色素的提取与分离

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1、光合作用色素的提取与分离小组成员：黄素芬、马牧原、谷维佳、段娜、孙捷吉、周枭楠、肖祖文一、教学目标：1. 基本知识与技能：了解叶绿体中的色素组成、颜色。了解纸层析法的原理。2. 方法与过程：通过实验掌握叶绿体中色素的提取和分离的基本操作方法。3. 情感与态度培养学生严谨的科学态度，学会根据实验的现象和结果，进行分析，推出结论。二、.实验目的1、进行绿叶中色素的提取和分离2、探究绿叶中含有几种色素三、实验原理叶绿素分布：叶绿体类囊体膜上分类： 叶绿素叶绿素a （蓝绿色）叶绿素b （黄绿色） 类胡萝卜素叶黄素（黄色） 胡萝卜素（橙黄色）2 叶绿体中的色素能溶解在丙酮（有机溶剂，酒精、汽油、苯、石

2、油醚等）中，所以用乙醇可提取叶绿体中色素。（丙酮有毒性）3 色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤 纸条上的扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散 得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。四、实验材料新鲜、色浓绿、无浆液的菠菜叶片，研钵、石英砂、碳酸钙、无水乙 醇（提取液）量筒（10ml）、干燥的定性滤纸、玻璃漏斗、玻璃棒、 小烧杯（每人2个）、铅笔、毛细吸管、层析液（石油醚：丙酮：甲 苯=20:2:1）、用来塞试管的棉塞五、实验过程1. 提取色素：称取一剪碎一研磨一过滤一收集 称取新鲜、色浓绿、无浆液的菠菜叶片5g，放入研钵中。 向研钵中加入少许二氧化硅和碳酸钙

3、，再加入10ml无水乙醇，进行 迅速、充分的研磨。（二氧化硅有助于研磨充分，碳酸钙防止色素被 破坏，无水乙醇溶解色素。） 将研磨液迅速倒入玻璃漏斗2. 制备滤纸条将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，并在距这一端一厘米处用铅笔画一条细的横线。3. 画滤纸细线：用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画一条细 线（细而齐），待滤液干后，再画一两次。4. 色素分离将3ml层析液倒入试管中，将滤纸条（有滤纸细线的一端朝下）轻轻插入层析液中随后用棉塞塞紧试管口。注意不能让让滤纸细线触及层 析液。（也可用小烧杯代替试管，培养皿盖住小烧杯。）5. 观察与记录观察试管内滤

4、纸条上出现了几条色素带，以及每条色素带的颜色。将观察结果记录下来。六、预期实验结果滤纸条上出现4条色素带，从上到下依次是：橙黄色胡萝卜素（最快）黄色叶黄素蓝绿色叶绿素a （最多）黄绿色七.思考叶绿素b （最慢）1. 制备滤纸时，为何要把滤纸条的底部剪两个角2. 纸层析时应注意什么？3. 层析时为何要用棉塞塞住试管口？4. 实验结果怎样？为什么会出现这样的结果？5. 在滤纸上的色素带还有何特点？6. 如果用圆形滤纸取代条形滤纸，并在圆形滤纸的中央点一滴层析 液，现象如何？7. 提取叶绿体中色素的关键是什么？8. 分离色素关键是什么？9本实验在哪些方面可以改进？（如层析液、实验材料等）八.实验拓展将色素的提取液放于光源与三棱镜之间，通过观察光屏上颜色的 变化，来判断色素吸收那些光？所有的可见光（即白光）通过三棱镜 会形成七色光的一个连续光谱，如果在各种色光前进的途中放入色素 溶液，如果色素能吸收黄光,那么光屏上原来黄光的位置会出现暗带。 所以只需光屏上哪一位置出现暗带，就可以知道那种色光被吸收了。 当把色素提取液放于光源与三棱镜之间，光屏上红光区和蓝紫光区出 现暗带，说明叶绿体中的色素主要吸收红光和蓝紫光。