检验科资料

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1、细心整理检验科在医院感染管理工作中职责一、负责感染病人相关化验，对送检样本刚好进展病原微生物造就、分别、鉴定、药敏试验及特殊病原体耐药性监测。二、定期总结、分析病原微生物分布及其药敏试验结果，向临床医师和医院感染管理科反应，并向全院公布。三、负责医院感染常规微生物学监测，踊跃协作感染管理专职人员工作，反应和上报有关信息，严格执行无菌操作技术和消毒隔离制度。四、负责医院感染限制培训中相关微生物学学问培训。五、严格执行医院感染监限制度，遵照国家法规要求做好生物平安工作。六、发生医院感染流行或爆发时，担当相关检测工作。七、负责医院感染科研工作中试验室检测工作。检验科医院感染微生物学监测制度为了合理标

2、准我院消毒灭菌效果、环境卫生学监测工作，提高监测结果精确性、真实性、牢靠性，特作如下规定及要求：一、按规定开展环境微生物学监测工程，严格遵守规定监测时限，真实标准采样，完整填写监测报告单，每月25号前报感染管理科，科室监测登记备案保存3年。二、严格执行无菌技术操作原那么，操作前衣帽干净，戴口罩，洗手，必要时戴手套。三、严格执行医疗机构消毒技术标准，造就基制作间运用前严格进展环境消毒，空气紫外线照射消毒时间不少于60分钟，开灯5-7分钟起先计时，物表消毒配置500mg/L含氯消毒液进展擦拭消毒，拖布、抹布、消毒桶固定运用，标记清楚，不准混用。四、严格执行手卫生标准，制作造就基和采样操作前严格洗手

3、和手消毒，造就基制作间配备手消毒液，手消开瓶运用期限为1个月。五、细菌室每月对采样试管、造就皿做无菌试验，按要求做到造就时限精确、中和剂添加正确、报告结果标准。六、监测中对不合格工程要谨慎进展缘由分析，解除制作和操作中污染可能性，并对不合格工程照实上报。七、重点科室、重点部位每月进展监测，其它科室不定期进展抽查，如有感染可能性随时协作医院进展监测调查。八、各科室部门监测工程、监测时限、采样方法、评价合格标准，详见附件。附件：A.4 手和皮肤消毒效果监测手消毒效果监测应遵循WS/T 313要求 皮肤消毒效果监测 采样时间遵照产品运用说明规定作用时间，到达消毒效果后刚好采样。 采样方法用5cmx5

4、cm灭菌规格板，放在被检皮肤处，用浸有含相应中和剂无菌洗脱液棉拭子1支，在规格板内横竖来回匀整涂擦各5次，并随之转动棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml含相应中和剂无菌洗脱液试管内，刚好送检，不规那么皮肤可用棉拭子干脆涂擦采样。 检测方法将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，用无菌吸管吸取1.0mL待检样品按种于灭菌平皿，每一样本接种2个平皿，平皿内参与已溶化4548养分琼脂15ml18 ml ,边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置361温箱造就48h，计数菌落数。细菌菌落总数计算方法见式A.1：细菌菌落总数cfu/cm2=平板上菌落数x稀释倍数 采样面积cm2A.1 结果判定皮肤消

5、毒效果判定标准遵循WS/T 313中外科手消毒卫生标准。 留意事项采样皮肤外表缺乏5cmx5cm，可用相应面积规格板采样。A.5 物体外表消毒效果监测 采样时间在消毒处理后或疑心及医院感染爆发有关时进展采样。 采样方法用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体外表，用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液PBS或生理盐水采样液棉拭子1支，在规格板内横竖来回各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，被采外表100cm2，取全部外表；被采面积100cm2，取100cm2。剪去手接触局部，将棉拭子放入装有10ml无菌检验用洗脱液试管中送检。门把手等小型物体那么接受棉拭子干脆涂抹物体外表采样。

6、采样物体外表有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。 检测方法充分震荡采样管后，取不同稀释倍数洗脱液1.0ml接种平皿，将冷至4045熔化养分琼脂造就基每皿倾注15ml20ml，361恒温箱造就48h,计数菌落数。疑心及医院感染爆发有关时，进展目标微生物检测。 结果计算 规那么物体外表物体外表菌落总数计算方法见式A.2：物体外表菌落总数cfu/ cm2=平均每皿菌落数X洗脱液稀释倍数 采样面积cm2) A.2 小型物体外表结果计算，用cfu/件表示。 结果判定 干净手术部、其他干净场所，非干净手术部室、非干净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等

7、；物体外表细菌菌落总数5cfu/ cm2。 儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心室、急诊室、化验室、各类平凡病室、感染疾病科门诊及其病房等；物体外表细菌菌落总数10cfu/ cm2。A.6 空气消毒效果监测 采样时间接受干净技术净化空气房间在干净系统自净后及从事医疗活动前采样；未接受干净技术净化空气房间在消毒或规定通风换气后及从事医疗活动前采样；或疑心及医院感染爆发有关时采样。 监测方法干净手术部室及其他干净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB 50333要求进展监测。浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证空气采样器。监测

8、时将采样器置于室内中心0.8m1.5m高度，按采样器运用说明书操作，每次采样时间不应超过30min。房间面积10m2者，每增加10m2增设一个采样点。 未接受干净技术净化空气房间接受沉降法：室内面积30m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积30 m2，设四角及中心五点，四角布点位置应距墙壁1m处。将平凡养分琼脂平皿90mm放置各采样点，采样高度为距地面0.8m1.5m；采样时将平皿盖翻开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖刚好送检。 将送检平皿置361恒温箱造就48h,计数菌落数。假设疑心及医院感染爆发有关时，进展目标微生物检测。 结果计算 沉降法按平均每皿菌落数报

9、告：cfu/皿暴露时间 浮游菌法计算公式见式A.3：空气中菌落总数cfu/m3=采样器各平皿菌落数之和cfu) 采样速率L/minx采样时间min 1000 A.3A结果判定A干净手术部室和其他干净场所，空气中细菌菌落总数要求应遵循3A非干净手术部室、非干净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中细菌菌落总数cfu直径平皿。A儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心室、急诊室、化验室、各类平凡病室、感染疾病科门诊及其病房空气中细菌菌落总数4cfu/(5min直径9cm平皿)。A5 留

10、意事项采样前，关闭门、窗，在无人走动状况下，静止10min后采样。A7 消毒液监测A71 常用消毒液有效成分含量测定库存消毒剂有效成分含量依照产品企业标准进展检测；运用中消毒液有效浓度测定可用上述方法，也可运用经国家卫生行政部门批准消毒剂浓度纸卡进展监测。A72 运用中消毒液染菌量测定A721 .1 用无菌吸管按无菌操作方法吸取1.0mL被检消毒液，参与9mL中和剂中混匀。醇类及酚类消毒剂用平凡养分肉汤中和，含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒剂用含0.1%硫代硫酸钠中和剂，洗必泰、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温80和0.3%卵磷脂中和剂，醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂，含有外表活性剂各种

11、复方消毒剂可在中和剂中参与吐温80至3%；也可运用该消毒剂消毒效果检测中和剂鉴定试验确定中和剂。A7 用无菌吸管吸取必需稀释比例中和后混合液1.0mL接种平皿，将冷至4045熔化养分琼脂造就基每皿倾注15mL20 mL,361恒温箱造就72h,计数菌落数；疑心及医院感染爆发有关时，进展目标微生物检测。消毒液染菌量计算见式A.4：消毒液染菌量cfu/ml=平均每皿菌落数10稀释倍数A.4A722 结果判定运用中灭菌用消毒液：无菌生长；运用中皮肤黏膜消毒液染菌量：10cfu/ml，其他运用中消毒液染菌量100cfu/ml。A73 留意事项采样后4h内检测。A8 清洁用品消毒效果监测A81 采样时间

12、 消毒后、运用前进展采样。A82 采样方法 布巾、地巾等物品可用无菌方法剪取1cm3cm，干脆投入5ml含相应中和剂无菌生理盐水中，刚好送检。A83 检测方法 将采样管在混匀器上振荡20s或用力振打80次，取采样液检测致病菌。A84 结果判定 未检出致病菌为消毒合格。A9 致病菌检测当疑心被某致病菌污染时，或疑心医院感染及某致病菌有关时，致病菌检测依据污染状况进展相应指标菌检测。检测方法参考相关标准。附 录 B资料性附录消毒试验用试剂和造就基配方B1 磷酸盐缓冲液PBS. 0.03mol/L. pH7.2无水磷酸氢二钠 2.83g 磷酸二氢钾 1.36g蒸馏水加至 1000mL将各成分参与到1

13、000mL蒸馏水中，待完全溶解后，调pH至7.27.4，于121压力蒸气灭菌20min备用。B2 无菌检验用洗脱液吐温80 1g蛋白胨 10g氯化钠 8.5g蒸馏水 1000mL将各成分参与到1000mL0.03mol/L PBS液中，加热溶解后调pH至7.27.4，及121压力蒸汽灭菌20min备用。B3 养分琼脂造就基蛋白胨 10g牛肉膏 5g氯化钠 5g琼脂 15g蒸馏水 1000mL除琼脂外其他成分溶解于蒸馏水中，调pH至7.27.4，参与琼脂，加热溶解，分装，于121压力蒸气灭菌20min备用。B4 溴甲酚紫蛋白胨造就液蛋白胨 10g葡萄糖 5g可溶性淀粉 1g溴甲酚紫乙醇溶液 10

14、mL蒸馏水 1000mL将蛋白胨、葡萄糖溶解于蒸馏水中，调pH至7.07.2，参与1%溴甲酚紫酒精溶液，摇匀后，分装，每管5mL，于115压力蒸汽灭菌30min。置4冰箱备用。B.5 养分肉汤造就基蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 氯化钠 5g 蒸馏水 1000ml将各成分溶解于蒸馏水中，调 pH 至 7.27.4，分装，于 121 压力蒸汽灭菌 20min备用。B.6 嗜热脂肪杆菌复原琼脂造就基 蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 可溶性淀粉 1g葡萄糖 1g 琼脂 20g 蒸馏水 1000ml以上各成分蒸馏水溶解，调pH 至7.07.2，装瓶，经115压力蒸汽灭菌30min后运用。B.7 0.5%

15、葡萄糖肉汤造就基蛋白胨 10g氯化钠 5g葡萄糖 5g肉浸液 1000ml取蛋白胨及氯化钠参与肉浸液内，微温溶解后，调 pH 至弱碱性，煮沸、参与葡萄糖溶解后，摇匀，滤清，调 pH 至7.07.4，分装，于 115 压力蒸汽灭菌 30min。B.8 稀释液：胰蛋白胨生理盐水溶液TPS。胰蛋白胨 1.0g氯化钠 8.5g先用900ml以上蒸馏水溶解，并调整pH值在7.00.220，最终用蒸馏水加至1000ml，分装后，经121压力蒸汽灭菌后运用。B.9 需氧-厌氧菌琼脂造就基 酪胨(胰酶水解) 15g牛肉膏 3g葡萄糖 5g氯化钠 2.5gL-胱氨酸 0.5g硫乙醇酸钠 0.5g酵母浸出粉 5g

16、新颖配制 0.1% 刃天青溶液 1.0ml(或新配制 0.2% 亚甲蓝溶液 0.5ml琼 脂 0.5g0.7g蒸馏水 1000ml除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成份参与蒸馏水中，微温溶解后，调 pH 至弱碱性，煮沸、滤清，参与葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调 pH 至 6.97.3，分装于 115压力蒸汽灭菌 30min。B.10 无菌试验用真菌造就基 磷酸二氢钾(KH2PO4) 1g 硫酸镁(MgSO47H2O) 0.5g 蛋白胨 5g 葡萄糖 10g 蒸馏水 1000ml除葡萄糖外，上述各成分参与蒸馏水内，微温溶解后，调整pH 约6.8，煮沸，加葡萄糖溶解后，摇匀滤清，调pH 使灭菌后为6.4

17、0.2，分装，115压力蒸汽灭菌 20min备用。B.11 血琼脂造就基养分琼脂 100 ml脱纤维羊血(或兔血) 10 ml将养分琼脂加热熔化待冷至 50 左右，以无菌操作将 10ml 脱纤维血参与后摇匀，倒平皿置冰箱备用。B.12 留意事项配制造就基留意事项如下：a) 配制造就基容器不宜用铜锅或铁锅，以免影响细菌生长；b) 造就基用试管口和锥形烧瓶口应用平凡棉花制成棉塞，再用牛皮纸包好；c) 试剂及造就基配制好后应置清洁处保存，常温下不超过 1 个月。附件：1空气消毒效果监测采样时间：在消毒处理后、操作前进展采样。(1) 采样方法1)布点方法；室内面积30cm2，设内、中、外对角线3点，内

18、、外点布点部位距墙壁IM处；室内面积30cm2，设4角及中心5点，4角布点部位距墙壁lm处。2)平板暴露法：将平凡养分琼脂平板(直径为9cm)放在室内各采样点处，采样高度为距地面0.8m1.5m，采样时将平板盖翻开，扣放于平板旁，暴露5min，盖好立刻送检。3) 检测方法：将送检平板置37温箱造就48h，计数菌落数，假设疑心及医院感染爆发有关时，进展目标微生物检测。(2)结果判定类区域：细菌总数10cfu/m3，未检出致病菌为消毒合格；类区域：细菌总数200 cfu/m3，未检出致病菌为消毒合格；类区域：细菌总数500 cfu/m3，未检出致病菌为消毒合格。留意事项：采样前，关闭门、窗，在无人

19、走动状况下，静止10分钟后进展采样。2物品和环境外表消毒效果监测采样时间：在消毒处理后进展采样。(1)采样方法：用5cm5cmd 标准灭菌规格板，放在被检问题外表，采样面积100cm2，连续采样4个，用浸有含有相应中和剂无菌洗脱液棉拭子1支，在规格板内横竖来回匀整涂擦各5次，并随之转棉拭子，剪去手接触部位后，将棉拭子投入10ml含有相应中和剂无菌洗脱液试管内，立刻送检。门把手等不规那么物体外表用棉拭子干脆涂擦采样。(2)结果判定、类区域：细菌总数5CFU/cm3并未检出致病菌为消毒合格。类区域：细菌总数10CFU/cm3并未检出致病菌为消毒合格。类区域：细菌总数15CFU/cm3并未检出致病菌

20、为消毒合格。母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房物体外表不得检出沙门氏3手消毒效果监测采样时间:在消毒后立刻采样。1采样方法1手采样：被检人五指并拢，用浸有含有相应中和剂无菌洗脱液棉拭子在双手指屈面从指根到指端来回涂擦2次一只手涂擦面积约30 cm3，并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入10ml含有相应中和剂无菌洗脱液试管内，立刻送检。2结果判定、类区域工作人员：细菌总数5CFU/cm3，并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单孢菌为消毒合格。类区域工作人员：细菌总数10CFU/cm3并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。类区域工作人员：细菌总数15CFU

21、/cm3 并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格。母婴同室、婴儿室、新生儿室及儿科病房工作人员手上，不得检出沙门菌、大肠杆菌、溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌为消毒合格。4 压力蒸汽灭菌效果监测方法1化学监测法1)化学指示卡(管)监测方法：将既能指示温度，又能指示温度持续时间化学指示管(卡)放人每一待灭菌物品包中心，经一个灭菌周期后，取出指示管(卡)，依据其颜色及性状变更判定是否到达灭菌条件。2)化学指示胶带监测法：将化学指示胶带粘贴于每一待灭菌物品包外，经一个灭菌周期后，视察其颜色变更，以指示是否经过灭菌处理。3)结果判定：检测时，所放置指示管(卡)性状或颜色均变至规定条件，可认为该包灭菌合

22、格。4)留意事项：监测所用化学指示剂须经卫生部批准，并在有效期内运用。(2)生物监测法1)指示菌株：指示菌株为嗜热脂肪杆菌芽胞(ATCC7953或SSIK31株)，菌片含菌量为5.0X105-5.0x106cfu/片，在1210.5条件下，D值为13-1.9min，杀灭时间(KT值)19min，存活时间(ST值)为3.9min。2)造就基：试验用造就基为溴甲酚紫蛋白胨水造就基。3)检测方法：将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装人灭菌小纸袋内，置于标准试验包中心部位。灭菌柜室内,排气口上方放置一个标准试验包(由3件平纹长袖手术衣，4块小手术巾，2块中手术巾，1块大手术中，3O块10cm x 10cm

23、8层纱布敷料包袱成25cm X 30cm x 30cm大小)。手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒(22cm x 13cm x 6cm)代替标准试验包，盒内盛满中试管，指示菌片放于中心部位两只灭菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包封)，将贮物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准试验包或通气贮物盒中指示菌片，投人溴甲酚紫蛋白胨水造就基中，经56造就7天(自含式生物指示物按说明书执行)，视察造就基颜色变更。检测时设阴性参照和阳性参照。(4)结果判定：每个指示菌片接种溴甲酚紫蛋白胨水造就基都不变色，判定为灭菌合格；指示菌片之一接种溴甲酚紫蛋白胨水造就基，由紫色变为黄色时，那么

24、灭菌不合格。(5)留意事项：监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内运用。5 紫外线消毒效果监测(1 )紫外线灯管辐照度值测定1)检测方法：开启紫外线灯5min后，将测定波长为254nm紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距离1m中心处，待仪表稳定后，所示数据即为该紫外线灯管辐照度值。2)结果判定：平凡30w。直管型紫外线灯，新灯辐照强度90Uw/cm2为合格；运用中紫外线灯辐照强度70Uw/cm2对为合格；30W高强度紫外线新灯辐照强度180 Uw/cm2行为合格。3)留意事项：测定时电压220v土5v，温度20一25，相对湿度60%，紫外线辐照计必需在计量部门检定有效期内运用。6 医疗器械灭菌效果监测(1)采样时间：在灭菌处理后，存放有效期内采样。常规监测1)检测方法：用无菌方法将拟检缝合针、针头、手术刀片等小件医疗器械各5支，分别投人5ml无茵洗脱液中；注射器那么取5副在5ml无菌肉汤中分别抽吸5次；手术钳、镊子等大医疗器械在无菌操作下取2份以上用沾有无菌洗脱液棉拭子反复涂擦采样，并将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中。将采样管用力振打80次，用无菌吸管吸取lml待检样品放于灭菌平皿内，加人已熔化45-48养分琼脂15-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂凝固，置37温箱造就48h，计数菌落数。