蛋白质质谱分析的发展历史

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1、蛋白质质谱分析的发展历史质谱法是准确测定蛋白质质量和表征蛋白质的重要方法,根据各种用途,目前市场上已开发 出了多种鉴定方法和鉴定仪器,可应用于包括鉴定蛋白质及其翻译后修饰、蛋白质复合物、 它们的亚基和功能的相互作用,以及蛋白质组学中蛋白质的整体测量。质谱法也可用于定位 各种细胞器中的蛋白质,并鉴定不同蛋白质之间以及膜脂之间的相互作用。denature proteins & digestspectrometer蛋白质质谱分析步骤图解(图片:百泰派克提供)质谱法中用于蛋白质电离的两种主要方法是电喷雾电离(ESI)和基质辅助激光解吸/电离 (MALDI)。这些电离技术需要与质谱分析仪(例如串联质谱)

2、结合使用。通常,可以通过 “自上而下”的方法完整地分析蛋白质或者先将蛋白质分解成片段然后“自下而上”地对蛋 白质进行分析。有时分析较大的肽片段也可使用折中的“自中而下”的分析方法。随着MALDI和ESI的发展,二十世纪八十年代,利用质谱进行蛋白质研究开始普及。这些电 离技术在蛋白质表征中发挥了重要作用。基质辅助激光解吸电离(MALDI)是由Franz Hillenkamp和Michael Karas于80年代后期开发的。Hillenkamp, Karas和他们的研究人 员通过将氨基酸丙氨酸与氨基酸色氨酸混合并用266 nm脉冲激光照射,使氨基酸丙氨酸离 子化。尽管取得了一定进展,但直到1987

3、年田中浩一(Koichi Tanaka)使用了 “超细金属 加液体基质法”,将大小为34,472 Da的蛋白质羧肽酶-A的生物分子离子化,电离技术才 取得突破。1968年,Malcolm Dole报告了电喷雾离子化法与质谱的首次联合使用。在MALDI普及的同 一时期,电喷雾离子化法由开发者John Bennett Fenn公开。由于对生物大分子的鉴定和结 构分析方法的研究做出的巨大贡献,JohnFenn,田中浩一及Kurt Wuthrich共同获得了 2002 年诺贝尔化学奖。这些电离方法极大地促进了用质谱法研究蛋白质的发展。也因为如此,蛋 白质质谱在蛋白质表征中起着主导作用。本文由百泰派克整理编辑。百泰派克从事蛋白质理化性质分析及结构解析、以质谱技术为基础的蛋白质组学、代谢组学 技术服务,致力于建立国际领先的蛋白质研究分析技术平台,为各科研院所和大学提供高效、 准确、性价比高的蛋白质(组)研究技术包裹,协助客户在基础研究、分子诊断及其他生命 科学研究领域取得突破。

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