分子生物学期末考试重点

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1、定义重组DNA技术将不同的DN片段按照人们的设计定向连接起来，然后在特定的受体细胞中与载体同步复制并得到体现，产生影响受体细胞的新的遗传性状。2.说出分子生物学的重要研究内容1.DN重组技术 2.基因体现研究调控 3.生物大分子的构造功能研究4.基因组、功能基因组与生物信息学研究3简述DN的一、二、三级构造一级:种核苷酸的连接及排列顺序，表达了该DNA分子的化学成分二级：条多核苷酸连反向平行盘绕所形成的双螺旋构造三级:DNA双螺旋进一步扭曲盘绕所形成的特定的空间构造4.原核生物DN具有哪些不同于真核生物DNA的特性?NA双螺旋是由2条互相平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成,多核苷酸的方向由核苷酸间的

2、磷酸二酯键的走向决定,一条是5-3，另一条是3-5DN双螺旋中脱氧核糖和磷酸交替连接,排在外侧构成基本骨架,碱基排在内侧两条链上的碱基通过氢键相结合，形成碱基对5.DA双螺旋构造模型是由谁提出的？ 沃森和克里克.DN以何种方式进行复制,如何保证NA复制的精确性？线性DNA的双链复制:将线性复制子转变为环状或者多聚分子,在DNA末端形成发卡式构造，使分子没有游离末端,在某种蛋白质的介入下在真正的末端上启动复制。环状DNA复制：型、滚环型、D型 以亲代DN分子为模板进行半保存复制,复制时严格按照碱基配对原则DNA聚合酶I 非重要聚合酶,可保证DNA合成的精确性NA修复系统:错配修复、切除修复、重组

3、修复、NA直接修复、SOS系统.简述原核生物DNA复制特点只有一种复制起点，复制起始点上可以持续开始新的DN复制,变现为虽只有一种复制单元,但可以有多种复制叉8真核生物DN的复制在哪些水平上受到调控？细胞生活周期水平调控;染色体水平调控；复制子水平调控.细胞通过哪几种修复系统对N损伤进行修复？错配修复，恢复错配；切除修复，切除突变的碱基和核苷酸片段;重组修复，复制后的修复；DA直接修复，修复嘧啶二聚体;SS系统，DNA的修复,导致变异0.什么是转座子?分为哪些种类？是存在于染色体DNA上可自主复制和移动的基本单位。可分为插入序列和复合型转座子11.什么是编码链?什么是模板链？与RA序列相似的那

4、条DN链称为编码链，另一条根据碱基互补配对原则指引m合成DNA链称为模板链12.简述RN的种类及其生物学作用RNA：编码了一种或多种多肽链序列。tRNA：把RNA上的遗传信息变为多肽中的氨基酸信息。rRA：是核糖体中的重要成分。hnRA:由DNA转录生成的原始转录产物。snRA：核小RN,在前体mRNA加工中，参与清除内含子。snoRNA:核仁小RN,重要参与RNA及其他RA的修饰、加工、成熟等过程。scRN:细胞质小NA在蛋白质合成过程起作用。RNA的构造有哪些特点？具有核糖和嘧啶，一般是单链线性分子。重要以单链形式存在于细胞中。碱基重要有A、C、U。可自身折叠形成局部双螺旋。重要是A-U、

5、G-配对，偶而有G-U配对。RNA双螺旋的大小沟差别不大,不适合与蛋白质进行序列特异性互相作用。可折叠形成复杂的三级构造。RNA主链上的未配对区可自由旋转,以及不规则的碱基配对。14.什么是rinow box ?它的保守序列是什么?Pibnw bo是原核生物中中央位于转录起始点上游1b处的TATA区，因此又称为-1区。它的保守序列是TAAAT5简述原核生物和真核生物mRNA的区别原核生物mRN常以多顺反子形式存在。真核生物RA一般以单一顺反子的形式存在原核生物R的转录与翻译一般是偶联的,真核生物转录的m前体则需经转录后加工，成为成熟的NA与蛋白质结合生成信息体后才开始工作原核生物RN半寿期很短

6、一般为几分钟，最长只有数小时,而真核生物mN的半寿期较长构造特点也不同，原核生物mRNA的端无帽子构造,3端只没有或只有较短的poly A构造6.真核与原核生物基因转录有哪些差别？只有一种NA聚合酶参与所有类型的原核生物基因转录,而真核生物有3种以上的RN聚合酶来负责不同类型的基因转录，合成不同类型的、在细胞核内有不用定位的RN转录产物有差别。原核生物的初级转录产物大多数是编码序列，与蛋白质的氨基酸序列呈线性关系；而真核生物的初级转录产物很大,具有内含子序列，成熟的mRNA只占初级转录产物的一小部分原核生物的初级转录产物几乎不需要剪接加工就可直接作为成熟RNA进一步行使翻译模板的功能；真核生物

7、转录产物需要通过剪接、修饰等转录加工成熟过程才干成为成熟mN原核生物细胞中,转录和翻译不仅发生在同一种细胞空间里,并且这两个过程几乎是同步进行的，蛋白质合成往往在RNA刚开始转录时就被引起了，真核生物mRNA的合成和蛋白质的合成则发生在不同的空间和时间范畴内1.大肠杆菌的终结子有哪两大类？请分别简介一下它们的构造特点分为不依赖于因子和依赖于P因子两大类。不依赖P因子终结的特点:终结子位点上游一般存在一种富含GC碱基的二重对称区；终结子位点前面有一段由4-8个A构成的序列,因此转录产物的3端为寡U。依赖P因子的特点:终结位点的DNA序列缺少共性，并且不能形成强的发卡构造,因而不能诱导转录的自发终

8、结18.什么是RNA编辑，其生物学意义是什么?是指某些R特别是mRNA前体通过插入、删除或取代某些核苷酸残基等操作，导致DNA所编码的遗传信息的变化，使得通过RN编辑的mRN序列发生不同于模板DNA的变化。生物学意义: 校正作用，基因突变途中丢失的遗传信息得以恢复调控翻译,构建或清除起始密码子和终结密码子 扩大遗传信息，使基因或得新的构造核功能,有助于生物进化9.核酶具有哪些构造特点？根据其催化功能的不同可分为哪两大类?其生物学意义是什么？具有自我剪切能力的RNA大多数都能形成锤头构造,该二级构造由3个茎构成,茎区的局部双链构造包围着一种由113个保守核苷酸构成的催化中心。核酶分为剪切型和剪接

9、型两种。意义:继反转录现象之后对中心法则的一种重要修正,阐明RNA既是遗传物又是酶;为生命来源的研究提供了新思路2.什么是克隆载体?什么是体现载体?克隆载体：为使插入的外源N序列被扩增而特意设计的载体体现载体：为使插入的外源DNA序列可转录翻译成多肽链而特意设计的载体（体现载体和克隆载体的区别:1.克隆载体：一般仅具有有一种松弛型复制子、一种多克隆位点和一种筛选标记,以便被克隆和筛选的NA序列可以大量增殖。.而体现载体除了上述因子外,还需要有强的启动子、核糖体结合位点、转录起始信号、转录终结信号、翻译起始密码子、翻译终结密码子等一系列调控序列。）1试述PCR扩增的原理和环节原理：N在高温时发生

10、变性链解，当温度减少后又可以复性成为双链。通过温度变化控制NA的变性和复性,并设计引物做启动子，加入DN酶、NTP就可以完毕特定基因的体外修复 环节：.变性,双链打开 .退火,引物与模板相结合.链的延伸,D合成22.简述代谢产物对基因体现调控的两种方式转录水平上的调控转录后水平上的调控(mRN加工成熟水平上的调控、翻译水平上的调控）23.什么是操纵子学说?有关原核生物基因构造及其体现调控的学说，由法国Jacob和Mood提出,核心是使基因从体现克制状态中解脱出来,是从负调节的角度来考虑基因体现调控的2.简述乳糖操纵子的调控模型A,乳糖操纵子的构成:含Z、A三个基因构造,分别编码半乳糖苷酶、透酶

11、和半乳糖苷乙酰转移酶，此外尚有一种操纵序列O、启动子P、调节基因I.阻遏蛋白的负性调节：无乳糖时,阻遏蛋白位于O处,乳糖操纵子处在阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖时,诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列，乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶. P的正性调节D.协调调节:乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CP的正调控两种机制互相协调、互相制约25.什么是葡萄糖效应？有葡萄糖时,虽然有她的糖,与其相相应的操纵子也不会启动，不会产生出代谢这些糖的酶来,这种现象称为葡萄糖效应26什么是弱化作用?当培养基中色氨酸浓度很低时：负载有色氨酸的tA也就少，这样翻译通过两个相邻色氨酸密码

12、子的速度就很慢，当4区被转录完毕时，核糖体才进行到区，这时的前导区构造是-3配对,不形成-4配对的终结构造,因此转录可以继续进行，直到trp操纵子中构造基因所有转录培养基中色氨酸浓度较高时：核糖体可以顺利通过两个相邻色氨酸密码子，在4区被转录之前达到2区，使3区不能配对，3-4区自由配对形成基环终结子，转录被终结,r操纵子被关闭27.简述抗终结子的调控机理在N聚合酶达到终结子之前,与RN聚合酶结合，由于在终结子上游存在抗终结子信号序列,只有与抗终结子因子相结合的RN聚合酶才干顺利通过具有茎环构造的终结子，使转录继续进行28.简述反义RN的调控机理RNA调节是原核基因体现转录后调节的另一种重要机

13、制。细菌相应环境压力的变化,会产生某些非编码小RA分子，能与RNA中的特定序列配对并变化其构象,导致翻译过程的启动或关闭等作用。29.简述原核基因转录后调控的不同方式RNA自身构造元件对翻译的调节；mRN稳定性对转录水平的影响;调节蛋白的调控作用；反义RNA的调节作用;稀有密码子对翻译的影响；重叠基因对翻译的影响;翻译的阻遏;魔斑核苷酸水平对翻译的影响0.基因家族的分类及其重要体现调控模式简朴多基因家族:真核生物一方面是pe NA通过特异性甲基化,然后经RN酶的切割便可产生成熟NA分子。原核生物还要通过核酸酶降解才干产生成熟rRNA分子 复杂多基因家族：一般由几种有关基因家族构成，基因家族之间

14、由间隔序列隔开，并作为独立的转录单位，也许存在具有不同专一性的组蛋白亚类和发育调控机制 发育调控的复杂多基因家族:每个基因家族中，基因排列顺序就是她们在发育阶段的体现顺序。31.何为外显子、内含子及其构造特点和可变调控？大多数真核基因都是由蛋白质编码序列和非蛋白质编码序列构成，编码序列称为外显子,非编码序列称为内含子。构造特点:一种机构基因编码某一蛋白质不同区域的各个外显子并不持续排列在一起，而是常常被长度不等的内含子所隔离，形成镶嵌排列的断裂方式。可变调控:不少真核基因的原始转录产物可通过不同剪接方式,产生不同的mA,并翻译成不同的蛋白质。此外，某些核基因由于转录是选择了不同的启动子或者在转

15、录产物上选择了不同的PolyA位点而使转录产物产生不同的二级构造，因而影响剪接过程，最后产生不同的mRN分子。3.DNA甲基化对基因体现的调控机制大量研究表白,DNA甲基化能关闭某些基因体现的活性,去甲基化则诱导了基因的重新活化和体现。三种调控机制：N甲基化导致了某些区域DNA构象变化,从而影响了蛋白质和DNA的互相作用，克制了转录因子与启动区DA的结合效率 增进了阻遏蛋白的阻遏作用 DN的甲基化还提高了该位点的突变频率33.简述真核生物转录元件构成及其分类启动子、转录模板、RNA聚合酶基本转录所需蛋白质因子、RA聚合酶、增强子、反式作用因子3.简述增强子的作用机理增强子是指能使与它连锁的基因

16、转录频率明显增长的DN序列。有3种作用机制 影响模版附近的NA双螺旋构造，导致DNA双螺旋弯折或在反式因子的参与下，以蛋白质之间的互相作用为媒介形成增强子鱼启动子之间“成环”连接,活化基因转录。将模版固定在细胞核内特定位置,如连接在核基质上,有助于NA拓扑异构酶变化DN双螺旋构造的张力,增进RNA聚合酶在DNA链上的结合和滑动。增强子区可以作为反式作用因子或RA聚合酶进入染色质构造的“入口”35简述反式作用因子的构造特点及其对基因体现的调控反式作用因子是能直接或间接的辨认或结合在各类顺式作用元件核心序列上，参与调控靶基因转录效率的蛋白质。这些因子有两种独立的活性：特意地与RNA结合位点相结合,

17、然后激活转录。两种活性可以独立分派给特定的蛋白质构造域，分别称作DNA结合构造域和激活构造域,两者是相分离的,她们在蛋白质的不同区域。3举例阐明蛋白质磷酸化如何影响基因体现蛋白质磷酸化重要影响细胞信号转导进而影响基因体现。举例：在糖原代谢过程中,激素与其受体在肌细胞外表面相结合,诱发细胞质AMP的合成并活化A激酶，后者再将活化磷酸基团传递给无活性的磷酸化酶激酶，活化糖原磷酸化酶,最后将糖原磷酸化，进入糖酵解途径并提供ATP。(cMP介导的蛋白质磷酸化过程)37.简述组蛋白乙酰化和去乙酰化影响基因转录的机制组蛋白乙酰转移酶和去乙酰化酶通过是组蛋白乙酰化和去乙酰化对基因体现产生影响。组蛋白N端尾部

18、上赖氨酸残基的乙酰化中和了尾部的正电荷，减少了它与组蛋白的亲和性，导致核小体构象发生有助于转录调节蛋白与染色质结合的变化,从而提高了基因转录的活性。核心组蛋白2，H2B,H3,H4通过组蛋白尾部选择性乙酰化影响核小体的浓缩水平和可接近性。由于乙酰化的组蛋白克制了核小体的浓缩，使转录因子更容易与基因组的这一部分相接触,有助于提高基因的转录活性。3.什么是原癌基因，什么是抑癌基因？原癌基因：癌基因编码的蛋白可以增进细胞生长的失控和细胞向恶性状态转化的基因,没有激活之前， 称之为原癌基因抑癌基因:是一种克制细胞生长和肿瘤形成的基因。差别： 在功能上，抑癌基因起负调控作用,癌基因起正调控作用；在遗传方式上,原癌基因是显性的,抑癌基因是隐性的，在突变发生的细胞类型上,抑癌基因突变可以发生在体细胞中,也也许发生在生殖细胞中并通过生殖细胞得到遗传。原癌基因突变只发生在体细胞中。39.什么是单基因病、多基因病、获得性基因病？单基因病：重要病因是某个基因位点上产生了缺陷等位基因，如:地中海贫血、白化病。多基因病:波及多种基因及调控这些基因体现的环境因子之间的互相作用,如：高血压、糖尿病。获得性基因病:重要是由病源微生物感染引起的传染病,如肝炎、艾滋病。