胶体金标记的全定量免疫层析技术的原理

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1、胶体金标记的全定量免疫层析技术的原理从定性、半定量向全定量是即时检验(POCT)技术发展的一个趋势.全定量的POCT检测技术有多种原理. 本文主要介绍胶体金标记的全定量免疫层析技术的原理。一、胶体金标记的全定量免疫层析POCT试剂装置结构示意图及作用1、吸收垫:吸收多余液体.2、PVC底板:提供试剂封装外壳。3、C1、C2:标准质控区。羊抗鼠抗体结合于硝酸纤维膜上。4、T:检测区。鼠源性单克隆二抗。5、硝酸纤维素膜:提供抗原抗体反应的固相载体。6、胶体金垫:含胶体金标记的鼠源性单克隆抗体。7、样品吸收垫:吸收样品液体。二、原理该方法的免疫学原理是一个双抗体夹心法。样品加入样品吸收垫,样品中的液

2、体首先溶解胶体金垫中含有的胶体金标记的鼠源性单克隆抗体。其次样 品中待测抗原与胶体金颗粒标记的鼠源性单克隆抗体结合,形成抗原-抗体*胶体金复合物,并靠毛细作用 向检测线移动。在硝酸纤维薄膜的检测线上固定有另一鼠源性单克隆二抗。当样品层析至检测线时,可以 进一步形成抗体一抗原一抗体大胶体金双抗体夹心复合物,并在检测线上聚积显现出一条可见的显色反应。 无显色反应则表示样品中无抗原存在.而胶体金的量反应了待测抗原的量.从加样垫中泳动过来的过量胶体 金标记的单克隆抗体是鼠源性的,无论携带抗原与否,均可被固定于标准的羊抗鼠抗体所捕获,形成显色反 应,这种显色反应,既代表了整个反应体系是正确的,同时C1、C2区的显色反应的深浅,与检测区中被测抗原 的量呈对应关系。胶体金颗粒在特定波长下,对光的吸收和散射与胶体金颗粒的量相关,通过光电感应器检 测胶体金颗粒对光的吸收和散射,从而获得待测抗原的量。三、讨论全定量是POCT的发展趋势,采用两点定标法是全定量的一个重要标志,只有两点定标才有可能实现真正的 全定量。免疫反应原理E2I 耳 可r.7 ?吸收YYYY WVY*丫 I

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