机能学实验设计

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1、机能学实验设计不同药物对局部麻醉药作用效果的影响一、实验目的本实验的目的是学习小鼠的腹腔注射法，观察不同药物(肾上腺素、 去甲肾上腺素及酚妥拉明)对局部麻醉药(本实验使用的是普鲁卡因)作 用效果的影响，并掌握上述药物影响普鲁卡因作用的原理及机制。二、实验原理局部麻醉药(localanaethetic)简称局麻药，是一种局部应用于神 经末梢或神经干，能可逆地阻断神经冲动发生和传导，在意识清醒的条件 下引起局部感觉(痛觉、压觉、温觉等)丧失的药物。常用的局麻药有普 鲁卡因、利多卡因等。普鲁卡因(procaine)为酯类局麻药，其盐酸盐为奴 佛卡因(novocaine)，能暂时阻断神经纤维的传导而具

2、有麻醉作用。本 品对皮肤、粘膜穿透力弱，不适于表面麻醉。普鲁卡因能使细胞膜稳定， 降低其对离子的通透性，使神经冲动达到时，钠、钾离子不能进出细胞膜 产生去极化和动作电位，从而产生局麻作用。在临床多把普鲁卡因作局部 麻醉药物使用，常局部注射用于浸润麻醉、传导麻醉、蛛网膜下腔麻醉和 硬膜外麻醉。普鲁卡因对周围血管有明显的直接扩张作用，容易被吸收进 入血液，且麻醉持续时间短，为减少吸收延长药效，减少毒副作用，临床 上常加入少量的肾上腺素(1：200000500000),时效可延长20%。肾上腺素(adrenaline,AD/epinephrine)为a、B肾上腺素受体激 动药，作用广泛而复杂。其在血

3、管方面主要收缩小动脉和毛细血管前括约 肌。皮肤和黏膜血管a受体占优势，肾上腺素对其呈显著的收缩反应； 而骨骼肌血管以B2受体为主，呈舒张反应。去甲肾上腺素(noradrenaline,NA/norepinephrine,NE)为 al、 a2肾上腺素受体激动药，对两者无选择性。去甲肾上腺素可激动血管的 al受体，使血管(尤其是小动脉和小静脉)收缩。对全身各部分血管收 缩作用的程度与其含a受体的密度及去甲肾上腺素的剂量有关：皮肤黏 膜血管收缩最明显，其次是肾脏血管，再次是脑、肝、肠系膜、骨骼肌血 管等。酚妥拉明(phentolamine)为短效a受体阻断药，对a1、a2受体 的亲和力相同，其能与

4、 a 受体激动药竞争 a 受体，从而阻断 a 受体激 动药的作用。酚妥拉明可使血管舒张。利用不同药物对血管的作用，与普鲁卡因配伍注射，观察收缩血管的 药物对麻醉时间是否有延缓作用，而舒张血管的药物对机体吸收普鲁卡因 的速度是否有促进作用，从而缩短麻醉时长。血管的收缩扩张影响麻醉药 物的吸收的快慢，临床上可以根据需要而选用相应的药物与麻醉药配伍注 射，能够较好地控制对病患的麻醉时间。本实验中观察普鲁卡因对小鼠的局麻效果采用热板法。热板法是检 测镇痛药效果如何的经典方法之一。小鼠足底无毛且皮肤裸露，故对热刺 激较敏感。该方法是将小鼠置于预知加热到54.5C55.5C恒温的热金 属板上，通过刺激小鼠

5、局部产生疼痛反应，表现为舔后足。通过记录从放 入热板后到出现舔后足所需时间，即小鼠的痛阈值。热板法一般选用雌性 小鼠，这是因为雄性小鼠受热阴囊会下垂，而阴囊皮肤对热十分敏感，致 使雄性小鼠在实验过程中易跳跃，不易观察到其舔后足的现象。三、实验对象健康雌性小白鼠20只，体重1820g,年龄、体型相同四、实验器材和药品实验器材：1ml注射器3支，RB-200智能热板仪，天平，秒表实验药品：0.5盐酸普鲁卡因注射液、1/250000 肾上腺素、 1/250000 去甲肾上腺素、1/250000 酚妥拉明五、实验步骤与观察项目1、采用热板法测小鼠痛阈值：取雌性小鼠数只，依次放入智能热板 仪内，测定其痛

6、阈值，凡舔足时间在2030者入选后续实验，共选20只。3、给药：将分好组的小鼠分别放入天平中称量，按如下剂量腹腔注射给药：A组：0.5%盐酸普鲁卡因注射液(0.1ml/10g)腹腔注射。B组：含有1/250000肾上腺素的0.5%盐酸普鲁卡因注射(0.1ml/10g) 腹腔注射。C 组：含有 1/250000 去甲肾上腺素的 0.5%盐酸普鲁卡因注射液 (0.1ml/10g)腹腔注射。D 组：含有 1/250000 酚妥拉明的 0.5%盐酸普鲁卡因注射液 (0.1ml/10g)腹腔注射。4、实验结果记录：将给药后的所有小鼠放入 RB-200 智能热板仪，观 察其出现舔后足的行为，记下每只小鼠给

7、药后至舔后足所经历的时间，并 将其时间填入相应的组别内。不同药物对小鼠局部麻醉时间的影响普鲁卡因含AD含NA含酚妥拉明(0.1ml/10g)123455、数据处理：(1)求出各组每只小鼠痛阈药效平均时间：TA=(A1+A2+A5)/5；TB=(B1+B2+B5)/5；TC=(C1+C2+C5)/5;TD=(D1+D2+D5)/5(2)计算B、C、D两组相对A组延长和缩短的百分率：公式：RB%=|TB TA|/TA 某 100%RC%=|TCTA|/TA 某 100%RD%=|TDTA|/TA 某 100%注：绝对值中减后为负数者，在结果中要带上负号。六、注意事项1、注意小鼠腹腔注射的操作要领

8、2、观察小鼠要仔细认真七、实验结果预测与分析(1) A组的小鼠自给药后3min内即可产生局麻作用，该作用一般可 维持 30-45min。(2) B组的小鼠给药后产生局麻作用的时间会比A组延长，且局麻 作用可维持 1-2h。结果分析：肾上腺素为a、B肾上腺素受体激动药，作用广泛而复 杂。其在血管方面主要收缩小动脉和毛细血管前括约肌。给小鼠注射肾上 腺素后，注射部位周围血管收缩，延缓了普鲁卡因的吸收，使得其局麻作 用时间延长并增强。(3) C组的小鼠给药后产生局麻作用的时间比B组 还要长，且局麻作用维持时间比 B 组要长。结果分析：去甲肾上腺素为a1、a2肾上腺素受体激动药，对两者 无选择性。去甲

9、肾上腺素可激动血管的al受体，使血管(尤其是小动脉 和小静脉)收缩。给小鼠注射去甲肾上腺素后，NA激动血管al受体， 使血管收缩(此收缩作用比 AD 引起的血管收缩强烈)，延缓普鲁卡因的 吸收，延长并增强其局麻作用。（4） D组的小鼠给药后立刻产生局麻作 用，且该作用维持时间短。结果分析：酚妥拉明为短效a受体阻断药，对al、a2受体的亲和 力相同，其能与a受体激动药竞争a受体，从而阻断a受体激动药的 作用。酚妥拉明使血管舒张，加快了普鲁卡因在局部组织中的吸收，使其 局麻作用时间减少且效果减弱。八、结论不同药物对普鲁卡因的局麻作用有着不同的影响：肾上腺素和去甲肾 上腺素因其能收缩血管，从而延长普鲁卡因的局麻作用并使其效果增强； 相反，酚妥拉明可舒张血管，使普鲁卡因的局麻作用时间减短且效果减弱