出凝血疾病的检测

《出凝血疾病的检测》由会员分享，可在线阅读，更多相关《出凝血疾病的检测（42页珍藏版）》请在装配图网上搜索。

1、中国医学科学院血液病医院临床检测中心止血血栓室 孙海燕出凝血疾病的检测 生理性止血血管损伤血管收缩血管内皮下组织血小板黏附、聚集、释放vWF5-HT、TXA2等凝血系统激活胶原暴露、TF等 血凝块形成与维持纤维蛋白网加固血小板血栓抗凝系统纤溶系统一期止血二期止血 XII XIIaXI XIaIX IXa X XaII IIa I Is Ii XIIIXIIIaVIIVIIaVIII VIIIa TF +Ca2+ 前 激 肽 释 放 酶激 肽 释 放 酶 丢 失 不 引 起 出 血Va V Ca2+PLHMW-K PL凝血瀑布内源性凝血途径外源性凝血途径共同途径 筛查APTTPTTTFbgDDi

2、merFDP因子活性凝血因子II活性测定凝血因子V活性测定凝血因子VII活性测定凝血因子VIII活性测定凝血因子IX活性测定凝血因子X活性测定凝血因子XI活性测定凝血因子XII活性测定凝血因子XIII筛查抗体纠正试验特异性因子抗体（VIII）狼疮抗凝物检测 凝血因子活性测定项目结果单位参考范围PT 16.9 S 11-14INR 1.47 0.87-1.2APTT 109.4 S 23.7-36.0TT 16.1 S 13.3-19.3FIB 3.93 g/L 2-4FVIII 56.8 % 50-150FIX 39.2 % 50-120FXI 41.3 % 50-120 FXII 27.0

3、% 50-120DRVVT筛选143.4 S 31-44DRVVT确认56.4 S 30-38DRVVT比值2.5 0.8-1.2结论提示狼疮抗凝物存在。 凝血因子活性测定原理：凝血因子活性是通过其纠正乏该因子血浆所致的凝固时间延长的能力而测得的。梯度稀释已知凝血因子活性的血浆（标准品），与乏该因子的血浆混合，然后做APTT或PT测定，建立参考曲线。受检者血浆与乏该因子的基质血浆混合，测其APTT后PT值，通过标准曲线可计算其凝血因子的活性。因子缺乏或者假性降低：3个浓度当存在狼疮抗凝物等非特异性抗体时，凝血因子活性测定呈现稀释效应 凝血因子活性测定项目结果单位参考范围PT 16.9 S 11

4、-14INR 1.47 0.87-1.2APTT 109.4 S 23.7-36.0TT 16.1 S 13.3-19.3FIB 3.93 g/L 2-4FVIII 120.1（56.8；108.6）% 50-150FIX 119.4（39.2；75.6）% 50-120FXI 102.3（41.3；71.6）% 50-120 FXII 59.4（27.0；47.5）% 50-120DRVVT筛选143.4 S 31-44DRVVT确认56.4 S 30-38DRVVT比值2.5 0.8-1.2结论提示狼疮抗凝物存在。 项目结果单位参考范围PT 11.6 S 11-14INR 0.95 0.8

5、7-1.2APTT 129.9 S 23.7-36.0TT 15.5 S 13.3-19.3FIB 4.45 g/L 2-4DRVVT筛选39.8 S 31-44DRVVT确认32.6 S 30-38DRVVT比值1.2 0.8-1.2结论不提示狼疮抗凝物存在FVIII 1（1; 1.2 0 .2 ml 0 .2 ml 0 .2 ml 0 .2 ml未 稀 释 1 :1 1 :2 1 :4 1 :80 .2 ml咪 唑 0 .2 ml咪 唑 0 .2 ml咪 唑 0 .2 ml咪 唑 取 0 .2 ml+0 .2 mlNPP3 7 孵 育 2 小 时0 .2 mlNPP+0 .2 ml咪 唑

6、检 测 因 子 活 性 计 算 滴 度患者血浆 Bethesda Assay操 作 步 骤 APTT及 （ 或 ） PT延 长纠 正 试 验纠 正 （ 因 子 缺 乏 ） 不 能 纠 正 （ 抑 制 ） LA证 实 试 验 纠 正 不 能 纠 正因 子 活 性因 子 活 性 测 定 抑 制 物 滴 度 凝 血 四 项 遗 传 性 缺 乏 获 得 性 缺 乏血 友 病 甲 、 血友 病 乙 等 肝 病 、 vitk缺 乏 、 华法 令 治 疗 、 DIC等 因 子 特 异 性 抗 体肝 素 、 DTI、异 常 血 浆 蛋 白 等TT延 长 ， FIB正 常TT延 长 ， FIB低低 （ 无 ）

7、纤 维 蛋白 原 血 症 等 鱼 精 蛋 白 试 验 、爬 虫 酶 时 间 等 狼 疮 抗 凝 物 一期止血一期止血 血小板实验室检测数量：血小板计数、外周血涂片功能：PFA-100（PFA-200）、血小板聚集试验其他：血小板膜糖蛋白受体、电镜等 PFA-100（200） PFA-100（200）结果解释胶原/肾上腺素结果胶原/ADP结果解释原因正常正常正常功能正常异常正常胶原/肾上腺素结果异常而胶原/ADP结果正常，这种情况表明血小板存在功能异常，通常见于阿司匹林样药物影响通常为阿司匹林异常异常两种结果均异常表明存在血小板功能异常，vWD或者 药物影响血小板功能异常，药物，vWD 血 小

8、板 聚 集 试 验血 小 板 与 血 小 板 之 间 相 互 粘 附 过 程 。是形成血小板 血 栓 的 基 础 ， 也 是 血 小 板进 一 步 活 化 和 参 与 二 期 止 血 、 促 进 血 液 凝 固 的 保 证 。血 小 板 聚 集 的 要 素 GPIIb/IIIa ， Fg， Ca2+ 诱 导 剂 高 切 变 率 的 条 件 下 ,vWF与 Fn也 参 与 血 小 板 聚 集 21 22 血 小 板 聚 集 试 验 在 遗 传 性 血 小 板 疾 病 中 的 表 现疾 病 聚 集 反 应 ADP 胶 原 花 生 四 烯 酸 瑞 斯 托 霉 素 血 小 板 无 力 症BSS或 vW

9、D血 小 板 型 vWD及 2B型 vWD阿 司 匹 林 样 缺 陷储 存 池 疾 病灰 色 血 小 板 综 合 征胶 原 受 体 缺 陷正 常 -+ v+ -或 + v-+ -或 +-+ -+ +正 常 ， +增 强 ， 反 应 减 弱 ， -缺 乏 反 应 ， v差 别 大 ， 缺 乏 第 二 相 聚 集 血管性血友病（vWD）实验室检测vWF抗原检测：vWF:AgvWF活性检测：vWF:RCo，vWF:Act凝血因子VIII活性检测：FVIII:C瑞斯托霉素（及小剂量）诱导血小板聚集vWF多聚体分析 vWF与胶原结合力：vWF：CB 血管性血友病（vWD）分型1型：vWF部分缺失3型：v

10、WF完全缺失2型：2A：选择性高中分子量vWF多聚体缺失 2B：功能获得型突变导致vWF与血小板亲和力增加，高分子量vWF多聚体被清除及轻度血小板减少 2M：功能缺失型突变导致vWF与血小板GPIb结合力降低 2N：vWF与VIII结合力降低，导致VIII被清除 vWD的实验室分型诊断正 常 1型 2A型 2B型 2M型 2N型 3型 PLT-vWDvWF:Ag 正 常 L,or 正 常 或 无 vWF:RCo 正 常 L,or 或 正 常 或 无 FVIII 正 常 或 正 常 正 常 或 正 常 或 正 常 1-9IU/dL 正 常 或 RIPA 正 常 通 常 正 常 通 常 正 常 正

11、 常 无 通 常 正 常LD-RIPA 无 无 无 无 无 无 PFA-100 正 常 正 常 或 正 常 血 小 板 计 数 正 常 正 常 正 常 或 正 常 正 常 正 常 正 常 多 聚 体 分 析 正 常 正 常 异 常 异 常 正 常 正 常 无 异 常 抗凝系统与纤溶系统实验室检测抗凝蛋白检测： 抗凝血酶III活性测定（ATIII） 蛋白C活性测定（PC） 蛋白S活性测定（游离）（PS free）纤溶系统： 纤溶酶原 tPA PAI-1 D-dimer FDP 易栓症遗传性：1、抗凝蛋白缺陷：ATIII、PC、PS2、凝血因子缺陷：FV Leiden/FII 20210A、异常纤

12、维蛋白原血症3、纤溶蛋白缺陷：纤溶酶原、tPA缺乏、PAI-1增加4、代谢缺陷：高同型半胱氨酸血症获得性恶性肿瘤、APS、肝病、肾病、凝血因子增加、创伤及围手术期、妊娠、制动、经济舱综合征、避孕药、老龄等等 D-Dimer对VTE的阴性排除价值增高：老年、新生儿、妊娠、感染、肿瘤、手术、创伤、DIC、VTE、外周动脉病变、溶血、出血、抗血栓治疗、肝肾疾病等 我室的出凝血检测项目汇总 Activated partial thromboplastin time Antithrombin Activity Prothrombin TimeThrombin Time Dilute Russells V

13、iper Venom Time, Screen and confirm D-DimerFibrin(ogen) Degredation Products(FDPs) Silica Clotting Time, Screen and confirm Clauss FibrinogenPlatelet Aggregation（ADP、AA、Collagen、Ristocetin）Factor XIII Screen von Willebrand Factor AntigenProtein C Activity Protein S Activity（Free）Mixing Study (incuba

14、ted)Factor II Assay Factor V Assay Factor VII Assay Factor VIII Assay Factor IX Assay Factor X AssayFactor XI Assay Factor XII Assay Factor II Bethesda Units (Titer)Factor V Bethesda Units (Titer) Factor VII Bethesda Units (Titer) Factor VIIIBethesda Units (Titer)Factor IX Bethesda Units (Titer) Fac

15、tor X Bethesda Units (Titer) Factor XI Bethesda Units (Titer)Factor XII Bethesda Units (Titer) Anti Cardiolipin Antibody（IgG，IgM，IgA）Anti -2 GPI antibody（IgG，IgM，IgA） 基因检测Vascular Disorder Platelet Disorder Coagulation Factor Disorder Thrombotic DisorderACVRL1 ACBD5 FERMT3 HPS1 MYH9 STIM1 F2 FGB ADA

16、MTS13COL3A1 ACTN1 GATA1 HPS3 NBEA STXBP2 F5 FGG SERPINC1ENG ANKRD26 GFI1B HPS4 NBEAL2 TBXA2R F7 GGCX SERPIND1GDF2 ANO6 GNAS HPS5 ORAI1 TBXAS1 F8 LMAN1 HRGSMAD4 AP3B1 GNE HPS6 P2RY12 THPO F9 MCFD2 PROC BLOC1S3 GP1BA ITGA2B PLA2G4A TUBB1 F10 SERPINE1 PROS1BLOC1S6 GP1BB ITGB3 PRKACG VIPAS39 F11 SERPINF

17、2 THBDCYCS GP6 LYST RASGRP2 VPS33B F13A1 VKORC1 PLATDTNBP1 GP9 MASTL RBM8A WAS F13B VWFETV6 HOXA11 MPL RUNX1 FGA 分析前因素对结果的影响分析前即刻影响出凝血结果小号针头溶血凝血因子激活血小板激活不可信赖的结果凝固时间缩短肝素病人APTT缩短创伤性静脉穿刺组织凝血酶原入血标本凝块缩短凝固时间不可信赖的结果混合不充分样本凝块不可信赖的结果过度混合标本凝血因子激活血小板凝激活血浆样本复溶后有纤维凝块缩短凝固时间肝素病人APTT缩短 未纠正高HCT 凝固时间延长采血量不足凝固时间延长采血过量

18、样本凝块缩短凝固时间不可信赖的结果冻存之前未二次离心剩余血小板降解LA假阴性肝素病人APTT缩短血浆冻存在自动除霜冰箱凝血因子降解多数凝血因子降低放置于室温时间过长不稳定因子 V 和VIII的降解延长凝固时间冷藏样本冷激活凝血因子 VIIVIII 和 VWF的冷沉淀缩短PTVIII 和 VWF降低 出凝血检测的保存条件及间隔（推荐）项目全血保存处理和血浆分装室温冷藏冷冻室温冷藏冷冻-20冷冻-80PT 24h不接受不接受24h不接受2周12个月APTT 4h不接受不接受4h 4h 2周12个月 APTT（肝素检测）1h不接受不接受4h 4h 2周未知APTT（vWF和VIII因子）4h不接受不

19、接受4h 4h 2周6个月其他4h不接受不接受4h 4h依据具体项目而异 整合报告 检测科室的职能检测样本保证结果的准确性提供有临床价值的结果为临床提供必要的咨询，正确解释结果，最大限度提供可利用的信息 整合报告两种方式：由医师决定患者的检测项目，我们将患者的所有报告整合，就所有的结果做出条理性的解释，阐明其中异常结果的意义，可能会做出诊断性的结论，或者因为对病史了解的局限性只能提出可能性的因素供临床结合患者实际情况矫正，比如用药史，家族史等我们将不同的疾病整合几种不同的检查项目套餐，临床只需根据患者的情况挑选其中一种套餐，我们根据该患者的实际检查结果情况决定接下来做何种检测项目，最后整合报告，出具一整套的诊断性结论的报告 现阶段检测报告的缺陷只有结果，没有解释检测与临床沟通不足可能导致结果解读不全面，不能最大限度的提供有用信息对患者多次重复的创伤性操作