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3、抗氧化物质还原成绿 色的Mo(V)络合物，其最大吸收波长为695nm。抗氧化物质活性越强，测定的吸 光度值越大。此方法操作简单，所用试剂低廉、方法重现性好，非常适合抗氧化 性的测定。2.2溶液的配制样品液:同上磷钼试剂:0.6mol/L浓硫酸溶液、28mmol/L磷酸钠溶液和4mmol/L钼酸胺溶 液混匀，即得。2.3实验步骤分别取不同浓度的各样品溶液(0.24,0.48,0.72,0.96,1.20mg/ml)1.0ml置10ml 离心管中，加入3.0ml试剂溶液(试剂溶液中包括0.6mol/L的硫酸、28mmol/L 的磷酸钠、4mmol/L的钼酸铵)。混合液于95C水浴锅中分别水浴30m
4、in ,60min、 90 min、120 min、150 min。放冷至室温，695nm处测吸光度值。以蒸馏水为空白，吸光度值越大，表明 抗氧化能力越强。BHT做为阳性对照。将实验重复三次，求平均值。三、还3.1 实验原理以普鲁士蓝Fe4(Fe(CN)6)3之生成量作为指标，将六氰合铁酸钾K3 Fe(CNL还原成K.Fe(CNL，再利用Fe3+形成Fe (Fe(CNLL，由700nm处吸光 值变化检测还原力大小。吸光值愈高表示样品的还原力也就越强。3.2溶液的配制3.2.1样品的配制：用乙醇配制浓度分别为0.24,0.48,0.72,0.96,1.20mg/ml各 样品溶液，浓度分别为0.0
5、6,0.12,0.18,0.24,0.30mg/mlBHT溶液，Vc溶液。3.2.2 0.2mol/LPBS，PH=6.6:A 溶液:0.2mol/L Na2HPO4 溶液:称 Na2HPO4.2H2O35.63g，定容至 1000mL;B 溶液:0.2mol/L NaH2PO4 溶液:称 NaH2PO4.2H2O31.21g，定容至 1000mL; 取 A 溶液 37.5mL 加 B 溶液 62.5mL，即为 pH=6.6 的 0.2mol/L PBS。3.3实验步骤不同浓度的各样品溶液(0.24,0.48,0.72,0.96,1.20mg/ml)1.0ml，加入 0.2moL/L 的磷酸盐缓冲液(pH=6.6 )2.5mL和1%的铁氰化钾溶液2.5 mL ,得混合物于50C 水浴保温20分钟，然后加入2.5ml10% ( w/v )三氯乙酸溶液，混合溶液3000rpm 离心10min，精密吸取上清液2.5ml ,加入2.5ml蒸馏水和0.5ml0.1%的三氯化铁 溶液，在700nm处测吸光度(吸光度值越大，还原力越强)。BHT做为阳性对照。 将实验重复三次，求平均值。
抗氧化试验方法
