动物细胞工程

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1、动物细胞工程考纲要求】1.动物的细胞培养与体细胞克隆(I)。2.细胞融合与单克隆抗体(II)。前置作业一、动物细胞工程1. 动物细胞培妾 (1)过程幌细处理胞拖胞株1细刷系T13停物传物m岫 10代刖产气堡代h培养一H(2) 条件：的环境;7.27.4)； 环境：95%的(3) 应用：生产生物制品、培养 究等。细胞贴壁.出观接融抑制帝赤(1航以内)|培葬一营养一一合成培养基；温度和pH(36.50.5C, pH为_和5%的动物、检测的毒性和进行医学研2 .体细胞核移植(克隆)(1)过程：(以克隆牛为例)帅咐虹.中勤体与欢休咂皿哼既旦顷曲传物质基 体于耳本即同)去梭非&细胞*电嶂 邮细广 拒核(

2、2) 存在的问题：成功率低；克隆动物的健康问题；克隆动物食品的安全性问题。3. 动物细胞融合(1) 原理：细胞膜的。(2) 方法：聚乙二醇、的病毒、电激等。(3) 意义：突破有性杂交方法的局限，彳杂交成为可能；细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育的研究：的制备。4 .单克隆抗体(1) 制备R淋巴s休外、顾J膂醴茹俪晦森/麟零魅隆骨酚痛/细胞筋逸胞群培葬体内/取抗体郭胞培罪(2) 特点：化学性质专一、，并可以大量制备。(3) 应用：作为诊断试剂：准确识别各种 物质并特异性结合。用于治疗疾病和运载药物：制。探究点一动物细胞培养与核移植技术1 .简述动物细胞培养需要满足的条件？2.完成下表填空，

3、理解动物细胞培养与动物体细胞核移植过程与应用。项目动物细胞培养动物体细胞核移植原理细胞增殖动物细胞的细胞核具有全能性过程动物胚胎或幼龄动物的组织或器官*细胞悬浮液一培养一培养一细胞群体瓶其彳1忧性状_知Hid Iff产一-加nJj个体的邮细晌细胞培养体地胞 收葬卵巢，采体外=卵母细生卵母细胞培养分翳顿广胞去核一细胞融合一构建一移植到代孕母体内一得到克隆动物应用利用动物细胞培养技术可生产、干扰 素、单克隆抗体等。还可以用于检测 加速家畜 改良进程，促进优良畜群 繁育；保护物种，增加存活数量；物质，判断某种物质的毒性，以及临床医 学转基因克隆动物作为生物反应器，生产 珍贵的医用蛋白；作为移植的供

4、体；用于组织器官的移植等思维拓展1. 在动物细胞培养的过程中有贴壁生长和接触抑制现象。2. 动物细胞培养过程中两次用到胰蛋白酶，第一次用胰蛋白酶处理剪碎的组织使之分 散成单个细胞，第二次使贴壁细胞从瓶壁上脱落下来。3. 细胞核移植选用去核卵（母）细胞的原因：虽然细胞核内具有发展成为一个完整个体 所需的全套基因，但动物体细胞分化程度较高，因此很难表达全能性。而卵（母）细胞比较大， 容易操作；卵（母）细胞的细胞质多，营养丰富，含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条 件。将体细胞核移植入去核卵（母）细胞内，既保证了重组细胞的完整性，又能刺激体细胞核 表达其全能性，发育成为一个新的个体。4. 与克隆动

5、物有关的亲本的遗传关系：动物体细胞核移植产生的新个体的亲本有三个： 体细胞核供体、卵（母）细胞细胞质供体、代孕母体。新个体细胞核基因型与体细胞核供体完 全一样，因此新个体性状与体细胞核供体基本相同。卵（母）细胞细胞质中也有少量的DNA， 新个体性状与卵（母）细胞细胞质供体有一些地方相同。代孕母体没有为新个体提供遗传物 质，新个体性状与代孕母体基本没有联系。探究点二动物细胞的融合与单克隆抗体的制备完成下列填空：1. 原理：细胞膜的。2. 诱导融合的因素：聚乙二醇（PEG）、电激等。3. 意义：最重要的用途是制备。4. 单克隆抗体的制备过程。瑚的小鼠【探究示例3】B淋巳切辑S骨flfi炯割胞,筑的

6、一第1次蟠瞬都透出圳胞一物点:毗能迅速.又细胸瞄邮生LJ尊选第2/筋逢，在杂交痼蛔It中旅选出 的杂芯摘堀服二三从年葬戒中鼠yiC卜m腹本中提坝单克卷抑体一主委优点、,并可大埴制彘近年来，我国死于狂犬病的人数有上升之势。狂犬病病毒的核酸是RNA，机体感染病毒后产生的特异性lgG抗体，能消除狂犬病病毒，这是接触狂犬病病毒后及时注 射疫苗和特异性抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗，已取得良好效果。请根据上述材料，回答下列问题：（1）狂犬病病毒的毒力可发生变异。从自然感染动物体内分离的病毒株称为野毒株，其致病力强。将野毒株在家兔脑内连续传50代后，变成固定毒株。固定毒株对人及动物致病

7、 力弱，不引起狂犬病。巴斯德首先利用固定毒株制成减毒活疫苗，预防狂犬病。制成减毒活 疫苗需要用 培养。（2）特异性抗体获取的方法可用单克隆抗体制备法。在制备单克隆抗体的过程中，应用 的 动 物 细 胞 工 程 的 技 术 是（3）下图是单克隆抗体制备过程示意图，请据图回答:挫射抗原体外命罪旗4 1小鼠细胞匚二 、髓隆叫_1姒的胞凯胞幌YW骨憧袖胞小鼠律内培菲 图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是细胞，该细胞能够产生。从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射特定的物质 。 图中B过程是细胞融合，该过程需要用灭活的、聚乙二醇或电激等诱导。 特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射

8、某种抗原，使动物产生抗体， 然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比，单克隆抗体具有等优 点。(4) 动物细胞体外培养需要满足的环境条件有单克 隆抗体技术还有 哪 些用 途？网络构建细胞工我动物细胞二程细胞产物的 工厂化生产课后练习1.生物选修3:现代生物科技专题(2016全国卷2 )下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。回答下列问题:(1)图中A表示正常细胞核，染色体数为2n，则其性染色体的组成可为过程表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核 时常采用 的方法。代表的过程。（2）经过多次传代后，供体细胞中的稳定性会降低。因此，选材

9、时必须关注传代次数。若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是。与克隆羊多莉（利广培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了（2014年全国1卷）2.生物选修3：现代生物科技专题（15分）某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X、Y和Z）,每只小鼠免疫5次，每 次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数）， 结果如下图所示。皂巅夸S盲一若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条），并将该细 胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙 醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检

10、测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题：（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经 次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免 疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的 小鼠，理由是。（2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还 有，体系中出现多种类型细胞的原因 。（3） 杂交瘤细胞中有个细胞核，染色体数目最多是条。（4）未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是参考答案前置作业一、1.(1)胰蛋白未原代传代(2)无菌、无毒气体空气CO2转基因有 毒物质2. (1)重组细胞代

11、孕3. (1)流动性(2)灭活(3)远缘单克隆抗体4. (1)筛选特定(2)特异性强灵敏度高(3)抗原生物导弹探究点一1. (1)无菌、无毒的环境：培养液和所有的培养用具要进行无菌处理；通常还要在培养 液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染；应定期更换培养液，防止细胞代谢产物 积累对细胞自身造成危害。(2) 营养：液体合成培养基成分包括糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。 通常需加入血清、血浆等天然成分。(3) 温度和pH：哺乳动物多以36.50.5C为宜；多数细胞生存的适宜pH为7.27.4。(4) 气体环境：95%空气+5%CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维

12、持培 养液的pH。2. 胰蛋白酶原代传代减数第二次重组胚胎疫苗有毒遗传濒危异种探究点二1. 流动性2. 灭活的病毒3. 单克隆抗体4. 某抗原免疫过诱导细胞融合杂交瘤细胞杂交瘤大量增殖专一抗体能产 生所需抗体 特异性强 灵敏度高探究示例3 (1)活细胞(2)动物细胞融合和动物细胞培养(3)B(或浆)抗体抗原 (或狂犬病病毒)病毒(或仙台病毒)特异性强、灵敏度高，并可大量制备(4) 无菌、无毒、温度和pH、气体、营养物质(5)作为诊断试剂、运载药物(或“生物 导弹”)等构建知识网络植物组织培养植物繁殖新途径作物新品种培育动物细胞培养单克 隆抗体制备课后练习1、1)XX或XY显微操作胚胎移植(2) 遗传物质(3) 卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的形状产生影响(4) 动物已分化体细胞的细胞核具有全能性