实验三动物细胞的传代培养

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1、动物细胞的传代培养动物细胞的传代培养 实验三实验三实验目的实验目的 了解和掌握动物细胞传代培养的基本方法及其了解和掌握动物细胞传代培养的基本方法及其操作过程。操作过程。实验原理实验原理1.1.贴壁生长细胞传代贴壁生长细胞传代 采用酶消化法传代。常用的消化液有的胰蛋白酶液。采用酶消化法传代。常用的消化液有的胰蛋白酶液。2.2.半悬浮生长细胞传代（半悬浮生长细胞传代（HelaHela细胞）细胞）此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢，可用直接吹打此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但贴壁不牢，可用直接吹打法使纫胞从瓶壁脱落下来，进行传代。法使纫胞从瓶壁脱落下来，进行传代。3.3.悬浮生长细胞传代悬浮生

2、长细胞传代 离心法传代：离心（离心法传代：离心（10001000转转/分分）去上清，沉淀物加新培养液）去上清，沉淀物加新培养液后再混匀传代。后再混匀传代。直接传代法：悬浮细胞沉淀在瓶壁时，将上清培养液去除直接传代法：悬浮细胞沉淀在瓶壁时，将上清培养液去除1/21/2一一2/32/3，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。实验用品实验用品器材：超净工作台、无菌细胞培养瓶、离心管、吸管、橡皮塞、酒精灯等试剂：PBS、75酒精及酒精棉球、含10小牛血 清的1640培养液、胰蛋白酶消化液实验动物：贴壁细胞系实验方法实验方法（贴壁生长细胞传代）（贴壁生长细胞传代）消化数分钟中止消化、吹散细胞细胞传代细胞传代3737、5 5COCO2 2培养培养思考题简述动物细胞传代培养的操作程序及注意事项？