制备液相色谱课件
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1、制备液相色谱第十章第十章 制备高效液相色谱制备高效液相色谱Preparative high performance liquid chromatography制备液相色谱一、制备色谱分类一、制备色谱分类制备液相色谱制备液相色谱高速逆流色谱高速逆流色谱制备薄层色谱制备薄层色谱制备气相色谱制备气相色谱制备液相色谱制备液相色谱法柱色谱柱色谱低压及中压色谱低压及中压色谱制备高效液相色谱制备高效液相色谱制备液相色谱二、制备高效液相色谱二、制备高效液相色谱1.概述概述成本高,分辨率高,常用于样品纯化成本高,分辨率高,常用于样品纯化的最后阶段。的最后阶段。适于微量组分的分离纯化适于微量组分的分离纯化使用较小
2、颗粒的固定相(使用较小颗粒的固定相(5-30um)通常在超载的情况下使用通常在超载的情况下使用制备液相色谱分类分析型液相色谱仪用于制备分析型液相色谱仪用于制备 使用常规分析柱(使用常规分析柱(4.6*250mm),制备量),制备量5-100ug半制备液相色谱,可使用分析型仪器半制备液相色谱,可使用分析型仪器 使用半制备柱(使用半制备柱(10mm i.d.),制备量),制备量20mm i.d.),制备量),制备量 10g制备液相色谱分析型液相色谱与制备型液相色谱的比较分析型液相色谱与制备型液相色谱的比较分析型液相色谱分析型液相色谱制备型液相色谱制备型液相色谱目的目的优化目标优化目标试样量试样量柱
3、负荷柱负荷流速流速分离要求分离要求色谱柱色谱柱检测器检测器试样处理试样处理理论基础理论基础样品的定性定量样品的定性定量最大的峰容量最大的峰容量0.5mg越少越好,越少越好,10-10-10-3g/g填料填料0.5-1.0ml/min基线分离基线分离内径内径5mm,3-10 m必需,高灵敏度,宽线性必需,高灵敏度,宽线性和流动相一起摒弃和流动相一起摒弃线性色谱理论线性色谱理论样品的分离、富集、纯化样品的分离、富集、纯化最大的通量最大的通量半制备半制备0.1kg越多越好,越多越好,10-3-10-1g/g填料填料10ml/min中等分离度,与纯度回收率有关中等分离度,与纯度回收率有关内径:内径:10-1600mm,10-20 m最好有,适于大流量最好有,适于大流量收集,流动相循环使用收集,流动相循环使用非线性色谱理论非线性色谱理论制备液相色谱2.制备基础理论制备基础理论制备液相色谱制备液相色谱制备液相色谱制备液相色谱柱的质量负载能力柱的质量负载能力制备液相色谱制备液相色谱3.制备实施步骤制备液相色谱制备HPLC制备液相色谱参考文献:参考文献:李瑞萍等李瑞萍等.高效制备液相色谱柱技术的研究进高效制备液相色谱柱技术的研究进展展.化学进展化学进展.2004,16(2),2741.刘国诠刘国诠.制备液相色谱技术制备液相色谱技术
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