标本采集、运送标准操作规程.ppt

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1、微生物检查的标本收集原则 1.及时采集微生物标本作病原学检查。 2.采样时严格执行无菌操作，将污染情形降 至最低。 3.在感染的急性期、使用抗生素前或伤口局 部治疗前收集样本。 4.收集真正感染的病灶处的样本，且避免邻 近区域常居菌群的污染。 5.采用专用无菌容器收集标本。 临床微生物标本采集、运送标 准操作程序 微生物检查的标本收集原则 6.选择正确的解剖部位，并以适当的技术、方法 与容器收集足量的样本，尽量不要以棉花拭子收 集样本。 7.采样后立即送检，最好在 2h内。如不能及时送 检，应将标本置于适当的储存环境待送，但存放 一般不能超过 24h。 8.混有正常菌群的标本，不可置肉汤培养。

2、 9.每份标本都应贴上标签并标明必要信息，在检 验申请单上填写足够的有关临床资料。（要标明 病区、病人姓名、住院号、标本来源、采集部位、 采集时间等） 细菌室对微生物标本拒收的标准与 处理方法 拒收标准 处理方式 申请单注明的标本种类与送检标本不符 与原送检部门联系，退回申请单，要求审核并重送符合要求的标本。 申请单上填写项目不全或与标本的标签不符或容 器上未贴标签 与原送检部门联系，要求补充完整申请单或重贴标签或重送标本。 检验单上未注明样本来源和培养项目或仅注明身 体部位者（如胸、腿） 查询申请医师，补足标本信息。 仅有申请单而无标本或无菌容器内无标本 与原送检部门联系，退回申请单，要求重

3、送标本 标本外漏及明显受污染（如开塞） 与原送检部门联系，退回申请单，建议重送标本。 标本收集不符合采集要求 退回申请单，及时通知临床，告知正确收集方法，要求重送标本 样本混入消毒液 或防腐剂 退回申请单，及时通知临床，建议重送标本。 细菌室对微生物标本拒收的标准与 处理方法 送检延误，超过要求送检时限 与送检部门联系，退回申请单，要求重送标本。 标本量过少或已明显干燥 与原送检部门联系，退回申请单，要求重送标本。 申请项目不适合如血液培养同时要求涂片革兰染 色，肛门或直肠标本要求做革兰染色检查淋 球菌。 联系申请医师，建议删去请求革兰染色项目 送检容器不当或破损渗漏 与原送检部门联系，退回申

4、请单，要求重送标本。 穿刺液标本严重凝固，无菌部位标本（如脑脊液、 脓、穿刺液、尿液等）为非无菌管采集。 退回申请单，并注明标本不当，要求重送标本。 一支拭子同时做细菌、支原体、衣原体及真菌培 养 询问医师并补送标本，如不能补送，则按医师要求优先次序处理 同一天同一病人重复送多次同一检测目的的相同 样本（血液标本除外） 一般只检查一次即可，可与临床医生进行协商。 各类标本储存的环境 储存环境 标本来源 4 冰箱 痰、尿液、粪便、活检组织、气管冲洗物、导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等 室温（ 25 ） 脑脊液、泌尿生殖道、眼、耳、鼻、喉、血液培养、血管导管尖、体液 、厌氧菌培养标本 细菌室项目

5、检验周期表 序号 检验项目 标本送 达时限 标本接收 至进行检 验时间 标本接收至出报告 时间 标本检验的周期（标本接收 至报告送达时间） 1 肥达氏反应、肺支抗体、结核抗体、梅毒 筛查 2小时 1小时 24小时 2天 2 梅毒确诊试验 2小时 1小时 24小时 3天 3 普通细菌培养 +药敏（包括尿、痰、脑脊液、分泌物、粪便、咽拭子等） 1小时 1小时 阴性 3天、阳性结果 3天以上 4 血培养 立即 1小时 阳性结果 3天以上，阴性结果 7天 7 淋球菌培养 30分钟 30分钟 2天 8 真菌培养 1小时 2小时 3天后 细菌室项目检验周期表 9 解脲、人型支原体培养及药敏、衣原体培 养

6、1小时 2小时 2天后 11 一般涂片革兰氏染色 1小时 2小时 5小时 当天下午 12 涂片找抗酸杆菌 1小时 2小时 5小时 当天下午 13 新型隐球菌墨汁染色 1小时 1小时 5小时 当天下午 注： 1. 细菌室正常上班时间为周一至周六 全天、周日上午；其他时间（包括中午、 夜班、周日下午、）常规培养请送急诊化 验室。 2各类血清学检测周一至周五做；支原体、 衣原体检查周一至周六上午做，其余时间 标本一律不接收。 3 空气培养、物表监测周六、周日不做， 于周一至周五打电话给细菌室告之数量。 标本采集、运送的标准操作程序 【 目的 】 规范标本采集，保证实验室检测前标本质 量。 【 范围

7、】 微生物实验室所有标本。 【 职责 】 采集、运送微生物标本的临床各科室工作 人员。 【 标准操作程序 】 1.血液、骨髓标本： 1.1采集指征： 对可疑血流感染患者未进行抗菌药物治疗前，应及时进 行血液培养 . 可疑血流感染患者出现以下一项或几项体征时应及时采 集血培养： （ 1）发热（ 38 ）或低温（ 36 ） （ 2）寒战 。 （ 3）白细胞增多（计数大于 10,000 109/L，特别有 “ 核左移 ” 未成熟的或带状的白细胞）。 【 标准操作程序 】 （ 4）粒细胞减少（成熟时我多核白细胞小于 1000 109/L）。 （ 5）血小板减少。 （ 6）皮肤黏膜出血。 （ 7）昏迷

8、. （ 8）多器官衰竭 （ 9）血压降低 （ 10）呼吸加快 （ 11）降钙素原升高（ PCT） 【 标准操作程序 】 在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧外， 很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培养。 肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症的患儿（特别 是 2岁或以下的幼儿）一般出现于门诊，常伴有明 显的发热（ 38.5 ）和白细胞增多（总数 20,000 109/L）。老年菌血症患者，可能不发热 或低体温，如伴有身体不适，肌痛或中风可能是 感染心内膜炎的重要信号。 【 标准操作程序 】 1.2血培养次数和采血时间： 采血应尽量在使用抗菌药之前进行，推荐同时采 集 2 3套（不同部位）血培养，以

9、助于提高阳性 检出率，区别病原菌与污染菌。（一套血培养为 一瓶需氧培养加一瓶厌氧培养。一次静脉采血只 能注入到 1套培养瓶中）。尽可能选用可中和或吸 附抗菌药物的培养基。临床对可疑菌血症患者应 立即采集血培养标本，对间歇性寒战或发热可在 寒战时或体温高峰到来之前 0.5 1h进行采血。 除特殊情况之外（如怀疑细菌性心内膜炎），采 集血培养后的 2至 5天内，无需重复采集血培养。 【 标准操作程序 】 1.3特殊的全身性和局部感染患者采集血培养的建 议： 1.3.1急性心内膜炎：对于可能的心内膜炎患者， 必须在经验使用抗菌药物前 30min之内抽取血培 养，起始采集 3套血培养，如果在 24h内

10、仍报告为 阴性，则继续采集 2套血培养，全部培养一共为 5 套。 1.3.2亚急性心内膜炎：需在 24h之内连续从不同 部位抽取 3套血培养，间隔时间 30-60min。如 24h 内为阴性，则继续采集 2套血培养，全部培养一共 为 5套。 【 标准操作程序 】 1.3.3对于亚急性心内膜炎的评估，皮肤消毒尤为重要，因为其主要的 病原菌为皮肤定植菌如凝固酶阴性葡萄球菌。因此，血培养必须取自 外周静脉而非留置的静脉导管。取自导管的血培养会伴有很高的污染 风险从而导致错误的心内膜炎的结论。建议采用正确的皮肤消毒，从 不同的外周静脉部位分别采集血培养，不能从留置的导管采血。 1.3.4急性脓毒症：

11、10min内从不同的部位采集 2 3套血培养。 1.3.5可疑菌血症但血培养持续阴性，应改变血培养方法，如延长培养 时间或增加特殊培养基，以获得罕见的或苛养的微生物（真菌，结核 菌等）。 1.3.6不明原因发热，如隐性脓肿、伤寒热和波浪热，从不同体位先采 集 2 3 套血标本， 24 36h后估计体温升高之前（通常下午）再采 集 2套以上 【 标准操作程序 】 1.4皮肤消毒程序： 1.4.1推荐使用碘酊、次氯酸和洗必太或碘 伏。 碘酊、次氯酸和洗必太的消毒效果要优于碘伏。 消毒剂需要有足够的时间以保证消毒效果（碘酊作 用 30s；碘伏作用 1.5 2min）。 洗必泰的作用时间和碘酊一样，但

12、是没有过敏反应， 因此不必擦去，但不能用于小于 2个月的婴儿。 【 标准操作程序 】 1.5 静脉穿刺点皮肤消毒程序： 1.5.1 70%酒精消毒皮肤（以采血点为中心，螺旋式 用力有内到外直径 5cm以上），作用 60秒； 1.5.2 用碘伏消毒皮肤（以采血点为中心，螺旋式用 力有内到外直径 5cm以上），作用 1.52min；或用碘酊消 毒皮肤，作用 30秒； 1.5.3 再用 70%酒精脱碘（以采血点为中心，螺旋式 用力有内到外直径 5cm以上）； 1.5.4 静脉穿刺采血。 注：血培养必须特别注意消毒，因许多微生物， 尤其葡萄球菌属通常存在皮肤表面或近表层处，易污染血 培养标本。 【 标

13、准操作程序 】 1.6培养瓶消毒程序： 用 70%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞（不能用含碘消 毒剂），作用 60s。用无菌纱布或无菌棉签清除橡 皮塞表面残余液体，然后注入血液。 1.7采血量： 成年患者推荐的采血量为每套不少于 10ml，每瓶 不少于 5ml。婴幼儿患者推荐的采血量，每瓶不少 于 2ml。 1.8培养瓶 推荐使用商品化的培养基。 【 标准操作程序 】 1.9静脉穿刺和培养瓶接种程序： 穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳胶 手套固定静脉，不可接触刺点。 骨髓标本采取对穿刺一侧准备同外科切口。 用注射器无菌穿刺取血或骨髓后，直接注入血培 养瓶，勿换针头（如果行第二次穿刺，应换针 头

14、），或严格按厂商推荐的方法采血。 血标本接种到血培养瓶后，轻轻颠倒混匀以防血 液凝固，立即送检。 【 标准操作程序 】 1.10血培养瓶标识 标识内容应包括病人姓名、病员号、标本种类、 采集时间。注：病人标识不可覆盖在血液培养瓶 的条形码上。 1.11标本的运送 血培养标本应按要求尽快送往实验室，不能超过 2h。如无法及时送检，血标本需室温（ 20-25度） 保存，切勿冷藏。 1.12 生物安全防护参见 HS-JY-GL-XJ-302生 物防护的安全程序 。 【 标准操作程序 】 2.尿液标本 2.1采集指征： 1)有典型的尿道刺激症状 2)肉眼脓尿或血尿 3)尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐

15、阳性（几个 +号） 4)不明原因的发热，无其他局部症状 5)留置导尿管时间超过 48h的患者出现发热 6)膀胱排空功能受损 7)泌尿系统疾病手术前。 【 标准操作程序 】 2.2采集方法： 标本采集应力争在末使用抗菌药物之前，注意避免消毒剂 污染标本。 清洁中段尿：最好留取早晨清洁中段尿标本，嘱咐患者睡 前少饮水，清晨起床 ,由专业人员指导下采集中段尿标本。 尿标本消毒采集程序： 女性中段尿的采集方法： 用肥皂水完全清洗尿道区域，用湿纱布垫漂洗。 分开阴唇，开始排泄。 排除前段尿后，不停止尿流，采集中段尿。 留置导尿管收集尿液：利用留置采集标本时，应先夹住导尿管 1- 2小时后，以 75 酒精

16、消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射 器穿刺导尿管吸取尿液。注意不能从尿液收集袋中采集尿液。 【 标准操作程序 】 2.3 采集量 5 10ml。 2.4 容器 无菌、带螺旋盖、透明塑料容器。 2.5 标本容器标识 标识内容应包括病人姓名、病员号、标本种类。 2.6 标本运送 标本采集后立即盖紧防止泄漏或容器外部留有残留物。及时送检，室 温保存下不得超过 2小时，否则应置于 4 冰箱保存，保存时间不得 超过 24h。 2.7 注 直接导尿可能导致尿道菌落进入膀胱，增加医源性感染的危险。 8生物安全防护参见 HS-JY-GL-XJ-302生物防护的安全程序 。 【 标准操作程序 】 3. 粪便样

17、本 5.1采集指征： 当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培 养： 粪便涂片镜检白细胞 5/HP 体温 38.5 重症腹泻 血便或便中有脓液 未经抗菌药物治疗的持续性腹泻病人 来自肠道传染疫区的患者 5.2采集时间： 尽可能在发病早期和使用抗菌药物之前采集。在不同的时间采集 2 3 个标本可以提高致病菌的分离率。 【 标准操作程序 】 5.3采集方法： 自然排便采集标本时，取有脓血，黏液，组织碎片部分的粪便 1 3g （花生米大小）。水样粪便则取絮状物，一般取 1 3ml，直接装入运 送培养基中送检。 直肠拭子采集粪便标本：先以肥皂和水，将肛门周围洗净，然后用经 无菌盐水

18、湿润的棉式子插入肛门超越肛门括约肌约 2 3cm，与直肠 黏膜表面接触，轻轻旋转，必须将棉式子置于运送培养基中送检。 5.4 采集量： 成形粪便花生米大小 1 3 g，水样便 1 3 ml。 5.5容器： 粪便标本装于无菌加盖螺旋广口塑料杯；直肠肛拭置于 Cary-Bair运送 培养基。 5.6 标本容器标识 应包括病人姓名、病员号、标本种类、检验项目、采集时间。 【 标准操作程序 】 5.7标本运送： 标本采集后应立即加盖，防止泄漏或容器外部留有残留物。 1小时内 送检，建议床边接种。 高度怀疑霍乱弧菌感染的标本运送必须符合相应的生物安全防护要求。 5.8注： 住院超过 3d或入院诊断不是胃

19、肠炎的患者，应考虑抗菌药物相关腹泻 的检测，一般不做常规粪便培养。 除婴儿和有活动性腹泻症状的患者外不推荐用拭子做常规病原检测。 有腹部痉挛的患者在发病 6h内采集到的血便或水样便的效果最好。 疑似致病性大肠埃希菌，气单胞菌，邻单胞菌，弧菌，小肠结肠炎耶 尔森菌感染的病人，需要培养时，须另外提出申请。 【 标准操作程序 】 4 组织标本 9.1采集指征： 浅表皮肤黏膜感染，深部组织感染等。 9.2采集时间： 在使用抗菌药物之前采集。 9.3采集方法： 根据不同的病变部位，炎症或坏死组织部位，采用相应的方法采集组织标本。 9.4采集量： 1g。 9.5容器： 无菌封闭容器，需要加一些无菌盐水保持

20、湿润。 9.6标本容器标示 : 应包括病人姓名，病员号，标本种类，检验项目，采集时间。 9.7标本运送 : 标本采集后正确盖好，防止泄漏或容器外部留有残留物，常温 1h内送至实验室。 9.8注：送检组织的量尽可能多，不要呈送表面简单摩擦的拭子。组织标本不要添加固定液。 【 标准操作程序 】 微生物标本采集指南 表 1 标本类型 采集 送检时 间 温 度 报告 时 间 重复采 样 限 制 说明 原则 装置和 最 小 量 转运 血培养 培养瓶口的消毒：用 70%酒精擦拭血 培养瓶口橡皮塞，作用 60s。用 无菌棉签清除橡皮塞表面残留 液体，然后注入血液。 静脉穿刺点皮肤消毒： 1. 70%乙醇消毒

21、皮肤（以采血点 为中心，螺旋式用力有内到外 直径 5cm以上），作用 60s； 2. 用碘伏消毒皮肤，作用 1.5 2min;或用碘酊消毒皮肤，作用 30s（以采血点为中心，螺旋式 用力有内到外直径 5cm以上） 3. 再用 70%酒精脱碘（以采血点 为中心，螺旋式用力有内到外 直径 5cm以上） 4. 静脉穿刺采血。 注：血培养须特 别注意消毒，因许多微生物， 尤其葡萄球菌属通常存在皮肤 表面或近表面或表层处，易污 染血培养标本 血培养 专 用 瓶 成人： 5 m l / 瓶 ， 量 大 效 果 更 好 婴儿： 2 m l / 瓶 2h内送 至 实 验 室 ， 室 温 放 置 7/d 3瓶

22、/24h 1.急性脓毒症： 10min 内从不同的部位 采 2 3套 2.急性心内膜炎：对于 可能的心内膜炎 患者，必须在经 验使用抗菌药物 前 30min之内抽 取血培养，起始 采集 3套血培养 ，如果在 24h内 仍报告为阴性， 则继续采集 2套 血培养，全部培 养一共为 5套。 3.亚急性心内膜炎：需 在 24h之内连续 从不同部位抽取 3套血培养，间 隔时间 30-60min 。如 24h内为阴 性，则继续采集 2套血培养，全 部培养一共为 5 套。 注意事项同脑脊液 【 标准操作程序 】 微生物标本采集指南 表 2 标本类型 采集 时间温度 报 告 时 间 重复采 样 限 制 说明

23、原则 装置和 最 小 量 转运 尿： 女性，中段 男性，中段 导尿管 1用肥皂和水完全清洗尿 道区域，用湿纱布 垫漂洗 2分开阴唇，开始排泄 3排除前段后，不停止尿 流，采集中段尿 1用肥皂和水清洗阴茎头 ，用湿纱布垫漂洗 2回缩包皮，开始排泄 3排除前段后，不停止尿 流，采集中段尿 1用肥皂和水完全清洗尿 道区域 2将导管无菌插入膀胱 3流入 15ml尿后，采集尿 入无菌容器内 无菌容 器 30-50ml 无菌容 器 30-50ml 无菌容 器 30-50ml 2h,室温 2h,室温 2h,室温 5/ d 5/ d 5/ d 1次 /天 1次 /天 1次 /天 该程序可能导致尿道菌落进入膀 胱并增加医源性感染的危险 阴道 1.擦除过多的分泌物和排 出液 2.用 2支无菌拭子从阴道穹 隆部黏膜处获取分 泌物 31支需要涂片， 1支拭子 做培养 转运拭 子 2h,室温 对于子宫内装置，将全部装置放入无 菌容器并室温转运，推荐使用 革兰染色方法确定细菌性阴道 炎。细菌培养往往不准确和容 易误导