外周血细胞形态检验

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1、赣 州 市 妇 幼 保 健 院 丁 克 文 讲 授 内 容 器 材 清 洁 、 干 燥 、 无 尘 、 无 油 脂 的 载 玻 片。 操 作 在 玻 片 近 一 端 1/3处 , 加 一 滴 血 液 , 握 住 另 一 张 边 缘光 滑 的 推 片 , 以 3045角 使 血 滴 沿 推 片 迅 速 散 开 ,快 速 、 平 稳 地 推 动 推 片 至 载 玻 片 的 另 一 端 。 注意事项 血膜呈舌状,头、体、尾分明 空气中晃动,尽快干燥;37恒温箱中促干 涂片的厚薄、长度与血滴大小(1020l)与血片质量 1h内染色或在1h内甲醇固定 正确清洁玻片 抗凝血或毛细血管血涂片;EDTA能阻止

2、PLT聚集 抗凝血液4h内涂片 原 理 瑞 氏 ( Wright) 染 色 法 ( 经 典 染 色 法 ) 瑞 氏 染 色 法 使 细 胞 着 色 既 有 化 学 亲 和 反 应 , 又 有 物 理 吸 附 作 用 。 试 剂 瑞 氏 染 液 瑞 氏 染 料 0.1 g 甲醇 (AR) 60ml pH6.8磷酸盐缓冲液(pH6.46.8) 磷酸二氢钾(KH2PO4) 0.3g 磷酸氢二钠(Na2HPO4) 0.2g 加少量蒸馏水溶解,再加至1000ml。 操 作 加 瑞 氏 染 液 数 滴 , 固 定 血 膜 约 1min。 滴 加 约 等 量 的 缓 冲 液 与 染 液 混 合 , 室 温

3、下 染 色 510min。 用 流 水 冲 去 染 液 ,待 干 燥 后 镜 检 。 注 意 事 项 PH对细胞染色有影响。未干透的血膜不能染色。染色时间与染液浓度、染色时温度成反比。不能先倒掉染液,用流水冲去。血膜上有染料颗粒沉积,可加少许甲醇。 先在低倍镜下浏览全片,了解染色好坏和 细胞分布情况,观察有无异常细胞。选择涂片体尾交界处染色良好的区域,在 油镜下计数100个白细胞,按其形态特征 进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。血 涂 片 镜 检 注 意 事 项分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈城垛状迂回移动,计数使不能重复和遗漏。白细胞数明显减少的血片,应检查多张血片。分类见有

4、核红细胞,不计入100个白细胞内,以分类100个白细胞过程中见到多少有核红细胞报告,并注明所属阶段。 除慢淋外,破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞总数的2%。若破碎细胞仍能明确鉴别,如破碎的嗜酸性粒细胞,应包括在分类计数中。在结果报告中应对破碎细胞或不能识别细胞作适当描述。分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染色及分布情况,注意有无寄生虫和其他异常所见。白细胞形态变化较大,遇有疑问应请示上级主管或主任进行核实,以减少错误。 正 常 红 细 胞 大 小 较 为 一 致 , 直 径 69um在 各 种 贫 血 时 , 红 细 胞 可 出 现 大 、 小 不一 。 直 径 10um为 大 红

5、细 胞 , 15um为巨 红 细 胞 , 常 见 于 巨 幼 贫 、 肝 脏 疾 病 等 ,直 径 6um为 小 红 细 胞 , 多 见 于 缺 铁 性 贫血 等 。 直 径 相 差 1倍 以 上 为 大 小 不 均 右 图 : 大 红 细 胞 ( 上 ) 小 红 细 胞 ( 下 ) (中 央 苍 白 区 扩 大 ) RBC直 径 通 常 2.6 um, 呈 小 圆 形 , 细 胞 中心 区 蛋 白 含 量 较 正 常 多 。 见于 遗 传 性 球 形 红 细 胞 增 多 症( 25%以 上 ) 、 自 身 免 疫 性溶 贫 和 异 常 Hb病 ( HBS、HBC病 等 ) 。 球 形 红 细

6、 胞 红 细 胞 呈 椭 圆 形 , 横 短 , 长 大 , 有 时呈 畸 形 。 正 常 人 可 见 到 , 15%。 见 于 以 下 疾 病 : 1、 遗 传 性 椭 圆 性 RBC增 多 症 , 高 于 2550%才 有 诊 断 价 值 。 2、大 细 胞 性 贫 血 时 可 达 25%。 3、其 他 各 类 贫 血 有 不 同 程 度 的 增 多。 椭 圆 形 红 细 胞 比 正 常 红 细 胞 扁 薄 , 中 心 有 少 许 血红 蛋 白 , 部 分 可 与 周 围 的 血 红 蛋白 连 接 , 边 缘 部 染 色 较 中 央 深 ,故 呈 靶 状 。 主 要 见 于 以 下 疾 病

7、 : 1、珠 蛋 白 生 成 障 碍 性 贫 血 2、严 重 缺 铁 性 贫 血 3、一 些 血 红 蛋 白 病 ( 血 红 蛋 白 C、D、E、S病 ) 4、肝 病 、 脾 切 除 后 及 阻 塞 性 黄 疸 等 。 靶 形 红 细 胞 细 胞 狭 长 似 镰 刀 , 也可 呈 麦 粒 状 或 冬 青 叶样 , 主 要 见 于 遗 传 性镰 形 红 细 胞 增 多 症 镰 形 红 细 胞 红细胞淡染区呈裂口状狭孔,正常 5%。常见于感染(特别是急性化脓性感染)、急性中毒、急性失血及急性溶血等。如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为极度左移,多见于类白血病反应或白血病。 具 体 表 现 为 : 伴 白

8、细 胞 总 数 增 高 的 核 左 移 称 再 生 性 移 , 常 见 于 急 性 化 脓 性 感 染 , 如 大 叶 性 肺 炎 等 。 白 细 胞 总 数 不 增 加 或 减 低 的 核 左 移 称 退 行 性 左 移 , 常 见 于 严 重 感 染 、 机 体 抵 抗 力 低 下 时 , 如 伤 寒 、 感 染 中 毒 性 休 克 的 败 血 症 等 。 中 性 粒 细 胞 核 出 现 4、 5叶 ( 正常 时 多 为 3叶 , 占 5070%) 或更 多 , 其 百 分 数 3%。 这 是 造血 功 能 衰 退 或 造 血 物 质 缺 乏 的表 现 。 常 见 于 巨 幼 细 胞 性

9、贫 血和 使 用 抗 代 谢 药 物 后 。 此 外 ,在 疾 病 进 行 期 突 然 出 现 核 象 右移 , 提 示 预 后 不 良 。 核 右 移 严 重 感 染 、 恶 性 肿 瘤 、 各 种 重金 属 或 药 物 中 毒 、 大 面 积 烧 伤等 , 中 性 粒 细 胞 可 出 现 形 态 变化 。 具 体 表 现 为 : 细 胞 大 小 不 均 : 为 骨 髓 内 幼稚 粒 细 胞 发 生 不 规 则 的 分 裂 增殖 所 致 。 中 毒 颗 粒 : 细 胞 质 中 部 分 或全 部 颗 粒 变 粗 , 着 色 深 , 颗 粒的 分 布 及 大 小 等 , 可 能 为 中 性颗 粒

10、 成 熟 过 程 中 发 生 变 性 所 致 可在细胞质或核中出现,常为多个,被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致。 细 胞 质 内 出 现 嗜 碱 性多 呈 斑 块 、 梨 形 或 云雾 状 , 可 能 为 核 浆 发育 不 平 衡 所 致 , 为 细胞 严 重 毒 性 变 的 表 现 胞 核 有 各 种 形 态 的 芽 状 突出 , 临 床 意 义 尚 不 明 确 ,可 能 与 中 毒 、 癌 转 移 、 严重 的 放 射 损 伤 等 有 关 。 表 现 为 胞 体 肿 大 , 结 构 模糊 , 边 缘 不 清 。 胞 核 可 呈固 缩 、 肿 胀 、 破 碎 、 溶 解等 变 化 , 退

11、行 性 变 是 细 胞衰 老 死 亡 的 表 现 。 异形淋巴细胞:细胞大小为1025l,形态各异,呈圆形,卵圆形或不规则形。细胞核形各异,呈圆形、卵圆形、凹陷形、折叠形、裂隙形或分叶形,核染色质可为细致、中度致密或粗颗粒;副染色质无或少量,核仁无或偶见,大小和染色性各异。细胞质中等至大量;染灰色、淡蓝色或深蓝色;可见细胞边缘染色深,核周淡染;浆细胞样淋巴细胞常有核周淡染区和核窝;有时可见细小嗜天青颗粒;偶见空泡。 异形淋巴细胞可见于各种病毒感染,如传染性单核细胞增多症时最为常见。此外,可见于疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等。 按形态学特征分为型: I型:空泡型或浆细胞型 II型:不规则型或单核细胞型 III型:幼稚型 欢 迎 批 评 指 正 谢 谢 !

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