《血栓与止血试验》PPT课件

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1、 血 栓 与 止 血 检 验 临 床 血 液 学 教 研 室 第 一 节 血 栓 与 止 血 的 筛 选 检 验一 、 一 期 止 血 缺 陷 的 筛 选 检 验二 、 二 期 止 血 缺 陷 的 筛 选 检 验三 、 纤 溶 活 性 增 强 的 的 筛 选 检 验四 、 抗 凝 物 质 检 验 出 血 时 间 测 定 血 小 板 计 数 束 臂 试 验 ( 毛 细 血 管 脆 性 实 验 ) 血 块 收 缩 试 验 毛 细 血 管 抵 抗 力 试 验 第 一 节 一 期 止 血 筛 查 试 验 出 血 时 间 测 定 (bleeding time, BT) 一 、 原 理 : 测 定 在 皮

2、 肤 受 特 定 条 件 外 伤 后 , 出 血 自 然 停 止所 需 的 时 间 即 为 出 血 时 间 。 此 过 程 反 映 了 毛 细 血管 与 血 小 板 的 相 互 作 用 , 包 括 内 皮 下 组 织 与 血 小板 粘 附 ( 通 过 vWF 的 作 用 ) 、 血 小 板 的 聚 集 和 释放 等 反 应 , 以 及 PGI 2 与 TXA2 的 动 态 平 衡 。 二 、 方 法 Duke法 、 Ivy法 、 出 血 时 间 测 定 器 法 ( TBT法 ) ( 卫 生 部 推 荐 方 法 )三 、 试 剂 与 器 材 : 1 、 血 压 计 , 秒 表 , 干 净 滤 纸

3、 2 、 出 血 时 间 测 定 器 四 、 操 作 : 1、 血 压 计 袖 带 缚 于 测 定 上 肢 的 上 臂 , 加 压 并 维 持 在 40mmHg,儿 童 减 半 。 2、 在 肘 前 窝 下 5cm处 的 尺 侧 做 局 部 消 毒 后 , 将 测 定 器 垂 直 贴 于 皮 肤 表 面 , 按 下 按 钮 , 同 时 启 动 秒 表 , 移 开 测 定 器 。 3、 每 隔 30s,用 干 净 滤 纸 吸 去 流 出 的 血 液 , 直 至 流 血 自然 停 止 , 并 记 录 秒 表 读 数 。 五 、 参 考 值 : 2 .3 -9 .5 min六 、 临 床 意 义 :

4、 延 长 : 1 、 血 小 板 数 量 异 常 , 如 ITP、 TTP 2 、 血 小 板 功 能 异 常 , 如 plt无 力 症 、 巨 大 plt综 合 征 、 储 存 池 病 3 、 血 管 壁 异 常 血 管 性 血 友 病 、 遗 传 性 毛 细 血 管 扩 张 症 4 、 某 些 严 重 的 凝 血 因 子 缺 乏 缩 短 : 高 凝 状 态 和 血 栓 性 疾 病 七 、 质 量 控 制 1 、 注 意 影 响 BT测 定 的 因 素 2 、 滤 纸 吸 去 血 液 时 , 避 免 与 伤 口 接 触 3 、 注 意 药 物 的 影 响 ( 抗 凝 剂 、 Apc) 血 小

5、 板 检 验一 、 血 小 板 计 数二 、 血 小 板 生 存 时 间 检 测三 、 血 小 板 相 关 抗 体 检 测四 、 血 小 板 粘 附 试 验五 、 血 小 板 聚 集 试 验六 、 血 小 板 第 3 因 子 有 效 性 检 测七 、 血 小 板 膜 糖 蛋 白 检 测八 、 血 小 板 活 化 指 标 检 测 ( 血 浆 -TG、 PF4 、 血 小 板 P选 择 素 检 测 ) 血 小 板 计 数( platelet count , PC或 plt) 正 常 值 : ( 100 300) 109/L危 险 PC 20 10 9/L可 引 起 自 发 性 出 血 血 小 板

6、粘 附 试 验 ( platelet adhension test,PAdT)原 理 : 受 检 者 血 液 一 定 速 度 通 过 一 定 量 玻 璃 珠 的 塑 料管 , 测 定 通 过 玻 璃 珠 前 后 血 液 中 血 小 板 数 的 差 值 ,即 为 粘 附 于 玻 珠 和 塑 料 管 的 血 小 板 数 , 由 此 可 计 算出 其 占 血 小 板 总 数 的 百 分 比 , 即 为 血 小 板 粘 附 率 。方 法 : 玻 球 法 、 玻 璃 滤 器 法 、 玻 珠 法 临 床 意 义 : 血 管 性 血 友 病 、 巨 大 血 小 板 综 合 症 、 血 小 板 无 力 症 、

7、 肝硬 化 、 MDS、 急 性 白 血 病 、 服 用 抗 血 小 板 药 物 等 血 栓 前 状 态 和 血 栓 性 疾 病 、 妊 高 症 、 口 服 避 孕 药 等粘 附 率 减 低粘 附 率 增 高 诱 聚 剂 PPPPRP血 小 板 聚 集 试 验platelet aggregation tset, PAgT比 浊 法 : 以 PPP设 最 低 浊 度 , PRP设 最 高 浊 度 , 在 血 浆 中 加 入 诱 聚剂 , 测 定 血 浆 浊 度 的 变 化 , 绘 制 血 小 板 聚 集 曲 线 。 临 床 意 义 : 血 小 板 无 力 症 、 血 管 性 血 友 病 、 巨

8、大 血 小 板 综 合 症 、 血小 板 贮 存 池 病 、 低 ( 无 ) 纤 维 蛋 白 原 血 症 、 肝 硬 化 、 使 用血 小 板 抑 制 剂 等 。 高 凝 状 态 、 血 栓 形 成 性 疾 病 、 动 脉 粥 样 硬 化 、 糖 尿 病 、口 服 避 孕 药 、 人 工 瓣 膜 移 植 术 后 、 吸 烟 等 。聚 集 率 减 低聚 集 率 增 高 质 量 控 制 : 1.采 血 要 顺 利 , 避 免 组 织 液 混 入 , 抗 凝 剂 使 用 合 理 ( 不 用EDTA抗 凝 ) 2.采 集 后 3h内 室 温 下 完 成 3.试 验 前 十 天 停 用 一 切 抑 制

9、血 小 板 聚 集 的 药 物 ; 试 验 前 禁食 高 脂 类 食 物 4.注 意 PRP: 1000r/min离 心 10min PLT(100 300) 109/L PPP : 3000r/min离 心 20min PLT 20 10 9/L 全 血 凝 固 时 间 测 定 ( CT) 活 化 部 分 凝 血 活 酶 时 间 测 定 ( APTT) 血 浆 凝 血 酶 原 时 间 测 定 ( PT) 第 二 节 二 期 止 血 缺 陷 筛 查 检 验 全 血 凝 固 时 间 测 定 (coagulation time, CT)原 理 血 液 从 血 管 中抽 出 与 带 负 电 荷表 面

10、 接 触内 源 性 凝 血 途 径 启 动纤 维 蛋 白 形 成 ( 血 液 凝 固 ) 临 床 意 义 1 . 因 子 VIII、 IX、 XI活 性 减 低 ; 严 重 的 因 子 、 和纤 维 蛋 白 原 缺 乏 2 . 原 发 性 纤 溶 亢 进 ; 血 循 环 中 存 在 抗 凝 物 质 高 凝 状 态 和 血 栓 性 疾 病CT延 长CT缩 短肝 素 治 疗 用 量 检 测 指 标 活 化 部 分 凝 血 活 酶 时 间 测 定 (activated partial thromboplastin time, APTT)一 、 原 理 APTT Ca2+脑 磷 脂 白 陶 土 Ca2

11、+脑 磷 脂部 分 凝血 活 酶 二 、 操 作 ( 一 ) APTT手 工 法 (试 管 法 ) 血 浆 0 .1 ml APTT试 剂 各 0 .1 ml +CaCl2 0 .1 ml ( 混 匀 计 时 ) 结 果 观 察 : 缓 慢 倾 斜 试 管 , 观 察 液 体 流 动 状 态 , 流 动 停 止 停 止 计 时 参 考 值 2 5 45s (二 ) 仪 器 法 37 水 浴5min 37 温 浴 APTT延 长 缩 短因 子 VIII、 IX、 XI活 性 减 低 高 凝 状 态三 、 临 床 意 义 肝 素 抗 凝 监 测 APTT纠 正 试 验 于 患 者 血 浆 中 分

12、别 加 入 1 /4 的 正 常 新 鲜 血 浆 、 硫 酸 钡吸 附 血 浆 、 正 常 血 清 , 再 作 APTT试 验 。 硫 酸 钡 吸 附 血 浆 VIII、 XI、 XII ( 不 含 IX) 正 常 血 清 IX、 XI、 XII( 不 含 VIII) 新 鲜 血 浆 VIII、 IX、 XI、 XII 血 友 病 甲 血 友 病 乙 F 缺 乏正 常 血 浆硫 酸 钡 吸 附 血 浆 ( 缺 )正 常 血 清 (缺 ) 纠 正不 纠 正 纠 正纠 正 纠 正纠 正 不 纠 正患 者 血 浆 纠 正纠 正 凝 血 酶 原 时 间 测 定Prothrombin time , PT

13、一 、 原 理 Ca 2+脑 磷 脂 PT 组 织 因 子Ca2+ 脑 磷 脂 二 、 报 告 方 式 1 . 直 接 报 告 患 者 及 正 常 对 照 的 PT秒 数 2 . 报 告 凝 血 酶 原 时 间 比 值 ( PTR) PTR=受 检 者 PT( 秒 ) /正 常 对 照 PT( 秒 ) 3 . 报 告 国 际 标 准 化 比 值 ( INR) INR=PTRISI 组 织 凝 血 活 酶 的 国 际 敏 感 指 数 ( internation sensetivity index,ISI) 是 用 组 织 凝 血 活 酶 试 剂 与 ISI已 知 的 国 际 参 比 品 或经 其

14、 标 定 过 的 参 比 品 之 间 敏 感 度 相 比 较 的 一 个 参 数 。 测 定 方 法 : 用 多 份 凝 血 因 子 水 平 不 同 的 血 浆 ( 包 括 正 常 人 和 口 服 抗 凝剂 患 者 的 血 浆 ) , 用 参 比 品 测 得 它 们 的 PT的 对 数 ( lgPT) ,再 用 待 标 定 的 组 织 凝 血 活 酶 测 得 它 们 的 lgPT, 以 前 者 为 纵 坐标 , 后 者 为 横 坐 标 作 图 , 经 回 归 求 得 直 线 斜 率 。 待 标 定 的 组 织 凝 血 活 酶 的 ISI=已 知 的 ISI 斜 率 PT延 长 缩 短因 子 V

15、II、 II、 V、 X、 Fg活 性 减 低 高 凝 状 态三 、 临 床 意 义 口 服 双 香 豆 素 类 抗 凝 药 物 监 测 要 保 证 止 凝 血 检 验 的 质 量 必 须 做 好 以 下 十 点 :1 . 采 血 须 顺 利 , 尽 量 用 大 号 针 头 , 动 作 要 轻 柔 ; 2 . 标 本 用 加 盖 有 刻 度 标 记 的 塑 料 试 管 或 硅 化 管 收 集 ;3 . 抗 凝 剂 用 1 0 9 mmol/L的 枸 橼 酸 钠 , 抗 凝 剂 与 血 液 的 比 例 为 1 :9 。 当 Hct 增 高 55% 或 4 0 mg/L, 见 于 原 发 性 纤溶

16、 症 、 DIC、 M3 、 应 用 链 激 酶 等 溶 栓 治 疗 时 。 血 浆 D-二 聚 体 测 定一 、 原 理 : 1 . 胶 乳 凝 集 法 2 . ELISA法二 、 参 考 值 : 0 .5 mg/L有 临 床 意 义三 、 临 床 意 义 : 1 . DIC时 呈 阳 性 或 明 显 增 高 , 另 见 深 静 脉 血 栓、 心 梗 、 肺 栓 塞 、 重 症 肝 炎 等 2 . 可 作 为 原 发 纤 溶 和 继 发 纤 溶 鉴 别 的 重 要 依据 。 血 浆 硫 酸 鱼 精 蛋 白 副 凝 试 验( plasma protamine paracoagulation t

17、est, 3P) 结 果 判 断 阴 性也 是 鉴 别 继 发 性 纤 溶与 原 发 性 纤 溶 的 试 验 血 浆 硫 酸 鱼 精 蛋 白 副 凝 固 试 验plasma protamin parcoagulation test, 3P 四 、 临 床 意 义 1 . 阴 性 正 常 或 DIC晚 期 , 原 发 纤 溶 2 . 阳 性 含 细 颗 粒 沉 淀 , 粗 颗 粒 沉 淀 、 纤 维 蛋白 丝 网 或 胶 冻 样 物 质 , 见 于 DIC早 期 , 中 期 , 静 脉血 栓 、 严 重 创 伤 , 大 手 术 , 及 久 置 冰 箱 的 标 本 生 理 性 抗 凝 蛋 白 检

18、验 :一 、 抗 凝 血 酶 检 测 1 、 血 浆 抗 凝 血 酶 活 性 检 测 2 、 血 浆 抗 凝 血 酶 抗 原 检 测二 、 蛋 白 C检 测 1 、 血 浆 蛋 白 C活 性 检 测 2 、 血 浆 蛋 白 C抗 原 检 测三 、 血 浆 蛋 白 S抗 原 检 测四 、 组 织 因 子 途 径 抑 制 物 检 测第 四 节 抗 凝 物 质 检 验 病 理 性 抗 凝 物 质 检 验 :一 、 复 钙 交 叉 试 验二 、 凝 血 酶 时 间 检 测 及 甲 苯 胺 蓝 纠 正 试 验三 、 普 通 肝 素 和 低 相 对 分 子 质 量 肝 素 检 测四 、 凝 血 因 子 抑

19、 制 物 检 测五 、 狼 疮 抗 凝 物 质 的 筛 选 试 验 和 确 诊 试 验 凝 血 酶 时 间 测 定 及 甲 苯 胺 蓝 纠 正试 验 thrombin time,TT一 、 原 理 : 凝 血 酶TT 二 、 结 果 判 断 : 正 常 人 凝 血 酶 时 间 一 般 在 1 6 -1 8 s, 超 过 正 常 对照 3 s以 上 视 为 延 长 ; 如 正 常 对 照 在 2 0 s以 上 , 则 超过 5 s为 延 长 。 加 甲 苯 胺 蓝 后 TT明 显 缩 短 , 与 未 加 甲 苯 胺 蓝的 TT比 较 相 差 5 s以 上 , 视 为 纠 正 。 TT延 长血 浆 抗 凝 物 质 增 多 纤 维 蛋 白 原 异 常甲 苯 胺 蓝 能 纠 正 甲 苯 胺 蓝 不 能 纠 正 链 激 酶 、 尿 激 酶 溶 栓 治 疗 监 测 指 标 纤 维 蛋 白 原 异 常高 纤 维 蛋 白 原 血 症 为 心 脑 血 管 血 栓形 成 的 独 立 危 险 因 素 。量 增 高严 重 肝 病营 养 不 良DIC减 低 老 年 人 、 慢 性 感 染肿 瘤 、 应 激 、口 服 避 孕 药 期 间 等

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