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1、五鹤续断中总皂苷的提取工艺优化 目的研究五鹤续断中总皂苷的提取分离工艺。方法以提取方法、提取时间和提取溶剂为因素，采用L9（34）进行正交实验。结果超声提取优于索氏提取和微波提取，甲醇优于乙醇和双蒸水。结论用甲醇作为提取溶剂，采用超声波提取1 h，总皂苷提取效率较高。五鹤续断 总皂苷 提取工艺 超声波 正交实验Abstract:ObjectiveTo study the extraction and separation procedure of total saponins from Wu-He Dipsacus asper. MethodsOrthogonal experiment was
2、 used with the optimum factors of extracting method, extracting solvent and extracting time, etc respectively.Rusults The results showed that ultrasonic wave extraction method was more efficient than the sorbite extraction method and microwave extraction method. ConclusionThe optimum conditions are
3、as follows：methanol as extracting solvent, ultrasonic wave extraction method and extracting time 1 hour.Key wordsWu-He Dipsacus;Total saponins;Extraction and separation procedure;Ultrasonic wave;Orthogonal experiment五鹤续断属于川续断科植物Dipsacus asper，因其产地以湖北鹤峰县、五峰县为主，是川续断中的优质品，资源极其丰富，故在商贸中出现了“五鹤续断”的冠名1。现代研究
4、已证明其有效成分主要有皂苷、挥发油类、生物碱类、维生素E和蔗糖等，它具有补肝益肾，续接筋骨，抗骨质疏松，止血安胎等功效，临床上主要用于治疗腰膝酸软、跌打损伤、骨折2、腰椎骨质增生、先兆性流产和习惯性流产等3，4。皂苷作为植物天然活性成分，已早为人们所知。有药理学实验报道，续断的总皂苷提取物是促进骨损伤愈合作用的活性成分4。因此，对五鹤续断总皂苷的提取分离工艺进行研究，可为五鹤续断的综合开发与利用提供理论基础。本文以提取方法、提取溶剂和提取时间等为因素，选用L9(34 )正交表5进行实验，研究了五鹤续断中总皂苷的提取分离工艺。1方法与器材1.1取样及样品预处理本实验所用材料均采自恩施州鹤峰县走马
5、镇万寺坪道地药材五鹤续断GAP研究及种植基地，采用随机取样的方法，分别取1年生，2年生，3年生和野生的新鲜植株各10株（其根生长3年以后基本上都已木质化，不能作为药用），先用自来水将其根、茎、叶分别清洗干净，再用双蒸水冲洗，切碎后放在105的烘箱里杀青30 min1 h后，于80下烘至恒重，将各样品用粉碎机打磨成粉末，过40目筛装于试剂瓶中，贴上标签，贮存于干燥器内备用。1.2仪器与材料1.2.1仪器索氏提取器，756MC-紫外分光光度计，PHS-3C酸度计，SHZ-D循环水式真空泵，电热恒温干燥箱，电子天平（上海天平仪器厂），粉粹机，水浴锅,超声波提取仪，微波提取仪等。1.2.2试剂甲醇，9
6、5%的乙醇，乙醚，正丁醇，香草醛，冰醋酸，高氯酸，氢氧化钠，对照品，乙醇，HClO4，浓硫酸，蒽酮，葡萄糖等试剂均为分析纯，提取及试剂用水均为双蒸水。1.3方法1.3.1五鹤续断中总皂苷溶液的制备索氏提取：取样品粉末（过40目筛）2.0 g精密称定，置索氏提取器中，加乙醚80 ml，加热回流2 h，弃去乙醚液，药渣挥去乙醚，置于索氏提取器中，加甲醇80 ml，加热提取2 h，取甲醇提取液，挥干，残渣加水15 ml使溶解，水溶液置漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取5次，15 ml/次，合并正丁醇萃取液，用1%的氢氧化钠溶液洗涤3次，15 ml/次，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，定容于25 ml的容量瓶中，待测。超声波提取：精密称取样品粉末2.0 g，置15 ml具塞管中，精密加入甲醇10 ml，密塞，超声60 min，放置过夜，精密吸取上清液4 ml于离心管中，加入3倍量乙醚，放置使其完全沉淀，离心60 min，倾去上清液，加10%盐酸10 ml使之溶解，并转入锥形瓶中（少量多次，使完全转入），沸水浴回流2 h，过滤得褐色沉淀于滤纸，使沉淀溶解并过滤于10 ml量瓶中，用甲醇定容，待测。
五鹤续断中总皂苷的提取工艺优化
