猪人工授精站技术操作规程

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1、猪 人 工 授 精 站 技 术 操 作 规 程 一、人工授精站设置1、 选址1) 地形地势：地形要求开阔整齐，有足够面积，并留有发展余地。地势要求较高、干燥、平坦、背风向阳、有缓坡，但坡度不大于2502) 建筑朝向：南偏东1503) 社会条件：要求距铁路、国家一、二级公路应不少于500米，距三级公路应不少于200米，距四级公路不少于100米；与村镇居发点、工厂及其它牧场有距离应不少于1000米。2、 人员1) 采精员：熟练掌握公猪采精技术及后备公猪调教技术，合理控制公猪采精频率，能采集体积大、密度高的精液。2) 精液配制员：熟练掌握精液品质检查、稀释液配制、精液稀释、精液分装和保存等实验技术，

2、树立清洁、无菌概念。提供优质合格精液。3) 输精员：熟练掌握母猪发情鉴定技术，严格按照操作规程进行输精，认真填写母猪输精登记卡，保证母猪的受胎率和产仔数。4) 公猪饲养员：根据公猪体况、年龄等控制饲料饲喂量，保证公猪正常性机能，配合采精员的工作。3、 公猪舍1) 公猪舍：建设采用水帘降温系统，公猪集中饲养。公猪舍内配有足够的采精栏，应紧靠精液配制室。2) 公猪栏：地板要求半漏缝，采用防滑材料铺设，每个公猪栏面积约6M2，要求有三条以上的赶猪通道。4、 采精室1) 建筑设计：约56平方米（如2.12.4M），靠近公猪栏和精液制作室，要求宽敞、平坦、清洁、安静，地面防滑易清洗，内设工作人员逃逸安全

3、区。2) 工作人员逃逸安全角：以间隔约27厘米、直径10厘米、高120厘米的钢管直立排列而成，与墙角形成三角形。3) 采精架：以钢管或木材制作，高6070厘米，宽2530厘米，长100120厘米，架背辅适当厚度弹性软物，外包一张经过处理的猪皮或橡胶皮，以利清洗消毒，要求稳固、可升降以便为不同高度公猪提供报务。4) 防滑垫：弹性较好的橡胶垫，长100厘米，宽80厘米，位于采精架前。5) 精液传递窗：位于采精室与精液制作室之间，宽50厘米，高40厘米，墙两边设可推拉的玻璃门。6) 灭菌灯：内墙安装紫外线灯用作定期消毒。5、 精液配制室1) 总体要求：内设工作台和清洗用具用水池，内墙用瓷片铺面，并安

4、装空调机和紫外线消毒灯。以便于工作、卫生为主。2) 功能区：用具清洁和双蒸水制备区、稀释液配制区、精液品质检查区、精液稀释区、精液分装区、精液保存区、精液发放区等。3) 仪器设备和用具：所需仪器设备为：电脑、精子密度测定仪、位相差显微镜、3738恒温板、载玻片和盖玻片、红血球计数板、计数器、电子天平、磁力搅拌机、电子显示温度计、酒精温度计、精液分装机、17精液保存箱、恒温水浴锅、恒温箱、双蒸水器或去离子水生产器、干燥箱、1000ml、2000、3000ml烧杯、微量加样器、采精用保温集精杯，一次性簿膜手套、精液输送箱、脱脂纱布。二、种公猪与公猪饲养管理1、 品种1) 品种：长白、太白、杜洛克等

5、。2) 引种标准：纯种公猪要求达品种标准。3) 健康标准：公猪无传染病。2、 营养管理1) 日粮要求：种公猪日粮以提高公猪产精性能为目地，应独立配制。2) 营养标准：种公猪每日推荐如表23、 饲养管理1) 饲养：根据不同品种和品系确定种公猪的日粮配方，日饲喂量一般为2.53.0kg。严禁发霉变质和有毒饲料混入，要求饲料有良好的适口性，注意日粮体积不能过大，防止公猪腹大影响体形和配种。2) 日常管理：每天定时用刷子刷拭猪身，热天淋沐冲洗，定期称重和修碲，严防公猪咬架等3) 防暑降温：种公猪最适应的温度为1820。高温可使种公猪的食欲下降、性欲降低、精液品质下降，甚至会中暑死亡。防暑降温可采用水帘

6、、通风、洒水、冲凉、遮荫等措施。4、 防疫与健康检查1) 定期检测：每年定期于月份对公猪进行全面的抽血检测，对不合格的公猪进行淘汰；检测的疫病包括：伪狂犬病、篮耳病、猪瘟、布氏、5号病等。2) 免疫注射：3月份：乙脑2头份、猪瘟18月龄前4头份/18月龄后6头份、链球菌3头份。6月份：猪肺疫2头份。9月份：猪瘟18月龄前4头份/18月龄后6头份、链球菌3头份。3) 驱虫：每年每头猪驱虫2次。4) 引种隔离：对引进的公猪，先隔离饲养2个月，并抽血检测，证明无上述5种传染病者，并入大栏饲养，对不合格的作淘汰处理。三、采精 1、 公猪调教1) 调教年龄：后备公猪78月龄可开始调教，有配种经验的公猪也

7、可以进行采精调教。首先剪去公猪包皮部的长毛。2) 调教方法：将成年公猪的精液或包皮部分泌物涂在假台猪后部：采精栏放置一发情母猪，在公猪试图接近发情母猪时，将公猪引至假台猪：让待训公猪观摩已调教成功的公猪爬跨假台猪。每天可调教1次，但每次调教时间不能超过15分钟。一旦采精成功，第2天和第3天再继续采精，以加强其记忆和促成条件反射的建立。调教公猪要有耐心，不准打骂公猪。同时，注意公猪和调教人员的安全。2、采精方法1) 采精前准备2) 采精公猪的准备：根据当天精液需要情况，确定用于采精的公猪品种、耳号，并安排好采精的先后顺序。如果公猪体表有太多赃物，需事先冲洗干净并擦干体表水渍，才将公猪赶至采精室。

8、3) 采精器件的准备：集精器（采精杯或采精盒将一次性使用的食品保鲜袋置于集精器内，器口盖4层一次性使用消毒纱布或滤精膜，用橡胶圈套上固定，以过滤精液中的胶冻物质）置于38的恒温箱中备用。当公猪引至采精室后，迅速取出集精器，另外，还应准备好采精时清洁公猪包皮内污物的纸巾或消毒清洁的干纱布等。4) 配制精液稀释液：配制好所需量的稀释液，置于在水浴锅中预热至35。5) 精液质检设备的准备：调节好质检用的显微镜，开启显微镜载物台上恒温以及预热精子密度测定仪。6) 精液分装器件的准备：准备好精液分装器、精液瓶或袋等。3、采精技术1) 采精员一手带双层手套，另一手持37保温杯（内装1次性食品袋）用于收集精

9、液：饲养员将待采精的公猪赶至采精栏，用0.1%高锰酸钾溶液清洗其腹部和包皮，再用温水（夏天用自来水）清洁干净，避免药物残留对精子的伤害。2) 采精员挤出公猪包皮积尿，按摩公猪包皮部，刺激其爬跨假台畜。3) 公猪爬假台畜并逐步伸出阴茎，脱去外层手套，将公猪阴茎龟头导入空拳。4) 用手（大拇指与龟头相反方向）紧握伸出的公猪阴茎螺旋状龟头，顺其向前冲力将阴茎的“S”状弯曲拉直，握紧阴茎龟头防止其旋转，公猪即可射精。5) 用四层沙布过滤收集浓份或全份精液于保温杯内的一次食品袋内，最初射出的少量（5ml左右）精液不接取，有些公猪分23个阶段将浓份精液射出，直到公猪射精完毕，射精过程历时57分钟。6) 集

10、精杯位置应高于包皮部，可防止包皮部液体流入集精杯内。7) 集精员应注意安全，一旦公猪出现攻击行为，采精员应立刻逃至安全角。4、 采精频率1) 采精频率：以单位时间内获得最多的有效精子数决定采精频率。采精频率的固定比采精频率本身更重要。2) 成年公猪：每周采精1.52次。3) 青年公猪：每周一次。四、精液品质检查1、精液量：以电子天来称量精液，按每克一毫升计，避免以量简等转移精液盛放容器的方法测量精液体积。2、颜色：正常的精液是乳白色或浅灰色，精子密度越高，色泽愈浓，其透明度愈低。如带有绿色或黄色是混有脓液或尿液，若带有淡红色或红褐色是含有血液。这样的精液应舍弃不用，会同兽医寻找原因。3、气味：

11、猪精液略带腥味，如有异常气味，应废弃。4、pH值（酸碱度）：以pH计或pH试纸测量。5、 精子活率检查：活率是呈直线运动的精子百分率，在显微镜下观察精子活率，一般按中0.11.0的十级评分法进行，鲜精活率要求不低于0.7；检查活率时要求载玻片和盖玻片都应37预热。6、 精子密度：指每毫升精液中所含的精子数，是确定稀释倍数的重要指标。要求用血细胞计数板进行计数或精液密度仪测定。血细胞计数板计数方法：以微量加样品取具有代表性的原精液2001，3%Nacl 18001混匀，使之稀释10倍；在血细胞计数室上放一盖玻片，取1滴上述精液放入计数板的槽中，靠虹吸将精液吸入计数室内；在高倍镜下计数5个中方格内

12、的精子总数，将该数乘以50万，即得原精液每毫升的精子数（即精液密度）。7、 精子畸形率：畸形率是指异常精子的百分率，一般要求畸形率不超过18%，其测定可用普通显微镜，但需伊红或姬姆沙染色，相差显微镜可直接观察精子的畸形率，公猪使用过频或高温环境会出现精子尾部带有原生质滴的畸形精子；畸形精子种类很多，如：巨型精子、短小精子、双头或双尾精子，顶体膨胀或脱落、精子头部残缺或与尾部分离、尾部变曲。要求每头公猪每两周检查一次精子畸形率。8、 认真填写种公猪精液品质检查登记表（见表1）。五、精液稀释、分装、贮存和运输1、稀释液1) 稀释液：按稀释液配方（见表4），用称量纸、电子天平准确称量药品。2) 按1

13、000ml、2000ml剂量称量稀释粉，置于密封袋中。3) 使用前1小时将称量好的稀释粉溶于定量的双蒸水中，可用磁力搅拌器助其溶解。4) 用0.1N盐酸或0.1N氢氧化钠调整稀释液的PH值为7.2（6.87.4）左右；稀释液配好应及时贴上标签，标明品名、配制日期和时间、经手人等。5) 液态状稀释液冰箱4保存，不超过24小时。2、精液稀释1) 精液采集后应尽快稀释，原精贮存不超过30分钟。2) 未经品质检查或检查不合格（活力0.7以下）的精液不能稀释。3) 稀释液与精液要求应等温稀释，两者温差不超过1，即稀释液应加热至3337，以精液温度为标准，来调节稀释液的温度，绝不能反过来操作。4) 稀释时

14、，将稀释液沿盛精液的杯（瓶）壁缓慢加入到精液中，然后轻轻摇动或用消毒玻璃棒搅拌，使之混合均匀。5) 如作高倍稀释时，应进行低倍稀释（1：12），待半分钟后再将余下的稀释液沿壁缓慢加入， 以防造成“稀释打击”。6) 稀释倍数的确定：活率0.7的精液，一般按每个输精剂量含40亿个总精子，输精量为80100ml确定稀释倍数，例如：某头公猪一次采精量为200ml，活力为0.8，密度为2亿/ml，要求每个输精剂量是含40亿精子，输精量为80ml，则总精子数为200ml2亿/ml=400亿，输精头份为400亿/40亿=10份，加入稀释液的最为 1080ml-200ml=600ml。7) 稀释后要求静置片刻

15、再作精子活力检查，如果稀释前后活力无太大变化，即可进行分装与保存，如要活力下降，说明稀释液的配制或稀释操作有问题，不宜使用，并应查明原因加以改进。8) 混合精液：新鲜精液首先按1：1稀释，根据精子密度和混和精液的量记录需加入稀释液的量，将部分稀释后精液放入水浴锅保温，重复收集34头公猪品质优秀精液，将所要混精的精液置于足够大的容器，加入剩余部分稀释液（要求与精液等温），混均后进行分装。3、精液分装1) 调好精液分装机，以每80100毫升为单位，将精注分装精液瓶或袋。2) 在瓶或袋上用标签机打上标明公猪品种、耳号、生产日期、保存有效期、稀释液名称和生产单位等。3) 精液置室温（25）12小时后，

16、放入17精液保存恒温冰箱贮藏，也可将精液瓶或袋用毛巾包严直接放入17精液保存恒温冰箱内。4、精液贮存1) 精液须贮存于17精液保存恒温冰箱。2) 短效稀释液可保存3天、中效稀释液可保存46天、长效稀释液可保存79天，无论何种稀释液保存精液，应尽快用完。3) 每隔12小时轻轻摇匀一次，防止精子沉淀而引起死亡。6、 精液运输1) 精液运输应置于保温较好的装置内，如：可用双层泡沫箱，内装17“冰皇”，作为保温材料。2) 精液运输过程中避免强烈震动。六、母猪发情鉴定和输精1、发情鉴定：每日最少做两次试情（每天上午6：308：30和下午16：0017：30进行发情检查），即在安静的环境下，有公猪在旁时，

17、压背，以观察其站立反应。试情公猪一般选用善于交谈、唾液分泌旺盛、行动缓慢的老公猪；在发情鉴定之前1小时内不应让发情母猪接受公猪刺激。2、配种方式：第1次自然交配、第2次人工授精；第1次自然交配、第2、3次人工授精；2次人工授精；3次人工授精。3、输精时间：断奶后36天发情的经产母猪，发情出现站立反应后612小时进行第一次输精配种；后备母猪、断奶后7天以上发情的经产母猪和返情母猪，发情出现站立反应，就进行配种（输精）。4、精液检查：从17保存箱取出的精液，轻轻摇匀，用以灭菌的滴管取1滴放于预热的载玻片，置于37的恒温板上片刻，用显微镜检查活力，精液活力0.7，才可进行输精。5、输精管：经产母猪用

18、一次性海绵头输精管，输精前检查海绵头是否松动；后备母猪用一次性螺旋头输精管，为防止子宫炎发生，每头母猪每次输精都应使用一条新的输精管。7、 输精技术1) 输精人员消毒清洁双手。2) 用0.1%高锰酸钾水溶液清洁母猪外阴、尾部及臀部周围，再用温水浸湿毛巾，擦干外阴部。3) 将试情公猪赶至待配母猪栏之前，使母猪在输精时与公猪口鼻部接触，4) 从密封袋中取出没受任何污染的次性输精管（手不应接触输精管前2/3部分），在其前端涂上精液作为润滑液。5) 将输精管45度向上插入母猪生殖道内，输精管进入34cm之后，顺时针旋转，当感觉有阻力时，继续缓慢旋转同时向前后移动，直到感觉输精管前端被锁定（轻轻回拉不动

19、），并且确认被子宫颈锁定。6) 从精液贮存箱取出品质合格的精液，确认公猪品种、耳号。7) 缓慢颠倒摇均精液，用剪刀剪去瓶（管）嘴（或撕开袋口），接到输精管上，轻轻挤压确保精液能够流出输精瓶（管、袋）8) 用针头在输精瓶底部扎一个小孔，抚摸猪的乳房、胁部、外阴及压背刺激母猪，使其子宫收缩产生负压，将精液吸纳；输精时勿将精液挤入母猪生殖道内，防止精液倒流。9) 控制输精瓶（管、袋）的高低（或进入空气的量）来调节输精时间，输精时间要求 310分钟。10) 当输精瓶（管、袋）内精液排空后，放低输出精瓶约15秒，观察精液是否回流到输精瓶，若有倒流输精瓶再将其输入。11) 在防止空气进入母猪生殖道的情况下

20、，把输精管后端一小段折起，放在输精瓶（管、袋）中，使其滞留在生殖道内5分钟以上，让输精管慢慢滑落。8、 从17精液保存箱中取出的精液，无需升温至37，摇匀后可直接输精，但检查精液活力需将玻片预热至37。9、 认真登记母猪生产卡、配种记录（见表3）七、输精后母猪的管理1、输精后的母猪应饲养在安静的环境中，防止强的应激和夏季的防暑降温或冬季的保温。2、在配种后一月内适当减少饲料喂量。3、配种后一个月内任何不利的因素都可能造成早期胚胎被母体自体吸收，影响配种效果。表1：种公猪精液品质检查登记表采精日期公猪号采精员采精量ml色泽气味PH值活率精子密度 亿/ml畸形精子率%总精子数亿稀释后总量ml稀释液

21、量ml头份数检验员备注表2：种公猪每日营养推荐表营养数量/头/日数量/吨蛋白质250g13.5%赖氨酸11g0.60%蛋胱氨酸5.8g0.31%色氨酸2.3g0.13%苏氨酸7.6g0.42%缬氨酸8.1g0.44%钙16g0.90%磷14.5g0.80%有效磷9g0.50%盐9g0.50%微量元素铜30mg15g碘0.54mg0.27g铁300mg150g锰72mg36g硒0.54mg0.27g锌300mg150g维生素维生素A20000usp10000000usp维生素D3000usp150000usp维生素E80lu40000lu维生素K8mg4000mgVB2或核黄酸18mg9000mg烟酸（抗癞皮病维生素）100mg50000mgd泛酸60mg30000mg维生素B120.08mg40mg叶酸3mg1500mg生物素、维生素H0.4mg200mg胆酸1000mg5000000mg吡哆醇VB627.5mg13750mg表3 母猪输精登记表：耳号胎次发情日期第一次输精第二次输精第三次输精预产期输精员公猪耳号输精时间站立时间精液倒流公猪耳号输精时间站立时间精液倒流公猪耳号输精时间站立时间精液倒流