几种特殊的肠上皮细胞系

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1、几种特殊的肠上皮细胞系匡伟;赵国琦【摘 要】进行肠上皮细胞的分离培养是研究小肠功能、营养物质吸收机制及其调控的主要手段之一.本文综述了国外已经建立的几种特殊的肠上皮细胞系.【期刊名称】中国畜牧杂志年(卷),期】2007(043)013【总页数】4页(P41-43,55)关键词】 小肠;上皮细胞;综述作 者】 匡伟;赵国琦【作者单位】 扬州大学动物科学与技术学院,江苏扬州,225009;扬州大学动物科学 与技术学院,江苏扬州,225009正文语种】 中 文中图分类】 农业科学 辩转view pa移o隅练溅几种特殊的肠上皮细胞系匡伟，赵国琦+ (扬州大 学动物科学与技术学院，江苏扬州 225009

2、)摘要：进行肠上皮细胞的分离培养 是研究小肠功能 、营养物质吸收机制及其调控的主要手段之一。本文综述了 国 外已经建立的几种特殊的肠上皮细胞系。关键词：小肠；上皮细胞：综述中图 分类号：S865.1+20.1 文献标识码：A 文章编号：0258-7033(2007) 13-0041- 03在体内， 不同类群的肠系细胞之间广泛的相互作 用使得实验研究极其困难， 而体外细胞培养为研究肠上 皮细胞增殖和分化的调控因子提供了简单 、快速和准 确 的手段。 国外已有学者建立 了许多特定的肠上皮细胞 系 ，如大鼠肠隐窝细胞 系 IEC-6 、IEC-18 、IEC-17 ， 大鼠 肠上皮细胞系 IRD98

3、 ， 人结肠腺癌细胞系 Caco-2 、HT-29、Lovo 、SW-480 ，人结肠上皮细胞 T84 等，已被广泛地 用 于基本的生理过程、病理、药理等方面的研究。1IEC-6细胞系IEC-6是 Quaroni 等【 1】从正常大鼠空肠隐窝细胞分离出来并经体外培养传代而建立的 细胞株，它保持了小肠上皮干细胞未分化的特性，在组织学和免疫学方面与增 殖性隐窝细胞无明显差别，而且在合适条件下，能分化为成熟的肠上皮细胞。 IEC-6 的建立对于研究小肠上皮细胞的生长、分化、代谢等功能，药物作用以 及各种致病因素作用下 的肠黏膜的病理生理改变及其 发病机制等具有重要意义 。IEC-6自建株以来被国外学

4、者广泛运用于小肠黏膜修复的细胞、分子和基因机制 的研究。Fujita等f2忮用细胞研究了小肠上皮细胞对维生素C及其氧化形式去氢 抗坏血酸(DHA)的转运机制，结果证明，大鼠小肠上皮细胞中，至少存在2种 不同的维生素C转运系统，维生素C由一种特异性的载体转运，DHA则主要 由葡萄糖转运载体转运。Meng等【引通过培养大鼠小肠上皮IEC-6细胞研究 脂多糖和NO对精氨酸转运的影响，发现脂多糖通过增加y(+)转运系统 mRNA水平和载体蛋白水平来增强IEC-6细胞中精氨酸转运活收稿H期： 2006-03 03 ;修丨四日期：2006-05-17 +通讯作者性，而这一过程又受到 NO的调节。我国学者曾

5、于1997年引进并建立了 IEC-6的培养传代和活性检测 的实验方法 ，认为采用 IEC-6 作实验模型具有操作简便、传代稳定 、指标客观 重复性好等优点。陈祥贵等f4I采用相差显微镜、透射电镜、扫描电镜等技术 和MrIT法对引进的IEC-6细胞的培养鉴定和生长特性做了详细研究,结果表 明 ， 引进的 IEC-6 细胞具有典型的正常肠上皮隐窝细胞的形态特征 、超 微结构 和生长特性，表明细胞株未发生转化或变异。 2IEC-18 细胞系 IEC- 18(ilealepitheliumcell)也是由Quaroni等Iq最先从大鼠回肠隐窝细胞中分离出 的细胞系。 在正常的 培养条件下 ，该细胞存活

6、力高，保持了肠隐窝细胞的许 多 特性，并且能够分化成肠上皮细胞。Armbrecht等【61将IEC-18用于体外条 件下研究 1，25- 羟基 VD3 的作用机 制 ，发现 l，25- 羟基 VD3(lxl0-7rriol/L) 可以将细胞色素P450cc24的mRNA水平提高10倍，并且佛波醇的添加可以 显著提高小肠上皮细胞对 l，25- 羟基 VD3 的敏感性。小肠隐窝细胞在调节 Cl- 分泌过程中起重要作用，Basavappa等【7】利用IEC-18研究对CI-分泌具有 调节作用的Cl-通道的类型，发现小肠隐窝细胞表达了多种Cl-通道。Vasiluk 等【 8 将 IEC-18 作为研究

7、草甘膦( 一 种非选择性除草剂 ) 转运、绑定和毒性 的细胞模型 ， 当 其剂量大于 10mg/mL 时 ，会显著破坏肠细胞的屏障功 能。IEC-18还可以用于研究上皮细胞的渗透性。3IEC-17细胞系从新生大鼠十二指肠 分离出的 IEC-17 细胞与未 分化的肠隐窝细胞相似 ，能表达肠特异性抗原 ，并且 具中固耄 教44恙 参匡伟 ， 赵 国琦+外已经建立的几种特殊的肠上皮细胞 系 关键词：小肠；上皮细胞：综述中图分类号：S865.1+20.1文献标识码：A在 体内， 不同类群的肠系细胞之间广泛的相互作用使得实验研究极其困难，而体外 细胞培养为研究肠上皮细胞增殖和分化的调控因子提供了简单 、

8、快速和准确的手 段。 国外已有学者建立 了许多特定的肠上皮细胞系 ，如大鼠肠隐窝细胞系 IEC- 6 、IEC-18 、IEC-17 ， 大鼠肠上皮细胞系 IRD98 ， 人结肠腺癌细胞系 Caco-2 HT- 29、Lovo 、SW-480 ，人结肠上皮细胞 T84 等，已被广泛地用于基本的生 理过程、病理、药理等方面的研究。1细胞系是Quaroni等【1】从正常大鼠 空肠隐窝细胞分离出来并经体外培养传代而建立的细胞株 ， 它保持了小肠上皮干 细胞未分化的特性 ， 在组织学和免疫学方面与增殖性隐窝细胞无明显差别 ，而 且在合适条件下 ，能分化为成熟的肠 上皮细胞 。 IEC-6 的建立对于研

9、究小肠上 皮细胞的生长 、分化 、代谢等功能 ，药物作用 以及各种致病因素作用下 的肠黏 膜的病理生理改变及其发病机制等具有重要意义 。细胞研究了小肠上皮细胞对维 生素C及其氧化形式去氢抗坏血酸(DHA)的转运机制，结果证明，大鼠小肠上 皮细胞中，至少存在2种不同的维生素C转运系统，维生素C由一种特异性的 载体转运，DHA则主要由葡萄糖转运载体转运。Meng等【引通过培养大鼠 小肠上皮IEC-6细胞研究脂多糖和NO对精氨酸转运的影响，发现脂多糖通过增 加y(+)转运系统mRNA水平和载体蛋白水平来增强IEC-6细胞中精氨酸转运 活收稿H期：2006-03 03 ；修丨四日期：2006-05-1

10、7 +通讯作者我国学者 曾于1997年引进并建立了 IEC-6的培养传代和活性检测的实验方法，认为采用 IEC-6 作实验模型具有操作简便 、传代稳定、指标客观 、重复性好等优点。 陈 祥贵等f4I采用相差显微镜、透射电镜、扫描电镜等技术和MrIT法对引进的 IEC-6细胞的培养鉴定和生长特性做了详细研究,结果表明,引进的IEC-6细 胞具有典型的正常肠上皮隐窝细胞的形态特征、超微结构和生长特性，表明细胞 株未发生转化或变异。2 IEC-18 IEC-18(ilealepitheliumcell)也是由 Quaroni 等 Iq最先从大鼠回肠隐窝细胞中分离出的细胞系。在正常的培养条件下，该细胞

11、存 活力高，保持了肠隐窝细胞的许多特性，并且能够分化成肠上皮细胞。Armbrecht等【6l将用于体外条件下研究1, 25-羟基VD3的作用机制，发现 l , 25-羟基VD3(lxl0-7rriol/L)可以将细胞色素P450cc24的mRNA水平提高 10倍,并且佛波醇的添用，Basavappa等【7】利用IEC-18研究对CI-分泌具 有调Cl-通道。Vasiluk等【8将IEC-18作为研究草甘膦(一种非选择性除草 剂)转运、绑定和毒性的细胞模型,当其剂量大于10mg/mL时，会显著破坏 肠细胞的屏障功能。3 IEC-17从新生大鼠十二指肠分离出的IEC-17细胞与未分 化的肠隐窝细胞

12、相似，能表达肠特异性抗原，并且具l蓑 述.RevcevgPa)ers有少量的微绒毛，但是缺少完全分化的上皮细胞标记物【91。IEC-17还可用于研究细胞毒性和细胞代谢。Mor- drelle等I10l利用 IEC-17细胞研究肠隐窝L-谷氨酸的转运机制，动力学分析和竞争试验表明存 在3种机制：高亲和力的Na+非依赖型转运系统;高亲和力的Na+依赖 型转运系统；低亲和力Na+依赖型系统。Quaroni等嗨J EC-6、IFC- 17、IEC-18作为模型研究糖皮质激素受体以及激素作用下细胞形态、超微结 构和功能上的改变。4IRD98细胞系IRD98是从胎鼠小肠上皮分离得到的细胞 系 ，处 于相对

13、分化状态。 其形态和亚显微结构与肠上皮细胞相 似 ，并且含有上 皮细胞的多种酶：氨基肽酶、碱性磷酸酶、人丫一谷氨酰转移酶、糖分解酵素和 麦芽糖酶12。Safonova等【1研究表明，大鼠小肠上皮细胞IRD98可作为研 究胆固醇吸收的模型，他们利用1q胆固醇，3H胆固醇和14C麦固醇研究 了培养的人类小肠组织和大鼠小肠 上 皮细胞 IRD98 对胆固醇的吸收， 结果表面 胆固醇的吸收与时间和剂量有关，而麦固醇的吸收只能达到吸收的 胆固醇总量的 25%。 当 IRD98 和 IEC-17 暴露在 3%的乙醇溶液中， 细胞的存活降低， CAMP和膜的流动性增加而恩前列腺素（前列腺素E :类似物，具有

14、明显的细 胞保护作用）显著降低了乙醇对2种细胞的损坏作用,并且IRD98细胞对恩前 列腺素更为敏感41n 5Caco-2 细胞系 Caco-2（thehumancolon CarCInomaCellline） 是 一种人类结肠癌细胞来源 的分化 良好的消化道上皮细胞 ， 由Fogh等【1月分离得到的。细胞亚显微结构研究表明,Caco-2细胞与人小 肠上皮细胞在形态学上相似，具有与小肠吸收细胞相同的微绒毛和紧密的细胞连 接。 此 外，该细胞系还表达了典型的小肠微绒毛水解酶和营 养物质转运体。 Caco-2 细胞具有糖类、氨基酸、二肽、 胆碱及维生素 B12 的主动转运载体， 还具有小肠刷状缘细胞

15、标志酶一碱性磷酸酶。由于形态学及生化性质都与小肠 上 皮细胞很相似,Caco-2细胞模型已广泛的用于体外药物分子肠吸收的研究。在 研究肠吸收 口 服抗癫痫药氨己烯酸是否 利用质子藕联氨基酸转运体 l （ hPATl 和SLC36A1 ）时,Abbot等【-司使用了 Caco-2作为人类小肠上皮细胞模 型。为了证实肠上皮细胞对维生素B6的转运需要载中耄载客急体调节, Hamid等I”将Cac . o-2作为模型研究厂维生素B。的转运，试验结果首次 证实了肠上皮细胞对维生素B6的摄取过程需要特异性的载体转运机制，这一机 制受pH影响，受细胞内蛋白激酶A(PKA)调节途径的调控。Caco-2单层细胞

16、 还可作为一种方便快速的肽转运载体调节的药物吸收的体外研究系统。细胞模型足 最近十儿年来国外J “泛采用的一种研究药物小肠吸收的体外模型，具有很多优 点：培养条件相对容易控制 ，能简便快速的获得大量有价值的信息 ；其来源 于人结肠癌细胞， 同源性好；该模型与药物在肠中的吸收有良好的相关性、 重现性，广泛的适用性等。当然，该细胞系并非完全等同于小肠上皮细胞：单 细胞构成，缺少细胞异质性，TEER值比正常小肠上皮细胞高；因为缺少杯 状细胞而缺少小肠上皮中的黏液层，而黏液层是吸收的主要障碍之一；某些代 谢酶，如细胞色素 P450 的一些同工酶的表达与人体小肠上皮细胞有差别等。 6HT-29细胞系人大

17、肠癌细胞HT-29来源于人结肠中分化腺癌。该细胞是一种 体外易培养的人结肠腺癌细胞,能表达多种黏液素I墉丨其形态、黏附能力等 与肠上 皮细胞类似，能表达正常人肠细胞的形态和某些生理特性， 国外常用其 作为体外黏附试验的模拟细胞。在含有葡萄糖的培养条件卜-,HT-29细胞处 于未分化状态(HT-29glu),而在没有葡萄糖存在时，相互接触的HT-29发生 高度极化( HT-29gal )，形成 2 种显形，分别与高度分化的吸收上皮细胞和 分泌黏液的杯状细胞相似。该细 胞系常被作为研究小肠药物、营养物质吸收和 代谢的体外模型 。由于该细胞的分化过程与胚胎时期小肠发育过程相似 ，因此 该细胞可以作为

18、研究上皮细胞分化的体外模型。此外,BlajslI9研究表明，分 化的HT-29细胞是一种优良的细胞模型，可以用于研究Na(+)依赖型糖转运 载体的调节过程。Wice等I加将HT-29作为研究调节肠上皮细胞增殖分化过程 的基因的体外模型。7T84细胞系T84，人结肠腺癌细胞系，结构与正常的肠上 皮细胞相似。 该细胞生长在有渗透性的支持物上时，可以形成单层柱状上皮和紧 密的细胞连接，底侧膜与支持物黏附，顶膜暴露在外。作为种体外模型,T84 已被广泛地用于研究细胞转运过程。美国学者7eng等I2IIJ用一种l蓑 述.RevcevgPa）ers物【91IEC-17还可用于研究细胞毒性和细胞代谢。Mor

19、- drelle等I10I利用IEC-17细胞研究肠隐窝L-谷氨酸的转运机制，动力学分析 和竞争试验表明存在3种机制：高亲和力的Na+非依赖型转运系统;高亲 和力的Na+依赖型转运系统;低亲和力Na+依赖型系统。Quaroni等 嗨 JEC-6 、IFC-17、IEC-18 作为模型研究糖皮质激素受体以及激素作用下细胞 形态、超微结构和功能上的改变。4 IRD98细胞系是从胎鼠小肠上皮分离得到 的细胞系，处 于相对分化状态。其形态和亚显微结构与肠上皮细胞相似，并且 含有上皮细胞的多种酶：氨基肽酶、碱性磷酸酶、人丫一谷氨酰转移酶、糖分解 酵素和麦芽糖酶l2。Safonoval研究表明，大鼠小肠上

20、皮细胞IRD98可作为 研究胆固醇吸收的模型，他们利用1q胆固醇，3H胆固醇和14C麦固醇研 究了培养的人类小肠组织和大鼠小肠上皮细胞 IRD98 对胆固醇的吸收， 结果表 面胆固醇的吸收与时间和剂量有关，而麦固醇的吸收只能达到吸收的胆固醇总量 的25%。当IRD98和IEC-17暴露在3%的乙醇溶液中，细胞的存活降低, cAMP和膜的流动性增加而恩前列腺素（前列腺素E :类似物，具有明显的细胞 保护作用）显著降低了乙醇对 2 种细胞的损坏作用，并且 IRD98 5 （the human colon carcinomacellline）是一种由Foghl月分离得到的。细胞亚显微结构研 究表明，

21、细胞与人小肠上皮细胞在形态学上相似 ，具有与小肠吸收细胞相同的微 绒毛和紧密的细胞连接。此外 ，该细胞系还表达了典型的小肠微绒毛水解酶和营 养物质转运体。 Caco-2 细胞具有糖类 、氨基酸、二肽、胆碱及维生素 B12 的 主动转运载体， 还具有小肠刷状缘细胞标志酶一碱性磷酸酶。收的研究。在研究 肠吸收口 服抗癫痫药氨己烯酸是否利用质子藕联氨基酸转运体 l （ hPATl 和 SLC36A1 ）时,Abbot-司使用了 Caco-2作为人类小肠上皮细胞中耄载 客急B的转运，试验结果首次证实了肠上皮细胞对维生素受pH影响，受细胞内 蛋白激酶A(PKA)调节途径的调控。Caco-2单层细胞还可作

22、为一种方便快速的肽 转运“泛采用的一种研究药物小肠吸收的体外模型 ，具有很多优点 ：培养条件相 对容易控制， 能简便快速的获得大量有价值的信息；其来源于人结肠癌细胞， 同源性好；该模型与药物在肠中的吸收有良好的相关性、重现性，广泛的适用 性等。 当然 ，该细胞系并非完全等同于小肠上皮细胞：单一细胞构成， 缺少细 胞异质性， TEER 值比正常小肠上皮细胞高；因为缺少杯状细胞而缺少小肠上皮 中的黏液层，而黏液层是吸收的主要障碍之一；某些代谢酶，如细胞色素 P450 的一些同工酶的表达与人体小肠上皮细胞有差别等。6 HT-29人大肠癌细胞HT- 29 来源于人结肠中分化腺癌。该细胞是一种体外易培养

23、的人结肠腺癌细胞， 能 表达多种黏液素I墉丨似，能表达正常人肠细胞的形态和某些生理特性，国外常 用其作为体外黏附试验的模拟细胞。在含有葡萄糖的培养条件卜-，HT-29细 胞处于未分化状态 (HT- 29glu) ，而在没有葡萄糖存在时，相互接触的 HT-29 发生高度极化(HT-29gal )，形成2种显形，分别与高度分化的吸收上皮细胞 和分泌黏液的杯状细胞相似。 该细胞系常被作为研究小肠药物 、营养物质吸收和 代谢的体外模型。 由于该细胞的分化过程与胚胎时期小肠发育过程相似， 因此 该细胞可以作为研究上皮细胞分化的体外模型。此外，BlajslI9研究表明，分化 的HT-29细胞是一种优良的细

24、胞模型，可以用于研究Na(+)依赖型糖转运载体 的调节过程。Wice等I加将HT-29作为研究调节肠上皮细胞增殖分化过程的基 因的体外模型。 7 T84 T84 ，人结肠腺癌细胞系 ，结构与正常的肠上皮细胞相似 该细胞生长在有渗透性的支持物上时，可以形成单层柱状上皮和紧密的细胞连接 底侧膜与支持物黏附，顶膜暴露在外。 作为双室系统( twochambersystem) 研 究了 T84细胞对粪肠球菌的转胞吞作用，结果表明该模型可作为研究肠道转胞 吞作用的体外模型。同年，这些学者又研究发现，明胶酶在T84细胞在肠粪球 菌的转胞吞过程中发挥至关重要的作用。将T84、HT-29和纤维细胞共同培养 在

25、I型胶原上发现，纤维细胞可以诱导肠隐窝样的上皮细胞T84分化，这种诱 导作用在转化生长因子 卢 ( transforminggrowth factor-beta) 的存在下进一 步加强。 8 展望国外已经建立了多种肠上皮细胞株， 但多数是肠肿瘤细胞株， 虽然在病理 、药理和基本的生理过程等方 面得到广泛应用 ，但是局限性却很明显。 发达国家已经在一些医药开发等领域构建了细胞库 ， 但其仅局限于 人类的生物 制药开发应用 ，而对于为人类提供 肉、蛋、 奶等的畜禽类细胞营养方面的研究 还刚刚起步 ， 尤其 是反刍动物方面的细胞培养报道更为罕见 ， 因此将会 有更大 的前景。参考文献：1Quaron

26、iA.IsselbacherKJ,Ruoslahti E.Fibroneccinsynthesis by epithelialcrypt cellsofraL small intestineJ. Proc NatlAcadSci USA, 1978, 75: 5548-5552.2ResFujitaI,AkagiY, HiranoJ,et 甜.Distinct mec:hanismsof trans- port of ascorbicacid anddehydroascorbicacid in intestinalepithe- lialcells (IEC-6)J1. Commun MoIP

27、athol Pharmacol.2000,107(3- 4):219-231.3MengQ,ChoudryHA, SoubaWW, eld.Regulationof aminoacid argininetransportby lipopolysaccharideandnitricoxide in intesti- nal epithelialIEC-6cellsJl. J CasLrointestSurg, 2005,9(9):1276- 1285. 4陈祥贵，芮光伟，任 Jil 洪， 等.IEC-6细胞的培和牛长特-lt研究Lrl四川T业学院,2003,22(1):41 -44 5 Quar

28、oniA, Isselbacher K J.Cytotoxic effectsand metabolismof ben- zoapyreneand 7,12-dimethylbenzalanthracenein duodenalandilealepithelialcellc.ulturesJ. J Natl CancerInst, 1981, 67: 1353- 1362.6ArmbrechtH J,HodamT L, Boltz MA, et rd.Phorbolesterruarkedly increases the sensitivity of intesLinalepithelialc

29、ells t0 1,25-dihy- droxyviiaminD3Jl.FEBSLett, 1993, 327(1):13-16. 7BasavappaS, Vulapalli SR, ZhangH, et 以.Chloride channels the smallintestinal celllineTEC-18 叨. J Cell Physiol, 2005,202(1):21 - 31.8VasilukL, Pinto L J,MooreMM.Oral bioavailabilicyof glyphosate: studies using twointestinalcelllinesJ.

30、 EnvironToxicol Chem,2005, 24(1):153-160.融w转 v P 箍玲8. 缫 9 QuaroniA, Isselbacher K J.Cytutoxic effectsandmetabolismof ben-zoapyreneand7,12-dimethylbenzaanthracenein duodenalandilealepithelial cellculturesJ.J Natl CancerInst.1981,67(6):1353- 1362. tOlMordrelleA, HuneauJ F, TomeD.Sodium-dependentand-in

31、de- pendenttransportof I.-glutamatein the rat intestinaJcrypt-likecellIine IEC- 17Jl. BiochemBiophysRes Commun,1997, 233(1):244- 247. Il QuaroniA,JeanQ Tian,CokeM,etcd.Clucocorticoidshave pleiotropic effectsonsmall incestinalcrypt cellsJ. AmJPhysiol Cas-trointest I.iverPhysiol, 1999, 277: C1027-G104

32、0. 12NegrelR.RampalP, NanoJ L.et cd.EstahIishmentandcharacteri-zalion ofanepithelialintestinaJcelllinefrom rat fetusJ.Exp CellRes. 1983,143(2):427-437. 13SafonovaI C, Sviridov DD, RampalP, et 耐.Regulationof choles-terolabsorption in humanandratsmall intestine epithelialcellsJ.Biokhimiia,1993, 58(2):

33、274-284. 14 Ciannarelli S, NanoJ L, FourneiS, etd.F,ffec:tof enprostil andc,imetdineonethanol- induceddamagetointestinal epithelial celllinesIRD98 and IEC17J. Digestion, 1995, 56(6):509-515. 15FoghJ,FoghJ M,Orfeo T.Onehundredandtwenty-sevencultured humanLumorceIJlinesproducingtumorsin nudemiceJ. J N

34、atJ Can- cer Inst, 1977, 59(1):221-226. 16AbbotEL.,CrenadeDS, KennedyDJ,etcd.Vigabatrintransport across the humanintestinalepithelialCaco-2)brush-bordermem- brane is via the H(+)-coupledainino- acidtransporterhPATlJl. Br J Pharmacol,2005,Epul)ahead of print. 17 HamidMSaid, AlvaroOrtiz, TFu)masYMa.Ac

35、amer-mediatedmechanismfor pyridoxine uptakeby humanintestinalepichelialCa-co-2cells:regulation by aPKA-mediatedpathwayJ.AmJ PhysiolCell Physiol,2003,285: Cl 219-C1225. 18TruantS, BruyneelE, GouyerV, etcd.Requirementof both mucinsand proteoglycansin cell-celldissociationand invasivenessofcoloncarcino

36、ma HT- 29cellsJl.IntJ Can:er,2003,104(6):683-694. 19 Blais A.Expressionof Na(+)- coupledsugartransportin HT-29 cells:modulation by glucoseJ. AmJPhysiol Cell Physiol, 1991, 260: 1245.20Wice BM,CordonJ I.AstraLegyfor isolation of cDNAsencoding proteinsaffectinghumanintestinalepithelialcellgrowth and d

37、iffer- f2122 entiation: characterization of anovelgut-specificN- myristoylated annexinJl. CeIJ Biol, 1992,16(2):405-422. ZengJ,TengF, WeinstockCM, et cd.Translocation of Enterococcusfaecalisstrainsacrossamonolayerof polarized humanenterocytelikeT84cellsJ. Clin Microbiol, 2004,42(3): 1149- 1154.Haltt

38、unenT, MarttinenA, Rantalal, et 甜，Fibroblastsandtrans- forminggrowth factor beta induceorganizationanddifferentiationof T84humanepithelialcellsJl. Gastroenterology,1996, 11I(5): 1252- 1262. (T 转 第55页)中蕊嚣东惫双室系统(twochambersystem)研究了 T84细胞对 粪肠球菌的转胞吞作用 ，结果表明该模型可作为研究肠道转胞吞作用的体外模型 同年，这些学者又研究发现，明胶酶在T84要的作用。

39、将T84、HT-29和纤维 细胞共同培养在I型胶原上发现，纤维细胞可以诱导肠隐窝样的上皮细胞T84 分化，这种诱导作用在转化生长因子 卢 ( transforming growth factor-beta) 的存在下进一步加强。 8展望国外已经建立了多种肠上皮细胞株， 但多数是 肠肿瘤细胞株，虽然在病理 、药理和基本的生理过程等方面得到广泛应用 ，但是 局限性却很明显。发达国家已经在一些医药开发等领域构建了细胞库 ， 但其仅局 限 于人类的生物制药开发应用 ，而对于为人类提供 肉 、蛋 、奶等的畜禽类细胞 营养方面的研究还刚刚起步， 尤其是反刍动物方面的细胞培养报道更为罕见， 因此将会有更大的

40、前景。参考文献： 1 QuaroniA.IsselbacherKJ,Ruoslahti E.Fibroneccinsynthesis by epithelialcrypt cellsofraL small intestineJ. Proc NatlAcadSci USA, 1978, 75: 5548-5552. 2 ResFujitaI,AkagiY, HiranoJ,et 甜.Distinct mec:hanismsof trans- port of ascorbicacid anddehydroascorbicacid in intestinalepithe- lialcells (IE

41、C-6)J1. MoIPathol Pharmacol.2000,107(3- 4): 219-231. 3 Meng Q,ChoudryHA, SoubaWW, eld.Regulationof aminoacid argininetransportby lipopolysaccharideandnitricoxide in intesti- nal epithelialIEC-6cellsJl. CasLrointestSurg, 2005,9(9):1276- 4陈祥贵，芮光伟，任 Jil 洪，等.IEC-6 细胞的培和牛长特-It 2003,22(1) :41 -44 QuaroniA

42、, Isselbacher K J.Cytotoxic effectsand metabolismof ben- zoapyreneand 7,12- dimethylbenzalanthracenein duodenaland ilealepithelialcellc.ulturesJ. J Natl CancerInst, 1981, 67: 1353- 1362. 6 ArmbrechtH J,HodamT L, Boltz MA, et rd.Phorbolesterruarkedly the sensitivity of intesLinalepithelialcells t0I,

43、25-dihy- droxyviiaminD3Jl.FEBSLett, 1993, 327(1):13-16. 7 Basavappa S, Vulapalli S R, ZhangH, et 以.Chloride channelsin the smallintestinal ceIIIineTEC-18 叨. J Cell Physiol, 2005,202(1):21 - 1. 8 VasilukL, Pinto LJ,MooreMM.Oral bioavailabilicyof glyphosate: studies using twointestinalcelllinesJ. Envi

44、ronToxicol Chem,2005, 24(1): 153-160.QuaroniA, Isselbacher K J.Cytutoxic effectsandmetabolismof ben- zoapyreneand7,12-dimethylbenzaanthracenein duodenaland ilealepithelial cellculturesJ.J Natl CancerInst.1981,67(6):1353- tOlMordrelleA, HuneauJ F, TomeD.Sodium-dependentand-inde- pendenttransportof I.

45、-glutamatein the rat intestinaJcrypt-likecell Iine IEC- 17Jl. BiochemBiophysRes Commun,1997, 233(1):244- Il QuaroniA,JeanQ Tian,CokeM,etcd.Clucocorticoidshave pleiotropic effectsonsmall incestinalcrypt cellsJ. Am Physiol Cas- trointest I.iverPhysiol, 1999, 277: C1027-G1040. 12NegrelR.RampalP, NanoJ

46、L.et cd.EstahIishmentandcharacteri- zalion ofanepithelialintestinaJcelllinefrom rat fetusJ. Exp CellRes. 1983,143(2):427-437. 13SafonovaI C, Sviridov DD, RampaIP, et 耐.Regulationof choles- terolabsorption in humanandratsmall intestine epithelialcellsJ. Biokhimiia,1993, 58(2):274- 284. 14 Ciannarelli

47、 S, NanoJ L, FourneiS, etd.F,ffec:tof enprostil and c,imetdineonethanol-induceddamagetointestinal epithelial cell linesIRD98 and IEC17J. Digestion, 1995, 56(6):509-515. 15FoghJ,FoghJ M,Orfeo T.Onehundredandtwenty-sevencultured Lumor ceIJlinesproducingtumorsin nudemiceJ. Inst, 1977, 59(1):221-226. 16

48、AbbotEL.,CrenadeDS, KennedyDJ,etcd.Vigabatrintransport the humanintestinalepithelial Caco- 2)brush-bordermem- brane is via the H(+)-coupledainino- acidtransporterhPATlJl. J Pharmacol,2005,Epul)ahead of print. 17 HamidMSaid, AlvaroOrtiz, TFu)masYMa.Acamer-mediated mechanismfor pyridoxine uptakeby hum

49、anintestinalepichelialCa- co-2cells:regulation by aPKA-mediatedpathwayJ.AmJ Physiol Cell Physiol,2003,285: Cl 219-C1225.18TruantS, BruyneelE, GouyerV, etcd.Requirementof both mucins and proteoglycansin cell-celldissociationand invasivenessofcolon carcinoma cellsJl. IntJ Can:er,2003,104(6):683-694. 1

50、9 Blais A.Expressionof Na(+)- coupledsugartransportin HT-29 cells:modulation by glucoseJ. Physiol Cell Physiol, 1991, 260: 245. 20Wice BM,CordonJ I.AstraLegyfor isolation of cDNAsencoding proteinsaffectinghumanintestinalepithelialcellgrowth and differ- f21 22 entiation: characterization of anovelgut

51、-specificN- myristoylated CeIJ Biol, 1992,16(2):405-422. ZengJ,TengF, WeinstockCM, et cd.Translocation of Enterococcus faecalisstrainsacrossamonolayerof polarized humanenterocyte likeT84cellsJ. Clin Microbiol, 2004,42(3): 149-1154. HalttunenT, MarttinenA, Rantalal, et 甜，Fibroblastsandtrans- formingg

52、rowth factor beta induceorganizationanddifferentiationof T84humanepithelialcellsJl. Gastroenterology,1996, 11I(5): T 转第55 页)处理 组活性最高，并且血糖浓度对血清 ALP 的活性有明显的抑制作用。谷丙转氨酶 (GlyD是至今发现体内活性最强的转氨酶，在动物氨基酸代谢中占有极其重要的 地位。血清GPT的活性增加一方面表明体内蛋白质、氨基酸分解代谢加强；另 方面表明肝脏受损、血浆蛋白质合成受阻【9J。本试验中不同光增方式对 GPT活性的影响差异不显著(P0.05),不同光照周期

53、对GPT活性的影响差异显 著(PvO.05),以17L:7D处理组活性最高，表明在长光照时间有可能使肝脏受 损 ，和以上报道结果一致。 4 小 结不 同光增方式对蛋形指数和哈氏单位有影 响 ， 以 渐增条件下较好。 不同光增方式对血液生化指标没有 显著影响。不同光照周期 对蛋黄颜色有影响， 以 15L:9D 处理 组蛋黄颜色最好。 不同光照周期对血液生化 指标有一定影响，以13L:11D处理组较好。Anlm&l pduetlo抟鞠鞠签黪 参考文献： 【 l】CiacciarielloM, GousRM.Towhat extentcanage al sexualmaturity ofbroile

54、rbreeders be reduced0. Anim Sci,2005, 35: 73-82. f2OlanrewajuHA,ThaxtonJ P,DozierWA,e 耐.Areview of lightingprogramsforbroilerproductionJ.PoultSci,2006, 5(4):301-308.3陈会 良，汪东胜.麦松散对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响皿，中国畜牧杂志，2006 , 42(9):25-26 . 4武书庚. 日粮中不同硫酸铜和柠檬酸铜添加水平及其组合对产蛋 鸡生产性 能及蛋品质的影响D.北京：中国农业科学院，2001 . 【5何欣， 土晓霞. 复合酶

55、制剂对产蛋鸡生产性能及血液指标的影响【 J】 .北京农学院学报， 1999 ， 14(2):29-33. 6】 高峰，江芸，周光宏，等. 小麦甘粮添加非淀粉多糖酶制剂对雏鸡生 长及血液中血糖、尿酸和某些激素水平的影响【J】养殖与饲料，2004 , (4):4-7 . |7 周顺伍. 动物生物化学 ( 第 3 版) fM. 北京：中国农业出版社. 2000.154-158. 8Wilcox F H.Estimatesof correlationsbetweenserumalkaline pho- sphataselevel andproductivetraicsJl. Poult Sci, 19

56、63, 43: 1457- 1458.【 9】 任有蛇， 岳文 斌，曹宁贤等.不同换羽方法对蛋鸡生产性能和血液生化指标的影响J】中国畜 牧杂志， 2005 ， 41(10):21-23. Effect of DifferentLightingIncrescentandPhotoperiodonEggCharactersand Blood BiochemicalParametersof LayingHen HUANG Ren-lu,CHENHui, PANDong,DI Ke-qian,HOUYong-gang College ofAnimalScienceand Technology,Agri

57、cultural Universityof Hebei,Hebei Baoding071001, China) Abstract:Theobjectiveof thisresearchwasto study thedifferentphotoperiodoneggcharactersandbloodbiochemicalparametersofla yinghens.At the ageof 20week,320HylineBrowncommercialhenswererandomlyassignedt0 8 groups,with four replicationsper group,10

58、chickensin eachreplication.Photoperiods,whichhavefour levels 11L:13D,13L:11D,15L:9D,17L:7D,accordingto twomethodsabruptly inc.rescentandslowly increscentachieved.Theresults showed:ODif-ferent lighting increscenthadsomeeffects oneggshapeindexandHU,the slowly increscentgroupwasbetter thantheabrupt inc

59、rescentgroup,while differentlightingincrescentmethodshadnoeffectonbloodbiochemicalparam eters.Dif-ferent photoperiodhadsomeeffects onthe color of yolk, 15L:9Dgroupwasthe best of all.Howeverdifferentphotoperiodhadsomeeffectsonthe blood biochemicalparameters,andthe 13L:11Dgroupwasthe best. Key words:p

60、hotoperiod;production; biochemicalparameters;laying hens c 上接 第43 页 ) Some SpecialIntestineEpithelialCell Lines KUANG Wei, ZHAO Guo-qi (Collegeof AnimalScienceandTechnology,YangzhouUniversity, Jiangsu Yangzhou225009,China) Abstract:Isolation andculture of intestineepithelial cells is animportantmean

61、storesearchfunctionof intestine, mechanism and regulation ofnutrition absorption.Thearticlereviewedseveral importantintestine epithelialcelllines. words:intestine;intestine epithelialcell;areview 中固鸯教东是国谷丙转氨酶 (GlyD是至今发现体内活性最强的转氨酶，在动物氨基酸代谢中占有极其重要的 地位。血清GPT的活性增加一方面表明体内蛋白质、氨基酸分解代谢加强；另 方面表明肝脏受损、血浆蛋白质合成受

62、阻【9J本试验中不同光增方式对GPT 活性的影响差异不显著(P0.05)，不同光照周期对GPT活性的影响差异显著 (P0.05) ， 以 17L:7D 处理组活性最高 ，表明在长光照时间有可能使肝脏受损 ， 和以上报道结果致。小结不同光增方式对蛋形指数和哈氏单位有影响 ， 以渐 增条件下较好。 不同光增方式对血液生化指标没有显著影响。不同光照周期对蛋 黄颜色有影响， 以 15L:9D 处理组蛋黄颜色最好。 不同光照周期对血液生化指标 有一定影响，以 13L:11D 处理组较好。【I】CiacciarielloM, GousRM.Towhat extentcanage al sexual mat

63、urity ofbroilerbreeders be reduced0. Sci,2005, 35: 73-82. OIanrewajuHA,ThaxtonJ P,DozierWA,e耐.Areview of lighting programsforbroilerproductionJ.PoultSci,2006, 5(4):301-308. 3陈会良，汪 东胜.麦松散对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响皿，中国畜牧杂志，2006 , 42(9):25-26 .武书庚. 日粮中不同硫酸铜和柠檬酸铜添加水平及其组合对产蛋 鸡生产性能及蛋品质的影响D.北京：中国农业科学院，2001 . J】北京农学 院学

64、报， 1999 ， 14(2):29-33 .6】高峰，江芸，周光宏，等.小麦甘粮添加 非淀粉多糖酶制剂对雏鸡料， 2004， (4):4-7. 2000.154-158.8 Wilcox F H.Estimatesof correlationsbetweenserumalkaline pho- sphataselevel andproductivetraicsJl. 1458.9】任有蛇， 岳文斌， 曹宁贤 等. 不同换羽方法 对蛋鸡生产性能和血液生化指标的影响J】中国畜牧杂志，2005 , 41(10):21-23. Effect of DifferentLightingIncrescen

65、tandPhotoperiodonEggCharactersand BiochemicalParametersof LayingHen Ren-lu,CHENHui, PANDong,DI Ke- qian,HOUYong-gang College ofAnimalScienceand Technology,Agricultural Universityof Hebei,Hebei Baoding071001, China) Abstract:Theobjectiveof thisresearchwasto study the differentphotoperiodoneggcharactersandbloodbiochemicalparametersoflayinghens.At the ageof20week,320HylineBrowncommercialhenswererandomlyassignedt0 8 groups, with four replicationsper group,10