棒状杆菌检验.ppt

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1、种 类白 喉 棒 状 杆 菌 （ C.diphtheriae）假 白 喉 棒 状 杆 菌 （ C.pseudodiphtheriticum）干 燥 棒 状 杆 菌 （ C.xerosis）化 脓 棒 状 杆 菌 （ C.pyogenes）溃 疡 棒 状 杆 菌 （ C.ulcerans）假 结 核 棒 状 杆 菌 （ C.pseudotuberculosis）溶 血 棒 状 杆 菌 （ C.haemolyticum）J-K群 棒 状 杆 菌 （ C.jeikeium-CDC group JK）第 14章 棒 状 杆 菌 属 共 同 特 性 G+杆 菌 、 一 端 或 两 端 膨 大 成 棒 状

2、 染 色 不 均 匀 ， 两 端 浓 染 或 有 异 染 颗 粒 无 鞭 毛 、 无 芽 胞 排 列 不 规 则 ， 呈 栅 栏 状 白 喉 棒 状 杆 菌 致 病 菌 致 病 物 质 1、 白 喉 外 毒 素毒 力 强抗 原 性 强编 码 外 毒 素 的 tox基 因 -棒 状 杆 菌 噬菌 体一 、 临 床 意 义第 一 节 白 喉 棒 状 杆 菌 C.diphtheriae 作 用 机 制 ： -影 响 蛋 白 质 的 合 成作 用 特 点 ： 作 用 于 多 种 细 胞 ， 心 肌 、 神 经 细 胞 均 有毒 素 受 体 肿 瘤 细 胞 对 此 毒 素 敏 感 2、 索 状 因 子细

3、 菌 表 面 的 一 种 糖 脂 ， 能 破 坏 细 胞 的 线粒 体 ， 影 响 细 胞 的 呼 吸 与 磷 酸 化3、 K抗 原p 细 胞 壁 外 面 的 一 种 不 耐 热 糖 蛋 白p 抗 吞 噬p 有 利 于 细 菌 在 黏 膜 表 面 的 定 植 所 致 疾 病白 喉 （ 急 性 呼 吸 道 传 染 病 ）传 染 源 ： 患 者 及 带 菌 者传 播 途 径 ： 飞 沫 或 污 染 的 物 品临 床 表 现 ： 局 部 炎 症 ： 炎 性 渗 出 ， 坏 死 ， 纤 维 蛋 白 假 膜 窒 息 全 身 中 毒 症 状 外 周 N-N炎 ： 膈 肌 麻 痹 -呼 吸 困 难 声 带

4、麻 痹 -声 音 嘶 哑 咽 肌 麻 痹 -吞 咽 困 难 心 肌 -心 肌 炎 白 喉 假 膜 v感 染 后 机 体 可 获 得 牢 固 的 免 疫 力v机 体 还 可 通 过 其 它 方 式 获 得 免 疫 力 ：六 月 以 下 婴 儿 -母 亲成 人 -隐 性 感 染 、 人 工 主 动 免 疫v易 感 者 ：24岁 儿 童成 人 -也 有 可 能 免 疫 性 ： 二 、 生 物 学 特 性 形 态 与 染 色 : G+细 长 微 弯 的 杆 菌 一 端 或 两 端 膨 大 呈 棒 状 常 排 列 呈 V、 L、 X等 文 字 形 异 染 颗 粒 形 态 上 的 鉴 别 特 征 无 荚

5、膜 、 无 芽 胞 、 无 鞭 毛 白 喉 棒 状 杆 菌 异 染 颗 粒 1000 培 养 特 性 营 养 要 求 高 吕 氏 (Loeffler)血 清 斜 面 或 鸡 蛋 斜 面 ： 形 成 灰 白 色 、 湿 润 、 有 光 泽 的 光 滑 型 菌 苔 /菌落 BAP中 菌 落BAP（ 血 琼 脂 平 板 ）v菌 落 灰 白 色 、 光 滑 型 ， 直 径 1 2mm、 有 狭 窄 溶 血 环 （ 轻 型 ）v多 次 传 代 后 菌 体 变 为球 形 亚 碲 酸 钾 BAP（ 选 择 鉴 别 培 养 基 ）v黑 色 菌 落 鉴 别 依 据v根 据 菌 落 特 征 及 生 化 反 应 特

6、 点 可 将 本 菌 分 为 ： 重型 、 中 间 型 、 轻 型v不 同 菌 型 还 原 能 力 不 同 ， 呈 现 黑 色 或 灰 黑 色 菌 落白 喉 棒 状 杆 菌在 亚 碲 酸 钾 BAP中 菌 落 三 、 微 生 物 学 检 验 检 验 程 序 见 图 14-3 标 本 采 集 分 泌 物 ， 取 双 份 毒 力 试 验患 者 或 带 菌 者 咽 喉 、 鼻 咽 拭 子 等直 接 涂 片染 色 镜 检（ 单 染 或G 染 色 +异 染 颗 粒染 色 ） 吕 氏 血 清 斜面 35 1218h 亚 碲 酸 钾 BAP、35 24 48h BAP3516-18h涂 片 染 色镜 检 (

7、G 染色 和 异 染颗 粒 染 色 ） 观 察 菌 落特 点吕 氏 血 清 斜 面生 化 反 应涂 片 染 色镜 检检 验 程 序 直 接 涂 片 染 色 镜 检 ： 2 3张 涂 片 革 兰 染 色 、 异 染 颗 粒 染 色 镜 检 初 报 “ 直 接 涂 片 检 出 形 似 白 喉杆 菌 ” 早 期 诊 断 用 无 菌 棉 拭 子 浸 以 动 物 血 清 ， 采 集 标 本 ，37 10h， 涂 片 染 色 镜 检 提 高 阳 性 率 分 离 培 养 与 鉴 定1、 分 离 培 养 吕 氏 血 清 斜 面 ： 37 、 8 12h 涂 片 染 色 镜 检-检 出 率 要 比 直 接 涂

8、片 高 ， 有 助 于 快 速 诊 断 亚 碲 酸 钾 BAP： 37 、 24 48h， 黑 色 菌 落 BAP： 轻 型 有 溶 血 环 ， 应 注 意 与 溶 血 性 链 球 菌 鉴别 2、 鉴 定 形 态 染 色 、 菌 落 特 点 、 生 化 反 应 糖 发 酵 试 验 、 尿 素 酶 、 硝 酸 盐 还 原 鉴 别 棒 状 杆 菌 属 不 同 的 种 3、 毒 力 试 验 （ 鉴 定 致 病 菌 株 的 重 要 依 据 ） 体 外 法 ：v琼 脂 平 板 毒 力 试 验 （ Elek平 板 毒 力 测 定 ）vSPA协 同 凝 集 试 验v对 流 电 泳 体 内 法 ： 用 豚 鼠

9、 作 毒 素 -抗 毒 素 中 和 试 验 对 流 免 疫 电 泳 琼 脂 平 板 毒 力 试 验 -Elek平 板白 喉 抗 毒 素 待 测 菌 白 喉 抗 毒 素标 准 产 毒 株阴 性 菌 (-)待 测 菌 (+)待 测 菌 (-) （ 五 ） 免 疫 力 测 定1、 锡 克 试 验 （ Schick test）白 喉 外 毒 素 皮 内 试 验 调 查 人 群 在 感 染 或 预 防 接 种 后 对 白 喉 是 否 产 生 免疫 力 根 据 外 毒 素 与 抗 毒 素 中 和 的 原 理 ， 以 少 量 白 喉 外毒 素 测 定 机 体 有 无 相 应 抗 毒 素 缺 点 观 察 时

10、间 长 、 操 作 繁 琐 ， 不 易 进 行 广 泛 测试 2、 致 敏 红 细 胞 凝 集 试 验 测 定 血 清 中 抗 毒 素 水 平 0.1ml血 清 ， 倍 比 稀 释 +外 毒 素 致 敏 红 细 胞 ，37 、 1h后 观 察 结 果 敏 感 度 可 达 10-4单 位 ， 简 便 快 速 （ 二 ） 结 膜 干 燥 棒 状 杆 菌 （ C. xerosis）（ 三 ） 化 脓 棒 状 杆 菌 （ C. pyogenes）（ 四 ） 溃 疡 棒 状 杆 菌 (C. ulcerans)（ 五 ） 假 结 核 棒 状 杆 菌 （ C. pseudotuberculosis）（ 六

11、） 溶 血 棒 状 杆 菌 （ C. haemolyticum）（ 七 ） 杰 克 群 棒 状 杆 菌 （ C. jeikeium-CDC group JK）（ 一 ） 假 白 喉 棒 状 杆 菌 （ C. pseudodiphtheriticum）第 二 节 类 白 喉 棒 状 杆 菌 共 同 特 点 ： 大 多 不 产 生 外 毒 素 体 较 粗 短 ， 着 色 较 均 匀 ， 很 少 有 异 染 颗 粒 大 多 寄 生 在 人 或 动 物 的 鼻 腔 、 咽 喉 、 外 耳 道 、 外 阴 、 泌 尿 道 和 皮 肤 等 处 条 件 致 病 菌 ， 可 引 起 心 内 膜 炎 、 菌 血 症 、 肺 炎 、 泌 尿 生 殖 道 感 染 等 鉴 别 生 化 反 应