蛙心灌流模拟实验[1]

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1、测脉动，奥必佳，佳得乐对离体蟾蜍心脏活动的影响【目的】 学习 Straub 氏法灌流蟾蜍离体心脏方 法；了解心肌的生理特性；并观察各种功能饮品 等因素对心脏活动的影响。【原理】 作为蛙心起搏点的静脉窦能按一定节律 自动产生兴奋，因此，只要将离体的蛙心保持在 适宜的环境中，在一定时间内仍能产生节律性兴 奋和收缩活动。心脏正常的节律性活动需要一个 适宜的理化环境，离体心脏也是如此，离体心脏 脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影 响，可以通过改变灌流液的某些成分，观察其对 心脏活动的作用【预习要求】1仪器设备知识:参见第二章第三节 RM6240 微机生物信号采集处理系统。2实验理论:实验动物知

2、识参见第二章第一 节 生理科学实验常用实验动物的种类和第四章 第一节 动物实验的基本操作；统计学知识参见第 五章第四节 常用统计指标和方法；实验理论知识 参见生理学教材中有关心脏的生物电及心肌的生 理特性、自主神经系统对心血管活动的调节内容。 检索全文数据库中的相关研究论文，检索方法参 见第五章第五节。3预绘制实验原始数据记录表格和统计表格 （参考实验指导 P81-82）。4预测结果：预测脉动、佳得乐、奥必佳对 离体蟾蜍心脏活动的影响。【材料】牛蛙；RM6240BD微机生物信号处理系 统，张力换能器；蛙心套管（straub）,常用手术 器械，蛙板或蜡盘，蛙心夹，滴管，培养皿或小 烧杯，污物缸，

3、纱布，橡皮泥，任氏液，无钙任 氏液【方法】1仪器连接和参数设置 张力换能器输出线接微机生物信号处理系统 第 1 通道（亦可选择其它通道）， 微机生物信号 处理系统参数设置：RM6240 系统：点击“实验”菜单，选择“生 理科学实验中”的“蛙心灌流”项目。系统进入 该实验信号记录状态。仪器参数：通道时间常数 为直流，滤波频率10Hz，灵敏度3g，采样频率 400Hz，扫描速度 1s/div。2离体蛙心制备（1）取蟾蜍一只，破坏脑和脊髓后，仰卧固定在 蛙板上，从剑突下将胸部皮肤向上剪开，然后剪 掉胸骨，打开心包，暴露心脏，分离左、右主动 脉。（2）在左主动脉下方穿 1 根线，靠头端结扎作插 管时牵

4、引用，在主动脉干下方穿 1 根线，在动脉 圆锥上方系一松结用于结扎固定蛙心插管。（3）左手持左主动脉上方的结扎线，用眼科剪在 松结上方左主动脉根部剪一小斜口，右手蛙心插 管由此切口处插入动脉圆锥。当插管头到达动脉 圆锥时，用镊子夹住动脉圆锥少许，将插管稍稍 后退，并转向心室中央方向，镊子向插管的平行 方向提拉，心室收缩期时将插管插入心室（如图 1）。蛙心插管进入心室后管内的任氏液的液面会 随心室的舒缩而上下波动。蛙心插管进入心室后， 用预先准备好的松结扎紧，扎线套在蛙心插管的 侧钩上打结并固定。剪断主动脉左右分支。 好的松结扎紧，扎线套在蛙心插管的侧钩上打结 并固定。剪断主动脉左右分支。（4）

5、轻轻提起蛙心插管以抬高心脏，用一线在静 脉窦与腔静脉交界处作一结扎，结扎线应尽量下 压，以免伤及静脉窦，在结扎线外侧剪断所有组 织，将蛙心游离出来。（5）用新鲜任氏液反复换洗蛙心插管内含血的任 氏液，直至蛙心插管内无血液残留为止。此时离 体蛙心已制备成功，可供实验。（6）将蛙心插管固定在铁支架上，用蛙心夹在心 室舒张期夹住心尖，并将蛙心夹的线头通过滑轮 连至张力换能器的应变梁上，调节此线张力至 1g， 插管内加灌流约l1.5ml，并在插管上标记灌流 的高度，在此后的实验过程中，灌流液恒定于该、_、亠高度。【模拟实验操作方法】1 模拟实验窗口（图2）蛙心插管内为任氏液，下端左侧为放水管，正下方是

6、离体蟾蜍心 脏，其心室尖部用蛙心夹夹住，蛙心夹上棉线与 张力换能器相连（图中略去）。蛙心插管上方滴头 处为加药、冲洗之处。2离体蛙心 蛙心活动频率和幅度用动画展现， 并与仿真记录仪记录的曲线同步。3仿真二道记录仪 第一道记录离体蛙心收缩曲 线，第二道记录实验项目标记。仿真记录仪面板 设灵敏度、位移、纸速、停纸按钮，面板设数字 显示框，分别显示记录仪第一道灵敏度、心肌收 缩力量、实验项目、实验时间。4试剂架 试剂架上放置试剂，滴头可拖动，鼠 标器左键点击某一药品或试剂瓶的滴头并拖动至 蛙心插管上方滴头处释放完成灌流液的更换或药 品的滴加，仿真记录仪上显示曲线数据、标注实 验内容。5窗口内容和可操

7、作控件均有提示，窗口提示栏 右侧设置“返回”按钮，鼠标点击“返回”按钮， 程序返回到模拟实验窗口。图 2 离子与药物对离体蟾蜍心脏活动的影响模拟实验窗口【观察项目】 1描记正常的蛙心搏动曲线，注意观察心跳频率、 心室的收缩和舒张程度。2把蛙心插管内的任氏液全部更换为脉动溶液， 做好标记，观察心博变化。待曲线出现明显变化 时，立即吸取套管中的灌流液，同时做好标记； 并用新鲜任氏液清洗 2-3 次，待心搏恢复正常。 注意：换液时切勿碰套管，以免影响描记曲线基 线，同时保持液面的高度一致。3向套管内加入2-6 滴脉动溶液，做好标记，观 察心博曲线的频率与振幅变化。当曲线明显变化 时，立即吸取套管中的

8、灌流液，并做好标记，迅 速用壬氏液清洗 2-3 次，待心博恢复正常。 4同法向套管滴加奥必佳溶液 12 滴，观察并记 录心搏变化。当曲线明显变化时，立即吸取套管 中的灌流液，并做好标记，迅速用壬氏液清洗 2-3 次，待心博恢复正常。5同法向套管滴加佳得乐溶液 12 滴，观察并记 录心搏变化。当曲线明显变化时，立即吸取套管 中的灌流液，并做好标记，迅速用壬氏液清洗 2-3次，待心博恢复正常。【实验报告】1题目。2署名 作者和合作者姓名及单位。3结构式摘要（目的，方法，结果，结论）。 4材料和方法 主要实验材料，离体蛙心标本制 备方法简要，仪器装置连接和仪器参数， 5观察项目及观察指标，填写实验指导 81-82 表 格。6结果 列各项处理前后心率、心室的收缩和舒 张张力原始数据表格，用文字和数据逐一描述实 验结果。7讨论 对实验结果进行分析推理。8参考文献。