实验四放线菌酵

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1、1实验四实验四 放线菌、酵母菌和霉菌形态观察放线菌、酵母菌和霉菌形态观察 1.1 1.1 了解放线菌、酵母菌、霉菌的培养方法。了解放线菌、酵母菌、霉菌的培养方法。1.2 1.2 掌握放线菌、酵母菌、霉菌的制片技术和染色方法。掌握放线菌、酵母菌、霉菌的制片技术和染色方法。1.3 1.3 掌握观察放线菌、酵母菌、霉菌的形态特征的方法。掌握观察放线菌、酵母菌、霉菌的形态特征的方法。1 实验目的实验目的22.1 2.1 放线菌、霉菌和酵母菌在形态特征和生殖方式上有什么异放线菌、霉菌和酵母菌在形态特征和生殖方式上有什么异 同同?2.2 2.2 如何鉴别酵母菌细胞的活性如何鉴别酵母菌细胞的活性?2.3 2

2、.3 用乳酸石碳酸棉兰染色液对霉菌制片有哪些优点用乳酸石碳酸棉兰染色液对霉菌制片有哪些优点?2 实验原理实验原理(通过了解下列问题来掌握实验原理通过了解下列问题来掌握实验原理)34孢子囊孢子囊孢子囊梗孢子囊梗563 3 材料与方法材料与方法3.1 3.1 实验器材实验器材3.1.1 药品：酵母菌染色液：酵母菌染色液：吕氏碱性美蓝染液。吕氏碱性美蓝染液。霉菌染色液：霉菌染色液：乳酸石碳酸棉兰染色液乳酸石碳酸棉兰染色液3.1.2 菌种：Streptomyces sp.（链霉菌（链霉菌 ）,Saccharomyces cerevisiae （酿酒酵母（酿酒酵母 ），），Penicillum citr

3、inum（桔青（桔青霉）霉）,Rhizopus oryzae（米根霉），（米根霉），Aspergillus niger(黑曲霉黑曲霉)。3.1.3 仪器：显微镜（显微镜（MODEL E100MODEL E100）3.1.4 其它物品：酒精灯，载玻片，盖玻片，擦镜纸，接种环，酒精灯，载玻片，盖玻片，擦镜纸，接种环，镊子、大头针等。镊子、大头针等。73.2 3.2 方法方法3.2.1.1 3.2.1.1 插片法培养放线菌。按无菌操作要求，取链霉菌培养物插片法培养放线菌。按无菌操作要求，取链霉菌培养物在高氏一号培养基上密集划线接种。用镊子取无菌载片以在高氏一号培养基上密集划线接种。用镊子取无菌载片以

4、4545。角角插入培养基平板上。将平板倒置，于插入培养基平板上。将平板倒置，于2828培养培养3 35 5天天。3.2.1 3.2.1 放线菌制片与观察。放线菌制片与观察。3.2.1.2 3.2.1.2 制片、镜检、绘图。用镊子取长有培养物的盖玻片，用制片、镜检、绘图。用镊子取长有培养物的盖玻片，用擦镜纸擦去背面培养物，将有菌面朝上放在载片上。先用低倍镜擦镜纸擦去背面培养物，将有菌面朝上放在载片上。先用低倍镜观察基内菌丝、气生菌丝、孢子丝和孢子的位置，接着换高倍镜观察基内菌丝、气生菌丝、孢子丝和孢子的位置，接着换高倍镜观察各部位的细微结构，绘图并说明各部位的名称。观察各部位的细微结构，绘图并说

5、明各部位的名称。83.2.2 3.2.2 酵母菌制片与观察。酵母菌制片与观察。3.2.2.1 3.2.2.1 酵母菌培养。在麦芽法培养基平板上划线接种酿酒酵母，酵母菌培养。在麦芽法培养基平板上划线接种酿酒酵母，于于28 28 培养培养1 12 2天。天。3.2.2.1 3.2.2.1 美兰染液水浸片法制片。滴一滴美兰染液水浸片法制片。滴一滴0.1%0.1%吕氏碱性美蓝染液吕氏碱性美蓝染液于载片中央，用接种环按无菌操作取菌落边缘培养物少许置于染于载片中央，用接种环按无菌操作取菌落边缘培养物少许置于染液中，混合均匀。或取啤酒培养物少许滴加在染液中。加盖片。液中，混合均匀。或取啤酒培养物少许滴加在染

6、液中。加盖片。3.2.2.2 3.2.2.2 镜检及绘图。将制片放置镜检及绘图。将制片放置3 min 3 min 后，分别用低倍镜和高倍后，分别用低倍镜和高倍镜观察酵母菌的形态和出芽情况，并区分死、活细胞。染色镜观察酵母菌的形态和出芽情况，并区分死、活细胞。染色3 0 min 后，比较死、活细胞的比例。绘图注意标明各部分结构。后，比较死、活细胞的比例。绘图注意标明各部分结构。（细胞质部分以细点表示）（细胞质部分以细点表示）93.2.3 3.2.3 霉菌制片与观察。霉菌制片与观察。3.2.3.1 3.2.3.1 霉菌培养。按无菌操作方式将霉菌点接于在霉菌培养。按无菌操作方式将霉菌点接于在PDAP

7、DA培养基培养基平板上，于平板上，于28 28 培养培养3 35 5天。天。3.2.2.2 3.2.2.2 直接制片观察法。滴一滴乳酸石碳酸棉兰染液于载片上，直接制片观察法。滴一滴乳酸石碳酸棉兰染液于载片上，用镊子取霉菌培养物少许，先于用镊子取霉菌培养物少许，先于50%50%乙醇中浸一下先去脱落的孢子，乙醇中浸一下先去脱落的孢子，然后将培养物置于染液中，用大头针小心将菌丝分开。加盖片。然后将培养物置于染液中，用大头针小心将菌丝分开。加盖片。3.2.3.1 3.2.3.1 霉菌观察。先用低倍镜观察菌体的各个部位，认识霉菌霉菌观察。先用低倍镜观察菌体的各个部位，认识霉菌各部分结构，必要时用高倍镜观察，尤其注意观察产孢子结构。各部分结构，必要时用高倍镜观察，尤其注意观察产孢子结构。绘图并标明各部分名称。绘图并标明各部分名称。10实验报告实验报告1 1 用文字描述实验项目、实验目的、材料与方法用文字描述实验项目、实验目的、材料与方法.实验结果。实验结果。按绘画要求进行。按绘画要求进行。3 3 实验分析。分析制片、观察过程中存在的问题，实验分析。分析制片、观察过程中存在的问题，如何改进？如何改进？