布鲁氏杆菌病

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1、布鲁氏杆菌病疾病概述:猪的布鲁氏杆菌病(以下简称布病),是一种自 1914 年以来一直被公认为是一种特殊存在的传染 性疾病。当时 Traum(1914) 从印第安那州流产猪胎儿中分离出该菌,但从那以后很多年,该病被 认为是由流产布鲁氏杆菌 (Brucella abortus)引起的。直到Huddleston(1929)才把这个传染性病 原作为一个独立的种命名为猪布鲁氏杆菌(B suis)。布鲁氏杆菌病在全世界多数国家的野生和家养猪中都有 发生。在美国猪的布鲁氏杆菌病曾被认为是一种主要疾病, 在本世纪年 2050年代引起巨大经济损失。从那时起,管理制度的改变结合根除该病的常规措施,从而在 大部分

2、地区逐步消灭了布鲁氏杆菌该病。自 1989年以来,所有的州都参加了联邦组织的消灭该 病的项目。现在从猪的主要产区看来已彻底消灭了该病。 该病在美国东南部的猪群似乎发病率最 高,尽管那里猪群的感染率小于15%。据USDA统计资料(Frey等,1993), 1993年度在猪场、家畜市场和屠宰场测试的 160万头猪中,有 05%血清学阳性反应。该资料表明估计的发病率比实际发病高一些,因为在未感染的猪群中单一血清学阳性反应会经常出现, 1993年被判为真 正的感染猪群为 83 群,而它们中的多数又是发生在地方性区域的小群猪中。该病在美国南部广泛分布,主要是由亚种 1引起,在欧洲(除了没有布鲁氏杆菌病的

3、英国和斯 堪地纳维亚),布鲁氏杆菌病有少量流行。在非洲,一些国家有该病的报道,但在非洲大陆上的 猪的数量不多,而且实际状况也不清楚。亚洲,特别是东南亚,该病有较高的流行性,中国和新 加坡主要由亚种 3 引起,其他地区则由亚种引起。在澳大利亚,该病仅在 Queensland(Altion , 1990) 联邦的猪群中有发生。 猪的布鲁氏杆菌病也使公共卫生注意到一直以来人病的主要来源是猪布 氏杆菌感染的猪布鲁氏杆菌 ( B snis )(Fox 和 Kaufmann , 1977)。猪的布鲁氏杆菌病引起的公共卫生危害要比牛的布鲁氏杆菌病大得多。主要因为猪布氏杆菌 (Bsuis) (亚种 1 和亚种

4、 3)对人类的致病性大大高于流产布鲁氏杆菌 ( B abortus ),大量接 触过感染猪的人组织中有较多数量的猪布鲁氏杆菌。 由于猪不生产奶制品,猪布鲁氏杆菌在人类 的发病几乎全部是职业性的,包括农场工人兽医和屠宰工人。 有趣的是,牛感染猪布鲁氏杆菌虽 然少见,但在澳大利亚工作的Cook和Noble(1984)却报道了几例,可能是由接触过野猪的工作人 员传染的。在牛奶中混有排泄物可以引起人病的流行(Borts等,1943),Paolicchi等(1993)报道猪 鲁布氏杆菌引起一只公羊的感染,他推测这可能代表一种公共卫生的危害。病原学布鲁氏杆菌(以下简称布氏杆菌)属由六个学术命名的种组成:流

5、产布氏杆菌(B abortus)、 马尔他布氏杆菌 (Bmelitensis)、猪布氏杆菌(Bsuis)、林鼠布氏杆菌(Bheotomae)、绵羊布氏杆菌(Bovis)和(Bcanis) (Brinley Morgan 和 McCullough , 1974 ; Alton 等,1975),该属在遗传同源性很高(Verger, 1985),但与任何其它动物病原的关系都不紧密(de Ley等,1987)。 前三种又分为 8 亚种, 3 亚种和 5亚种。马尔他布氏杆菌的主要寄主是山羊和绵羊;流产布氏杆 菌是牛;林鼠布氏杆菌是沙漠森林大鼠;林鼠布鲁氏杆菌,犬布鲁氏杆菌是狗,猪布氏杆菌 ( B siu

6、s )亚种 1 和亚种 3 的常见寄主是猪,这些亚种分布在世界各地。猪布氏杆菌 (B suis)亚种 2出现在欧洲,寄主是猪和欧洲野兔( Lepus capinensis ),其形成的一个病原,可在野 生和家养猪中偶尔引起布鲁氏杆菌病的暴发。由亚种 2引起的猪布鲁氏杆菌病与由亚种 1和亚种 3引起的子宫粟疹性布氏杆菌病略有差异是一个特征,亚种 2对人不致病。 B.suis 亚种 4在西伯 利亚、阿拉斯加和加拿大的驯鹿(Rangiferspp.)中是一种地方病,尽管它引起多例人的布鲁氏杆菌病,但对猪不致病, B.suis 亚种 5引起鼠科布氏杆病。 B.suis 是惟一被公认为引起猪全身 感染从

7、而导致繁殖障碍的布氏杆菌。 虽然其它布氏杆菌也可自然感染或经人工感染猪。 但感染的 特征是几乎都没有临床症状,只有侵入点的局部淋巴结有自限性感染。然而,值得注意的是布氏 杆菌亚种的鉴别必须在用大型指导中心所用的方法来完成。这很可能是由于早期 60年代以前, 经常有从猪分离出 B melitensis (Alton , 1990)的报道有关。细菌学检查对诊断是非常有帮助的,但必须记住在实验室中处理 B.suis 是非常危险的,因而 必须有合适的防护措施。布氏杆菌属于第三类危险物, 必须由经过训练的且有经验的人员,在有 三级实验设备的实验室中用I/III级的安全柜处理,与该属其它种一样,B.sui

8、s的初代分离在琼脂培 养基上经37C, 27天培养,可见小的、凸起的、半透明的菌落。所有布氏病菌属和亚种,除B ovis 和 Bcanis 外,都会自然出现光滑的菌落形态。 B ovis 和 B canis 即使在初代培养也总出现粗糙落。布氏杆菌的所有光滑型菌落在某些人工诱导环境条件下, 可以 转变为中间型、粗糙型或粘液型,如果培养物长期培养,常常会出现这种转变,因此,并不能把 它们归于哪些属或亚种。显微镜下,布氏杆菌是小的革兰氏阴性杆菌或球菌,且是不运动的和单个分布的。来源不同,其菌体大小也不同,但一般是0408 |J mX 0630 |J m。几个市售的琼脂培养基适合于B.suis的分离和

9、繁殖。经常用的有胰蛋白胨,Albimi,血清葡萄 糖, Farrell&39;s 和马铃薯浸出液。培养基中加入血清浓度为 5%的血清常常有助于布氏杆菌生长, 特别是对于初代分离。增加二氧化碳的浓度则对 B.suis 的生长不利。有关分类程序,亚种和生长 培养基配方的更完整的讨论,以及金属特性的描述,可以从Alton等(1988)得到。一般地,所 有 B.suis 的亚种比布氏杆菌的其它种明显有更强的尿素酶和催化酶活性。把B.suis分类为亚种,是基于各种常规和特殊试验的综合发现。简单讲,B.suis亚种1产生大 量的硫化氢,而亚种25则很少产生或不产生。亚种1亚种5的生长比亚种3和亚种4的生长

10、 更易受到品红抑制。B.suis不被Tbilisi布氏杆菌噬菌体的常规稀释液(RTD)裂解,但10 000XRTD;被部分裂解用抗A和M群抗原的单特异抗血清,B.suis亚种1,2,3是A群,而亚种 4是AM群(惟一区分亚种3和亚种4特征群),亚种5是M群(表281)。所有 B.suis 亚种的氧化代谢特征都十分相似,没有足够可以加以区分的差异。在 B.suis 中, 仅仅已知亚种 1 和 3 亚种在表 281 用于区别 Brucella suis 的特征产H 2S在Thionin 上生长 在Fuchsin 上生长 主要抗原RTD被Tb 噬菌体溶解104RTD 被 Tb 噬菌体裂解亚种 1 +

11、 + - a A 不溶解 b 溶解 c亚种 2 - + - A 不溶解 溶解亚种 3 - + + A 不溶解 溶解亚种 4 - + - d AM 不溶解 溶解亚种 5 - + - M 不溶解 溶解a与A和M单特异血清发生凝集;b不溶解;c溶解;d某些菌株可生长。美国养猪区出现。直到1946年,在美国惟一被承认的猪布氏病病原仍是B.suis亚种1。当时, B.suis 亚种 3(最初被分类为美国 B melitensis )首先被 S H MacNutt(Borts 等, 1946) 从感染猪的组织中分离出。从1950年起,分离B.suis亚种1的报道比较少,而B.suis亚种3的 分离变得多起

12、来。毫无疑问,现在美国的猪布氏杆菌病主要是亚种 3。流行病学证据显示,多数B.suis感染易感动物的传播是与其直接接触感染的猪有关。在该属中,最重要 的感染途径是通过消化道和生殖道。猪的习性和该病的一般特点预示消化道是最常见的侵入门 户。各种年龄的猪都可能吃到或喝到污染了感染猪排出物的东西。 仔猪经常通过受乳被感染母猪 传染,当种猪被圈养在一起时,流产的胎儿和胎膜通常很快被吃掉。 布氏杆菌病在猪是一种性病, 当与感染的公猪交配时,或用污染了 B.suis的精液人工授精时,母猪很快被感染。猪可通过结膜, 或鼻内接种B.suis悬液而人工感染。该菌也可通过受损的、甚至是完整的皮肤侵入。环境中存在布

13、氏杆菌是该病传播中一个比较重要的因素。布氏杆菌的残存率与其它无芽孢革 兰氏阴性菌相似,而且紧密地依赖于流行时的环境条件。实验证据显示,巴斯德灭菌法,24 h 直接太阳光照,和最常用的灭菌剂均可迅速杀灭B.suis。有机物中的布氏杆菌在冷冻或接近冷冻 的温度下可存活2年以上。因此,养猪场布氏杆菌病的根除必须包括有效消毒措施 (Luchsinger 等, 1965)。长期保存布氏杆菌的最有效方法是冻干和/或低温冷冻储藏。除了感染的家猪以外,已知的 B.suis 感染源很少存在。只有欧洲野兔和野猪已被确认为主要 的潜在传染源。欧洲野兔早在1954年(Bendtsen等,1954)被认定为B.suis

14、亚种2的自然寄主, 看来与欧洲猪群布氏杆菌病的阶段性暴发有关。在美国东南部 (其他地区很少存在)的野猪 (Drew等,1992)被发现有高的血清学反应,从一些猪中分离出B.suis亚种1(Wood等,1976; Becker等,1978)。在佛罗里达州的进一步研究显示,尽管只有某些种群被感染,但在那些种群 中的发病率通常是高的(Leek等,1993)。在控制猪布氏杆菌病时,野猪流行病学的重要性主要依 赖于野猪和家猪之间的接触 (Nettles, 1991)。如果在野猪存在的地区,猪的管理系统能防止野猪 和家猪的接触,那么野猪B.suis的感染对于人类健康就比对生猪产生的威胁重要得多。用诱饵给

15、野猪群免疫接种已显示,在将来的某些情况下被认为是一种可行的选择(Fletcher等,1990),可 用菌株RB51,它是个粗糙型类变株,在美国最近被应用到牛群的常规免疫中(Enright,1995)。 在患布氏杆菌病的养猪场附近捕获的啮齿类动物或食肉动物中,曾有大量B.suis感染的或血清学 阳性的实例。一般认为这些动物从猪获得感染, 并且是感染的最终寄主。可以肯定,最近的感染 猪群流行病学调查揭示了感染猪群才是另一群家猪的感染源。实验研究证明,猪可被 B.suis 亚种 4, B abortus,Bmelitensis,B canis 和 B neoto mae 感染。然而还没有证据证明,入

16、侵生殖道的这些细菌会在猪群中互相传播, 或者局限在任 何感染部位的淋巴结以外的组织中。所有公开的证据显示, 这些亚种或种对猪的致病性不高, 猪 不出现临床症状,感染是自我局限的,且存在通常少于 60 天。不过,这些感染对公共卫生非常 重要。特别是对装卸工人,还可伴有流产布氏杆菌的感染。感染B.suis亚种1,2或亚种亚种3的猪对其它家养动物是一个感染源。B.suis的感染可自然 发生于马、牛和犬。尽管在马的感染中最常见的布氏杆菌是 B abortus ,但有记载,当马 接触了感染的猪时,由B.suis引起痿管和其它临床症状。牛是乎不被B.suis感染,当感染出现时, 其特征是乳腺炎,排到牛奶中

17、的B.suis菌对公共卫生存在威胁。该菌可以引起犬的急性感染,使 怀孕母犬频繁流产。有一些证据显示,犬的一个重要病原菌B canis ,是从B.suis亚种3进 化而来的。发病机理公开的文献和比较研究表明,B.suis亚种13的致病性是非常相似的(Thomsen,1934;Hutchings,1950;Hoerlein等,1954;Deyoe,1967)。不同之处是与猪感染的方式,感染的剂 量,年龄和猪的品种因素有关, 相同亚种的菌株之间也可能会有微小差异。 不管怎样,该病所表 现的特征通常是不明显的。无论感染的途径如何,该菌必须接触到并且穿过粘膜上皮, 其机制尚 未能完全阐明。随着最初的细菌

18、侵入,淋巴细胞和浆细胞在粘膜下聚集作为应答。 入侵的细菌被 带到局部淋巴结,尚不清楚细菌是独自运行到淋巴结, 还是由巨噬细胞带进去的, 感染的淋巴结 由于淋巴细胞和网状内皮细胞的增生和浸润而增大。在局部淋巴结存活的布氏杆菌进入一个菌血 症期,这时通过藏在嗜中性细胞和巨噬细胞内而避开体液免疫机制。在猪B.suis感染的急性发病 期,如果频繁采血和细菌学检查, 菌血症可以是一个不可避免的发现。一般菌血症发生在接触感 染后的 17周 ,平均发生在感染后的 2周。菌血症平均持续 5周,而且在这段时期内一般 是持续存在的,个别猪存在间歇菌血症从短至 1 周到长至 34个月。病程中广泛的组织继发性感 染很

19、可能是菌血症造成的。在菌血症过后的短期内,从动物体内许多部位可以分离到 B.suis(Deyoe 和 Manthei , 1967)。 整个淋巴系统在一段时间内均会受到影响。 随着感染后时间的延长,细菌定位的部位数量逐渐减 少。在淋巴结中,最常见的 B.suis 感染部位,根据感染途径依次为下颌骨、肝肠、髂骨内、咽上 的淋巴结。赤藓醇(一种促进布氏杆菌生长的糖 )在生殖系统的器官含量高的猪易受到持续感染。 胎盘是感染首选部位,布氏杆菌定位于慢性滋养层的内质网中。除了严重的胎盘感染外,可见到子宫内膜的轻微炎症。尽管不像淋巴结那么常见,脾、肝、 肾、膀胱、乳腺和大脑可被感染(Jubb等,1985)

20、。其它B.suis的主要来源,特别是在慢性感染 的猪,是关节液和骨髓。随着体液抗体和细胞介导的免疫系统活动的出现,机体对 B.suis 侵入的反应变得明显,发展 为显微镜下可见的病变。这些现象可同时出现,但通常是在可监测的菌血症出现后发生, 菌血症 可产生长达68周的可监测的抗体水平。当感染B.suis的猪病愈时(例如,它们的组织中不再有 活菌存在时),其它现象,诸如抗体水平,细胞过敏性,以及显微病变也会消退或消失,不幸的 是,许多猪会保留永久性感染。在一系列实验中,248头性成熟猪建立了感染(Deyoe,1972a),在猪感染B.suis后的不同间隔 期宰杀,对它们的组织进行全面性细菌学检查

21、。每一母猪组中,有 3/4的猪在感染后 46个月, 或更长时期的感染中痊愈,而公猪的痊愈率从未超过50%。相反地,Goode等(1952)和Manthei 等(1952)却从在乳猪阶段受到感染了的474头成年猪中的12头中分离到 Bsuis。此资料证实大 多数感染 B.suis 的猪最终都将自然康复。不过,相当多的永久性感染的母猪将是一个持续的感染 源。病理诊断:临床症状B.suis 感染的临床表现在不同的猪群变化极大。 在感染的猪群中,多数没有可被畜主看到的布 氏杆菌病的症状。猪布氏杆菌病的典型表现是流产,无生育力,睾丸炎,后肢瘫痪以及跛行。感 染猪不表现任何稽留热或波浪热。临床症状是一过性

22、的,死亡罕有出现。流产可以发生在妊娠的任何时间,且受到感染时间的影响比妊娠时间更大。在配种时通过生 殖道感染的母猪流产发生率最高(Deyoe and Manthei,1969)。早至被精液中带有 B suis的公 猪自然受精后 17天,就可观察到流产。在放养情况下,早期流产易被忽略,早期的迹象是大量 的母猪在可导致妊娠的配种后 3040天有发情征象。在早期流产时,很难观察到阴道排出物, 妊娠中期或晚期发生的流产,通常与母猪在妊娠 35天或 40天后受到感染有关。母猪生殖系统感 染持续性变化极大。已证明,很少数母猪阴道分泌物中的 B.suis 可存在30个月。而且多数病例在 30天内排菌。 临床

23、上很少见子宫感染的母猪有不正常阴道分泌物, 除非濒临流产或刚刚流产,多数母猪最终从 生殖系统感染痊愈。母猪生殖系统感染只在流产、分娩或与公猪交配后短期内发生,母猪会有23个静止发情期, 继后的妊娠率和生产能力通常很好。公猪生殖系统的感染比母猪持续时间长。某些公猪不形成局部的生殖感染,但发生生殖系感 染的公猪很少痊愈。在该公猪附性腺或睾丸上的病理变化, 一般比在子宫上的会更广泛和不可逆 转。感染的公猪可能无生育能力和缺乏性欲, 这常与睾丸感染有关。然而,公猪的附性腺感染更 常见,在它们的精液里的B.suis可大量播散。这些公猪的授精力未必降低(Vandeplassche等,1967)。 多数情况

24、下,公猪可出现B.suis亚种1, 2或亚种3的临床病灶。本病在乳猪和断乳猪的临床表现为与后肢瘫痪有关的脊柱炎。这些临床症状偶尔可见于其它 各种年龄组的猪。病理变化B.suis 引起猪的大体病变各种各样。大量的化脓出现,导致大部分粘膜坏死和脱落。 一般地组织学变化包括:子宫腺体的淋巴细胞浸润,子宫内膜基质的细胞浸润,腺体周围结 缔组织的增生。弥散的化脓性炎症在感染的胎盘经常出现, 也可出现大量上皮细胞坏死和纤维素 性结缔组织增生。局部的显微肉芽肿常可在患布氏杆菌病的猪的肝脏见到,特别是在该病的菌血症期内。这些 病灶常常有淋巴细胞、巨噬细胞、嗜中性细胞和巨细胞浸润的坏死区,并有组织细胞和上皮细胞

25、 覆盖,干酪样或凝固性的坏死中心。该病灶通常被一个纤维囊部分地或全部地包裹。肉芽肿的坏 死部分中心有大量嗜中性细胞浸润,并可出现液化和矿物质化 (Enright , 1990)。这些病变并不是布氏杆菌病特有的,其原因是类似的肝脏病变也与其它细菌感染有关。B.suis 的感染有时会引起骨骼的显微病变。 这些病变发生在脊柱和长骨。该病变常发生在接近 骨骺软骨的地方,通常组成一个由巨噬细胞和白细胞带围绕的干酪样坏死中心, 外部包有纤维结 缔组织。慢性的淋巴细胞和巨噬细胞浸润的炎性病灶和化脓病灶,不常见于感染猪的肾、脾、脑、卵 巢、肾上腺、肺及其它组织 (Deyoe, 1968)。诊断诊断猪布氏杆菌病

26、最精确,也可能最敏感的方法是通过直接培养分离布氏杆菌。已经证明, 从尸体淋巴结的小量取样的常规培养法发现的阳性病例的数量不亚于血清学诊断出的布氏杆菌 病(Alton, 1990;Rogers等,1989)。由于该方法可在所有的屠宰场不用损坏尸体即可取材,因此, 这是一个很实用的调查手段。可用的其它材料的培养常是多种多样的,诸如阴道拭子或流产物, 精液样本或阉割的睾丸,肿大的关节液, 以及血液样本。然而,由于实验室设备和经培训的人员 的不足或缺乏,该培养常常是不能实施的(Deyoe,1969)。在不加二氧化碳的条件下B.suis可在所 有正常布氏杆菌培养基上迅速生长,Alton等(1988)完整

27、地描述了该项技术。最初用荧光抗体(FA)技术,在感染猪的组织中进行B.suis抗原检查。总的结论是,用FA方法 在淋巴结压片中很少检测到布氏杆菌,其原因是典型的细菌的数量较少(Deyoe,1972b)。但是FA 试验可以用于检测流产材料,因为在这样的样本中,有大量典型的B.suis。最近,监测布式菌存 在的潜在的敏感方法,诸如多聚霉链反应(PCR),逐渐被引入常规应用,将来可能作为某种情形 下的一种有价值的诊断方法(Lealklevezas等,1995)。检测抗猪布氏杆菌抗体的血清学方法,一般被认为是最实用和最常规的诊断方法,但所得结 果远不完美。对市场猪的调查显示,用平板凝集试验,多至18%

28、的正常猪可有1 : 25的反应 (Deyoe, 1969)。另外,某些猪很少产生或不产生抗布氏杆菌的抗体。在病的不同阶段,感染的 猪群几乎总有一些检不出抗布氏杆菌抗体的猪。某些B.suis菌株似乎不刺激抗体产生,其它布氏 杆菌的菌株也是如(Doyoe,1967)。暴露于小剂量感染性B.suis的猪,在产生大量抗体以前,一 般有一个延长的潜伏期。由于外部因素,现用的血清学试验对于诊断个体猪来说,远不比用于牛有效。然而,多数血 清学试验完全适用于群体的检测。 其特征是,感染猪群包括多数的,或大量感染的个体。 由于猪 的相互接触,及布氏杆菌病在猪群中有迅速散播的倾向,通常的发病率是50% 80%(S

29、pencer 和 Mattison , 1975)。在群体试验中,大的猪群中只有个别血清学反应者,一般可判 定B.suis的感染是不存在的。大量的血清学试验已用于猪布氏杆菌病的诊断或调查中(Alton等, 1988)。其中有许多还用于牛布氏杆菌病的诊断,大多数试验用B abortus 全细胞抗原。因为通常所用的菌株 B abortus 1193和S99的抗原,有与光滑的B.suis相同或非常相似的表面脂多糖复合体,美国农业部的动植物检疫局(APHIS)和英国的维桥中心兽医实验室生产和发放的标准抗原,可同等地应用于牛和猪布氏杆菌病的诊断。用B abortus 和B.suis抗原检测猪血清,已进一

30、步经实验室确认。诊断猪布氏杆菌病的原始方法是试管和平板凝集法。是根据是否发现多数感染猪群含有 1头 或以上猪,带有大于100国际单位(IU)的凝集抗体。判定结果现在知道,血清凝集试验(SAT)尽管敏感, 但如果作为诊断工具单独使用的话,还不够特异。在多次反复地试验并可决定抗体滴度、 趋向的 情形下,可以纠正一些不准确的诊断。把抗原血清混合液的pH值降低到34,发现非特异凝集减少,而不影响感染猪血清的凝 集。该现象就促使了缓冲布氏杆菌抗原试验分类方法的发展, 在该方法中的布氏杆菌抗原被缓冲 到 pH3 65。缓冲的布氏杆菌抗原,成为布氏杆菌病卡片试验和诸如缓冲平板抗原和玫瑰环试 验(RT)相似方

31、法的基础。这些试验是目前诊断猪布氏杆菌病最实用的方法,对大规模的监测试验 也可能是个较好的方法,并是 &34;国际贸易试验清单&34;(国际办公室 des Epizooties 1997) 中列 出的一种方法。因为它们较不易受非特异凝集的影响, 所以,它们比标准凝集试验有明显的优点, 而且与其它诊断猪布氏杆菌病的血清学试验一样敏感。其它试验,诸如利凡诺沉淀血清凝集,2 巯基乙醇及补体结合试验(CFT),经常被用于猪布 氏杆菌病的诊断,对卡片试验结果的确认是非常有用的。 由于上述试验很少或几乎不可能检测猪 血清中的 IgM 布式菌抗体,因此,它们有很高的特异性。然而,在布氏杆菌病早期,这些方法

32、相对的敏感性通常是低的。到抗体反应高峰时和慢性过程的后期,利凡诺、巯基乙醇和 CFT方 法一般与卡片试验一样敏感。 Rogers 等报告了关于培养阳性猪的一个血清试验范围的评价。 RBT 的敏感性是79%, CFT为49%及SAT为51%,根据30 000血清样本的试验结果,得到RBT和 特异性为 98%。其它的研究也都证实,诊断水平越低,其敏感性也越低 (Ferris 等, 1995;Payeur 等, 1990)。无论何种血清学试验,只要能检出 80%90%的感染猪,则可认定为是目前最好的诊断方法。酶联免疫吸附试验(ELISA)的有限的研究已经在做,看来这个方法对未来猪布氏杆菌病的诊断 和

33、其它血清学试验(国际办公室 des Epizooties , 1997)具有同等地位甚至更有优势,旨在消灭该病的进一步研究也在实施中。Corbel(1985)综述的实验性的研究显示,几个其它属的细菌感染可以在布氏杆菌病诊断试验中产生抗体反应。这些细菌包括大肠杆菌的血清型O : 157,考夫曼,怀特N群的沙门氏杆菌的血 清亚型,以及最重要的小肠结肠耶尔森氏杆菌血清O : 9。已确认,猪往往感染后者,而且引起 交叉感染。因此,耶尔森菌其决定簇O多糖抗原和光滑型布氏杆菌的A抗原化学组成一样,在 某些情况下,由于其在诊断上易与布氏杆菌病混淆及对在出口贸易的影响上比布氏杆菌病对农业 生产具有更大的威胁。

34、英国曾经一直没有 B.suis 感染,并且由于它的畜群总体上的良好卫生状况 而享受繁荣的出口贸易。在1988年前7年内,在其出口猪的检疫中,CFT反应高于20个国际 补体试验单位(icftu)的猪的数量从未超过0 004%,而1988,1989和1990年的数字分别为0 42%, 0 70%和1 5%。自从1988年起,至少4%的出口猪群有高于5%CFT阳性反应, 有些猪群50%以上的猪达到这个水平。曾从受检猪群中分离到耶氏大肠杆菌09,尽管做了广泛的调查,但仍未发现B.suis(Wrathall等,1991)。淋巴细胞转化试验,已被用于测量一定规模的猪场中感染猪的细胞介导的免疫反应(Kane

35、ene等,1978)。在组织中找到B.suis和可测出的淋巴细胞刺激反应之间有高的相关性。 然而,除非特殊病例,该方法的复杂性可能限制了把它作为一个诊断手段。 在美国,已经研究用皮下注射布氏杆菌过敏原的方法检测迟发性的过敏反应,但结果未刺激 出强烈的反应。然而,它们与血清学试验有相似的准确性, 可能更适于在某些情况下的猪场的检 测,尽管它们的操作和判定更困难些,且可能不适于上市猪的检测。在面对 O: 9引起的交叉反 应时,这些试验的应用也许是最特异的诊断方法。在许多国家, 尤其是东欧,皮试常被用于猪布 氏杆菌病的诊断。对诊断最重要的帮助之一是一份完整的猪群历史资料, 包括临床表现,猪的转 移,

36、合并猪群,配种记录,以及工作人员疾病状况的良好记录,给布氏杆菌病的诊断提供了必要 的无价的资料。准确的流行病学资料对实验室诊断也是一个必要的补充。防治方法:治疗 没有一种治疗方法,诸如抗生素治疗,饲料添加,或其它化学疗法,在医治猪的布氏杆菌病 方面被证明是有效的,并且在经济上是可行的。 据了解,给予大剂量的四环素、链霉素或磺胺的 办法已有相当长的历史。在一些试验中, 看来这些抗菌素单独或联合使用有一定效果。然而, 通常情况下抗菌素治疗效果仅限于该病的菌血症期,停止治疗后,组织中仍存在B suis 活 菌。尽管治疗对在从寄主中根除所有细菌方面尚无效果,但比较而言,化学治疗可以抑制 B.suis

37、的迅速繁殖,以此缓和临床症状和减少细菌的传播。 即使该方法实际用有限,但它对感染猪群有 良效,不应废置不用。预防免疫 尚未研制出使猪产生抵抗布氏杆菌病,安全而可靠的疫苗。通过抗原刺激可产生明显的抵抗 力,但免疫的持续性却非常有限(Deuoe, 1972a)。在美国,对猪免疫接种的兴趣已随着疾病发生 的减少而降低。就美国目前猪布氏杆菌病发生的状况而言,其研制和应用疫苗的费用尚不清楚。尚无专门针对抗猪的 B.suis 感染免疫机制的基础研究。,人们完全可以根据其它动物的布氏 杆菌病研究中大量的证据推断,其基本的机制是一个细胞介导的免疫, 体液免疫只起一种微小的 作用或根本不起作用。对猪的抗布氏杆菌

38、免疫性的研究可总结 如下 :1 某些猪对布氏杆菌的感染有天然抵抗力,如 果其它遗传因素可被忽略的话,该抗病性通过选择性育种措施,可被显著加强 (Cameron 等, 1941)。2 多数感染强毒 B.suis 的猪可病愈,但由强毒感染引起的抵抗力是短暂的, 多数可能在初次 感染后的612个月内出现再次感 染。3 用弱化的 B.suis 或 B abortus 菌株 19所做的试验,在产生持续的免疫性方面没有 成功,虽然所用产品曾被认为可以安全使用。4 灭活 B.suis 的菌体或抽提液在刺激免疫性上一般无效,或者说尚没有证据证明其能产生足 够的持续免疫。控制措施布氏杆菌病控制的经验指出,在美国

39、从猪群中根除该病是有希望的,且是可行的。自从 1950 年以来该病的发生明显减少。减少的重要因素是猪的生产倾向于更专业化, 分散饲养的猪场变得 更少。结果,猪的繁殖疾病的发生在比重上变得更重, 封闭的系统和猪群杜绝了许多猪场间疾病 传播的机会。在多数情况下,较大的猪场取消了 &34;公用种公猪&34;。另一个在控制猪布氏杆菌病中的重要手段,是建立和管理有效的无布氏杆菌病猪群, 特别是纯种群或用于出售种猪的猪 群,贯彻执行有效的监测措施,诸如交易猪 (母种猪和公种猪 )的鉴定和检测,在控制和消灭大量的感染猪群方面起到了重要作用。最后,不论何时认真执行推荐的从一个猪群或一个地区消灭布氏杆菌病的措施

40、,该病在当地的再次出现是极为少见的(例如,Spencer和Mattison ,1957)。目前,在美国消灭布氏杆菌病是一项州、联邦和家畜行业共同的计划。该项计划是由州和联邦 的动物卫生管理属之间合作管理、指导以及资助的。通过专家委员会 (最终决定根除布氏杆菌病 的统一方法与规则和实施该措施 )的代表推动家畜行业落实措施的执行。这些规则指南经常会得 到修订。因此,各州的兽医都有现行的关于每个州实施该措施的资料。措施当猪群发现或怀疑有 B.suis感染时,建议使用三个不同的措施。1包括减少猪群的数量,措施这是目前长期使用最有效、最经济的方法。2 是一项为挽救不可替换的世系而制定的措施,基本上包括把成年猪送入市场屠宰 而保留 断 奶猪作为繁殖种群,由于该措施总 不成功,因 此,需要考虑隔离和反复检测的 措施。3 包括淘汰血清学阳性反应的猪,以必要的次数重复检测该猪群。如果该猪群已经被感染,最后一项措施是极少成功的,但如果猪群只有个别阳性反应猪,或者阳性反应的猪是极少数, 而且有理由怀疑布氏杆菌病存在,那么此措施是一个选择。

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