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1、薯蓣皂苷元的提取、精制与鉴定一、概述穿山龙为薯蓣科穿龙薯CDioscorea nipponica Makino）的干燥根茎。具有活血化瘀、祛风除湿、清肺化痰等功效。穿山龙中主要化学成分的结构及物理性质：薯蓣皂苷（dioscin）为无定形粉未或针状结晶，mp275277C。可溶于甲 醇、乙醇、甲酸，难溶于丙酮和弱极性有机溶剂，不溶于水。r b薯蓣皂苷元（diosgenin）为白色粉末，mp204207C, D -129。（C =1.4三氯甲烷）。可溶于有机溶剂及醋酸中，不溶于水。OHOHH,OHOHOH备 H,OHOH OH薯蓣皂苷兀D葡萄糖 L鼠李糖薯蓣皂苷二、实验部分一）实验目的要求1、掌握
2、穿山龙中薯蓣皂苷元的提取和精制方法。2、熟悉薯蓣皂苷及皂苷元的性质和检识方法。二）实验原理薯蓣皂苷元在植物体内与糖结合成苷，经水解（酸水解、酶水解）可得薯蓣 皂苷元和糖。利用薯蓣皂苷元不溶于水，溶于有机溶剂的性质，用石油醚连续回流提取，将其从原植物中提取出来。（三）实验药材、仪器与试剂1、药材：穿山龙粗粉70g （每组）2、仪器：电热套、圆底烧瓶、冷凝管、纱布、乳钵、H试纸、烘箱、试管、 水浴锅、索氏提取器等。3、试剂：浓H2SO4、Na2CO3粉末、蒸馏水、95%乙醇、1%磷钼酸乙醇溶液、 石油醚（60-90C）、醋酐、浓硫酸、三氯甲烷、浓硫酸等。（三）实验内容1 、薯蓣皂苷元的提取、分离和
3、精制穿山龙粗粉（70g）1置圆底烧瓶中，加水350ml、浓H2SO430ml,室温浸泡24小时，文火加热回流46小时， 放冷，倾出酸水液酸性药渣用清水反复漂洗除去余酸，然后将药渣倒入 乳钵中，加Na2CO3粉末，反复研和 磨调PH至中性（用PH试纸测试）、水洗、抽干 中性药渣低温（80C ）干燥12小时干燥药渣置乳钵中研成细粉，置索氏提取器中， 以石油醚（60-90C） 150 ml为溶剂，连 续回流提取4-5小时石油醚提取液回收石油醚至剩10-15m 1，迅速倾入小烧瓶中、密盖，置于冰箱中析晶（48h）,抽滤滤液沉淀J用少量冷石油醚洗二次，抽干薯蓣皂苷元粗品置圆底烧瓶中，加50ml甲醇，在沸
4、水浴上加热回流至 J完全溶解，趁热抽滤，滤液放入冰箱析晶。薯蓣皂苷兀精品2、鉴定（ 1）检识反应醋酐一浓硫酸反应（Liebermann-Burchard反应）取样品适量，加冰醋酸0.5ml使溶解，续加醋酐0.5ml搅匀，再于溶液的边 沿滴加 1 滴浓硫酸，观察并记录现象。三氯甲烷一浓硫酸反应（Salkowski反应）取样品适量，加三氯甲烷 1ml 使溶解，沿试管壁加等量的浓硫酸，分别置可 见光及紫外灯下，观察并记录现象。（ 2 ）薄层色谱鉴定吸附剂：硅胶 G-CMC-Na 薄层板样 品： 1% 自制薯蓣皂苷元的乙醇液对照品：1%薯蓣皂苷元标准品的乙醇液展开剂：苯-乙酸乙酯（ 8:2）显色剂：1
5、%磷钼酸乙醇溶液，105C加热至斑点显色清晰。实验结果记录：观察斑点颜色，记录图谱并计算Rf值。（四）实验指导及注意事项1原料经酸水解后应充分洗涤呈中性，以免烘干时炭化。2在干燥水解原料的过程中，应注意压散团块和勤翻动，以利快干。3在连续回流提取过程中，由于使用的石油醚极易挥发损失，故水浴温度 不宜过高，能使石油醚微沸即可。此外可加快冷凝水的流速，以增加冷凝效果。4回收石油醚的蒸馏操作，不必另换蒸馏装置。只将索氏提取器中的滤纸 筒取出，再照原样装好，继续加热回收烧瓶中的溶剂，待溶剂液面增加至高虹吸 管顶部弯曲处 1cm 处，暂停回收，取下提取器，将其中石油醚移置另外容器中， 如此反复操作，即可完成回收石油醚的操作。5在连续提取过程中，欲检查有效成分是否提取完全，可取提取器中提取 液数滴，滴于白瓷皿中，挥散溶剂，观察有无残留物，然后进行醋酐浓硫酸反 应。若反应呈阴性，示已提尽。（五）思考题1甾体皂苷可用哪些反应进行鉴定？2试设计一种从穿山龙中提取薯蓣皂苷的工艺流程，并说明提取、分离原 理。3使用石油醚作提取溶剂时，操作中应注意哪些事项？
实验三--穿山龙中薯蓣皂苷元的提取、分离与鉴定
