生殖生物学复习总结

《生殖生物学复习总结》由会员分享，可在线阅读，更多相关《生殖生物学复习总结（4页珍藏版）》请在装配图网上搜索。

1、1.体外受精技术包含从配子的发生、体外培养、受精直至生命的形成。所以,体外受精技术是生命科学研究的基础,也是扩大良种畜胚胎来源的一种主要手段。由于从屠宰场收集卵巢,通过体外受精技术,生产大量的廉价胚胎,降低了胚胎的生产成本,为胚胎移植技术的大面积推广创造了条件。鉴于目前我国没有大规模的良种畜可屠宰,以及体外生产胚胎移植后的成功率不高等因素,今后应该结合活体采卵技术,反复从良种母畜体内采集卵母细胞来生产体外受精胚胎。同时,应该进一步研究提亭体外受精胚胎的囊胚率,解决妊娠率不高等技术问题。体外受精技术不仅限于扩大胚胎生产，就整个配子与胚雨生物技术的发展而言，它将成为胚胎生物技术的最基本的核心关键技

2、术。所以,随着体外受精技术配套技术的不断完善,其应用前景十分广阔。2、卵母细胞的采集和成熟培养：(1)超数排卵: 用促性腺激素处理（2）从活体卵巢中采集卵母细胞（3）从屠宰后母畜卵巢上采集卵母细胞母细胞的选择，采集到的卵母细胞绝大多是与卵丘细胞形成卵丘卵母细胞复合体COC。未成熟的卵母细胞分四个等级；卵母细胞的成熟培养:由超数排卵采集的卵母细胞已在体内发育成熟，不需培养可直接与精子受精,对未成熟卵母细胞需要在体外培养成熟。培养时,先将采集的卵母细胞在实体显微镜经过挑选和洗涤后,然后放入成熟培养液中培养。家畜卵母细胞的成熟培养液目前普遍采用TCM199添加孕牛血清、促性腺激素、雌激素和抗生素成份

3、。通常采用微滴培养法,微滴体积为50-200微升，每滴中放入的卵母细胞数按每5微升一个计算单位。卵母细胞移入小滴后,放入二氧化碳培养箱中培养,培养条件为39 、100%湿度和5%二氧化碳的空气。牛的培养时间为20-24h,卵丘卵母细胞复合体经成熟培养后，卵丘细胞层扩散靠近卵母细胞周围的卵丘细胞呈放射状排列，出现放射冠,用DNA特意性染料染色后,在显微镜下进行核相观察,可见卵母细胞处于第2次成熟分裂中期。3、体外受精1精子的获能处理:哺乳动物精子的获能方法有培养和化学诱导两种方法。牛、羊的精子常用化学药物诱导获能,诱导获能的药物常用肝素和钙离子载体。2受精:即获能精子与成熟卵子的共培养,除钙离子

4、载体诱导获能外,精子和卵子一般在获能液中完成受精过程。受精培养时间与获能方法有关。在B2液中一般为8小时而用TALP或SF液作受精液时可培养18-24h。精子和卵子常在小滴中共培养,受精时精子密度为1-9 106/ml,每10微升精液中放人1-9枚卵子,小滴体积一般为5O200微升。4、胚胎培养提高受精卵发育率的关键因素是选择理想的培养体系。在家畜中,胚胎培养液分为复杂的和化学成分明确的培养液两大类。复杂培养液中的成分很多,除无机和有机盐外,还添加维生素、氨基酸、核苷酸和嘌呤等营养成分和血清,最常用的有TCM199、B2和F10。用它们培养胚胎时,可以采用体细胞共培养体系,即体细胞与胚胎在微滴

5、中共同培养,利用体细胞生长过程中分泌的有益因子,促进胚胎发育,克服发育阻断。5、 哺乳动物的克隆效率为什么低,试从克隆操作技术体系方面解释可能的原因?卵母细胞的年龄和细胞周期会直接影响到重组胚,重编程过程。卵子成熟后卵母细胞质才获得指导体细胞核膜破裂的能力，在正常受精胚中,母源mRNAs在受精到早期胚胎合子型基因激活过程中发挥着核心调控作用。同样，母源信息也能使移入卵母细胞质中的供体基因组重新程序化,这也是核移植所依据的主要原理之一。供体细胞分化特征越明显克隆效率越低，使用胚胎干细胞作核供体比体细胞的克隆效率要高。发展起来的两步克隆法以第一步核移植产生的卵裂球或建立的胚胎干细胞系为供体进行第二

6、轮的克隆,可以大大提高克隆效率,并可以有效地使终端分化的B细胞、T细胞发生重编程,长期体外培养或操作过程中发生的染色体改变也能导致克隆动物发育异常。6、供体核的重编程不彻底是造成克隆胚胎发育不良的主要原因之一,你怎么看?试解释。核移植后供体核重编程的效果一般从以下几个方面来评价(1)囊胚发育率;(2) 一直到子宫以后胚胎出生率;(3)出生后发育到成年的比率;(4)克隆囊胚外植后获取胚胎干细胞的频率等。直到现在核移植效率仍然非常低,而且,重构胚发育严重异常,妊娠早期流产率和出生后死亡率非常高。此外,外界环境引起的信号转导、转录后调控等方面的错误都有可能成为重编程失常的诱导因素。细胞核重编程改变是

7、细胞形态和功能改变的一个中间事件,将其上下游事件联系起来探明重编程的分子机制将是一个很有意义的方向。不同的类型、周期、代数、物种对重编程有影响。7、如何进行安全转基因操作?针对社会上较多的对转基囚动植物的不信任,你如何认识?(l)毒物动力学试验,了解它的吸收、分布、代谢及排泄等情况(2)遗传毒性试验,包括体外试验和体内致突变试验(3)潜在致敏性试验(4)基因传递与稳定性试验。检查是否导入的基因向人畜胃肠道中存在的微生物中转移和表达(5)微生物定植和微生物致病性试验。对本身是活菌或含有活菌的新型食品要评价这两项指标(6)啮齿类90天喂养试验。其中注意遗传毒性、神经毒性、免疫毒性及生殖毒性(7)验

8、证对人类的安全性;一定时期后,对转基囚食品安全性的再评价。包括耐受量、肠道群菌谱及数量等。8、克隆技术的环节：1、供体核的准备；2、受体细胞质的选取；3、核质重组融合激活技术；4、重组胚的体内或体外培养；5、重组胚胎的移植意义：1.理论价值 推翻了细胞分化的不可逆性，确定了新的理论体系，分化了的细胞的细胞核并没有在结构上发生不可逆的变化，一旦条件合适便可从头开始驱动胚胎发育的整个进程。9、原始卵泡的发生机制？原始卵泡的发育是非激素依赖性的,主要通过细胞间的相互作用及局部的细胞因子调节 ,在进化过程中高度保守。有多个因子参与原始卵泡的调节 , 当原始生殖细胞到达生殖嵴形成种系囊时 ,与卵巢的体细

9、胞相互作用。原始生殖细胞与前颗粒细胞组成性腺索,直至原始卵泡形成。性腺索通过基底膜与卵巢的间质细胞隔离。单个的卵母细胞 ,需要改造基底膜并被包围形成原始卵泡。原始卵泡由一个卵母细胞和一层不完整的扁平前颗粒细胞组成 ,没有明显的泡膜细胞层或有组织的间质细胞围绕。原始卵泡的组装要求单个卵母细胞分开 ,并与前颗粒细胞结合。控制原始卵泡形成的因子还不清楚。10、透明带作用是保护卵子，阻止异种精子进入。许多卵的透明带下面还有一层分泌性的囊泡，称为皮层颗粒。外层为中性或弱酸性粘多糖蛋白,内层主要为强酸性粘多糖蛋白。11. 卵发生机制？ 脑垂体在下丘脑分泌的促性腺激素释放激素GnRH的控制下，分泌FSH和L

10、H，卵巢受到FSH刺激后，其皮质内的卵泡生长，发育，成熟，并促使卵泡颗粒细胞产生雌激素。经FSH的作用后，LH可以增强卵泡颗粒细胞合成孕激素和多种酶的能力，随着Graafian氏卵泡的形成，通过水解作用和卵泡内液压力在卵泡眼点处增大，导致卵泡壁和卵巢表面立方生殖上皮破裂而发生排卵12、精子最终进入卵质完成受精需克服多少障碍？1.在顶体酶的作用下，精子穿过放射冠，与ZP3相作用穿过透明带进入卵周隙2.受精开始时，皮质颗粒的膜与卵细胞融合，使细胞表面负电荷随之增多，从而制止精子质膜与卵膜的融合，发生皮质反应3. 透明带结构发生变化，发生透明带反应，透明带对精子的结合能力降低，防止多精受精。4. 皮

11、质颗粒的内容物除能破坏或灭活透明带上与精子结合的受体，还能使透明带中肽链间的交联增加，对顶体蛋白酶的敏感性减弱，制止精子穿透。13. 在小鼠的受精过程中，也有顶体反应，但是小鼠的精子不会形成顶体突，受精过程中也没有受精锥的出现。相同：在防止多精入卵的过程中，都会有皮质反应的发生，即随着皮质颗粒的膜与卵细胞融合，使细胞表面负电荷随之增多，从而制止精子质膜与卵膜的融合14. 哺乳动物胚胎着床机制? 着床是指胎生哺乳类动物的早期胚胎和母体子宫壁结合, 从而建立母子间结构上的联系以实现物质交换的过程。胚胎着床是在着床期间胚胎与母体子宫内膜细胞表面通过定位、黏附、连接及侵入等一系列事件完成着床过程, 是

12、哺乳动物所特有的生殖活动, 是妊娠建立的标志和首要环节。实质上是胚胎滋养层细胞与母体子宫内膜细胞间逐步建立密切的细胞间通讯联系的过程, 是胚胎与母体间复杂、精细的多因子双向调控的结果。目前已知涉及胚胎着床的因子包括有激素、细胞因子、黏附分子、细胞表面寡糖、细胞外基质、细胞活素类物质以及基质金属蛋白酶等。它们形成一个复杂的调控网络, 精细地调控胚胎着床的每一生理过程。 （1）妊娠识别：着床前胚胎首先产生和释放妊娠信号给母体的子宫内膜，母体在接受这些信号后随即产生反应，以维持黄体的功能和促进孕体的继续发育从而保障妊娠的建立。（2）子宫的容受性：人类在月经周期的黄体时相内，子宫内膜出现类似蜕膜反应的

13、转化,，称为前蜕膜。若卵子不受精, 前蜕膜则在行经时脱落而随血流排出；如果受精，则在孕卵着床时转化为蜕膜。蜕膜细胞能为发育的胚胎提供营养物质，并限制滋养层细胞的侵蚀，起保护母体的作用。（3）激素调节：孕激素(孕酮)在胚胎着床中起主导作用,它刺激子宫腔内腺上皮的发育和子宫腺体的分泌, 为早期胚胎发育提供营养。孕酮及其代谢物能抑制妊娠母体的免疫反应, 促进着床。性别鉴定：核型分析；X连接酶法鉴定胚胎性别；H-yY抗原法；SRY-PCR法名词解释：1：疏松结缔组织:是由细胞、纤维、基质组成，基质含量多。细胞包括成纤维细胞、浆细胞、巨噬细胞、大细胞等。可概括为建 (未分化的间充质细胞)成(成纤维细胞)

14、巨(巨噬细胞)大(肥细胞)白(白细胞)浆(浆细胞)房(脂肪细胞)。细胞间质由胶原纤维、弹性纤维、网状纤维和基质组成。该组织分布于细胞、组织和器官之间，具有支持连接、防御保护、营养和修复的功能。2：生殖脊：可以发育为生殖腺，是脊椎动物胚胎后半部，背系膜侧面中胚层形成的纵行上皮加厚的细胞条。3：原窝；原条中间形成的凹陷叫原沟，细胞通过呀U能够迁移到囊胚腔，原条前端有原结，原结中央的凹陷就是原窝。4：气血屏障：肺泡内氧气与肺泡隔毛细血管内血液携带CO2进行气体交换通过的结构。包括肺泡表面液体层、I型肺泡细胞及基膜、薄层结缔组织、毛细血管基膜及连续内皮。5：放线菌酮；一种在真核生物中对蛋白质生物合成过

15、程有着抑制效应的化合物，通过干扰蛋白质合成过程中的异位步骤而阻碍翻译过程。常用来抑制生物体外真核细胞的蛋白质合成。6：DMSO；一种渗透性保护及能降低细胞冰点，减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。它也存在有一定的毒性，可与蛋白质疏水基团发生作用，导致蛋白质变性。7；ICSI：卵胞浆内单精子注射技术 ，也就是第二代“试管婴儿”，是借助显微操作系统将单一精子注射入卵子内使其受精。LIF，白血病抑制因子，是典型的多功能生长因子，对于细胞生长、增殖与分化有着广泛的作用，与胚胎发育，神经发育和造血系统的发育有密切的联系。FSH：卵泡刺激素，只增加卵泡数

16、目，不刺激卵泡的成熟。LH：促黄体生成素，作用于成熟的卵泡，引起排卵并生成黄体。）GnRH：促性腺激素释放激素，可促进促性腺激素的分泌，可诱导FSH，LH,等激素的分泌，促使精原细胞分化。睾酮：LH与间质细胞结合，刺激细胞产生睾酮，睾酮以扩散的方式进入曲细精管，发挥在生精过程中作用。生理作用：（1）促使性器官和副性腺发育；（2）维持雄性动物第二性征；（3）促使精细官发育和精子形成; （4）促进动物骨骼与肌肉生长 。催乳素PRL:（1）促进乳腺发育和乳汁生成（性成熟前促进乳腺导管发育，在妊娠期，促进乳腺腺泡发育）；（2）抑制性腺机能发育，引起禽类抱窝，母牛不排卵；（3）对于啮齿类动物，PRL促使

17、新黄体形成，老黄体退化，提高啮齿类雄性动物间质细胞LH受体，具有壮阳之作用（4）提高动物母性行为。绒毛膜促性腺激素hCG 对母畜的作用促进卵泡发育、诱使排卵，类同LH的作用；对妇女妊娠：胚胎信号；代替卵巢功能；免疫抑制PG： 前列腺素，增加黄体生成素释放激素释放，是睾丸激素分泌增加；对血管和支气管平滑肌有作用；对胃肠道有作用，可引起平滑肌收缩；对神经系统地址的释放和活动起调节作用；对呼吸系统的作用，E可以松弛支气管平滑肌，F抑制；对内分泌系统有作用。IPS 通过导入外源基因使体细胞区分化为多能干细胞。MSTN作为胞外信号分子可与成肌细胞膜上的受体结合引起受体白身的磷酸化,启动细胞内一系列信号传导过程,作用于生肌决定因子(MyoD)靶基因的调控区,调节肌肉组成蛋白和蛋自基因的表达。IGF-1 类胰岛素一号增长因子。在婴儿生长和在成人体内持续进行合成代谢作用上具有重要意义。降血糖血脂、舒张血管促进骨的合成代谢，保持其正常结构功能，促生长促分化。