保健食品功效成分及卫生指标检验规范

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1、功效成分及卫生指标检验规范功效成分及卫生指标检验规范1 主题内容和适用范围1.1 本规范规定了保健食品和原料的卫生要求、功效成分和卫生指 标的检验项目和方法。1.2 本规范适用于保健食品的检验受理、 项目的确定和方法的选择。2 基本要求2.1 凡保健食品，必须符合 保健食品通用卫生要求 ，该要求 所列 的各项目必须按规定执行。附表 1 所列检测项目是对 保健食品通用 卫生要求 补充规定。2.2 保健食品中使用的添加剂必须符合 GB2760 食品添加剂使用 卫生标准规定的品种名单。检测机构根据产品配方检测合成色素、 防腐剂、甜味剂及抗氧化剂的含量。2.3 凡使用有机溶剂提取物为原料的产品，其使用

2、的有机溶剂要符合 GB2760 附录 D 食品工业用加工助剂推荐名单要求。2.4 保健食品应具有与产品配方和申报的保健功能相适应的功效成 分或特征成分，申报时须检测配方中主要原料所含的功效成分或特征 成分。附表 2 所列原料为主的产品须检测表中规定的项目。2.5 保健食品评审专家委员会可根据产品的具体配方、工艺等相关 资料，要求申报单位检测指定的项目。2.6 功效成分、特征成分、营养成分及卫生学指标的检测方法应根 据其产品适用的方法学范围选择国家标准、 卫生部部颁标准、 行业标 准以及国际上权威分析方法进行测定。2.7 在没有相应的标准方法之前，其产品中所声称（具有）的功效 成分或特征成分的检

3、测方法及检测所需的标准品对照品及特殊试剂 均由申报单位提供， 并说明其产品中功效成分或特征成分分析方法的 来源。如属自主开发研究的分析方法， 需提供方法学研究的相关资料， 同时将方法学研究的资料报卫生部保健食品功效成分检测协作组 （中 国疾病预防控制中心营养与食品安全所） 备案，必要时卫生部将组织 方法学验证，其费用由申报单位承担。2.8 检验机构受理保健食品检测时， 申报单位应提供该产品的配方、 工艺及企业标准等相关资料。2.9 卫生部对保健食品的功效成分的检测机构进行认定，检测机 构的名单由卫生部门公布。 保健食品的功效成分检测工作应在卫生部 认定的检测机构进行。 违禁成分的检测由卫生部指

4、定的检验机构进行 检测。附表1:下列类型的产品、或下列原料为主的产品指标检测项目表产品类型检测项目1固体水分、灰分2口服液可溶性固形物、pH3海产品镉4鱼油类酸价、过氧化值（降血脂类产品需检测胆固醇）5茶叶有机氯农药残留（八八八、滴滴涕）6红曲黄曲霉毒素E 1、桔青霉素7中药材水、八八八、滴滴涕8苹果、山楂展青霉毒素9片剂和胶囊崩解时限10抗疲劳、减肥和违禁药物改善生长发育的产品附表2 :功效成分和特征成分检测项目表1营养素补充剂产品中标识的营养素矿物质）（包括维生素和2五加科参类皂甙3蕈类（灵芝、蘑 菇等）膳食纤维4冬虫夏草菌丝体腺苷5红景天类红景天甙6芦荟类芦荟甙7大蒜类大蒜素8螺旋藻类蛋

5、白质、胡萝卜素、素B2维生素B1、维生9茶叶类茶多酚10魔芋类膳食纤维11纤维素类膳食纤维12磷脂类丙酮不浴物、乙醚不浴物（原料）13红曲类洛伐它丁14植物油类脂肪酸、维生素E15动物油类脂肪酸16初乳类免疫球蛋白17鹿血类蛋白质、氨基酸18蚂蚁类锰、蛋白质19蚯蚓类蚓激酶（溶纤酶）、蛋白质20蛇、蝎等蛋白质、氨基酸21角鲨烯角鲨烯22蜂皇浆10-羟基癸烯酸23蜂花粉、蜂胶总黄酮24甲壳质产品脱乙酰度，产品如为复方应检测原料 的脱乙酰度25蛋白质、氨基酸蛋白质、氨基酸制品26褪黑素产品褪黑素 产品原料（褪黑素）需提供原料纯度证明并检测3 保健食品中功效成分的检验方法见附件 1附件 1目录1.

6、保健食品中红景天甙的测定2. 保健食品中大蒜素的测定3. 保健食品中芦荟甙的测定4. 保健食品中脱氢表雄甾酮（DHEA的测定5. 保健食品中吡啶甲酸铬的测定6. 保健食品中盐酸硫胺、盐酸吡哆醇、烟酸、烟酰胺和咖啡因的测定7. 保健食品中肌醇的测定8. 保健食品中肉碱的测定9. 保健食品中a 亚麻酸、丫 一亚麻酸的测定10. 保健食品中免疫球蛋白 IgG 的测定11. 保健食品中水溶性粗多糖的测定12. 保健食品中人参皂甙的高效液相色谱测定13. 保健食品中原花青素的测定14. 保健食品中核苷酸的测定15. 保健食品中洛伐他丁的测定16. 保健食品中中药功效成分的鉴别方法17. 保健食品中银杏叶

7、总黄酮的高效液相色谱测定18. 保健食品中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定19. 保健食品中金雀异黄素的测定20. 保健食品中茶氨酸的高效液相色谱测定21. 五味子类保健食品中五味子醇甲、五味子甲素和乙素的高效液相色谱测定22. 保健食品中腺苷的测定23. 保健食品中褪黑素的测定附：保健食品功效成分检验方法协作组提供的检验方法1. 保健食品中人参总皂甙的测定2. 保健食品中总黄酮的测定3. 壳聚糖的游离氨基测定及脱乙酰度的计算4. 蚓激酶活性的测定5. 乙醚不溶物、丙酮不溶物的测定6. 角鲨烯的测定1保健食品中红景天甙的测定Determ in ati on of salidroside

8、 in health food第一法高效液相色谱法1范围本方法规定了保健食品中红景天甙的测定方法。 本方法适用于以红景天为主要原料的保健食品中红景天甙的测定。 本方法的检出限：0.02卩go本方法的线性范围：0.010.50卩g/mLo2 原理将混匀的试样使用甲醇进行提取，根据高效液相色谱紫外检测器定性定量检 测。3 试剂除非另有说明，在分析中仅使用双蒸水。3.1 乙酸钠分析纯。3.2 甲醇优级纯。3.3 石油醚分析纯。3.4 红景天甙标准溶液准确称量红景天甙标准品 0.0200g，加入甲醇溶解并 定容至10mL此溶液每 mL含2.0mg红景天甙。4仪器4.1高效液相色谱仪：附紫外检测器（UV

9、o4.2 超声波清洗器。4.3 离心机。5分析步骤5.1 试样处理5.1.1 液体试样：准确量取摇匀后的液体试样 20mL于 50mL容量瓶中，先加入 25mL甲醇，超声10min后用甲醇定容至刻度，混匀，经0.45如滤膜过滤后供液 相色谱分析用。5.1.2 固体试样：取20粒以上片剂或胶囊试样进行粉碎混匀， 准确称取适量试 样（精确至0.001g ）于50mL容量瓶中，加入甲醇,超声提取10min。取出后加 入甲醇定容至刻度，混匀后以3000rpm/min离心3min。经0.45m滤膜过滤后供 液相色谱分析用。5.2 液相色谱参考条件5.2.1 色谱柱：C18 柱 4.6 x 250mm,5

10、x m5.2.2柱温：室温。5.2.3紫外检测器：检测波长215 nm。524流动相：甲醇：0.02mol/L乙酸钠溶液二9:91。525 流速：1.0mL/min。526进样量：10儿。527色谱分析：取10卩L标准溶液及试样溶液注入色谱仪中，以保留时间定性， 以试样峰高或峰面积与标准比较定量。5.3标准曲线制备 分别配制浓度为0.0、0.01、0.02、0.05、0.20、0.50卩g/mL 红景天甙标准溶液，在给定的仪器条件下进行液相色谱分析，以峰高或峰面积对 浓度作标准曲线。5.4 分析结果的表示5.4.1 计算h1X C X VX =h2X mX 1000式中：X 试样中红景天甙的含

11、量，mg/g；h 1 试样峰高或峰面积；C标准溶液浓度，卩g/mL；V试样定容体积，mL;h 2 标准溶液峰高或峰面积；m 试样质量，g。计算结果保留三位有效数字。6技术参数准确度 方法的回收率在91.7 %98.6 %之间。允许差 在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平 均值的土 10%第二法极谱法1范围本方法规定了保健食品中红景天甙的测定方法。本方法适用于以红景天甙为主要功效成分的保健食品中红景天甙的含量测定。本方法的最低检出量为0.05卩g。若取1.00mL液体类试样，其最低检出浓度 为0.05mg/L;若取0.25g固体类试样、则最低检出浓度为 0.2mg/kg。

12、本方法的最佳线性范围为 0.1卩g/mL1.0卩g/mL。2原理保健食品中红景天甙用甲醇提取，D 101型大孔吸附树脂净化处理，经亚 硝基化后，其衍生物在硼砂溶液中具有电活性，在滴汞电极上还原产生极谱波。 用峰电位定性，以试样与标准的峰电流（lp）比较定量。3试剂除注明外，试剂为分析纯，实验用水为重蒸馏水。3.1 甲醇。3.2 D101 型大孔吸附树脂。3.3 饱和硼砂溶液。3.4 0.2%盐酸溶液。3.5 2mol/L 亚硝酸钠溶液。3.6 1.0mg/mL 红景天甙标准贮备溶液：准确称取 0.1000g 红景天甙对照品（中 国药品生物制品检定所）于烧杯中，加水溶解并定容至 100mL 容量

13、瓶。此溶液 每毫升含红景天甙I.Omg,冰箱保存。3.7 10.0卩g/mL红景天甙标准使用溶液：准确吸取红景天标准贮备溶液 I.OOmL 于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。此溶液每毫升含红景天甙10.0卩g。4 仪器与设备4.1 极谱分析仪。4.2 超声波清洗机。4.3 10mmX 150mm玻璃层析柱。5 分析步骤5.1 试样的制备及予处理5.1.1 液体类试样（如保健酒、口服液、饮料等）准确吸取摇匀的试样液1.00mL于50mL容量瓶中，加水稀释至刻度、摇匀， 供测定用。5.1.2 一般固体类试样（如保健茶、蜜片、胶囊等）准确称取经粉碎并过20目筛的试样0.25g,置50mL三角瓶中

14、，加入10mL 甲醇，于超声波清洗机超声提取10min、过滤，滤液收集于50mL容量瓶中。再 加入 10mL 甲醇于三角瓶中，重复超声提取一次，合并滤液于上述容量瓶中，用 水稀释至刻度，供测定用。5.1.3 个别组分复杂的固体类试样 个别组分复杂的固体类试样需经柱层析净化处理。层析柱制备。取适量 D101 型非极性大孔吸附树脂于烧杯中，加水洗涤数 次，缓缓倾入10mm x 150mm玻璃层析柱内，湿法装柱、树脂约高 50mm， 10mL 甲醇注入层析柱上端进行淋洗，弃淋洗液。净化。按5.1.2节处理、提取试样，准确吸取10.0mL提取试液，缓缓注入层析柱上端，用玻璃蒸发皿收集流出液。 再吸取

15、10mL 甲醇分两次注入层析柱进行 淋洗、合并流出液于蒸发皿中，置70C恒温水浴挥干，用水溶解移入 10mL容量瓶中，水稀释至刻度，供测定用。5.2 极谱分析参考条件单扫描极谱法（SSP法）。选择起始电位为一 400mV，终止电位一900mV， 扫描速度250mV/S,三电极，二次导数，静置时间5s及适当量程。于峰电位（Ep） 600mV （vs.SC日处，记录红景天甙的峰电流（lp）nA。5.3 标准曲线的绘制准确吸取10.0卩g/mL红景天甙标准使用溶液 0, 0.10, 0.20, 0.40, 0.60, 0.80, 1.00mL 于 7 支 10mL 比色管中（相当于含 0, 1.0,

16、 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0 卩 g 红景天甙）。各管加入 2.0mL 2mol/L 亚硝酸钠溶液及 1.0mL 0.2%盐酸溶液置沸水 浴10min,取出冷却至室温后各管再加入1.0mL饱和硼砂溶液，加水稀释至刻度， 摇匀。将各管溶液依次移入电解池, 置三电极系统。 按上述极谱分析参考条件 （5.2） 下测定，记录各管红景天甙的峰电流（Ip）。以红景天甙含量为横座标，其对应 的峰电流为纵座标,绘制标准曲线。5.4 试样测定5.4.1 标准曲线法准确吸取上述待测液0.1mL0.5mL于10mL比色管中，（视其含量高、低 而定）加入 2mL 2.0mol/L 亚硝酸钠溶液,

17、 以下操作同 5.3 节标准曲线绘制项下测 定试液中红景天甙的峰电流（ Ip）。5.4.2 标准加入法分别吸取上述待测液0.10.5mL于2支10mL比色管中（视其含量高、低而 定）。其中一管加入所吸取待测液中红景天甙含量大致相当的红景天甙标准使用 溶液（可先予测一次） ,各管再加入 2mLL2.0mol/L 亚硝液钠溶液,以下操作步 骤同 5.3节标准曲线绘制项下。测定两管溶液中红景天甙的峰电流（Ip）。6 结果6.1计算6.1.1标准曲线法mxViVx 1000式中：X 试样中红景天甙含量， mg/g （或mg/mL）；A从标准曲线上查得的含量，卩g;V试样的定容体积，mL;V1测定用试样

18、溶液体积，mL;m试样的质量（或体积），g （或mL ）。6.1.2标准加入法X=B x h1(h2hi) XmXV1Vx 1000(2)式中：B加入红景天甙标准含量，卩g;h1未加红景天甙标准管中溶液的峰电流，nA;h2加红景天甙标准管中溶液的峰电流，nA;X，m，V1，V与（1）式中表述含义相同。6.1.3结果表示：计算结果保留3位有效数字。6.2技术参数准确度：本方法的平均添加回收率为 92.5%精密度：相对标准偏差（RSD） 7.0%干扰因素：若试样中共存黄酮甙，有正干扰，测定时加入1 %硝酸铝溶液0.5mL, 即可消除此干扰。2保健食品中大蒜素的测定Determ in ati on

19、of allitridum in health food1范围本方法规定了保健食品中大蒜素（三硫二丙烯，GHoS）的测定方法。本方法适用于以大蒜（油）为主要原料，制成的酒、胶囊、片剂中大蒜素的 含量测定。本方法最低检出浓度为0.0430mg/mL；取100mg试样，提取定容5.0mL时, 试样中大蒜素最低检出质量浓度为 0.20g/100g。本方法最佳线性范围：0.320-3.00卩g。2原理根据大蒜素为挥发性油成分，经有机溶剂提取，用气相色谱仪分析，采用外 标法定量。3试剂3.1无水乙醇（分析纯）。3.2正己烷（分析纯）。3.3标准溶液配制 称取0.1000g标准，置于10mL容量瓶中，用正

20、己烷定容至 刻度，该溶液中含大蒜素浓度为10.0mg/mLo此溶液可在冰箱中保存七天。取该 溶液1.0mL，置于10mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度，此溶液含大蒜素浓度 为 1.0mg/mLo 4仪器4.1气相色谱仪，附氢火焰（FID）检测器。4.2数据处理机，或积分仪。4.3分析天平：万分之一。4.4超声清洗机。4.5 离心机，3000r/min。5分析方法5.1试样提取5.1.1固体试样精密称取试样0.100g，加无水乙醇2.5mL ,密塞，超声70min,取出冷却，加正己烷2.5-25.0mL定容（调节大蒜素含量约为 1.0mg/mL左右）， 振摇，静置分层后，取上层液进样。5.1.2液

21、体试样 精密吸取20.0 mL试样，于分液漏斗中，加5mL正己烷振摇 提取1mi n,静置（或离心）分层后，取上层液进样。5.2气相色谱参考条件5.2.1 色谱柱 玻璃 色谱柱长：2米，内装担 体：硅藻土 （ Chromosorb W（AW） ,60-80 目;固定相：0.5%己二酸乙二醇酯（Ethylene Glycol Adipate ）;。522柱箱温度：90C。523进样口温度：150C。5.2.4 鉴定器温度：150C。5.2.5 载气：氮气（55mL/min）。5.2.6 氢气：50mL/min ;空气：500mL/min。5.2.7鉴定器灵敏度：2;记录仪衰减：3。5.2.8进样

22、量1卩L。5.3定性分析 在参考操作条件下，以对照品与试样比较保留时间定性。5.4定量分析试样中大蒜素色谱峰面积或峰高与标准的色谱峰面积或峰高比 较定量。5.5分析结果表述试样中大蒜素的含量按式（5.5.1 ）计算。5.5.1计算W=Ai C VA m 1000100式中：W 大蒜素的含量,A试样使用液色谱峰面积或峰高;A2标准使用液峰面积或峰高;C标准使用液浓度，mg/mLV 试样定容体积，mL;m试样的质量，g5.5.2结果表示计算结果保留三位有效数字6技术参数6.1回收率：在不同的试样中不同浓度加标回收率为97.8-116%6.2精密度：同一试样6次测定结果的RSD为2.10%。6.3两

23、次测定结果相对误差：w 10%6.4干扰因素：在超声时,注意密塞。7参考色谱图rK图A标准品气相色谱图图中tr=0.588 溶剂， tr=3.045 大蒜辣素 tr=10.912大蒜素图B片剂试样气相色谱图图中tr=0.6 溶剂， tr=3.062 大蒜辣素 tr=11.011大蒜素3保健食品中芦荟甙的测定1 范围本方法规定了芦荟胶囊、芦荟片剂、芦荟汁等保健食品中芦荟甙含量的测定 方法。本方法适用于芦荟胶囊、芦荟片剂、芦荟汁等保健食品中芦荟甙含量的测定。 本方法的最低检出量10ng本方法的最佳线性范围：0100卩g/mL y=1124194x+3215;线性关系r=0.9999 2原理用甲醇+

24、水（55+45）作为溶剂，提取试样中的芦荟甙，经高效液相色谱仪C18柱分离，紫外检测器293nm条件下检测，以芦荟甙保留时间定性，峰面积定3 试剂3. 1甲醇色谱纯；3. 2水重蒸水；3. 3芦荟甙标准品 纯度98%3. 4芦荟甙标准溶液的制备 精确称取芦荟甙标准品10mg，加流动相甲醇+水（55+45）溶解并移入100mL容量瓶中，定容至刻度 4仪器设备4. 1高效液相色谱仪附紫外检测器4. 2色谱柱 C18 （以十八烷基键合硅胶填料为填充剂） 或具同等性能的色谱柱,150mm99.0%3.5 丫 -亚麻酸甲酯 99.0%3.6标准储备液 称0.0250g的a -亚麻酸甲酯及0.0250mg

25、的丫 -亚麻酸甲酯标准 品,分别用正己烷溶解，并定容于25mL容量瓶中，混均，浓度分别为1.0mg/mL。3.7标准使用液 分别取a -亚麻酸甲酯及丫 -亚麻酸甲酯标准储备液各 5.0mL 置于10mL的容量瓶中，混均， a -亚麻酸甲酯和 Y -亚麻酸甲酯的含量为0.5mg/mL。4. 仪器与设备 4.1气相色谱仪，附氢火焰（FID）检测器。4.2数据处理机，或积分仪。4.3分析天平：1/10000。4.4分析天平：1/1000。4.5加热式磁力搅拌器。4.6标准磨口烧瓶（50mL）和直形冷凝管。5. 分析步骤 5.1试样制备5.1.1脂肪的提取 按GB/T 5009.6中规定的方法提取。5

26、.1.2皂化称取0.100g油脂（或脂肪）和磁力搅拌子一并放入 50mL磨口烧瓶中（见图1）,加入4mL0.5mol/L氢氧化钾甲醇溶液，上部连接回流冷凝管，并固定于磁力 搅拌器上，由冷凝管上口向溶液中导入氮气； 使反应瓶中始终充满氮气。开启磁 力搅拌器，并加热使反应液保持 65 5C,搅拌回流约15mi n。5.1.3甲脂化从冷凝管上部加入4mL三氟化硼甲醇溶液，搅拌（65 5C ），回流约2min, 冷至室温，从冷凝管上部加入5mL正己烷继续搅拌5min，移去冷凝管，加入5mL 饱和氯化钠水溶液，摇动数分钟，转移至 25mL分液漏斗中分离水与有机相，再 加3mL正己烷洗水相，分离，弃水相，

27、合并有机相并定容至10mL（浓度低时吹氮浓缩至1.0mL）。供测定用。5.2气相色谱参考条件5.2.1 色谱柱：FFAP （改性聚乙二醇 20M，30mx 0.25mm i.d. 0.25 卩 m）。5.2.2柱箱温度：215C。5.2.3进样口温度：250E。5.2.4检测器温度：260 Eo5.2.5 氮气：50mL/min，30 : 1 分流；氢气：45mL/min;空气:500mL/min。5.3定性分析在上述仪器条件下，分析取标准使用液和试样测定液1.0卩L，注入气相色谱 仪，以保留时间来确定a -及丫 -亚麻酸甲酯。5.4定量分析试样中a或丫 -亚麻酸甲酯色谱峰面积或峰高与标准的比

28、较定量。6. 分析结果试样中a或丫 -亚麻酸测定结果按（1）式计算 6.1计算x(%)=A1 x px vx 0.952 X00%(1)mx 1000式中:Xa或丫 -亚麻酸含量，%；A1试样中a或丫 -亚麻酸甲酯色谱峰面积或峰高；A2标准使用液色谱峰面积或峰高；p标准使用液浓度,mg/mL；v 正己烷定容体积，mL;m试样质量，g；0. 952亚麻酸换算系数。脂肪试样再换算原保健食品试样中 Y-亚麻酸和a -亚麻酸的量。 6.2结果表述计算结果保留三位有效数字。7. 技术参数相对标准偏差：10%.。回收率：93.0%101.7%8.色谱参考图图1标准色谱图图2试样色谱图气相色谱参考条件色谱柱

29、：FFAP（改性聚乙二醇 20M , 30m X 0.25mmi. d. 0.25 卩 m）。柱箱温度：215C。进样口温度：250E。检测器温度：260C。氮气：50mL/min , 30 : 1 分流；氢气：45mL/min;空气：500mL/min。10. 保健食品中免疫球蛋白IgG的测定Determ in ati on of immuno globuli n content in health food1 适用范围本方法规定了初乳粉中免疫球蛋白IgG的测定。 本方法适用于初乳粉中免疫球蛋白IgG的测定。本方法最小检出量：2.0卩g。本方法最小检出浓度：当取样量 0.1g，稀释至25mL

30、进样量20卩L时，最 小检出浓度为0.5mg/mL。本方法最佳线性范围：0.2 1.0mg/mL。2 方法原理根据高效亲和色谱的原理，在磷酸盐缓冲液条件下免疫球蛋白IgG与配基连 接，在pH2.5的盐酸甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG。3 试剂3.1 pH6.5 0.05mol/L磷酸盐缓冲液 A液3.2 pH2.5 0.05mol/L甘氨酸盐酸缓冲液B液3.3 IgG 标准贮备液：称取IgG标准品（Sigma化学公司）0.0100g,用pH6.5 0.05mol/L磷酸盐缓冲液溶解并定容至10.0mL,摇匀，浓度为1.0mg/mL。3.4 IgG 标准系列溶液：以IgG标准贮备液，用pH6.

31、5 0.05mol/L 磷酸盐缓冲 液稀释成含 IgG 0.2mg/mL, 0.4mg/mL, 0.6mg/mL, 0.8mg/mL, 1.0mg/mL 的标准 系列。临用时配制。4 仪器和设备HPLC仪具紫外检测器和梯度洗脱装置。5 分析步骤5.1 试样处理：称取0.1g （精确至0.001g ）试样，用A液稀释至25.0mL,摇匀， 通过0.45卩m微孔滤膜后进样。5.2.1先用5倍柱体积的重蒸水洗柱，再用10倍柱体积的A液平衡柱，进样， 按洗脱程序进行洗脱。5.2.2 HPLC参考条件色谱柱：Pharmacia HI-Trap Protein G 柱，1mL 波长：280nm移动相：A液

32、B液进行梯度洗脱，见下表。梯度洗脱表：TimeFlow mL/minA%B%Gradie nt00.41000探4.50.4100065.50.4010066分析结果表示6.1计算C V 100x =m 1000式中x :试样中IgG的含量，g/100g ; m :试样的质量，g;C:被测液中IgG的含量，mg/mLV:试样定容的体积，mL。6.2结果表示：计算结果保留三位有效数字。7 技术参数 允许差： 5%回收率:94.4 95.1%8 色谱图峰G gc-luzmnuIgG峰I班；标准色蔚图初乳索色谱图11. 保健食品中水溶性粗多糖的测定方法Determ in ati on of wate

33、r-soluble crude polysaccharide in health food1. 范围本方法规定了保健食品中以葡聚糖为主要结构分子量在10000以上的水溶性粗多糖的测定方法。本方法适用于保健食品中以葡聚糖为主要结构分子量在10000以上的水溶性粗多糖的测定。本方法最低检出浓度：5.0mg/L。本方法最佳线性范围：5.0ug/mL -200ug/mL。2. 原理食品中分子量10000的高分子物质在80聽醇溶液中沉淀，与水溶液中单和 低聚糖分离，用碱性二价铜试剂选择性的从其它高分子物质中沉淀具有葡聚糖结 构的水溶性多糖，用苯酚-硫酸反应以碳水化合物形式比色测定其含量，其颜色强度与水溶

34、性粗多糖中葡聚糖的含量成正比，以葡萄糖为标准参照物并以此计算食品中水溶性粗多糖含量。3 试剂本方法所用试剂除特殊注明外，均为分析纯；所用水为去离子水或同等纯度 蒸馏水。3.1乙醇溶液(80%):20mL水中加入无水乙醇80mL混匀。3.2氢氧化钠溶液(100g/L):称取100g氢氧化钠，加水溶解并稀释至1L,加入固体 无水硫酸钠至饱和，备用。3.3铜试剂储备液：称取3.0gCuSQ.5H20,30.0g柠檬酸钠，加水溶解并稀释至1L, 混匀备用。3.4铜试剂溶液：取铜储备液50mL加水50mL混匀后加入固体无水硫酸钠12.5g 并使其溶解。临用新配。3.5洗涤剂：取水50mL加入10mL铜试

35、剂溶液，10mL氢氧化钠溶液，混匀，临 用新配。3.6硫酸溶液（10%:取100mL浓硫酸加入到800mL左右水中，混匀，冷却后稀 释至 1L。3.7苯酚溶液（50g/L）:称取精制苯酚5.0g，加水溶解并稀释至100mL混匀。 溶液置冰箱中可保存一月。3.8 葡萄糖标准储备溶液 : 精密称在硫酸干燥器中干燥至恒重的葡萄糖标准0.5000g,加溶解，并定容至50mL混匀，置冰箱中保存。此溶液每毫升含10.0mg葡萄糖。3.9葡萄糖标准使用液：吸取葡萄糖标准储备液1.00mL,置于100mL容量瓶中，加 水至刻度 , 混匀, 置冰 箱中保存。此溶液每毫升含葡萄糖 0.10mg。4仪器4.1 分光光度计4.2 离心机4.3 旋转混匀器5. 分析步骤5.1 标准曲线制备 ：精密吸取葡萄糖标准使用液 0.00,0.10,0.20,0.40,0.60,0.80,1.00 mL（ 相 当于葡萄糖，0.010,0.020,0.040,0.060,0.080,0.10mg）分别置于 25mL比色管中，准确补充水至