《急白免疫分型》PPT课件.ppt

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1、讲座 急性白血病 免 疫 学 分 型 急性白血病的免疫分型 MICM分型 : 细胞形态学 (包括细胞组化 )为基础， 细胞免疫学 (免疫表型 )为主体， 细胞遗传学为辅助， 分子生物学为补充的原则。 免疫学分型对 ALL更重要。 免疫学与 FAB分型可不一致。 白血病免疫分型原理 白血病细胞表面有大量的抗原 ,这些抗原的 性质与正常白细胞的抗原性质相同 ， 目前尚未发 现特异的白血病抗原 。 但白血病细胞可能具有 : 1.特异性的联合抗原 ; 2.某些抗原表达于某个特定系列的发育阶段上 ,而 正常造血细胞不存在这种现象或极为罕见 。 这些抗原称为白细胞分化抗原或分化群 CD （ cluster

2、 designations） . 白血病免疫分型原理 白血病免疫分型的意义： 1。有助于白血病亚型的诊断，特别对用形态学、 细胞化学染色不能肯定细胞来源时及杂合性白血 病； 2。指导临床治疗； 3。有助于判断白血病的预后； 4。可进行疾病的监测如检测。 细胞系列抗原的表达 -B细胞系抗原 B细胞根据发育阶段可分为： B祖细胞 TdT、 CD34、 HLA-DR 前 B细胞（可再分为前前 B、前 B） TdT、 CD34、 CD10、 CD19、 CD24 未成熟 B细胞 CD19、 CD24、 CD20、 CyCD22 成熟 B细胞 CD19、 CD24、 CD20、 CyCD22 活化 B细

3、胞 CD19、 CD24、 CD20、 CyCD22 浆细胞 CD38 细胞系列抗原的表达 -T细胞系抗原 T细胞发育的路径为： 骨髓（ 骨髓祖细胞 前胸腺细胞，亦称 T祖细胞 ） - 胸腺（早 中 晚） - 外周血（成熟） 骨髓 T祖细胞 CD34+、 TdT+、 CD10+、 CD7+ CD7出现最早并贯穿于 T细胞发育全程 T细胞系抗原 T 细胞进入胸腺后： （早） CD7+、 CD2-、 CD3-、 CD4-、 CD8-、 TCR- （中） CD7+、 CD2+、 CD3+、 CD4-、 CD8-、 TCR- （晚） CD7+、 CD2+、 CD3+、 CD4+、 CD8+、 TCR+

4、， CD7+CD2+CD3+CD4-CD8+TCR+ CD7+CD2+CD3+CD4+CD8-TCR+ 进入血液及淋巴结 T细胞系抗原 -外周血 T细胞 血液中 T细胞主要有以下亚型： 1.CD3+、 CD4+、 CD8- 辅助性 T细胞 /诱导性 T细胞 ， TH/TI 占 T细胞总数的 60-70% 2.CD3+、 CD4-、 CD8+ 抑制性 T细胞 /细胞毒性 T细胞 ， TS/TC， 占 T细胞总数的 20-30% 3.CD3+、 CD4+、 CD8+ 占 T细胞总数的 1-3% 4.CD3+、 CD4-、 CD8- 占 T细胞总数的 1-10% T细胞系抗原 -CD4+T细胞亚群

5、1 根据产生淋巴因子的差异分为： TH1 产生 IL-2、 IFN- 、 TNF- TH2 产生 IL-4、 IL-5、 IL-6、 IL-10 2 根据功能分为： TSI（ suppressor inducer T-cell） 诱导 TS功能 ， CD31+、 CD45RA+ THI（ helper inducer T-cell） 辅助 B细胞产生抗体 ， CD31-、 CD45RO+ 3 分为记忆 T细胞 、 天然 T细胞 、 活化 T细胞 天然 T细胞 记忆 T细胞 活化 T细胞 表型 天然 T 细胞 记忆 T 细胞 活化 T 细胞 CD4 CD8 CD45RA + - + + - -

6、+ - - CD45RO - + + C D 2 5 C D 5 4 C D 5 8 -/+ +/+ + 髓系抗原 根据髓系抗原表达大致分为 7类： 1粒细胞和单核细胞上都有较强表达的抗原： CD13、 CDw17、 CD32、 CD87、 CD88、 CD89、 CDw92、 CD93、 CD156、 CD157、 CD163。 2以粒细胞为主，也存在于单核细胞上的抗原： CD15、 CD65。 3. 以单核细胞为主，也表达在粒细胞上的抗原： CD14、 CD33。 髓系抗原 3基本只表达在单核细胞上的抗原： CD16、 CD64、 CD68、 CD91、 CDw136、 CD155。 基本

7、只表达在粒细胞上的抗原： CD16b、 CD66。 4造血干、祖细胞抗原： CD34、 CD90。 5其他髓系相关抗原：主要存在于其他系细胞上， 髓系细胞上也有表达： CD4、 CD7、 CD9、 CD10、 CD11b、 CD11c、 CD31、 CD36、 CD38 6血小板相关抗原： CD36、 CD41、 CD42、 CD61、 CD62。 7. 红细胞抗原： CD36、 GPA 免疫分型 从 70年代开始试图进行免疫学分型： 1986年前五分法 1986年后两大类九分法 1994年四型 21类法 免疫分型 五分法： 五分法： Common型 未分化型 T细胞型 前 B细胞型 B细胞型

8、 表型 DR/CD9/CD10+ 复杂 CD2/CD5+ CyIg SmIg+ 发生率：国外 60-70% 30% 15-25% 2-3% 2-3% 国内 50% 30% 20% 0.5% 1.5% 预后： 儿童 最好 次之 再次 最次 最次 成人 次之 再次 最好 最次 最次 免疫分型 两类九型法 : 非 T亚型 HLA-DR CD9 CD10 CD20 链 SmIg 发生率 % I + - - - - - 5 II + + - - - - 15 III + + + - - - 30 IV + + + + - - 50 V + + +/- +/- + - 5 VI + + - + - + 2

9、 免疫分型 两类九型法 T亚型 CD7 CD5 CD2 CD3 CD4 CD8 CD1a 发生率 I + + + - - - - 55 II + + + +25% +90% +90% + 25 III + + + + + # + # - 20 #:二者之一阳性 ALL免疫分型 -四型 21类法 第一型：裸型 - 未分化型 ,干细胞型 第二型：纯型 - Pre-B1,Pre-B2,Pre-B3, Pre-B4,B,T1,T2,T3 第三型：变异型 -Pre-B1-4/My+,Pre-B1- 4/CD15+, PRE-B1-4/T+,T1-4/My+, T1-4/CD15+,T1-4/B+ 第四型

10、：多表型 -Pre-B1-4/M+,T1-4/M, Pre-B+T,Pre-B+T+M. ALL免疫分型 -FAB的 MIC分型 B-ALL CD19 TdT DR CD10 CyIg SmIg FAB亚型 早期前 B + + + - - - L1,L2 t(4;11) t(9;22) 普通 -ALL + + + + - - L1,L2 6q- 近单倍体 t/del(12p) t(9;22) 前 B-ALL + + + + + - L1 t(1;19) t(9;22) B-ALL + + - +/- +/- + L3 t(8;14) t(2;8) t(8;22) 6q- ALL免疫分型 -FA

11、B的 MIC分型 T-ALL CD7 CD2 TdT FAB亚型 早期前 T + - + L1,L2 t/del(9q-) T-ALL + + + L1,L2 t(11;14) 6q- 白血病系列积分方法 单表型：某个系列积分大于 2分，其他系列为 0分： 纯 B-ALL，纯 T-ALL，纯 AML（ M0-5），纯 AML-M6，纯 AML-M7。 表达某一系列抗原为主型：某一个系列积分大于 2分，伴另一系列抗原的 表达，但小于或等于 2： 1、 My+-B-ALL， My+-T-ALL， My+： CD13+/14+/33+和 15 ， 2、 CD15+B-ALL， CD15+T-ALL，

12、 CD15+： CD15+（ CD13/14/33-） 3、 CD2+ B-ALL CD5+ B-ALL CD7+B-ALL， 4、 CD20+T-ALL CD24+T-ALL 5、 Ly+AML。 3. 双表型：至少二个系列积分大于 2分 : B-ALL-粒单型（形态 ALL）， B-ALL-粒单型（形态 AML）， T-ALL-粒单型（形态 ALL）， B-ALL-粒单型（形态 AML）。 4. 未分化型，所有系列积分均小于或等于 2。 急性白血病免疫学 系列分型的积分方案 分数 B系 T系 粒单系 巨核系 红系 2 M/cCD22 M/cCD3 MPO CD41 CD42 血型蛋白 A

13、cCD79a M/cTCR / Ccd13 CD61 RhD HbF c sIg M/cTCR / FVIII 1 CD19 CD20 CD2 CD5 Mcd13 CD33 CD36 ABH CD36 ABH CD36 CDw65 cCd68 0.5 CD10 CD24 CD7 CD1a CD11a/c CD14 TdT CD4 CD15 CD65 CD117 免疫学分型 与 FAB AML分型 的相关性 M1： CD34+、 MPO+、 DR+、 TdT+、 CD33+、 CD13+、 CD15-、 CD11b-、 无 淋、红、巨核系抗原 M2： CD34+、 CD33+、 CD13+、 D

14、R+、 CD15+ M3： CD33+、 CD13+、 DR-、 CD34- M4： CD34+ 、 CD33+、 CD13+、 CD14+、 CD15+ M5： CD34+ CD33+、 CD13+、 CD14+、 CD15+ M6： 血型糖蛋白 +、 CD34-， DR-、 CD33-、 CD13-、 CD15- M7： CD34+、 CD33+、 DR+、 CD41+、 CD42+、 CD61+ M0： FAB：形态学为 L2型， MPO、 SBB组化阴性，淋系抗原阴性， CD33、 CD11、 CD15 及 antiMPO单抗阳性 。 细胞系列抗原的表达 -B细胞系抗原 HLA-DR意

15、义 在白血病分型中， HLA-DR特异性较差， 除 B系外， HLA-DR在急非淋、成人 T细胞白 血病亦表达， 但如 DR+，加上 CD5-、 CD7-则 99%为 B系。 90%B系 ALL表达 CD10。 与 AL预后有的抗原 1。 CD34： 强表达者预后差，特别是复发时 CD34增强是最有意义的免疫学表型 改变， CD34常与一些预后差的因素 共存时有相加的作用，与 CD34与 Pgp 或 DR共存的患者，比单表达其中一 个抗原的患者完全缓解率明显降低。 与 AL预后有的抗原 2。 Pgp： 表达者 1、预后较差， 2、常出现耐药现象， 3、常与预后不良的因素如 CD34、 CD56

16、相伴随。 与 AML预后有的抗原 3。髓系抗原 表型越不成熟预后越差， CD33/CD15/CDw65低表达的 AML一 般提示治疗无反应或 /和生存期较短。 与 AL预后有的抗原 4。 My+ALL： CR率低 占 ALL21.6%， My+ALL CR52.6%, My-ALL CR80%. 5。 CD34+ALL： CR率较低， 占 ALL53.6% CD34+ALL CR62%,CD34-ALL CR82.6%, CD34+My+ALL： CR率很低， CR33.3%, CD34-My-ALL83.3%, 6。 Ph+ALL ： CR率低， CR41%,Ph-ALL CR83.3% 与

17、 AML预后有的抗原 6。 Ly+AML： CR率低 占 AML43%， CR46%，合并 CD34+38%， PgP+15%， （其中 CD2+AML7.7%， CD7+AML22%， CD19+13%）， Ly-AML： CR73% 7。 CD7+AML： CR率低， 占 AML22%， 合并 CD34+75%， PgP+55%， （ M1： 42%， M2： 18%， M4： 28%， M5： 9%， M3： 0%） CR35% 与 AML预后有的抗原 8。 CD19+AML： CR率较低， 占 AML13%， 合并 CD34+67%， PgP+33%， （ M2： 16%， M5： 2

18、5%）， CR50%。 9。 CD2+AML： CR率较高， 占 AML18%，合并 CD34+57%， PgP+14%， （ M3： 36%， M5： 13%）， CR71%。 与 AML预后有的抗原 10。 MK+AML： CR率很低， 占 AML12.8%， CR33%， 其中 HAL： 45%， M5： 24%， M2： 14%， M3、 M6不表达， 常伴 CD34+、 PgP+， WBC明显增高。 11。 Ph+AML： CR率低， 占 AML2 10%，见于 M1， M2， M4， CD34高表达，缓解期短。 从分子水平看： bcr断裂点位于 M-bcr，产物为 P210-CML

19、急变而来； bcr断裂点位于 m-bcr，产物为 P190-原发性 AML。 杂合性急性白血病 杂合性急性白血病（ HAL）又称为混合性急性白血病（ MAL）指白血病细胞表达一种系 以上免疫标记的一组白血病，主要依靠免疫分型确诊。发生率占白血病的 1.2%- 1.5%，疗效差，预后不良。 分型 1。双表型：白血病细胞较均一，每个细胞同时表达淋巴系和髓系细胞的免疫学 标志； 2。双克隆型：白血病细胞不均一，同时存在两种恶性克隆性细胞，一般一种表 达淋巴系标志，一种表达髓系细胞标志； 3。双系细胞：与双克隆型相似，但这两部分白血病细胞系来自同一多能干细胞。 并限定只有当两种细胞并存，或 6个月之内

20、相继发生，才属次型； 4。转换型：白血病细胞由一种表型在 6个月以后转为另一种表型，现已不将次 型称为 HAL。 HAL目前多联合应用形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学等手段来确定诊断。 HAL的淋系和髓系标志均大于标准， T、 B淋巴细胞混合一般不作为 HAL看。 系统标志积分达不到诊断标准的称为 Ly+AML或 My+ALL。 诊断标准 多才用积分法。 急性白血病免疫学 系列分型的积分方案 分数 B系 T系 粒单系 巨核系 红系 2 M/cCD22 M/cCD3 MPO CD41 CD42 血型蛋白 A cCD79a M/cTCR / cCd13 CD61 RhD HbF c sIg

21、M/cTCR / FVIII 1 CD19 CD20 CD2 CD5 Mcd13 CD33 CD36 ABH CD36 ABH CD36 CDw65 cCd68 0.5 CD10 CD24 CD7 CD1a CD11a/c CD14 TdT CD4 CD15 CD65 CD117 系统标志积分 苏医 B系 T系 髓系 2分 CD22+、 CD3+、 POX+ 1分 CD19+、 CD2+、 CD13+、 CD33+、 CD10+ CD41+、 CD61+ 0.5分 CD7+ CD14+、 CD15+ 大于或等于 2分为系列阳性 系统标志积分 Catovsky B系 T系 髓系 2分 CyCD2

22、2+ CyCD3+ MPO+ 1分 CD10+ CD19+ CD2+、 CD5+ CyCD13+、 CD33 0.5分 TdT+、 IgH TdT+、 CD7+ CD11+、 CD14+ CD15+, 大于或等于 2分为系列阳性 系统标志积分 EGI B系 T系 髓系 2分 CD79a+ CyCD3+、 抗 MPO+ CyIgM+、 mCD3+、 CyCD22+ 抗 TcR+、 1分 CD19+ CD2+、 CD13+、 CD10+、 CD5+、 CD33+、 CD20+ CD8+、 CDw65+ 0.5分 TdT+、 CD24+、 TdT+、 CD7+、 CD14+、 CD15+、 CD64

23、+、 CD117 髓系大于或等于 2分、淋系大于 1分为系列阳性 系统标志积分 307医院 B系 T系 髓系 2分 CD22+、 链 +、 CD3+、 MPO、 CD13+、 CD20+ TCR+、 CD14+、 CD33+、 CD19+ Auer小体、 PPO 1分 CD10+、 CD24+ CD2+、 CD5+、 CD11b+、 CD11c+、 CD15+、 NSE、 CAE、 SBB、 t（ 8： 21） t（ 15： 17） 0.5分 TdT+、 IgH+ CD7+ AML形态学 大于或等于 2分为系列阳性 系统标志积分 山东医大 B系 T系 髓系 2分 CD22+、 链 +、 CD3

24、+、 MPO、 CD13+、 CD20+ 、 SmIg CD14+、 CD33+、 CD19+ Auer小体、 PPO CD41、 CD42、 CD61 1分 CD10+、 CD24+ CD2+、 CD5+、 CD11b+、 CD11c+、 IgL、 L3形态学 CD15+、 NSE、 CAE、 SBB、 t（ 15： 17）或 PML/RARa t（ 8： 21）或 AML/ETO 形态学 M2b、 M3a、 M6 0.5分 TdT+、 IgH+ TCR+、 CD3+ 其他 AML形态学 两系或三系积分大于 2分为 HAL 系统标志积分 河北二院 B系 T系 髓系 2分 CD22+、 链 +

25、、 CD3+、 MPO、 CD13+、 CD33+、 CD20+ CD21+ CD28、 CD14+、 CD41+、 CD42+、 CD19+ SmIg Auer小体、 PPO、 inv（ 16） L3形态学 t（ 15： 17）、 t（ 8： 21） M4Eo、 M6、 M2b、 M3形 态学、 PML/RARa 1分 CD10+、 CD24+ CD2+、 CD5+、 CD11b+、 CD11c+、 IgL、 PAS PAS、 CD56、 CD15+、 NSE、 CD57 CAE、 SBB、 0.5分 TdT+、 IgH+ TCR+、 CD7+ 其他 AML形态学及细胞化学 两系积分大于 2

26、分为 HAL 其他白血病的系列标志 多毛细胞白血病： CD11c+、 CD19+、 CD22+、 CD25+、 CD38+、 CD20+、 SmIg+、 CD25-，变异型： CD25- 成人 T淋白血病： CD2+、 CD3+、 CD4+、 CD25+， CD8- 幼淋细胞白血病： CD19+、 CD20+、 CD22+、 CD24+、 SmIg+ 浆细胞白血病： DR-、 CD19-、 CD20-、 CD38+、 胞质 Ig+、 SmIg- MDS的免疫表型 1. CD34+7%( 正常人为 2.5%) RA2.8%， RAEB8.5%， RAEBT11.3% CD34+易转为白血病 ,预后差 . 2. CD13+20% (正常人 11.7%) RA1.8%， RAEB24%， RAEBT253% 3.CD33+20.9% (正常人 16.5%) RA18%， RAEB21%， RAEBT23% 4.CD15+30% (正常人 45.5%) 5. CD3+27%,19%,11% (正常人 35.5%)