灯对试管直接加热。防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤；缩短实验时间。（三）蛋白质的鉴定操 作 方 法注 意 1句题解释花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。F 种子要浸泡3 4