现代组化复习要点
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1、现代组化复习要点1.FISH探针的类型。2抗原刺激后,机体体液中现能与相应抗原发生特异性结合的球蛋白一免疫球蛋白(lg)。免疫球蛋白分哪几类。3. 免疫组织化学全过程分步。4. 原位杂交的主要分类。5最常用于产生多克隆抗体的动物是兔子,其次是山羊、猪、绵羊、马、豚鼠以及其他动物。兔子大量用于多克隆抗体产生的原因。6. 单克隆抗体与多克隆抗体区别7. 免疫组化染色方法选择的原则及注意事项。8. 免疫组化染色过程基本操作步骤。9免疫组化进行抗原修复的原因;什么是阳性对照和阴性对照,以及设置的原因;用到什么修复方法。10.以下抗体保存浓缩抗体:工作浓度抗体:即用型抗体:11酶组织化学中影响酶活性的因
2、素。12. 酶组织化学显示酶的方法。(一)金属离子沉淀法:一般用于显示磷酸酶1.钙钴法 2. Gomori硝酸铅法(二)偶氮偶联法(偶氮色素法)(三)联苯胺色素法(四)四唑盐法(五)靛蓝反应原理:底物被酶分解为二个初级反应产物,其中之一可在一定条件下形成不溶性的靛蓝。13. 酶组织化学的应用(1)了解组织、细胞的代谢活动(2)细胞类型的判断(3) 了解细胞定位(4)用于肿瘤的研究(5)用于免疫组化和杂交组化的显示手段14. 碱性磷酸酶,酸性磷酸酶在人体中的分布位置及其检测应用方面。15. 常用于显示碱性磷酸酶,酸性磷酸酶的方法。16. 腺苷三磷酸酶的显示方法。17. 显示乙酰胆碱酯酶的方法。1
3、8. 掌握氧化还原酶。19. 酯酶分类。20. 特异性显示DNA分子形态学方法。21. 吖啶橙染料分别与DNA和RNA结合后呈现荧光颜色。22说明应用流式细胞仪,通过AnnexinV-FITC/PI染色,如何区分凋亡细胞和坏死细胞,并且分析原理。1)坏死细胞和凋亡细胞的细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸(PS)迁移至细胞外侧,AnnexinV和PS具极强的结合力,坏死 细胞和凋亡细胞呈现绿色(2)坏死细胞核被PI染成红色(3)双变量FCM的散点图左下象限显示正常活细胞,为FITC-,PI-;右上象限为坏死细胞,为FITC+,PI + ;右下象限为凋亡细胞,呈现FITC+/PI-23. 免疫组织化学与原位杂交的不同点。不同点:(1)原理不同:免疫组织化学-抗原抗体反应;杂交组织化学-核酸碱基互补。(2)方法不同:免疫组织化学一方法类同:荧光法、酶标法、亲合法/二步、三步法等,敏感、特异; 杂交组织化学一荧光原位杂交、组织或细胞原位杂交、原位PCR。(3)检测水平不同:免疫组织化学一组织/细胞、蛋白水平,杂交组织化学一核酸(DNA/RNA)水平24. 免疫组织化学的应用范围,并举例说明。25. 常用哪些CD系列分别标记的T淋巴细胞标记的抗体和B淋巴细胞标记的抗体。
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